李 祎 吳奕飛 王朝林

急性B淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)病情急重,若臨床未能采取有效治療措施,隨著疾病進(jìn)展,將會威脅患者生命[1-2]。臨床主要依據(jù)細(xì)胞形態(tài)學(xué)、免疫分型、遺傳特征診斷B-ALL。流式細(xì)胞術(shù)免疫表型檢查是對細(xì)胞成熟期間的表層抗原和細(xì)胞質(zhì)抗原表達(dá)水平進(jìn)行分析,以此對白血病展開規(guī)范化的免疫學(xué)劃分,從而明確細(xì)胞分化情況,判斷病情嚴(yán)重程度[3]。但B-ALL可發(fā)生在細(xì)胞代謝的不同階段,且不同階段患者的臨床特征和預(yù)后皆不相同,臨床需分析其免疫表型的差異方能采取針對性治療措施[4-5]。然而對于兒童和成人免疫表型的差異仍缺乏有效探究。鑒于此,本研究選擇2018年1月至2021年12月于我院行白血病免疫分型檢測的B-ALL患兒98例和成人B-ALL患者92例作為研究對象,分析兒童和成人免疫表型的差異,為臨床采取合適的治療措施提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月至2021年12月于我院行白血病免疫分型檢測的B-ALL患兒98例和成人B-ALL患者92例作為研究對象。其中98例B-ALL患兒中男性52例,女性46例;年齡1～14歲,平均年齡(8.21±1.45)歲。92例成人B-ALL患者中男性49例,女性43例;年齡18～72歲,平均年齡(46.71±6.93)歲。

1.2 檢測方法

收集初診兒童和成人患者骨髓2 ml,應(yīng)用肝素抗凝;在每個檢測管中放入(1×107/mL)100 μL的標(biāo)本,并應(yīng)用四色免疫熒光法(四種熒光素為FITC、PE、PE-Cy5、PE-Cy7)標(biāo)記抗體。所用單克隆抗體包括異硫氰酸熒光素(FITC)、別藻青蛋白(APC)標(biāo)記CD19、CD20、CD22、cyIgM、cyCD79a、CD10、cTdT、CD34、HLA-DR、CD38、CD13、CD15、CD33、CD117及同型對照IgG等。所有單克隆體抗原及陰性對照均來自美國Becton Dickison公司。標(biāo)記抗體后,應(yīng)用流式細(xì)胞儀(美國碧迪公司,型號BD FACSCanto II,批準(zhǔn)文號:20152221424)和CellQuest軟件檢測細(xì)胞表面標(biāo)志,每個檢測管獲取5000個細(xì)胞并展開相關(guān)分析,再通過CD45/側(cè)散射(SSC)雙參數(shù)散點圖設(shè)門法識別幼稚細(xì)胞,計算幼稚細(xì)胞的百分比,并分析該幼稚細(xì)胞群中各白血病相關(guān)抗原的陽性率。陽性標(biāo)準(zhǔn)為:胞質(zhì)或胞核抗原cyIgM、CyCD79a、cTdT≥10%為陽性,其他抗原表達(dá)陽性率≥20%為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兒童與成人B-ALL患者免疫分型分類

在98例B-ALL兒童和92例B-ALL成人患者中,依據(jù)抗原表達(dá)的差異可分為三個階段:早前B-ALL(Pro-B-ALL)、普通B-ALL(Com-B-ALL)、前B-ALL(Pre-B-ALL);在B-ALL分類中,Com-B-ALL和Pre-B-ALL類型兒童與成人患者所占比例相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);Pro-B-ALL類型患者中兒童所占比例(2.04%)低于成人(9.78%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。

表1 兒童與成人B-ALL患者免疫分型分類(例,%)

2.2 兒童與成人B-ALL患者B系抗原表達(dá)情況

在全部的B-ALL患者中,共190例,B系抗原CD19陽性表達(dá)率最高,兒童與成人均為100.00%,其次為CD22(兒童100.00%、成人98.91%)、cyCD79a(兒童100.00%、成人96.74%);兒童與成人B-ALL患者CD20、CD22、cyIgM、cyCD79a、cTdT陽性率相當(dāng),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);兒童B-ALL的CD10陽性率(97.96%)高于成人患者(88.04%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。

表2 兒童與成人B-ALL患者B系抗原表達(dá)情況(例,%)

2.3 兒童與成人B-ALL患者干/祖細(xì)胞抗原表達(dá)情況

B-ALL兒童的HLA-DR、CD38陽性率與成人B-ALL患者相當(dāng),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);B-ALL兒童的CD34陽性率(70.41%)低于成人患者(84.78%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表3。

表3 兒童與成人B-ALL患者干/祖細(xì)胞抗原表達(dá)情況(例,%)

2.4 兒童與成人B-ALL患者伴髓系抗原表達(dá)情況

兒童與成人B-ALL患者CD13、CD117陽性率相當(dāng),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);B-ALL兒童的CD33、CD15陽性率低于成人患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表4。

表4 兒童與成人B-ALL患者伴髓系抗原表達(dá)情況(例,%)

3 討論

B-ALL是臨床常見的惡性血液疾病,依據(jù)骨髓中正常B細(xì)胞抗原分化特點可將其分為Com-B-ALL、Pre-B-ALL、Pro-B-ALL三種類型[6-7]。B-ALL可發(fā)于各個年齡階段,以兒童最為常見,成人患者隨著發(fā)病年齡的增長,生存質(zhì)量隨之下降[8-9]。同時,兒童和成人患者在細(xì)胞遺傳學(xué)異常和對治療的反應(yīng)等多項指標(biāo)中均有所差異,故分析兒童和成人B-ALL患者中的免疫表型差異可為疾病的診斷和治療提供參考依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示,在B-ALL免疫分型分類中,Com-B-ALL和Pre-B-ALL類型兒童與成人患者所占比例相比(P>0.05);Pro-B-ALL類型患者中兒童所占比例(2.04%)低于成人(9.78%)(P<0.05);在全部的B-ALL患者中,B系抗原CD19陽性率最高,兒童與成人均為100.00%,其次為CD22、cyCD79a;兒童與成人B-ALL患者CD20、CD22、cyIgM、cyCD79a、cTdT、HLA-DR、CD38、CD13、CD117陽性率相當(dāng)(P>0.05);兒童B-ALL的CD10陽性率高于成人患者,CD34、CD33、CD15陽性率低于成人患者(P<0.05)。提示監(jiān)測兒童與成人B-ALL的免疫表型在診斷、判斷預(yù)后、明確治療方案中意義重大。CD34是造血干細(xì)胞的特異性標(biāo)記,在細(xì)胞分化程度低的B-ALL中表達(dá)更為明確[10-11]。本研究發(fā)現(xiàn)兒童B-ALL的CD34低于成人患者,由此可見成人患者細(xì)胞分化較差,腫瘤惡性程度高,臨床治療難度大。CD20的表達(dá)與患者預(yù)后密切相關(guān),其陽性率越高則復(fù)發(fā)率越高、生存時間越短,本研究發(fā)現(xiàn)兒童與成人患者的CD20陽性率相當(dāng)。而CD19作為血液惡性腫瘤的一個重要靶點,其在多種B細(xì)胞淋巴瘤和白血病中具有表達(dá),本研究發(fā)現(xiàn)在全部的B-ALL患者中,CD19陽性率較高,故臨床針對不表達(dá)的CD20的早期B系腫瘤可選用抗CD19抗體治療。同時,白血病細(xì)胞存在異質(zhì)性和非同步性,故B-ALL細(xì)胞可不同程度的表達(dá)髓系抗原。兒童和成人B-ALL患者中以CD13和CD33髓系抗原最為常見,而CD117和CD15由于其異常表達(dá)的頻率較低,故臨床常忽略對其的深入研究。CD117表達(dá)于髓系原始細(xì)胞中,是髓系特異的標(biāo)志,其陽性率越高則復(fù)發(fā)率越高,生存率越低[12]。CD33、CD15在成人B-ALL患者中高表達(dá),表明是B-ALL敏感性和特異性均較高的標(biāo)志。針對此,臨床需依據(jù)不同年齡階段患者白細(xì)胞的免疫表型實施針對性的治療措施,以此延長患者生存周期。

綜上所述,兒童與成人B-ALL的免疫表型具有特異性,通過評估抗原的表達(dá)水平可更精準(zhǔn)地描述患者獨立特征,為臨床評估預(yù)后及采取有效治療措施提供指導(dǎo)。