郭延輝,王銘鈺,張 宇,王雨千*,孫麗君,李 男,崔鶴馨,陳言亮
1.榆樹市畜牧總站,吉林榆樹 130400;2.長春市農(nóng)業(yè)科學院,吉林長春 130111;3.公主嶺市動物疫病預(yù)防控制中心,吉林公主嶺 136100
我國是世界上梅花鹿資源最為豐富的國家之一,梅花鹿在我國擁有的鹿科動物中數(shù)量最大、種類最多、分布最廣[1]。離乳期梅花鹿由于飲食結(jié)構(gòu)變化以及分群,容易受到環(huán)境因素影響造成各種應(yīng)激[2],產(chǎn)生食欲不振精神萎靡等現(xiàn)象,甚至導(dǎo)致離乳期幼鹿的死亡,如不細心管理極易導(dǎo)致養(yǎng)殖場產(chǎn)生巨大經(jīng)濟損失[3]。丁酸鈉作為一種酸化劑類飼料添加劑已經(jīng)廣泛應(yīng)用于仔豬、雛雞、犢牛等幼齡動物,其具有促進動物消化、抗菌消炎、提高動物免疫等功能,但其在梅花鹿仔鹿中的應(yīng)用尚未見報道。本研究擬在離乳期梅花鹿日糧中添加丁酸鈉,研究其對離乳期梅花鹿生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率、血清免疫及抗氧化指標的影響,探討丁酸鈉在離乳期梅花鹿日糧中的使用效果,以期為丁酸鈉在梅花鹿生產(chǎn)中的應(yīng)用提供實踐依據(jù)。
丁酸鈉購自于陜西金潤生物科技有限公司,梅花鹿免疫球蛋白(IgA、IgM、IL-2、IL-4)測定試劑盒購自于上海朗頓生物科技有限公司,抗氧化指標檢測試劑盒(總超氧化物歧化酶T-SOD、過氧化氫酶CAT、谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px)購自于南京建成生物工程研究所。
48只95±3日齡體重為23.17±1.36 kg離乳期雄性梅花鹿隨機分成4組,分別為對照組(CON),丁酸鈉1(CSB1)、2(CSB2)、3(CSB3)組,每組3個重復(fù),每個重復(fù)4只梅花鹿。對照組飼喂梅花鹿仔鹿基礎(chǔ)飼糧,日糧配方及營養(yǎng)成分:玉米45%、豆粕25%、苜蓿草粉15%、磷酸氫鈣5%、食鹽0.5%、麩皮12%、多維0.5%、微量元素0.5%、代謝能15.36 MJ/Kg、粗蛋白19.95%、粗脂肪3.13%、鈣 3.73%、磷3.11%。
CSB1、CSB2、CSB3組分別飼喂含有50、100、200 mg/kg丁酸鈉的梅花鹿仔鹿基礎(chǔ)日糧。各個重復(fù)梅花鹿均在寬3 m、長6 m的鹿圈中飼養(yǎng),期間自由采食自由飲水,每天記錄各圈投料量與剩料量,預(yù)飼期7 d,試驗期30 d。
試驗結(jié)束前1~3天收集各組梅花鹿新鮮糞便樣本,將每圈樣本混合后,去除糞便中的雜質(zhì),凍于-80 ℃用于營養(yǎng)物質(zhì)消化率的測定。
試驗結(jié)束當天將各組梅花鹿麻醉后進行血液采集,采集后血液經(jīng)過離心后收取血清放于-20 ℃保存,用于梅花鹿免疫及抗氧化指標檢測。
2.4.1 生產(chǎn)性能測定
分別于試驗正式開始前1天和試驗第30天對各組梅花鹿進行麻醉后稱重,計算各組梅花鹿增重、平均日增重。并根據(jù)試驗記錄的采食量計算料重比。
2.4.2 營養(yǎng)物質(zhì)消化率檢測
分別測定飼料樣本及糞便樣本中的水分、灰分、粗蛋白、粗脂肪等用于計算各組梅花鹿的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪消化率。粗蛋白測定采用凱氏定氮法,粗脂肪測定使用索式抽提法。
2.4.3 免疫及抗氧化指標測定
各組梅花鹿免疫指標測定均使用酶聯(lián)免疫吸附法測定。T-SOD測定使用羥胺法測定、CAT采用鉬酸銨法測定、GSH-Px活性采用比色法測定。
所有試驗結(jié)果經(jīng)過Excel 2007初步整理后,使用SPSS 17.0對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析。試驗結(jié)果以平均數(shù)±標準差表示,使用Duncan函數(shù)進行多重比較,其中p<0.05表示差異顯著。
丁酸鈉對離乳期梅花鹿生長性能的影響結(jié)果可知,CSB3組末重顯著高于對照組(p<0.05),CSB1、CSB2組雖然末重高于對照組,但差異不顯著(p>0.05)。CSB1、CSB2、CSB3組梅花鹿平均日增重均顯著高于對照組(p<0.05),其中CSB3組 顯 著 高 于 CSB1、CSB2組(p<0.05),CSB1、CSB2、CSB3組梅花鹿平均日增重分別比對照組提高了19.89%、25.20%、39.03%。CSB1組梅花鹿料重比顯著低于對照組(p<0.05),CSB2、CSB3組料重比與對照組相比沒有顯著差異(p>0.05)。
丁酸鈉對離乳期梅花鹿營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響結(jié)果可知,CSB3組梅花鹿粗蛋白、粗脂肪、干物質(zhì)消化率均顯著高于對照組(p<0.05),CSB3組梅花鹿粗脂肪、干物質(zhì)消化率均顯著高于CSB1、CSB2組(p<0.05),CSB1、CSB2組梅花鹿粗蛋白、粗脂肪、干物質(zhì)消化率與對照組相比沒有顯著差異(p>0.05)。
丁酸鈉對離乳期梅花鹿血清抗氧化指標的影響結(jié)果可知,CSB3組梅花鹿血清中GSH-Px含量顯著高于對照組(p<0.05),CSB1、CSB2組梅花鹿血清中GSH-Px活性與對照組無顯著差異(p>0.05);CSB2、CSB3組梅花鹿血清中T-SOD活性顯著高于對照組(p<0.05),CSB1組梅花鹿血清中T-SOD活性與對照組無顯著差異(p>0.05);各組梅花鹿血清中CAT活性無顯著差異(p>0.05)。
丁酸鈉對離乳期梅花鹿血清免疫指標的影響,各組梅花鹿血清中IgA、IgM含量無顯著差異(p>0.05),CSB2、CSB3組梅花鹿血清中IL-2、IL-4含量顯著高于對照組(p<0.05),CSB1組梅花鹿血清中IL-2、IL-4含量與對照組相比無顯著差異(p>0.05)。
丁酸鈉作為一種酸化劑,具有調(diào)節(jié)胃腸酸度,促進動物消化的作用,眾多研究表明其具有促進動物生長以及提高營養(yǎng)物質(zhì)消化率的功能。丁酸鈉對反芻動物胃腸微生物具有調(diào)節(jié)作用,能夠抑制有害菌生長。本研究結(jié)果表明,丁酸鈉可以顯著提高離乳期梅花鹿平均日增重,顯著提高梅花鹿粗蛋白、粗脂肪及干物質(zhì)消化率,其促生長及提高飼料消化率的機制可能是調(diào)節(jié)腸道pH值,促進腸道細胞增值,改善胃腸系統(tǒng)發(fā)育,提高胃腸酶活等。
雖然關(guān)于丁酸鈉具有抗氧化功能的研究較多,吳東霖等研究表明日糧添加丁酸鈉能夠顯著提高哺乳期犢牛血清SOD和GSH-Px活性,提高犢牛的總抗氧化能力。本研究結(jié)果表明,日糧添加丁酸鈉可以顯著提高離乳期梅花鹿血清中SOD、GSH-Px以及CAT酶活性,與吳東霖等研究結(jié)果相近。
動物機體的免疫系統(tǒng)是抵御環(huán)境應(yīng)激的主要防御系統(tǒng),免疫球蛋白和白介素是免疫系統(tǒng)中的主要的免疫活性分子,其中IL-2、IL-4分別是機體細胞免疫和體液免疫的主要指示分子。李丹丹等研究表明,斷奶仔豬添加丁酸鈉能夠緩解仔豬斷奶應(yīng)急損傷,提高仔豬免疫力;丁酸鈉還能提高幼齡動物免疫器官發(fā)育,提高幼齡動物血清中免疫球蛋白的水平。丁酸鈉提高免疫的作用機制主要為調(diào)節(jié)toll樣受體分泌相關(guān)信號通路,提高免疫相關(guān)分子分泌能力,同時丁酸鈉還能抑制組蛋白去乙?;?,緩解動物炎癥的發(fā)生,提高動物免疫力。本研究結(jié)果表明,丁酸鈉能夠顯著提高離乳期梅花鹿血清中IL-2、IL-4水平,說明丁酸鈉能夠提高離乳期梅花鹿免疫力。
在本試驗條件下,基礎(chǔ)飼糧中添加丁酸鈉能夠顯著提高離乳期梅花鹿生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率以及血清免疫和抗氧化水平。結(jié)果表明,丁酸鈉可以作為離乳期梅花鹿的飼料添加劑選擇,飼料添加量以200 mg/kg為宜。