張 帆 郭宏崗 陳 攀

急性白血病是指造血干細胞組織的惡性克隆性病癥,發(fā)病期間患者骨髓中失常的原有細胞組織和未成熟細胞會大量生成,聚集在骨髓內,控制正常造血,其誘發(fā)主要受電離輻射、化學影響、家族遺傳等因素的影響。急性白血病患者會出現免疫低下的癥狀,同時伴有大量白血病細胞增殖,導致健康的白細胞失去功能,如不及時治療,還會誘發(fā)供血不足、心功能不全等一系列神經系統(tǒng)異常,影響患者的生活和健康[1-2]。隨著診斷治療技術的不斷發(fā)展,二代測序(NGS)技術的進步,較多基因異常被發(fā)現證實,其與急性白血病的發(fā)病和預后緊密相關。TP53基因又被稱為P53腫瘤蛋白組織,其歸屬于較早發(fā)現的腫瘤抑制基因,可以調節(jié)細胞周期,有效防止細胞癌變的產生,同時還可以保證基因組的平衡,防止細胞突變的產生,且其參與到細胞應激反應、細胞凋亡、DNA修復的過程中。經相關研究表示伴TP53基因異常與急性白血病的發(fā)病息息相關[3-4]。本研究分析伴TP53基因異常急性白血病患者的臨床特征和預后。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2017年1月至2021年12月收治的急性白血病患者560例,男性280例,女性280例;年齡23～52(36.45±3.65)歲;其中急髓系白血病(AML)310例,急性淋巴白血病(ALL)250例。

1.2 選取標準

納入標準:①經免疫功能檢查或外周血常規(guī)檢查被確診為急性白血病患者;②患者無其他凝血系統(tǒng)異常;③患者有完整的臨床治療資料;④患者知情并簽署同意書。排除標準:①患者伴有其他免疫功能異常者;②患者伴有腎、肝、肺等器官惡性腫瘤;③患者伴有嚴重精神異常或認知障礙;④患者患有其他血液嚴重疾病。

1.3 方法

1.3.1 染色體核型分析 收集患者骨髓液5～6 ml,經過肝素抗凝和計數后,按照(1～2)×106/mL的細胞濃度接種到15 ml左右的培養(yǎng)基內,通過短時間的培養(yǎng)法,結合常規(guī)制備染色體,通過低滲及固定后獲取細胞,隨后使用R顯帶、Giemsa染色后實施核型分析,且注意異常核型需按照《人類細胞基因組學國際命名體系(ISCN 2016)》實施描述,其余細胞懸液需放置在-20 ℃的地方保存?zhèn)溆谩Ｐ枳⒁鈴碗s核型為≥3個異?？寺?單體核型為一個克隆里伴有2種或2種以上的常染色單體,或1種常染色單體伴有其他常染色體結構異常。

1.3.2 AML患者核酸提取 首先醫(yī)生需收集患者骨髓液2～6 ml,并用天根生化(北京)提供的血液基因提取劑提取患者DNA,隨后用TRIzol法來獲取患者的RNA,最后使用微量分光光度計(美國)進行定量,方便后續(xù)檢查。

1.3.3 AML高通量測序靶向檢測基因異常 首先選取PCR引物來擴增患者的108種白血病相關基因,隨后采用Ion Torrent PGM測序工具(美國)實施測序,完成測序之后記錄好數據,之后使用人基因組(HG19)、COSMIC、dbSNP等數據庫實施分析,需保證基因覆蓋率超過99%,平均測序深度需保持在1500×左右,目標區(qū)域測序深度需大于1000×,檢測靈敏度保證在5%。

1.3.4 治療方法 誘發(fā)方案包含DA(柔紅霉素配合阿糖胞苷)、IA(去甲氧柔紅霉素配合阿糖胞苷)、地西他濱聯合CAG(阿克拉霉素配合阿糖胞苷+G-CSF)。局部緩解患者后續(xù)使用原方案再進行誘導,未緩解患者則更換其他方案。

1.3.5 隨訪 電話或病案室查訪等方式實施隨訪,隨訪截止到2022年12月,未有1例脫落病例?？偵鏁r間從確診日期到隨訪截止的時間,死亡患者則計算死亡日期,無復發(fā)生存時間是從完全治愈日期到復發(fā)或任何因素誘發(fā)的死亡日。

1.4 觀察指標

(1)基因異常檢出率。(2)臨床特征,包含是否接受移植、染色體核型、白細胞計數(WBC)、血紅蛋白(HGB)、乳酸脫氫酶(LDH)、血小板(PLT)。(3)療效。結合《血液病診斷及療效標準(第4版)》[5]進行評估。

1.5 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 基因異常檢出率

560例急性白血病患者中,136例(24.29%)伴有TP53基因異常,其中骨髓增生異常綜合征相關急性髓系白血病4例,急髓系白血病(AML)微化13例,AML成熟43例,急性粒-單核白血病34例,急性單核白血病和純紅組織白血病分別為21例。

2.2 臨床特征

異常組接受移植和不接受移植情況與無異常組比較,無顯著差異(P>0.05);異常組復雜核型(50.00%)較無異常組(7.08%)高,非復雜核型(43.38%)較無異常組(89.86%)低(P<0.05),且缺失核型(6.62%)與無異常組(3.07%)比較無顯著差異(P>0.05);伴有TP53基因異常組患者與無異常組患者比較,WBC、HGB、LDH較低,且PLT較高(P<0.05)。見表1。

表1 伴有TP53基因異?；颊吲c臨床特征的關系

2.3 療效分析

136例基因異常的急性白血病患者中,治療完全緩解30例,完全緩解率22.06%(30/136);在424例基因無異常的急性白血病患者中,治療完全緩解399例,完全緩解率94.10%(399/424)。無異常組完全緩解率較異常組高(χ2=298.244,P<0.001)。

2.4 預后

截止末期隨訪日,560例患者中死亡174例(31.06%),其中伴TP53基因異常組死亡72例(52.94%),無異常組死亡102例(24.06%)。異常組死亡率明顯高于無異常組(χ2=10.003,P<0.001)

3 討論

急性白血病屬于血液系統(tǒng)惡性腫瘤疾病,是一種常見且嚴重的病癥,其發(fā)病原因與血細胞克隆異常、病態(tài)造血等密切相關,其主要表現為白細胞明顯上升或減少,伴有鼻出血癥狀。急性白血病會讓患者出現腸胃系統(tǒng)衰竭,同時會使血小板降低,且伴有明顯出血現象。因化療導致粒細胞缺乏,患者會出現嚴重的感染或敗血癥,如不及時治療,患者會出現電解質紊亂的現象,還會導致免疫功能降低,進而誘發(fā)肺部感染,甚至會傷害患者的心臟,致使患者發(fā)生心肌白血病浸潤和心包積液等疾病,嚴重危害患者生命安全[5-6]。

TP35基因是指人體抑癌基因,其處于患者17號染色體短臂,編碼的P53蛋白利用DNA的損傷來恢復、細胞周期控制、誘導凋亡等多種途徑發(fā)揮主要的抗腫瘤功效,其歸屬于重要的抗癌基因。TP35基因突變的概率高達50%以上,但比起實體腫瘤的高突變率,TP35基因突變在血液疾病中的發(fā)生率較低,約為12.7%,老年急性髓系白血病中的突變率為5%～10%,TP35基因突變常出現在體細胞DNA的結合結構區(qū)域[7-9]。本研究結果表示,伴有TP53基因異常組患者與無異常組患者比較,WBC、HGB、LDH較低,且PLT較高(P<0.05),提示伴TP53基因異常急性白血病患者臨床癥狀較嚴重。分析原因在于,TP53基因若和人體中的RB1基因同時突變,會在患者治療的時候轉化成小細胞肺癌,且TP53基因突變會影響患者細胞內的蛋白功能,使其無法起到抗腫瘤的作用,還會影響患者的治療,加重臨床癥狀[10-13]。經進一步研究表示,136例基因異常的急性白血病患者中,完全緩解30例,完全緩解率22.06%(30/136);在424例基因無異常的急性白血病患者中,完全緩解399例,完全緩解率94.10%(399/424),提示伴TP53基因異常急性白血病患者療效較差。分析原因在于,TP53基因異常患者會出現明顯耐藥性增強、生存率降低的現象,且TP53基因的4號顯子和7號顯子在治療期間會出現突變,影響患者的靶向治療,降低治療對疾病的控制率,無法保證患者病情穩(wěn)定,從而降低了治療效果,不利于患者的后續(xù)治療[14-16]。本研究數據還表示,560例患者中死亡174例(31.06%),其中伴TP53基因異常組死亡72例(52.94%),無異常組死亡102例(24.06%),提示伴TP53基因異常急性白血病患者預后效果差。

綜上所述,伴TP53基因異常的急性白血病患者臨床癥狀復雜,其突變位點主要位于DNA結合結構,且伴TP53基因異常會加重患者臨床癥狀,并影響治療效果及預后。