李達(dá)，王文章，周強(qiáng)，王瑋

（青島海洋科技館，山東 青島 266003）

大西洋金黃水母（Chrysaora quinquecirrha），又名大西洋海刺，屬刺胞動(dòng)物門、缽水母綱、旗口水母目、游水母科、金黃水母屬，體色通常為不透明的白色[1]，顏色純凈，形態(tài)優(yōu)美，泳姿優(yōu)雅，具有極高的觀賞價(jià)值，已在許多水族館人工飼養(yǎng)和展示。

大西洋金黃水母分布于大西洋、印度洋沿岸以及西太平洋沿岸的溫暖水域[2]，常見于美國(guó)東部、墨西哥灣北部和印度東南等沿海[2-9]。在25℃～31℃的夏季沿海地區(qū)，大西洋金黃水母迅速生長(zhǎng)[10]，大量出現(xiàn)在美國(guó)東部河口和沿海[4,5]。當(dāng)溫度接近15℃時(shí)，大西洋金黃水母開始從水面消失，溫度降至10℃時(shí)，仍有部分被發(fā)現(xiàn)于拖網(wǎng)上[11]。作為食物鏈的頂級(jí)捕食者，大西洋金黃水母利用傘體、觸手和口腕捕捉獵物[12]，以各種浮游生物如櫛水母、橈足類、枝角類、多毛類、魚卵和魚苗等為食[4,9,13-18]。利用高通量測(cè)序（Next-generation sequencing）方法對(duì)大西洋金黃水母消化道灌洗液、胃囊和觸手進(jìn)行DNA片段收集和測(cè)序，發(fā)現(xiàn)23 個(gè)不同的食物類群，包括以前未被記錄為被捕食物種的一些軟體生物。這些食物類群包括橈足類、魚類、櫛水母、?？?、片腳類、藤壺類、蝦類、多毛類、吸蟲、扁形蟲、棘皮動(dòng)物、腹足類、雙殼類和半索動(dòng)物等[19]。另有研究發(fā)現(xiàn)，大西洋金黃水母碟狀體對(duì)櫛水母幼體具有較明顯的選擇捕食性[20]。

在人工環(huán)境中飼養(yǎng)，溫度、鹽度、光照和pH 等環(huán)境因子顯著影響水母生長(zhǎng)[21-27]。餌料種類和變化同樣影響水母生長(zhǎng)發(fā)育和活力等[28-31]。處于生長(zhǎng)期的幼水母體生長(zhǎng)狀態(tài)能直觀反映出餌料是否滿足了營(yíng)養(yǎng)需求。本研究通過對(duì)比單獨(dú)投喂不同天然餌料后大西洋金黃水母幼水母體的生長(zhǎng)和存活情況，探究大西洋金黃水母幼水母體快速且健康生長(zhǎng)的天然餌料種類，可為水母研究工作中的餌料結(jié)構(gòu)優(yōu)化提供策略和參考。

1 材料與方法

1.1 材料

大西洋金黃水母碟狀體及幼水母體均為本實(shí)驗(yàn)室自行培育。碟狀體經(jīng)過1～2 個(gè)月活鹵蟲無節(jié)幼體培養(yǎng)后，挑選形態(tài)完整，傘體收縮正常，活力強(qiáng)，傘徑（3.5±0.5）cm 的幼水母體作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，分別投喂海月水母（Aurelia aurita）碎塊、鹵蟲（Artemia）無節(jié)幼體、大黃魚（Larimichthys crocea）魚卵、大銀魚（Protosalanx hyalocranius）肉糜、糠蝦（Mysidacea）、橈足類（Copepods）及鹵蟲（Artemia）成蟲，其中海月水母和鹵蟲無節(jié)幼體為活體，其余為凍鮮。

1.2 方法

設(shè)7 個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組3 個(gè)平行，每個(gè)平行30 只幼水母體。所用實(shí)驗(yàn)缸為200 L 亞克力環(huán)形水母缸，進(jìn)缸24 h 內(nèi)不投喂。水母放入后，實(shí)時(shí)調(diào)節(jié)水流，使其口腕和觸手均自然伸長(zhǎng)，無纏繞和卷曲。

每日上午10：00 投喂1 次。投喂量以水母胃囊飽滿為準(zhǔn)，每日調(diào)整投喂量。用巴氏吸管和亞克力空心管投喂。

每5 d 在投喂前從各缸隨機(jī)取3 只水母測(cè)量和記錄生長(zhǎng)數(shù)據(jù)（不足3 只則以實(shí)際數(shù)量為準(zhǔn)）：用秒表計(jì)數(shù)其游動(dòng)時(shí)的傘體收縮頻率；將水母放入實(shí)驗(yàn)托盤，使其傘體自然鋪平，口腕自然伸長(zhǎng)，用吸水紙吸干體表水分后用游標(biāo)卡尺（美耐特MNT）測(cè)量傘徑和口腕長(zhǎng)度；用電子天平（OHAUS，精度0.0001 g）稱量個(gè)體質(zhì)量。每日淘汰死亡、畸形、潰爛或傘體無收縮水母，記錄數(shù)量。

實(shí)驗(yàn)用源水均經(jīng)過沉淀、石英砂缸過濾和紫外燈殺菌。各實(shí)驗(yàn)組水溫維持在（22±1）℃，鹽度（32±1）。選用光源為90 W 太空燈（希帝萊品牌），每日光照12 h，昏暗12 h，光強(qiáng)變化模擬日出日落。每缸配有紫外殺菌燈、加熱裝置和制冷系統(tǒng)。每日傍晚吸污處理，清除剩余餌料和排泄物。每日使用滴流桶給所有實(shí)驗(yàn)缸補(bǔ)充淡水。每2 d 檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)缸水中鹽度、亞硝態(tài)氮（NO2--N）和總氨氮（TAN）含量及pH，并通過換水及時(shí)調(diào)整水質(zhì)到理想指標(biāo)（鹽度32±1，亞硝態(tài)氮<0.02 mg/L，總氨氮<0.05 mg/L，pH 7.8～8.1）。每5 d 更換總水量的10%。實(shí)驗(yàn)為期60 d。

1.3 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

存活率按下式計(jì)算：存活率/%=n1/n×100%。

式中，n1為存活的水母數(shù)量，n 為初始水母數(shù)量。

利用Excel 2010 和SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)各項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和分析，用Origin 2018 軟件進(jìn)行繪圖。用單因子方差分析法分析組間差異，用Student-Newman-Keul’s 檢驗(yàn)法分析組間顯著性，P<0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同餌料對(duì)大西洋金黃水母幼水母體存活率的影響

不同餌料對(duì)大西洋金黃水母幼水母體存活率的影響見圖1。海月組始終維持較高存活率；糠蝦組存活率在30 d 后開始出現(xiàn)明顯下降；橈足類組存活率在15 d 后開始緩慢下降；魚卵組和魚肉組存活率在15 d 后開始出現(xiàn)明顯下降；鹵蟲無節(jié)幼體組和鹵蟲成蟲組存活率自初始呈不斷下降。第60 d 各組存活率由高到低依次為：海月組（93.33±0.00）%、鹵蟲無節(jié)幼體組（17.78±1.92）%、鹵蟲成蟲組（11.11±1.92）%、魚卵組（4.44±1.93）%、魚肉組（4.44±1.93）%、糠蝦組（4.44±1.93）%和橈足類組（4.44±1.93）%。第60 d 差異性分析顯示，海月組、鹵蟲無節(jié)幼體組和鹵蟲成蟲組分別與其他組差異顯著（P<0.05），魚卵組、魚肉組、糠蝦組和橈足類組組間差異不顯著（P>0.05），與其他組差異顯著（P<0.05）。

圖1 不同餌料對(duì)大西洋金黃水母幼水母體存活率的影響Fig.1 Effects of different diets on survival rate of juvenile medusae of Atlantic sea nettle Chrysaora quinquecirrha

2.2 不同餌料對(duì)大西洋金黃水母幼水母體生長(zhǎng)的影響

不同餌料對(duì)大西洋金黃水母?jìng)銖健⒖谕箝L(zhǎng)度、個(gè)體質(zhì)量和傘體收縮頻率的影響如表1 和圖2 所示。

表1 不同餌料對(duì)大西洋金黃水母幼水母體傘徑、口腕長(zhǎng)度、個(gè)體質(zhì)量和傘體收縮頻率影響（30 日/60 日）Tab.1 Effects of different diets on test diameter,oral arm length,body weight and umbrella pulse frequency for juvenile medusae of Atlantic sea nettle Chrysaora quinquecirrha（30 days/ 60 days）

圖2 不同餌料對(duì)大西洋金黃水母幼水母體傘徑、口腕長(zhǎng)度、個(gè)體質(zhì)量和傘體收縮頻率影響Fig.2 Effects of different diets on test diameter,oral arm length,body weight and umbrella pulse frequency for juvenile medusae of Atlantic sea nettle Chrysaora quinquecirrha

海月組和鹵蟲成蟲組幼水母體傘徑緩慢上升，最大值分別出現(xiàn)在第60 d 和第55 d；鹵蟲無節(jié)幼體組呈先快速上升后趨于平緩，最大值出現(xiàn)在第50 d；魚肉組呈先上升后趨于平緩，最大值出現(xiàn)在第20 d；魚卵組呈先上升后下降，最大值出現(xiàn)在第5 d；糠蝦組和橈足類組呈緩慢下降，最大值均出現(xiàn)在第15 d。第60 d 各組幼水母體傘徑由大到小依次為：鹵蟲無節(jié)幼體組、鹵蟲成蟲組、海月組、魚肉組、糠蝦組、魚卵組和橈足類組（圖2-a）。

海月組和鹵蟲成蟲組幼水母體口腕長(zhǎng)緩慢上升，最大值分別出現(xiàn)在第60 d 和第40 d；鹵蟲無節(jié)幼體組呈先明顯上升后下降，最大值出現(xiàn)在第25 d；魚肉組呈先上升后趨于平緩，最大值出現(xiàn)在第15 d；糠蝦組、橈足類和魚卵組先上升后下降，最大值分別出現(xiàn)在第15 d、第30 d 和第5 d。第60 d 各組口腕長(zhǎng)度由長(zhǎng)到短依次為：鹵蟲成蟲組、鹵蟲無節(jié)幼體組、海月組、魚肉組、糠蝦組、橈足類組和魚卵組（圖2-b）。

鹵蟲無節(jié)幼體組幼水母體個(gè)體質(zhì)量明顯上升，最大值出現(xiàn)在第60 d；海月組和鹵蟲成蟲組呈緩慢上升，最大值分別出現(xiàn)在第60 d 和第55 d；魚肉組先上升后下降再趨于平緩，最大值出現(xiàn)在第20 d；魚卵組先上升后下降，最大值出現(xiàn)在第5 d；糠蝦組和橈足類組呈緩慢下降，最大值分別出現(xiàn)在第5 d和第0 d。第60 d 各組個(gè)體質(zhì)量由大到小依次為：鹵蟲無節(jié)幼體組、鹵蟲成體組、海月組、魚肉組、魚卵組、糠蝦組和橈足類組（圖2-c）。

海月組幼水母體傘體收縮頻率較為穩(wěn)定，呈緩慢下降，最大值出現(xiàn)在第25 d；鹵蟲無節(jié)幼體組、魚肉組和鹵蟲成蟲組呈持續(xù)下降，最大值分別出現(xiàn)在第0 d、第0 d 和第5 d（并列相同）、第5 d；糠蝦組和橈足類組先平緩再快速下降，最大值分別出現(xiàn)在第0 d 和第25 d；魚卵組先上升再下降，最大值出現(xiàn)在第10 d。第60 d 各組傘體收縮頻率由高到低依次為：海月組、魚卵組、鹵蟲無節(jié)幼體組、魚肉組、鹵蟲成蟲組、糠蝦組和橈足類組（圖2-d）。

3 討論

3.1 不同餌料對(duì)大西洋金黃水母幼水母體存活率的影響

本實(shí)驗(yàn)在統(tǒng)計(jì)存活率時(shí)，將畸形、潰爛或傘體不收縮的水母一并計(jì)入淘汰水母，統(tǒng)計(jì)結(jié)果反映了健康水母的最終數(shù)量。海水橈足類體內(nèi)不飽和脂肪酸含量高，并含有魚蝦蟹生長(zhǎng)發(fā)育的必需氨基酸，是營(yíng)養(yǎng)全面的海洋生物活餌料。投喂橈足類可提高人工育苗中海水魚蝦蟹幼體的成活率與活力[32,33]。橈足類富含二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）、游離氨基酸和一些其他必需微量營(yíng)養(yǎng)素以及消化酶，這些成分，尤其是不飽和脂肪酸是很多海洋魚類早期幼體正常發(fā)育的重要保證[33]。本實(shí)驗(yàn)中，橈足類組水母中后期的存活率下降，淘汰水母多傘體萎縮且無收縮活力，表現(xiàn)為營(yíng)養(yǎng)缺乏，可能選用凍鮮橈足類為餌料，其中幼水母體所需的營(yíng)養(yǎng)成分部分流失造成?？肺r組水母存活率曲線和淘汰水母狀態(tài)與橈足類組相似，同樣判斷為缺乏營(yíng)養(yǎng)，糠蝦組水母進(jìn)食后排出較多的食物殘?jiān)?，這種情況在不同餌料組合對(duì)馬來沙水母（Sanderia malayensis）生長(zhǎng)影響[30]的實(shí)驗(yàn)中同樣出現(xiàn)，認(rèn)為幼水母體的胃囊在消化糠蝦時(shí)存在一定困難。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，魚卵組水母在進(jìn)食后排出的部分魚卵殘?jiān)鼤?huì)一直黏附在口腕根部和口腕上，而該組淘汰水母多呈傘體萎縮且口腕嚴(yán)重萎縮，認(rèn)為與魚卵的高脂肪組成有關(guān)，其高黏稠度的餌料可能不利于水母的消化和殘餌排出，水母無法正常游動(dòng)和消化代謝。鹵蟲無節(jié)幼體組和鹵蟲成體組淘汰水母多呈畸形，表現(xiàn)為統(tǒng)一的傘體翻折，且淘汰個(gè)體遍及整個(gè)生長(zhǎng)期，原因尚不明確，有待進(jìn)一步研究。

膠質(zhì)類生物（水螅水母和海月水母碟狀體）在霞水母（Cyanea nozakii）胃囊中平均存留時(shí)間顯著短于橈足類和魚類，隨著橈足類、海月水母、魚類的體長(zhǎng)增加,霞水母對(duì)其消化時(shí)間顯著增長(zhǎng)[34]。本研究中，海月組水母存活率顯著高于其他組，且整體形態(tài)勻稱，認(rèn)為海月水母滿足該幼水母體營(yíng)養(yǎng)，且易消化吸收。實(shí)驗(yàn)選用大銀魚魚肉并加工成肉糜投喂，意在有助于水母胃囊的消化，而該組水母進(jìn)食后仍然排出較多食物殘?jiān)ū憩F(xiàn)為光滑的膠質(zhì)團(tuán)顆粒），認(rèn)為魚糜消化不充分可能與實(shí)驗(yàn)水母的整體規(guī)格較小有關(guān)，也可能與膠狀肉質(zhì)有關(guān)。魚肉組淘汰水母?jìng)€(gè)體多數(shù)已接近亞成體，表現(xiàn)為口腕萎縮且傘體活力差，認(rèn)為水母處于非營(yíng)養(yǎng)缺乏導(dǎo)致的異常狀態(tài)，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中建議選用不同肉質(zhì)的魚肉種類來研究其對(duì)水母消化及生長(zhǎng)的影響。

3.2 不同餌料對(duì)大西洋金黃水母幼水母體生長(zhǎng)的影響

野外環(huán)境中，大西洋金黃水母食物選擇性較為廣泛[19]，人工飼養(yǎng)環(huán)境下，不僅要選擇滿足水母正常生長(zhǎng)的餌料，還需對(duì)餌料的獲取難易以及對(duì)水質(zhì)的影響進(jìn)行權(quán)衡。

作為水母飼養(yǎng)研究的常用餌料，鹵蟲無節(jié)幼體營(yíng)養(yǎng)豐富[35]且易被消化吸收[34]。在不同飼料對(duì)海月水母的生長(zhǎng)性能影響實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)鹵蟲無節(jié)幼體組生長(zhǎng)性能最好，水母?jìng)銖斤@著高于其他各組[36]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，鹵蟲無節(jié)幼體組水母生長(zhǎng)速度最快，其個(gè)體質(zhì)量指標(biāo)在后期表現(xiàn)出繼續(xù)生長(zhǎng)的趨勢(shì)，具有一定生長(zhǎng)潛力，且觀察到部分水母在第10 d 出現(xiàn)明顯性腺，認(rèn)為鹵蟲無節(jié)幼體能夠充分滿足該水母幼水母體生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)。在第35 d 后，鹵蟲無節(jié)幼體組水母口腕長(zhǎng)度普遍縮短且標(biāo)準(zhǔn)差變大，認(rèn)為與實(shí)驗(yàn)期間所觀察到部分組水母整體口腕過長(zhǎng)導(dǎo)致相互纏繞并斷裂有關(guān)。海月組水母?jìng)銖胶蛡€(gè)體質(zhì)量增長(zhǎng)穩(wěn)定，兩項(xiàng)指標(biāo)均表現(xiàn)出繼續(xù)生長(zhǎng)趨勢(shì)，傘體活力始終較強(qiáng)且穩(wěn)定，認(rèn)為海月水母同樣是該種水母幼水母體的優(yōu)質(zhì)餌料。海月水母本身含水量較大，單位體積內(nèi)其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)總量相對(duì)較少，這也是導(dǎo)致海月組水母生長(zhǎng)速度較慢的原因之一。鹵蟲成蟲組水母在飼養(yǎng)后期傘徑和個(gè)體質(zhì)量趨于平穩(wěn)，雖然兩項(xiàng)指標(biāo)均小于鹵蟲無節(jié)幼體組最大值，但其口腕長(zhǎng)度相對(duì)較長(zhǎng)，無生長(zhǎng)異常狀態(tài)，因此認(rèn)為鹵蟲成蟲組水母在亞成體時(shí)期遇到生長(zhǎng)瓶頸，可能餌料本身缺乏水母成體時(shí)期所需某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)導(dǎo)致，也可能受實(shí)驗(yàn)投喂頻次影響，水母日能量攝入相近于能量消耗。

魚肉作為水母飼料的研究報(bào)道較少。本研究發(fā)現(xiàn)，魚肉組水母在前期表現(xiàn)出明顯的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)，在0～5 d，其傘徑和個(gè)體質(zhì)量均大于其他組，在10～20 d階段，其傘徑和個(gè)體質(zhì)量均大于除鹵蟲無節(jié)幼體組外其他組（圖2）。通過對(duì)比發(fā)現(xiàn)，第45 d 時(shí)，魚肉組和海月組水母的傘徑和個(gè)體質(zhì)量基本一致，但魚肉組口腕長(zhǎng)度只有海月組一半，傘體收縮頻率也明顯小于海月組。魚肉組在快速生長(zhǎng)后出現(xiàn)的異常停滯狀態(tài)，原因尚不明確。實(shí)驗(yàn)所選魚肉為大銀魚肉，其對(duì)幼水母體前期生長(zhǎng)具有的明顯促進(jìn)作用，認(rèn)為魚肉具有作為水母常規(guī)餌料的可研發(fā)性，利于降低水母飼養(yǎng)成本。

脂類是海水仔稚魚的必需營(yíng)養(yǎng)要素，n-3 高度不飽和脂肪酸是海水仔稚魚的必需脂肪酸，直接影響其生長(zhǎng)和存活，其中又以DHA 和EPA 尤為重要[37]。大黃魚魚卵含有豐富的脂肪酸和氨基酸[38]，DHA 含量遠(yuǎn)高鹵蟲無節(jié)幼體[35,38]。本研究中，魚卵組水母在投喂初期表現(xiàn)出較強(qiáng)的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)，認(rèn)為魚卵營(yíng)養(yǎng)滿足幼水母體早期所需，而該組水母?jìng)泱w收縮頻率在第10 d 明顯大于其他組的極值，說明魚卵中富含提升水母活力的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可能與DHA 和EPA 有關(guān)。因此在日常飼養(yǎng)中，有望在水母的基礎(chǔ)餌料中額外添加指定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以定向提高水母的生長(zhǎng)速度和活力。研究表明，浮游橈足類是絕大多數(shù)幼魚和許多中上層經(jīng)濟(jì)魚類（如鯡Clupea pallasi、銀魚Salangidae、金色小沙丁魚Sardinella aurita、鮐Pneumatophorus japonicus 和竹莢魚Trachurus japonicus 等）及鯨類的主要天然餌料，又是底棲魚類的間接餌料[39]。橈足類具有豐富的磷脂，磷脂中具有高含量的高度不飽和脂肪酸和抗氧化物質(zhì)[40]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，橈足類組水母?jìng)泱w收縮頻率在10～25 d 階段呈明顯升高，認(rèn)為橈足類中同樣含有提高水母活力的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在實(shí)際飼養(yǎng)中，復(fù)合餌料投喂下的水母存活率和生長(zhǎng)率往往大于單一餌料投喂，因此對(duì)于不同餌料的選擇和添加比例，以及添加劑的運(yùn)用，將是后續(xù)研究工作的重點(diǎn)之一。

3.3 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)所選7 種天然餌料對(duì)大西洋金黃水母幼水母體存活和生長(zhǎng)具有明顯差異性影響：海月組存活率最高（>90%），其他組存活率皆在50%以下；鹵蟲無節(jié)幼體、海月水母和鹵蟲成蟲具有穩(wěn)定的生長(zhǎng)促進(jìn)作用（生長(zhǎng)速度鹵蟲無節(jié)幼體＞鹵蟲成蟲＞海月水母），其中鹵蟲無節(jié)幼體組和海月組具有繼續(xù)生長(zhǎng)趨勢(shì)；大銀魚肉在初期具有明顯生長(zhǎng)促進(jìn)作用；黃花魚卵在初期具有明顯生長(zhǎng)促進(jìn)作用和傘體活力提升作用；糠蝦和橈足類無明顯生長(zhǎng)促進(jìn)作用。