王釗

（大慶油田生態(tài)環(huán)境管護(hù)公司，黑龍江 大慶 163000）

0 引言

在現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)持續(xù)發(fā)展的背景下，業(yè)內(nèi)對(duì)花卉植物組織培養(yǎng)技術(shù)的研究正在不斷深入。但目前業(yè)內(nèi)對(duì)花卉植物組織培養(yǎng)試管苗出瓶種植方面缺少研究，導(dǎo)致試管苗的成活率受到嚴(yán)重影響。因此為解決上述問題，未來需要不斷研究，從選擇優(yōu)質(zhì)試管苗、煉苗、避免菌類滋生等角度出發(fā)，以提高出瓶種植的科學(xué)性，防止死苗現(xiàn)象發(fā)生，該點(diǎn)對(duì)保證經(jīng)濟(jì)效益具有重要意義。

1 試管苗出瓶種植的重要性

植物組織培養(yǎng)技術(shù)屬于常見技術(shù)，其目前已趨向于成熟，且正朝廣闊領(lǐng)域延伸。在當(dāng)前的花卉培育中，植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用對(duì)培育成功率具有直接影響。正式進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需要對(duì)外植體進(jìn)行合理選擇，展開滅菌消毒操作，并以無菌環(huán)境為基礎(chǔ)，在培養(yǎng)基內(nèi)對(duì)外植體進(jìn)行放置，以進(jìn)行培養(yǎng)。在此基礎(chǔ)上，外植體將受到附近溫度與激素的積極影響，從而發(fā)育成完整試管苗。在完成上述操作后，操作人員需要通過多項(xiàng)手段對(duì)試管苗進(jìn)行誘導(dǎo)，保證其能夠健康生長(zhǎng)。

在深入分析植物組織培養(yǎng)技術(shù)后，可發(fā)現(xiàn)其主要包括5 個(gè)階段。目前業(yè)內(nèi)在研究該項(xiàng)技術(shù)手段的過程中，多會(huì)將外植體生長(zhǎng)與分化誘導(dǎo)階段、中間繁殖體增殖階段視作重點(diǎn)研究對(duì)象，未深入研究出瓶種植與苗期管理過程，且有部分人員未對(duì)該階段的重要性形成正確認(rèn)知。對(duì)于試管苗出瓶種植與苗期管理階段，其在植物組織培養(yǎng)技術(shù)中具有重要地位，且是決定小苗能否健康生長(zhǎng)的重要因素，若操作人員未對(duì)該階段進(jìn)行嚴(yán)格管控，將直接影響試管苗，致使其存活的可能性減少，導(dǎo)致人力資源與物力出現(xiàn)浪費(fèi)。例如，試管苗在生長(zhǎng)過程中，處在的環(huán)境屬于無菌條件，具有良好的溫度與光照條件，且能夠持續(xù)供給營(yíng)養(yǎng)，可通過激素對(duì)生長(zhǎng)代謝方面進(jìn)行調(diào)控，實(shí)現(xiàn)健康生長(zhǎng)，而在進(jìn)行出瓶移植后，其有可能因生長(zhǎng)環(huán)境出現(xiàn)劇烈轉(zhuǎn)變，溫度、濕度適宜性下降，從而導(dǎo)致死苗現(xiàn)象發(fā)生[1]。因此需要提高對(duì)試管苗出瓶種植的關(guān)注度，認(rèn)識(shí)到該階段的重要性，并進(jìn)行嚴(yán)格管控，以積極影響試管苗成活率。

2 花卉植物組織培養(yǎng)試管苗出瓶種植技術(shù)的要點(diǎn)

2.1 選擇優(yōu)質(zhì)試管苗

為提高試管苗的移栽成活率，必須對(duì)優(yōu)質(zhì)健壯的試管苗加以重視，確保試管苗在完成移植操作后粗壯，莖基部顏色健康，根系狀況良好。例如，移植的目標(biāo)屬于木本植物，需要對(duì)其采取相應(yīng)措施，略微實(shí)現(xiàn)木質(zhì)化，促使根系與莖的維管束保持互相連通，禁止由愈傷組織中間發(fā)生。為確保各項(xiàng)要求能夠得到滿足，應(yīng)提高對(duì)壯苗生根培育的關(guān)注度。

首先，需要科學(xué)選取小苗，確保選取的目標(biāo)具有嫩葉，并對(duì)小苗采取分離措施，使其成為單苗或小苗叢，轉(zhuǎn)移至培育基內(nèi)，保證小苗能夠停止增殖，并迅速生根成長(zhǎng)，進(jìn)而為后續(xù)移栽提供保障。在通常情況下，2～4 周內(nèi)即能夠生根，生長(zhǎng)出正常短根。許多植物在培育方面進(jìn)行1 次即可，僅在條件特殊時(shí)，需要轉(zhuǎn)接1～2 次培養(yǎng)基，常見的有非洲菊、大巖桐等。另有部分生長(zhǎng)細(xì)弱的植物在生根培養(yǎng)前必須適當(dāng)增加壯苗流程，促使苗長(zhǎng)粗壯，以便于后續(xù)誘導(dǎo)生根，提高移植成活率，在該種狀況下采用的培養(yǎng)基多是不具有激素的1/2 MS 培養(yǎng)基。

其次，壯苗生根在通常情況下需要對(duì)1/2 或1/4 量的MS 培養(yǎng)基進(jìn)行使用，不使用細(xì)胞分裂素或僅使用少量，并加入一定程度的生長(zhǎng)素，進(jìn)而促進(jìn)生根，提升存活率。針對(duì)根系較細(xì)，且屬于叢生的植物，可選擇對(duì)“液體淺層靜置培養(yǎng)”進(jìn)行使用。該種培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)呈現(xiàn)多樣化，例如清洗難度較低，能節(jié)省時(shí)間與人力，且培養(yǎng)苗較為粗壯，根系發(fā)達(dá)，能防止移栽與清洗過程中對(duì)根系造成不良影響，有效節(jié)省瓊脂，提升成本節(jié)省效果。

最后，需要對(duì)培養(yǎng)基中的糖分進(jìn)行控制，增強(qiáng)光照強(qiáng)度。在通常情況下，糖的含量需要減少50%，光照條件需要優(yōu)化，例如，強(qiáng)度應(yīng)提升至少3 倍，至多5 倍，以此才能強(qiáng)化小苗的光合作用，防止其對(duì)異樣條件產(chǎn)生依賴，增強(qiáng)試管苗的抗逆能力。此外，雖然組培苗在部分狀況下將出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢的現(xiàn)象，但在展開調(diào)查工作后，可發(fā)現(xiàn)其成活率顯著優(yōu)于其他小苗。在完成生根培育操作后，小苗將在各項(xiàng)操作的作用下，轉(zhuǎn)變成再生植株。在部分狀況下，小苗可能暫時(shí)未實(shí)現(xiàn)生根，但較為粗壯，滿足無根扦插相關(guān)要求。在此基礎(chǔ)上，作業(yè)人員即可出瓶種植。

2.2 煉苗

對(duì)于試管苗培養(yǎng)室，其營(yíng)養(yǎng)、濕度、光照等條件均能夠滿足試管苗具有的各項(xiàng)需求，若立即進(jìn)行出瓶移栽，則試管苗有可能因環(huán)境轉(zhuǎn)變較快，從而無法適應(yīng)環(huán)境，導(dǎo)致死苗現(xiàn)象發(fā)生[2]。因此為解決上述問題，在出瓶移栽前，作業(yè)人員有必要展開時(shí)間為3～15d 的煉苗操作，以確保試管苗能夠適應(yīng)環(huán)境，進(jìn)而提高成活率。具體操作方法如下：正式進(jìn)行移栽操作前，需要明確選取的培養(yǎng)瓶與試管苗，并將二者移出培養(yǎng)室，放置到潔凈明亮，且具備良好通風(fēng)性的環(huán)境中，放置時(shí)間不得少于7d。在此基礎(chǔ)上，將實(shí)現(xiàn)在保障營(yíng)養(yǎng)與濕度的前提下促使小苗在瓶?jī)?nèi)適應(yīng)外界環(huán)境。在完成上述操作后，需要取下瓶塞進(jìn)行煉苗，在通常情況下應(yīng)持續(xù)2～3d，以此才能進(jìn)行移栽。

2.3 合理選擇種植介質(zhì)

從整體的角度出發(fā)，可發(fā)現(xiàn)種植介質(zhì)的選擇對(duì)試管苗移栽成活率具有決定性作用。在深入分析種植介質(zhì)后，可發(fā)現(xiàn)其包括的類型較多，不同類型均具有不同的適用范圍。應(yīng)用的介質(zhì)必須具備以下特征：①疏松通氣。②具備良好的保水性。③滅菌處理難度較低。④能夠?qū)﹄s菌滋生產(chǎn)生抑制作用。對(duì)于上述條件，疏松通氣的重要性較強(qiáng)，若種植介質(zhì)不具備該特征，則試管苗根部有可能出現(xiàn)腐爛現(xiàn)象，致使死苗現(xiàn)象發(fā)生。因此目前應(yīng)用率較高的種植介質(zhì)如下：蛭石、爐灰渣、珍珠巖、鋸木屑等，上述種植介質(zhì)多數(shù)能夠獨(dú)立使用，還能依照一定比例進(jìn)行混合使用，其中應(yīng)用率較高的是珍珠巖與蛭石混用。在展開移栽操作的過程中，作業(yè)人員需要對(duì)自身經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行充分結(jié)合，以此選擇適宜的種植介質(zhì)，對(duì)文心蘭種植介質(zhì)進(jìn)行選擇時(shí)，可同時(shí)選取苔蘚、珍珠巖、朽木屑、紙箱屑、蛭石等不同介質(zhì)進(jìn)行對(duì)比，進(jìn)而選取效果優(yōu)異的種植介質(zhì)，如朽木屑與苔蘚。

在種植介質(zhì)方面，作業(yè)人員不僅需要對(duì)物理結(jié)構(gòu)進(jìn)行考量，而且還要對(duì)pH 進(jìn)行科學(xué)調(diào)節(jié)，例如，山茶花pH 需要控制在5.4 左右。對(duì)于不同植物，需要將種植介質(zhì)pH 調(diào)整成不同數(shù)值，以此對(duì)成活率產(chǎn)生積極影響，但通過實(shí)踐可以發(fā)現(xiàn)，多數(shù)植物要求pH 中性偏酸。

2.4 避免菌類滋生

培養(yǎng)瓶中屬于無菌環(huán)境，但在試管苗移植后，無菌條件將難以維持，導(dǎo)致試管苗的成活受到一定影響。因此為防止菌類大量滋生，需要對(duì)細(xì)菌與真菌污染進(jìn)行嚴(yán)格管控。為實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)，應(yīng)參考以下內(nèi)容。

首先，在試管苗出瓶時(shí)，考慮到培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富，滋生雜菌的可能性較高，故而操作人員應(yīng)對(duì)附著的培養(yǎng)基進(jìn)行仔細(xì)清洗。在清洗過程中，操作人員必須保持耐心與謹(jǐn)慎，防止傷害試管苗，致使其傷口較多或根部受到損傷，進(jìn)而造成死苗。此外，由于創(chuàng)口滋生細(xì)菌的可能性較大，故而在清洗過程中應(yīng)保持謹(jǐn)慎，不得使用水管直接沖洗，應(yīng)使用溫度適宜的清水進(jìn)行漂洗，且水溫應(yīng)符合要求，保證手感舒適。

其次，在分苗過程中，應(yīng)對(duì)小叢進(jìn)行適當(dāng)分離，無須全部分離成單苗。在完成上述操作后，操作人員可選擇在移栽成活后，逐次將試管苗分植成單苗。在試管苗清洗操作結(jié)束后，應(yīng)在低濃度殺菌劑中對(duì)根部進(jìn)行浸泡，浸泡時(shí)間應(yīng)處在1～2s 的范圍內(nèi)，并在陰涼處晾曬試管苗，在通常情況下，晾曬時(shí)間應(yīng)控制在1～2h 內(nèi)。在小苗晾干后，操作人員才能進(jìn)行移栽[3]。

再次，需要對(duì)栽培環(huán)境加以重視，確保其具備良好的整潔性，雜菌數(shù)量較少。在展開對(duì)試管苗的移栽操作前，操作人員需要落實(shí)對(duì)種植介質(zhì)的滅菌處理措施。在滅菌處理方面，高壓滅菌具有良好成效，但其費(fèi)力費(fèi)時(shí)，因此在條件允許的情況下，可通過鍋爐房蒸汽達(dá)到滅菌的目的。如條件不允許，可采用化學(xué)滅菌法，進(jìn)而提高滅菌效果。

最后，在完成試管苗移栽操作后，需要通過噴霧器對(duì)濃度為800～1000 倍液的滅菌劑進(jìn)行噴淋。為提高菌類滋生抑制效果，操作人員最好每7d 左右即噴淋1次，以防止試管苗成活率受到菌類滋生的影響。

2.5 保證水分供應(yīng)

水分條件能夠在一定程度上影響移栽小苗的成活率，且對(duì)部分植物成活具有決定性作用，因此需要提高對(duì)水分供應(yīng)的重視程度。在培養(yǎng)瓶中，由于濕度較大，普遍處在100%，故而多數(shù)瓶中小苗缺少角質(zhì)層，難以應(yīng)對(duì)水分流失，且根系狀況較差，導(dǎo)致其對(duì)后續(xù)水分供給的要求提高。因此需要加強(qiáng)水分供給，但不得過多，防止小苗根部出現(xiàn)積水現(xiàn)象，致使根部通氣不暢，導(dǎo)致爛根現(xiàn)象發(fā)生。

為實(shí)現(xiàn)對(duì)水分供給具有的矛盾進(jìn)行有效處理，必須提升小苗生長(zhǎng)環(huán)境周圍空氣的濕度，保證其不小于90%，進(jìn)而保證小苗能夠保持挺拔狀況。在上述過程中，能夠采用的方法呈現(xiàn)多樣化，例如若通過苗盤種植，可選擇對(duì)塑料薄膜進(jìn)行加蓋或罩上玻璃瓶，并定時(shí)通過噴霧器進(jìn)行噴霧；若選擇在溫室內(nèi)苗床上進(jìn)行種植，需要對(duì)濕度計(jì)進(jìn)行設(shè)置，并安裝人工噴霧設(shè)備，以確保葉面空氣濕度符合要求。在通常情況下，植物需要處在高濕度環(huán)境中，否則將導(dǎo)致成活率下降，但也有部分植物對(duì)水分條件的要求較低，如仙人掌[4]。對(duì)于其他小苗，則需要將空氣濕度控制在90%左右，盡可能營(yíng)造與培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)相似的生長(zhǎng)環(huán)境，以確保小苗能夠始終保持挺拔狀態(tài)。在實(shí)際操作中，若個(gè)別實(shí)驗(yàn)材料較為珍貴，可選擇以濕濾紙為基礎(chǔ)放置小苗，以此為根毛的生長(zhǎng)提供保障，并通過滅菌劑進(jìn)行處理，移植到消毒介質(zhì)中，進(jìn)而提高水分利用率，防止試管苗出現(xiàn)死苗現(xiàn)象。

2.6 注重移栽季節(jié)與光溫條件

在培養(yǎng)瓶中，小苗將持續(xù)得到營(yíng)養(yǎng)供給，并具備充足糖分，以滿足碳源需要，大致屬于異養(yǎng)。但在出瓶移植后，小苗需要通過自身才能正常生長(zhǎng)，因此應(yīng)為小苗發(fā)揮自身的光合作用創(chuàng)造條件，改善光照，避免直射光，并使用強(qiáng)度較高的漫射光。應(yīng)避免光照過強(qiáng)，防止植物的蒸騰作用加強(qiáng)，導(dǎo)致水分平衡矛盾呈現(xiàn)尖銳化，致使脆弱的葉片損壞，導(dǎo)致葉片顏色呈現(xiàn)病態(tài)，小苗的成活率下降。操作人員需要對(duì)植物種類進(jìn)行綜合考量，依照苗的壯弱等因素對(duì)光的強(qiáng)度進(jìn)行考慮，適當(dāng)遮陰，以提高小苗的成活率。在太陽(yáng)光照較為強(qiáng)烈的情況下，應(yīng)通過遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰。

在培養(yǎng)室中，溫度普遍處在恒定狀態(tài)，因此試管苗將健康生長(zhǎng)，但在出瓶移植后，溫度將出現(xiàn)轉(zhuǎn)變，導(dǎo)致試管苗成活率受到影響。為解決上述問題，有必要考慮溫度條件，保證溫度適宜。例如，對(duì)于喜溫植物，應(yīng)將溫度控制在25℃左右；對(duì)于喜涼植物，應(yīng)將溫度控制在20℃左右。在控制溫度時(shí)，應(yīng)防止其過高或過低，若溫度較高，可能導(dǎo)致蒸騰增強(qiáng)，造成水分平衡性下降，致使菌類滋生無法得到控制；若溫度較低，可能導(dǎo)致試管苗生長(zhǎng)速度下降，致使成活率降低。試管苗普遍較為嬌嫩，如操作人員對(duì)其進(jìn)行移植時(shí)，未綜合考慮風(fēng)雨可能對(duì)試管苗產(chǎn)生的影響，必將導(dǎo)致試管苗成活率下降，因此需要在無風(fēng)區(qū)域?qū)υ嚬苊邕M(jìn)行移栽，并在展開移栽操作的初期，落實(shí)保護(hù)措施，防止外部因素?fù)p害小苗，導(dǎo)致移栽損失發(fā)生。此外，考慮到能夠管控溫度的溫室大棚成本較高，故而需要對(duì)移栽季節(jié)加以重視，合理選擇季節(jié)，在通常情況下應(yīng)在春秋季進(jìn)行移栽。若必須在冬季移植，則需要通過塑料薄膜進(jìn)行覆蓋，以提高溫度，避免對(duì)試管苗成活率產(chǎn)生影響。在夏季時(shí)，非必要情況不得進(jìn)行移植。

出瓶移植后的前10d 是決定試管苗移植是否成功的重要時(shí)期，因此在移植后的10d 內(nèi)，需要對(duì)試管苗實(shí)際狀況進(jìn)行緊密關(guān)注，并在發(fā)現(xiàn)問題時(shí)立即采取處理措施。在10d 后，若試管苗各方面均正常，即代表試管苗基本可成活。此外，在完成出瓶移植后，作業(yè)人員必須做好對(duì)試管苗的后期管理工作[5]。在管理過程中，應(yīng)在移植后的2 周進(jìn)行施肥，參考無土栽培法對(duì)營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行自主調(diào)配或直接使用1/2 MS 培養(yǎng)基大量元素的水溶液，通過噴霧器進(jìn)行噴淋，每周噴淋1 次。若試管苗生長(zhǎng)正常，且在15d 左右長(zhǎng)出新根，萌發(fā)幼芽，即代表試管苗可成活。

3 結(jié)語

綜上所述，對(duì)花卉植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行應(yīng)用時(shí)，需要提高對(duì)試管苗出瓶種植技術(shù)的關(guān)注度，并通過科學(xué)選擇試管苗、進(jìn)行煉苗、謹(jǐn)慎選取種植介質(zhì)、控制菌類滋生及合理選擇移栽季節(jié)等方法，以此減少外部環(huán)境因素對(duì)試管苗產(chǎn)生的影響，提高試管苗的成活率，進(jìn)而防止經(jīng)濟(jì)損失發(fā)生。