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        中草藥提取物對(duì)奶??谔阋咭呙缑庖咝Ч挠绊?/h1>
        2023-08-08 01:36:16申茂欣劉兆霞楊香芳劉召明王翠菊
        中國(guó)乳業(yè) 2023年7期
        關(guān)鍵詞:中草藥水平

        申茂欣,劉兆霞,楊香芳,劉召明,魏 嘉,王翠菊

        青島易邦生物工程有限公司,山東青島 266113

        0 引言

        口蹄疫是一種由口蹄疫病毒引起的被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(WHO)列為法定上報(bào)的動(dòng)物傳染病之一,在國(guó)內(nèi)被列為一類傳染病。奶?;疾『竺谌樾阅芟陆?、產(chǎn)奶量降低,而且由于口蹄疫傳播速度較快,會(huì)造成整個(gè)牛群感染,危及牛只生命,給養(yǎng)殖戶造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。我國(guó)目前主要流行的口蹄疫病毒血清型為A、O型。接種疫苗是預(yù)防口蹄疫的主要防控措施,但是接種疫苗后也存在較差的免疫原性及較短的免疫時(shí)間等問(wèn)題。若在接種疫苗時(shí)配合使用免疫增強(qiáng)劑,則能提高免疫效果[1]。

        中草藥提取物中存在多糖、生物堿、揮發(fā)油、黃酮等生物活性成分,這些有效成分具有增強(qiáng)畜禽自身免疫力、抵抗力、抗腫瘤、抗氧化的作用。且中草藥提取物具有生態(tài)、環(huán)保、價(jià)格合理、無(wú)殘留、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)勢(shì),正在逐漸取代抗生素在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用,不僅能保證畜禽健康,而且能提高畜禽產(chǎn)品(肉、蛋、奶等)品質(zhì),保障消費(fèi)者飲食安全。此外,中草藥提取物也可作為接種疫苗后使用的免疫增強(qiáng)劑,應(yīng)用在奶??谔阋哳A(yù)防中。因此,研究中草藥提取物在奶??谔阋咭呙缃臃N后對(duì)免疫效果的影響,是對(duì)奶牛業(yè)發(fā)展、人類健康、環(huán)境保護(hù)等方面具有重要現(xiàn)實(shí)意義的工作[2]。

        1 口蹄疫的基本情況

        1.1 病原及發(fā)病特點(diǎn)

        口蹄疫病毒較易發(fā)生變異(目前有7 種血清型)且對(duì)環(huán)境適應(yīng)性較強(qiáng),在溫度較低情況下存活時(shí)間可達(dá)4~5 個(gè)月。對(duì)高溫耐受力較差,85 ℃加熱15 min、100 ℃加熱3 min、用火噴燒1 s或在陽(yáng)光較強(qiáng)時(shí)直射30 min~1 h,即可使口蹄疫病毒死亡。被口蹄疫病毒感染后的發(fā)病率為100%,成年家畜的死亡率為1%~2%,而幼齡家畜的死亡率較高,為30%~50%。消毒時(shí)最好使用酸堿性的消毒液,如氫氧化鈉溶液(濃度為1%~2%)、草木灰(濃度為30%)、生石灰、甲醛溶液(濃度為1%~2%)??谔阋咧饕l(fā)生在偶蹄畜禽(豬、牛、羊)中,其中犢牛最易感染。該病雖一年四季均可發(fā)生,但春、秋是高發(fā)季。該病主要傳染途徑為呼吸道和消化道的空氣或直接接觸,傳染源為患病牛只或攜帶病原牛只的水皰、糞便、尿液、乳汁、唾液、被污染飼料、飲水、墊草及人員的衣物等[3]。

        1.2 臨床癥狀

        牛只患病后主要表現(xiàn)為發(fā)燒,精神低沉萎靡,食欲不振甚至廢退,有黏性唾液從口中流出,大小不等的水皰存在于牙齦、舌面、唇內(nèi)面等部位,個(gè)別牛只的水皰也出現(xiàn)在趾間、乳房和蹄冠處的皮膚上。這些水皰在2~3 天內(nèi)破裂并形成潰瘍,然后逐漸愈合(6~8 天),并且體溫逐漸恢復(fù)正常。若病情較輕且為良性,一般1 周時(shí)間奶牛即可恢復(fù)健康;若蹄部病變嚴(yán)重,則需要1 個(gè)月恢復(fù)健康;若情況更嚴(yán)重,則可能導(dǎo)致死亡。犢牛發(fā)生口蹄疫的病程較急,伴隨出血性胃腸炎、心肌炎等疾病而導(dǎo)致突然死亡[4]。

        2 中草藥提取物的生理功能

        2.1 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

        中草藥提取物雖然常被認(rèn)為是一種飼料添加劑,但由于自身具有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可起到補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)的作用。中草藥提取物中含有大量蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪、維生素、礦物質(zhì)等,應(yīng)用在飼料中可起到平衡營(yíng)養(yǎng)、加速畜禽生長(zhǎng)發(fā)育的作用[5]。

        2.2 抗菌及抗病毒

        由于中草藥提取物中含有多糖、黃酮、生物堿、酸等多種活性物質(zhì),當(dāng)其被添加到飼料中后,可抑制引起畜禽疾病的大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、白喉?xiàng)U菌等細(xì)菌的生長(zhǎng)和繁殖,發(fā)揮抗菌作用。常見(jiàn)抗菌、抗病毒作用的中草藥提取物包括黃芪、黨參、白術(shù)、當(dāng)歸、茯苓等[6]。

        2.3 抗應(yīng)激

        集約化、規(guī)?;B(yǎng)殖造成奶牛容易產(chǎn)生應(yīng)激,且奶牛生存環(huán)境變化、生病、運(yùn)輸、粗暴擠奶等操作會(huì)加重應(yīng)激反應(yīng),而在飼料中添加藥物來(lái)預(yù)防或減少應(yīng)激是一種保證生產(chǎn)力、操作較簡(jiǎn)單、適合多數(shù)養(yǎng)殖場(chǎng)的方法。但一般抗應(yīng)激的藥物價(jià)格較貴、成本較高且在一定程度上影響奶牛的生產(chǎn)性能,也容易在牛奶中殘留。研究發(fā)現(xiàn),將配制的中草藥提取物添加到畜禽日糧,可顯著改善畜禽應(yīng)激的反應(yīng)程度,提高生產(chǎn)性能,且不會(huì)降低畜禽產(chǎn)品品質(zhì)[7]。因此,中草藥提取物在畜禽生產(chǎn)中可發(fā)揮抗應(yīng)激作用,并且優(yōu)于其他抗應(yīng)激的藥物。

        2.4 免疫調(diào)節(jié)

        中草藥提取物通過(guò)促進(jìn)畜禽免疫器官發(fā)育、產(chǎn)生更多免疫活性細(xì)胞、誘導(dǎo)免疫細(xì)胞表達(dá),以及增加免疫受體表達(dá)、促進(jìn)抗體產(chǎn)生這兩方面來(lái)發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。使用中草藥提取物作為飼料添加劑,可使畜禽免疫器官顯著增重,抗體效價(jià)顯著提高,且免疫球蛋白、白細(xì)胞數(shù)量也顯著增加[8]。

        2.5 防腐防霉

        中草藥提取物中香辛料、精油等含有一定的抗菌物質(zhì),可發(fā)揮防腐防霉作用。單獨(dú)使用中草藥提取物或與化學(xué)防腐劑連用均可發(fā)揮較好效果。同時(shí),有些中草藥提取物(大蒜)中含有特殊揮發(fā)性的硫化合物,可通過(guò)散發(fā)特殊氣味來(lái)驅(qū)除蚊蠅等,保證飼料品質(zhì)[9]。

        3 奶??谔阋咭呙?/h2>

        由于口蹄疫病毒的變異血清型較多,疫苗種類也較多。但不同疫苗注射后的免疫效果、使用劑量、預(yù)防的口蹄疫血清型不同,所以在使用時(shí)還需根據(jù)場(chǎng)區(qū)的實(shí)際情況選擇合適的疫苗,保證使用疫苗能達(dá)到最佳預(yù)防效果。本文將國(guó)家批準(zhǔn)使用的關(guān)于口蹄疫疫苗的相關(guān)情況進(jìn)行總結(jié),能更簡(jiǎn)單直觀了解情況,便于選擇(表1)。

        表1 常用口蹄疫疫苗種類及簡(jiǎn)介

        4 中草藥提取物對(duì)免疫效果的影響

        單一或混合的中草藥提取物可與疫苗配合使用,增強(qiáng)畜禽機(jī)體免疫力,提高機(jī)體細(xì)胞或體液免疫應(yīng)答,輔助疫苗發(fā)揮更好效果。

        4.1 單味中草藥提取物對(duì)口蹄疫疫苗的影響

        常見(jiàn)的單味中草藥提取物包括白術(shù)多糖、黃芩多糖、黃芪多糖、金銀花多糖等,這些補(bǔ)益類的中草藥或提取物均可與口蹄疫疫苗產(chǎn)生協(xié)同作用,使畜禽接種疫苗后免疫力水平提高。

        口蹄疫疫苗的佐劑是水溶性川明參多糖時(shí),通過(guò)在小鼠上試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)使用水溶性川明參多糖后促進(jìn)多種細(xì)胞因子分泌,如IL-2、IL-4、IFN-γ、CD4,口蹄疫特異性抗體的滴度(IgG、Ig亞類)也顯著提升,說(shuō)明水溶性川明參多糖可使小鼠的細(xì)胞免疫水平、體液免疫水平顯著提高[10]。

        白術(shù)多糖(從白術(shù)根莖中提?。┳鳛榭谔阋咭呙绲淖魟r(shí),通過(guò)在小鼠上試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)感染了口蹄疫病毒的小鼠血清中的抗體滴度(IgG、Ig亞類)、血清中多種細(xì)胞因子的濃度等顯著提高,有效促進(jìn)免疫器官脾淋巴細(xì)胞增殖,提升對(duì)口蹄疫病毒的抵抗力。此外,其他的單味中草藥或提取物(人參莖葉皂苷、木鱉子提取物、合歡皮皂苷等)均可不同程度改善接種口蹄疫疫苗后的免疫應(yīng)答[11]。

        4.2 復(fù)方中草藥提取物對(duì)口蹄疫疫苗的影響

        復(fù)方中草藥或提取物一般是根據(jù)藥理相同、作用協(xié)同的多味中草藥制作而成。當(dāng)使用復(fù)方中草藥或提取物(黃芪多糖、丹參素、人參皂苷和硫酸軟骨素)作為小鼠接種口蹄疫疫苗后的佐劑時(shí),發(fā)現(xiàn)可使血清中口蹄疫疫苗的抗體水平顯著提高,且心肌膜上相關(guān)細(xì)胞被表達(dá)[12]。當(dāng)對(duì)接種O型口蹄疫疫苗的家兔灌服復(fù)方中草藥煎劑(蠶蛻、漢防己、吳茱萸和僵蠶加水煎煮,制備為水煎劑)時(shí),發(fā)現(xiàn)灌服復(fù)方中草藥煎劑后,能使家兔體內(nèi)產(chǎn)生活性免疫細(xì)胞的過(guò)程被抑制,并使家兔的血壓和心率維持在正常水平,達(dá)到調(diào)節(jié)免疫功能的作用,最終緩解注射口蹄疫疫苗對(duì)家兔造成的副作用[13]。當(dāng)使用感寒快克(即使用防風(fēng)、細(xì)辛、羌活、桂枝和麻黃這5 味中藥制作的復(fù)方中藥制劑)作為免疫增強(qiáng)劑來(lái)檢測(cè)接種O型口蹄疫疫苗后豬只體內(nèi)抗體水平時(shí),發(fā)現(xiàn)在一定范圍內(nèi)血清中抗體水平隨使用劑量增加而增長(zhǎng),抗體水平含量與使用感寒快克的時(shí)間有關(guān),并且與機(jī)體非特異性免疫機(jī)能相關(guān)的NK細(xì)胞水平也顯著提高[14]。

        4.3 中草藥提取物對(duì)奶??谔阋咭呙缑庖咝Ч挠绊?/h3>

        申義君等[15]研究黃芪多糖對(duì)奶牛注射口蹄疫疫苗后相關(guān)抗體水平的影響,選擇40 頭(隨機(jī)分為4 組,每組10 頭)年齡、胎次、體重接近的荷斯坦牛,每組每天在精飼料中分別添加0 g、5 g、10 g、15 g黃芪多糖,在飼喂黃芪多糖的第4天對(duì)每頭奶牛注射口蹄疫疫苗(O型、亞洲I型)2 mL后再飼喂黃芪多糖3 天。定期采集奶牛血液(第0、4、18、32、46、104天)后分離得到血清并用ELISA試劑盒檢測(cè)口蹄疫抗體水平,發(fā)現(xiàn)在精飼料中添加黃芪多糖均可顯著提高奶牛血清中口蹄疫抗體水平,檢測(cè)指標(biāo)為口蹄疫抗體效價(jià)、口蹄疫保護(hù)率,結(jié)果為在試驗(yàn)劑量范圍內(nèi)抗體水平隨劑量增加而提高。此研究表明,黃芪多糖可作為免疫增強(qiáng)劑用于奶??谔阋卟《痉揽?,使注射疫苗后的免疫效果增強(qiáng)。

        杜繼紅等[16]研究黃芪多糖粉對(duì)奶??谔阋咭呙缑庖咝Ч挠绊?,通過(guò)對(duì)60 頭泌乳期奶牛(分為4 組,每組15 頭)以瘤胃導(dǎo)管的方式灌服不同劑量(0 g/天·頭、5 g/天·頭、10 g/天·頭、15 g/天·頭)的黃芪多糖粉,在灌服的第4天以頸部肌內(nèi)注射方式進(jìn)行O型、亞洲I型口蹄疫疫苗接種,在試驗(yàn)的第4、18、32、46、104天分別檢測(cè)口蹄疫抗體,同時(shí)記錄第1、7、14、21、28、35、42天的產(chǎn)奶量,發(fā)現(xiàn)使用各劑量的黃芪多糖粉均能顯著提高血清中口蹄疫抗體水平,抗體效價(jià)的平臺(tái)期延長(zhǎng),即使在抗體水平的衰退期也能保持在較高位,同時(shí)奶牛產(chǎn)奶量從25.65 kg提高至26.27 kg。

        申義君[17]研究黃芪多糖對(duì)奶??谔阋咭呙缑庖呖贵w水平的影響,通過(guò)對(duì)60 頭荷斯坦牛分別飼喂0、低劑量(5 g/天·頭)、中劑量(10 g/頭/天·頭)、高劑量(15 g/天·頭)的黃芪多糖粉,并在第4天注射口蹄疫疫苗,統(tǒng)計(jì)指標(biāo)包括牛只的精神狀態(tài)、體溫、呼吸、采食量、死亡情況等以研究可能產(chǎn)生的不良反應(yīng),采集固定時(shí)間的血液以分析口蹄疫抗體水平。試驗(yàn)結(jié)果顯示,從飼喂黃芪多糖粉當(dāng)天開(kāi)始,所有奶牛均未出現(xiàn)不良反應(yīng),精神狀態(tài)、體溫、采食量等指標(biāo)均正常,在整個(gè)試驗(yàn)期間也未出現(xiàn)奶牛死亡。對(duì)于O型、亞洲I型口蹄疫抗體水平,在試驗(yàn)初期即開(kāi)始飼喂黃芪多糖粉時(shí)差異均不顯著,在接種疫苗后各組抗體水平增高,飼喂0劑量組的牛只的抗體水平先達(dá)到峰值,而其他組達(dá)到峰值的時(shí)間較晚,第25天時(shí)其他各組的抗體水平顯著高于未飼喂組。這些研究結(jié)果表明,在奶牛日糧中添加黃芪多糖粉能使O型、亞洲I型抗體水平增強(qiáng),其作用機(jī)理可能是使奶牛自身的免疫系統(tǒng)被激活從而產(chǎn)生更多抗體,使抗體滴度在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)維持在較高水平,抗體的平臺(tái)期延長(zhǎng),在免疫的中后期也具有較強(qiáng)的免疫作用。此外,黃芪多糖粉還能降低接種免疫應(yīng)激的產(chǎn)生。

        劉艷等[18]研究復(fù)方中藥偶蹄康(由甘草、升麻、陳皮、黨參、茯苓和白花蛇舌草6 味中藥組成)對(duì)奶??谔阋咭呙缈贵w水平、血清細(xì)胞因子及生化指標(biāo)的影響。將200 頭奶牛分為空白對(duì)照組和用藥組,每組各100 頭??瞻讓?duì)照組飼料中不添加復(fù)方中藥偶蹄康,試驗(yàn)組飼料中按照每頭牛300 g的劑量添加復(fù)方中藥偶蹄康。第7天停止給藥,并對(duì)各組牛只注射口蹄疫三價(jià)滅活疫苗(O型、A型和I型)。注射疫苗后第14、28、56天采集血液進(jìn)行血清抗體效價(jià)檢測(cè),發(fā)現(xiàn)注射疫苗后第14天采集血液中的抗體效價(jià)顯著高于空白對(duì)照組,而其他日期采集的血液中抗體效價(jià)無(wú)顯著差異。飼喂復(fù)方中藥偶蹄康后奶牛血清中與肝臟功能相關(guān)指標(biāo)(ALT、AST、TP、ALP等)、腎臟功能相關(guān)指標(biāo)(CREA、UREA、UA、Mg等)、心臟功能相關(guān)指標(biāo)(CK)與空白對(duì)照組相比也無(wú)顯著差異,而指標(biāo)總膽紅素(TBIL)在注射疫苗的當(dāng)天、第28、56天與空白對(duì)照組相比,顯著降低,說(shuō)明在奶牛日糧中添加復(fù)方中藥偶蹄康不僅不會(huì)損傷肝臟功能,在一定程度上還可通過(guò)降低TBIL來(lái)發(fā)揮利膽作用。使用復(fù)方中藥偶蹄康后能使奶牛外周血中一些細(xì)胞因子(CD4、IL-2、IL-4、IFN-γ等)的分泌被促進(jìn),正向調(diào)節(jié)奶牛機(jī)體免疫水平,即在一定劑量范圍內(nèi)使用復(fù)方中藥偶蹄康不會(huì)對(duì)奶牛肝臟、腎臟、心臟等器官功能產(chǎn)生不良作用,且在飼喂復(fù)方中藥偶蹄康一段時(shí)間后再進(jìn)行口蹄疫疫苗的注射,能提高疫苗的免疫應(yīng)答,使血清中口蹄疫疫苗的抗體水平顯著提高,并促進(jìn)奶牛自身的細(xì)胞免疫、體液免疫。

        5 小結(jié)與展望

        中草藥提取物對(duì)奶??谔阋咭呙绠a(chǎn)生的免疫效果有促進(jìn)作用,能延長(zhǎng)疫苗抗體的平臺(tái)期且保證抗體水平維持在較高水平,還能正向調(diào)節(jié)奶牛自身的細(xì)胞免疫、體液免疫,降低患口蹄疫的風(fēng)險(xiǎn),并減緩接種時(shí)造成的應(yīng)激。隨著國(guó)家減抗、禁抗政策的頒布和實(shí)施,中草藥提取物作為一種綠色免疫增強(qiáng)劑具有重要的發(fā)展前景。但目前關(guān)于中草藥提取物對(duì)奶??谔阋咭呙缈贵w水平影響的研究仍較少,且停留在初級(jí)階段,對(duì)提高免疫水平的作用機(jī)制仍不明確。隨著研究不斷深入,中草藥提取物無(wú)論是在奶牛疫病防控或其他自身免疫方面均會(huì)占據(jù)重要地位,開(kāi)辟出一條新途徑。

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