吳 鋒，何海洋，李 朋，朱頌雄，肖 煌，甘 贏，易 北，張 麗※

（1.湖南省湘陰縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南 湘陰 410600：2.岳陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南 岳陽(yáng) 414000）

口蹄疫（foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是偶蹄動(dòng)物的一種高度傳染性疾病，具有發(fā)病急、傳播迅速、發(fā)病率高、宿主譜系廣、危害大等特點(diǎn)[1]。傳播途徑可分為空氣傳播和接觸傳播。豬口蹄疫以接觸傳播為主，在低溫濕潤(rùn)環(huán)境中，口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus,FMDV）可通過氣溶膠傳播，因此，在風(fēng)力大，空氣濕度較大的春、秋兩季為口蹄疫的高發(fā)季節(jié)[2]。春、秋兩季口蹄疫的傳播速度加快，易造成養(yǎng)殖場(chǎng)大規(guī)模的感染，受感染的生豬可在口腔、舌頭、嘴唇、腳和乳房上出現(xiàn)水皰和潰瘍，并導(dǎo)致生豬食欲低下，生長(zhǎng)受到抑制，更嚴(yán)重的停止牲畜生產(chǎn)，導(dǎo)致嚴(yán)重的生產(chǎn)損失，非洲每年因口蹄疫經(jīng)濟(jì)損失超過20 億美元[3]，嚴(yán)重威脅了生豬養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。迄今為止，針對(duì)口蹄疫的治療并無特效藥，以預(yù)防為主，主要手段為疫苗免疫注射。為摸清我縣當(dāng)前豬O 型口蹄疫疫苗免疫情況，對(duì)各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬O型口蹄疫免疫抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)。通過監(jiān)測(cè)分析，為我縣豬O 型口蹄疫制定防控方案和組織防控工作提供科學(xué)有效依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

樣品于2022 年春防（3 月～4 月）、秋防（9 月～10 月）集中監(jiān)測(cè)時(shí)采集，采集全縣14 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)和1個(gè)街道的規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)及散養(yǎng)戶豬的血液樣品，每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)和街道采集一個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，1 個(gè)散養(yǎng)戶，每個(gè)規(guī)模場(chǎng)采集10 份血液樣品，散養(yǎng)戶養(yǎng)殖數(shù)量小于5 頭的全部采集，大于5 頭的則采集5 份血液樣品。采集好的血液樣品按要求放置采樣箱內(nèi)帶冰保存并及時(shí)送至實(shí)驗(yàn)室，對(duì)樣品進(jìn)行離心，分離血清后待檢測(cè)。

1.2 主要試劑與儀器

口蹄疫O 型抗體液相阻斷ELISA 檢測(cè)試劑盒（20220531101-1，購(gòu)自蘭州獸研生物科技有限公司）、酶標(biāo)儀（型號(hào)：MULTISKAN MK3，購(gòu)自上海賽默飛世爾儀器有限公司）、37℃恒溫培養(yǎng)箱（型號(hào)：SPX-150B5-Ⅲ，購(gòu)自上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司）、微量振蕩器（型號(hào)：ZW-A，購(gòu)自江蘇金壇市大中儀器有限公司）。

1.3 檢測(cè)方法

采用液相阻斷-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法，使用口蹄疫O 型抗體液相阻斷ELISA 檢測(cè)試劑盒對(duì)血清樣品進(jìn)行檢測(cè)，具體測(cè)定方法參照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 結(jié)果判定

抗體效價(jià)≥1:128 判為口蹄疫O 型抗體陽(yáng)性；1:64 ～1:128 時(shí)，判為可疑；＜1:64，判定為陰性。可疑血清樣品，進(jìn)行重測(cè)，重測(cè)抗體效價(jià)≥1:128，判為陽(yáng)性，＜1:128 判為陰性。

2 結(jié)果

2.1 湘陰縣豬O 型口蹄疫抗體監(jiān)測(cè)情況

由表1 可知，春防共檢驗(yàn)樣品211 份，168 份樣品合格，樣品合格率為79.6%；秋防共檢驗(yàn)樣品210 份，164 份樣品合格，合格率為78.1%，春防合格率比秋防合格率高1.5%。2022 年共檢驗(yàn)421 份樣品，豬O 型口蹄疫免疫抗體個(gè)體合格樣品數(shù)332份，平均合格率為78.9%。春防和秋防監(jiān)測(cè)場(chǎng)群數(shù)各30 個(gè)，陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)數(shù)分別為24 個(gè)、25 個(gè)，合格率分別為80%、83.3%；全年共監(jiān)測(cè)60 個(gè)場(chǎng)群，陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)數(shù)為49 個(gè)，全年平均合格率為81.7%。

表1 湘陰縣豬O型口蹄疫抗體監(jiān)測(cè)情況

2.2 湘陰縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬O 型口蹄疫抗體監(jiān)測(cè)情況

由表2 可知，春防期間全縣共有10 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）的個(gè)體免疫抗體水平達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[4]，合格率均在70%以上，合格率超過80%的鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）有9個(gè)，合格率超過90%的鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）有5 個(gè)，其中鶴龍湖鎮(zhèn)和三塘鎮(zhèn)的合格率達(dá)到了100%，嶺北鎮(zhèn)、新泉鎮(zhèn)、南湖洲鎮(zhèn)、湘濱鎮(zhèn)、楊林寨鄉(xiāng)的樣品合格率低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[4]，免疫水平不達(dá)標(biāo)，合格率在50%～70%之間。春防全縣共有5 個(gè)場(chǎng)點(diǎn)不合格，分別是嶺北鎮(zhèn)、新泉鎮(zhèn)、南湖洲鎮(zhèn)、湘濱鎮(zhèn)和楊林寨鄉(xiāng)，其中楊林寨鄉(xiāng)場(chǎng)點(diǎn)合格率為0。

表2 湘陰縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬O 型口蹄疫春防免疫抗體監(jiān)測(cè)情況

由表3 可知，秋防期間全縣15 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）有10 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）個(gè)體免疫水平達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[4]，合格率超過80%的鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）有9 個(gè)，合格率超過90%的鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）有3 個(gè)，個(gè)體免疫水平未達(dá)標(biāo)的5 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）分別為嶺北鎮(zhèn)、新泉鎮(zhèn)、湘濱鎮(zhèn)、楊林寨鄉(xiāng)、鶴龍湖鎮(zhèn)。秋防全縣共有5 個(gè)場(chǎng)點(diǎn)不合格，場(chǎng)點(diǎn)合格率為50%，分別為嶺北鎮(zhèn)、新泉鎮(zhèn)、湘濱鎮(zhèn)、楊林寨鄉(xiāng)、鶴龍湖鎮(zhèn)。

表3 湘陰縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬O 型口蹄疫秋防免疫抗體監(jiān)測(cè)情況

2.3 湘陰縣不同規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬O 型口蹄疫抗體監(jiān)測(cè)情況

由表4 可知，春防期間，規(guī)模場(chǎng)監(jiān)測(cè)150 份樣品，陽(yáng)性樣品數(shù)為132 份，合格率為88%，達(dá)到了個(gè)體免疫抗體水平標(biāo)準(zhǔn)；散養(yǎng)戶監(jiān)測(cè)61 份樣品，陽(yáng)性樣品數(shù)為36 份，合格率為59%，并未達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[4]，且散養(yǎng)戶合格率比規(guī)模場(chǎng)合格率低29%。規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶分別監(jiān)測(cè)15 家場(chǎng)點(diǎn)，規(guī)模戶陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)數(shù)有14個(gè)，場(chǎng)群合格率為93.3%，散養(yǎng)戶陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)數(shù)有10個(gè)，場(chǎng)群合格率為66.7%。

表4 湘陰縣春防不同規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)O 型口蹄疫免疫抗體監(jiān)測(cè)情況

由表5 可知，秋防期間，規(guī)模場(chǎng)監(jiān)測(cè)150 份樣品，陽(yáng)性樣品數(shù)為127 份，合格率為84.7%，同樣達(dá)到了國(guó)家免疫抗體水平的標(biāo)準(zhǔn)；散養(yǎng)戶共監(jiān)測(cè)了60 份樣品，陽(yáng)性樣品數(shù)為37 份，合格率為61.7%，未達(dá)國(guó)家合格標(biāo)準(zhǔn)[4]，散養(yǎng)戶合格率比規(guī)模場(chǎng)合格率低23%。規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶分別監(jiān)測(cè)15 個(gè)場(chǎng)點(diǎn)，陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)數(shù)分別為14、11 個(gè)，場(chǎng)群合格率分別為93.3%、73.3%。

表5 湘陰縣秋防不同規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)O 型口蹄疫免疫抗體監(jiān)測(cè)情況

3 討論

3.1 湘陰縣不同防控季節(jié)豬O 型口蹄疫抗體監(jiān)測(cè)分析

春秋集中免疫時(shí)間具體在3～4 月和9～10 月，在4 月底和10 月底結(jié)束集中免疫，5 月中旬和11中旬是免疫效果較為明顯的時(shí)期，因此選擇春防的5 月和秋防的11 月對(duì)免疫抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)更具代表性[5,6]。從春防和秋防監(jiān)測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，春防免疫水平高于秋防免疫水平，說明抗體水平在不同的免疫時(shí)期存在一定的差異性，但春防與秋防的總個(gè)體合格率均達(dá)到了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部標(biāo)準(zhǔn)。春防與秋防的場(chǎng)群監(jiān)測(cè)合格率在80%以上。說明全縣對(duì)“強(qiáng)制免疫”與“先打后補(bǔ)”政策的落實(shí)與口蹄疫的免疫情況較好。

3.2 湘陰縣各個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬O 型口蹄疫抗體監(jiān)測(cè)分析

為了更加全面地掌握不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)的疫苗免疫情況，我們對(duì)不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)的免疫抗體水平進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。湘陰縣因湘江自南向北而被分為東西兩部。嶺北鎮(zhèn)、新泉鎮(zhèn)、南湖州鎮(zhèn)、湘濱鎮(zhèn)、楊林寨鄉(xiāng)、鶴龍湖鎮(zhèn)位于湘陰西部。樟樹鎮(zhèn)、靜河鎮(zhèn)、洋沙湖鎮(zhèn)、金龍鎮(zhèn)、三塘鎮(zhèn)、東塘鎮(zhèn)、六塘鎮(zhèn)、石塘鎮(zhèn)、文星街道位于湘陰東部。在此次監(jiān)測(cè)結(jié)果中，春防和秋防均有鄉(xiāng)鎮(zhèn)出現(xiàn)O 型口蹄疫免疫不合格的情況，免疫抗體不合格的鄉(xiāng)鎮(zhèn)大部分在西部，而免疫抗體合格的鄉(xiāng)鎮(zhèn)在東部，說明東西兩部免疫效果不均衡。主要原因在于，2013 年，湖南省出臺(tái)了《湖南省湘江污染防治第一個(gè)“三年行動(dòng)計(jì)劃”實(shí)施方案》，為加強(qiáng)飲用水水源地環(huán)境保護(hù)，確保湘江飲用水安全，湘江長(zhǎng)沙綜合樞紐庫(kù)區(qū)湘江干流兩岸1 公里范圍和城鎮(zhèn)集中式飲用水水源陸域保護(hù)區(qū)內(nèi)的畜禽養(yǎng)殖企業(yè)全部退出或搬遷，而湘陰縣西部為濱湖平原，水系發(fā)達(dá)，鄉(xiāng)鎮(zhèn)皆鄰湘江資江干流與洞庭湖水域，自畜禽退養(yǎng)后，造就了東西兩部養(yǎng)殖規(guī)?！皟蓸O分化”的現(xiàn)狀。西部鄉(xiāng)鎮(zhèn)生豬養(yǎng)殖數(shù)量少，規(guī)模不大，且大部分為自繁自養(yǎng)；而東部鄉(xiāng)鎮(zhèn)養(yǎng)殖量大、規(guī)模大，養(yǎng)殖模式以“公司+農(nóng)戶”為主，具有較強(qiáng)的防疫意識(shí)。

3.3 湘陰縣不同規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬O 型口蹄疫抗體監(jiān)測(cè)分析

表4 和表5 中的結(jié)果顯示，無論是在春防還是秋防，規(guī)模場(chǎng)的樣品合格率和場(chǎng)群合格率均高于散養(yǎng)戶，說明規(guī)模戶的管理水平與動(dòng)物疫病的防控意識(shí)均高于散養(yǎng)戶。散養(yǎng)戶的樣品合格率均在70%以下，未達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部標(biāo)準(zhǔn)，主要原因在于，一方面，在發(fā)生非洲豬瘟后，雖然養(yǎng)殖戶的防疫意識(shí)有所上升，口蹄疫疫苗由鄉(xiāng)鎮(zhèn)提供，但是村防疫員不能進(jìn)入養(yǎng)殖舍對(duì)生豬進(jìn)行免疫接種，散養(yǎng)戶未接受正規(guī)的免疫接種技術(shù)，易出現(xiàn)“飛針”現(xiàn)象，并且部分養(yǎng)殖戶并未受到專業(yè)的免疫知識(shí)或者嫌麻煩，在對(duì)生豬進(jìn)行了口蹄疫的初次免疫后不愿進(jìn)行二次免疫，從而造成免疫效果不佳。另一方面，散養(yǎng)戶沒有規(guī)范化的飼養(yǎng)環(huán)境，生豬的自身免疫較差，免疫功能不強(qiáng)會(huì)進(jìn)一步地降低免疫效率。規(guī)模戶和散養(yǎng)戶的場(chǎng)群合格率均在70%以上，達(dá)到了免疫標(biāo)準(zhǔn)，說明湘陰縣O 型口蹄疫整體免疫效果較好。

4 結(jié)論

2022 年湘陰縣豬O 型口蹄疫整體免疫效果較好，個(gè)體合格率與群體合格率均超過國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)；不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)之間免疫抗體水平出現(xiàn)差異化，湘陰縣東部地區(qū)免疫抗體水平高于西部地區(qū)，免疫抗體水平不達(dá)標(biāo)的鄉(xiāng)鎮(zhèn)分布于西部地區(qū)；散養(yǎng)戶的抗體水平較低，需加強(qiáng)對(duì)本縣西部地區(qū)與散養(yǎng)戶的免疫與監(jiān)測(cè)工作。