吳雙俊,趙亭,劉長(zhǎng)江,尹彩霞

(山東方明藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司,山東 東明 274500)

吡拉西坦注射液,英文名為:Piracetam Injection,其主要成分為吡拉西坦,吡拉西坦的別名有:吡乙酰胺、酰胺吡酮、酰胺吡、咯烷酮、吡烷酮醋胺、腦復(fù)康、乙酰胺吡咯烷酮。吡拉西坦的分子式為C6H10N2O2,相對(duì)分子質(zhì)量為142.16,其化學(xué)名為2-氧代-1-吡咯烷基乙酰胺,為白色或類白色的結(jié)晶性粉末;無(wú)臭,味苦,在水中易溶,在乙醇中略溶,在乙醚中幾乎不溶。吡拉西坦注射液適用于急、慢性腦血管病、腦外傷、各種中毒性腦病等多種原因所致的記憶減退癥狀及輕、中度腦功能障礙。也用于兒童智力發(fā)育遲緩等的功效。吡拉西坦注射液肌肉注射、靜脈注射、靜脈滴注均可,肌肉注射。每次1 g,一日2～3次。靜脈注射。每次4～6 g,一日2次。靜脈滴注。每次4～8 g,一日1次,用5%或10%葡萄糖注射液或氯化鈉注射液稀釋至250 mL后使用。

吡拉西坦注射液是國(guó)家醫(yī)保目錄乙類藥物,用藥方便、療效確切,臨床應(yīng)用廣泛。吡拉西坦注射液參比制劑持證商為UCB Pharma,上市國(guó)家為土耳其。國(guó)內(nèi)吡拉西坦注射液收載于中華人民共和國(guó)藥典2020年版二部578頁(yè),有5 mL∶1 g,20 mL∶4 g,20 mL∶8 g等3個(gè)藥品規(guī)格,有效期為兩年。國(guó)內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)眾多,山東方明藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司是其中的一家。方明藥業(yè)是吡拉西坦注射液上市較早、銷售范圍較廣的生產(chǎn)企業(yè),積累了豐富的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)。

為提升吡拉西坦注射液質(zhì)量水平,根據(jù)國(guó)家質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)要求,參照參比制劑進(jìn)行研究。參照參比制劑制定處方,同時(shí)制備過(guò)程中嚴(yán)格控制制備工藝參數(shù),通過(guò)控制這些參數(shù),確保在得到質(zhì)量安全、有效、穩(wěn)定、均一的產(chǎn)品的同時(shí),在生產(chǎn)、使用和儲(chǔ)存過(guò)程中采用適當(dāng)?shù)姆椒?保證臨床用藥安全。

參照參比制劑研究吡拉西坦注射液的處方及制備工藝,對(duì)提升我國(guó)在該產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中的質(zhì)量控制水平,對(duì)維護(hù)百姓用藥安全及響應(yīng)國(guó)家生物安全號(hào)召方面有較強(qiáng)的現(xiàn)實(shí)意義。

1 試驗(yàn)用藥與儀器設(shè)備

1.1 試驗(yàn)用藥

吡拉西坦(東北制藥集團(tuán)股份有限公司);醋酸鈉(成都華邑藥用輔料制造有限責(zé)任公司);冰醋酸(成都華邑藥用輔料制造有限責(zé)任公司);活性炭(注射用)(上海活性炭廠);注射用水(山東方明藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司)。

1.2 儀器設(shè)備

KCQ80安瓿超聲波清洗機(jī)(上海遠(yuǎn)東機(jī)械設(shè)備總廠);JXSBSY251高效液相色譜儀(Agilent Technologies1260);JXSBSY62電子分析天平(賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司);JXSBBG68循環(huán)水式多用真空泵(河南省予華儀器有限公司);JXSBSY15電熱恒溫培養(yǎng)箱(山東濰坊精鷹醫(yī)療器械有限公司);ASM4.0安瓿水浴滅菌器(山東新華醫(yī)療器械股份有限公司);AGFS-8/1-20安瓿灌裝封口機(jī)(上海遠(yuǎn)東機(jī)械設(shè)備總廠);Five Easy Plus pH計(jì)(梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司);酒精噴燈、不銹鋼桶、水環(huán)真空泵、鑷子等。

2 方法與結(jié)果

2.1 吡拉西坦注射液處方及制備工藝

參考吡拉西坦注射液原研產(chǎn)品處方:吡拉西坦為活性成分,醋酸鈉和冰醋酸為pH值調(diào)節(jié)劑和緩沖劑。為吸附雜質(zhì)、脫色和除熱源加入適量的活性炭(供注射用),注射用水為溶劑。依照本品進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)參考文獻(xiàn),結(jié)合原輔料的性質(zhì)初步擬定如下處方及制備工藝。

2.1.1 處方

處方包含:吡拉西坦、醋酸鈉、冰醋酸、活性炭(供注射用)、注射用水。

2.1.2 制備工藝

取處方量約70%的注射用水,加入冰醋酸、醋酸鈉,攪拌溶解,再加入吡拉西坦攪拌溶解,再加入活性炭(供注射用),攪拌吸附15 min,過(guò)濾、脫碳,檢測(cè)pH值應(yīng)合格,否則用冰醋酸或10%醋酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至合格,再補(bǔ)加注射用水至全量,攪拌均勻,灌裝,熔封(充氮?dú)?,滅菌即得。

2.2 吡拉西坦注射液工藝的篩選

2.2.1 配制過(guò)程中注射用水初始水量和加料順序的選擇

根據(jù)工藝變更風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估依據(jù),50%的初始水量能夠保證各物料的充分溶解,且對(duì)含量、有關(guān)物質(zhì)、無(wú)菌和pH值的影響很小,故在初步確定制備工藝中確定的配制過(guò)程中初始水量控制在50%～60%是合適的,在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了投料順序的選擇,詳見表1、2。

表1 投料順序

表2 投料順序?qū)χ苿┵|(zhì)量影響的檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果顯示,投料順序?qū)χ苿┑馁|(zhì)量無(wú)明顯影響。過(guò)濾前后制劑的性狀、pH值、含量和有關(guān)物質(zhì)無(wú)明顯區(qū)別,根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)要求,初步確定的投料順序選擇:吡拉西坦、醋酸鈉、冰醋酸是合適的。

2.2.2 是否充氮及配液溫度的選擇

配制兩組樣品,分別考察配制、灌裝過(guò)程是否充氮(控制殘氧量<3.0%)及配制溫度對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響。試驗(yàn)結(jié)果如表3所示。

表3 充氮工藝考察試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果顯示,是否充氮對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量無(wú)影響,配液溫度在25～60 ℃范圍內(nèi)對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量無(wú)影響,根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際情況,產(chǎn)品配液溫度可嚴(yán)控至25～60 ℃。

2.2.3 活性炭(供注射用)濃度的選擇

按2.1配制2 000支樣品,按活性炭(供注射用)常用質(zhì)量濃度0.10,0.05 g/mL配制注射液,考察活性炭(供注射用)對(duì)注射液性狀、pH值、含量的影響,以篩選活性炭(供注射用)的最佳用量,如表4所示。

表4 活性炭(供注射用)吸附試驗(yàn)結(jié)果

由表4結(jié)果可知,0.10,0.05 g/mL的活性炭(供注射用)均可使注射液成為無(wú)色澄明液體,并且對(duì)性狀、pH值、含量無(wú)明顯影響,為保證產(chǎn)品質(zhì)量,在工藝中選用0.10 g/mL的活性炭(供注射用)。

2.2.4 注射液pH值的選擇

按2.1配制注射液,用醋酸鈉溶液或冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至4.9,5.4,5.9,分別灌入20 mL安瓿瓶中,熔封,滅菌,冷卻,觀察樣品性狀,測(cè)定其pH值、含量、有關(guān)物質(zhì)。如表5所示。

表5 pH值對(duì)樣品的影響

由表5結(jié)果可知,本品在不同的pH值調(diào)整點(diǎn),滅菌后產(chǎn)品的性狀、含量、有關(guān)物質(zhì)均無(wú)明顯變化。因測(cè)得原研上市產(chǎn)品的pH值為5.6,為保證產(chǎn)品質(zhì)量,把本品pH值控制在5.4～5.9。

2.2.5 滅菌參數(shù)的篩選

按2.1配制1 000支樣品,用4%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至5.6,灌裝于5 mL安瓿瓶中,分別選擇三種滅菌條件(121 ℃,12 min;121 ℃,15 min;115 ℃,30 min)進(jìn)行考查。從性狀、有關(guān)物質(zhì)、含量、無(wú)菌幾個(gè)方面進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)比不同滅菌參數(shù)對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響,確定本品的滅菌參數(shù),結(jié)果如表6所示。

表6 滅菌參數(shù)考察試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果顯示,121 ℃,15 min參數(shù)下有關(guān)物質(zhì)水平最高但仍低于參比制劑,根據(jù)相關(guān)法規(guī)要求,確定本品滅菌參數(shù)為121 ℃,15 min。

根據(jù)以上篩選研究確定的處方及制備工藝為:取處方量約70%的注射用水(25～60 ℃),加入冰醋酸、醋酸鈉,攪拌溶解,再加入吡拉西坦攪拌溶解,再加入0.10 g/mL活性炭(供注射用),攪拌吸附15 min,過(guò)濾、脫碳,檢測(cè)pH值至5.4～5.9,否則用冰醋酸或10%醋酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至合格,再補(bǔ)加注射用水至全量,攪拌均勻,灌裝,熔封(充氮?dú)?,121 ℃、滅菌15 min。

2.2.6 處方工藝確認(rèn)和重現(xiàn)

2.2.6.1 確定的小試處方工藝及重現(xiàn)性

1)小試批處方組成見表7。

表7 小試批處方組成

2)小試批制備工藝:向配制容器中加入約10 000 mL的注射用水(25～60 ℃);加入處方量的吡拉西坦、醋酸鈉和冰醋酸。加入活性炭(供注射用)吸附15 min,過(guò)濾,取樣檢測(cè)合格后,將藥液灌裝于20 mL硼硅安瓿瓶中(棕色),灌裝前后均充入氮?dú)?熔封。121 ℃,15 min滅菌。

3)小試三批考察結(jié)果見表8。

表8 小試三批考察結(jié)果

結(jié)果顯示,小試3批高溫60 d各項(xiàng)考察指標(biāo)均符合規(guī)定,且與參比制劑無(wú)差異,故可以進(jìn)行下一步的中試放大。

2.2.6.2 中試放大三批

1)處方及批量。批處方:吡拉西坦、醋酸鈉、冰醋酸、活性炭(供注射用)、注射用水。

2)中試放大批制備工藝:向配制罐中加入注射用水(25～60 ℃)至50%～60%處方量;加入處方量的吡拉西坦、醋酸鈉和冰醋酸;攪拌至完全溶解后加注射用水定容至全量并攪拌均勻。加入活性炭(供注射用)吸附15 min,過(guò)濾,取樣檢測(cè)合格后,灌裝(前后均充入氮?dú)?,熔封。121 ℃,15 min滅菌。

3)實(shí)驗(yàn)室放大樣品質(zhì)量研究,中試放大研究樣品檢驗(yàn)結(jié)果見表9。

表9 中試放大樣品檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果顯示,中試放大產(chǎn)品的關(guān)鍵質(zhì)量特性與參比制劑無(wú)顯著差異,中試放大工藝可行,經(jīng)中試放大三批試驗(yàn)確定的處方工藝能滿足工業(yè)化生產(chǎn)需要。

2.2.6.3 通過(guò)研究確定的處方及工藝

1)處方組成見表10。

表10 處方組成

2)包裝材料:本品直接接觸藥液的包材為中硼硅玻璃安瓿瓶(棕色)。

3)制備工藝:向配制罐中加入注射用水(25～60 ℃)至50%～60%處方量,加入處方量的吡拉西坦、醋酸鈉和冰醋酸;攪拌至完全溶解后加注射用水定容至全量并攪拌均勻。加入活性炭(供注射用)吸附15 min,過(guò)濾,取樣檢測(cè)合格后,灌裝(充氮?dú)?,熔封。121 ℃,15 min滅菌。

3 結(jié)論

通過(guò)對(duì)參比制劑進(jìn)行解析,研究了吡拉西坦注射液的處方和制備工藝,確定了吡拉西坦注射液最佳處方及制備工藝,并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行了考察。結(jié)果表明,所研制的產(chǎn)品處方及制備工藝合理,質(zhì)量穩(wěn)定,適合吡拉西坦注射液工業(yè)化生產(chǎn)。