高睿 于明 黃海

【摘要】目的：建立鹽酸尼卡地平中多種有機(jī)溶劑殘留量的測定方法。方法：采用頂空氣相色譜內(nèi)標(biāo)法，色譜柱為DB-624毛細(xì)管柱（30 m×0.53 mm，3.0μm），載氣為氮?dú)?，氫火焰離子化檢測器，柱溫程序升溫（初始柱溫40℃維持11 min，以40℃·min-1的速率升溫至200℃，維持5 min。結(jié)果：7種組分甲醇、乙醚、丙酮、異丙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷和苯，在此條件下能有效分離，線性范圍分別為149.82～898.92μg·mL1（r=0.9997）、264.50～1587.00μg·mL-1（r=0.9994）、252.90～1770.30μg·mL-1（r=0.9979）、250.00～ 1500.00μg·mL-1（r=0.9997）、251.56～1509.36μg·mL-1（r=0.9997）、6.534～22.869μg·mL-1（r=0.9995）、0.242～0.847μg·mL-1（r= 0.9998），平均回收率分別為90.48%（RSD%=3.38%），105.64%（RSD%=3.42%），103.55%（RSD%=3.95%），95.66%（RSD%= 3.83%），104.70%（RSD%=2.85%），94.61%（RSD%=3.59%），99.09%（RSD%=6.21%），（n=9），檢測限（LOD）分別為：0.15，0.026，0.015，0.25，0.25，3.27，0.12μg·mL-1。結(jié)論：該方法簡單、準(zhǔn)確、靈敏度高、重復(fù)性好，適合于鹽酸尼卡地平中殘留溶劑的檢測。

【關(guān)鍵詞】鹽酸尼卡地平；頂空氣相色譜法；殘留溶劑

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2023.01.035

【基金項(xiàng)目】遼寧省自然基金資助計(jì)劃（2019-MS-185）。

Determination of Residual Organic Solvents in Nicardipine Hydrochloride by Headspace GC

GAO Rui，YU Ming，HUANG Hai

（Liaoning Institute for Drug Control，Shenyang 110036，China）

Abstract：Objective：To establish a headspace gas chromatography method for the determination of residual solvents in decitabi

ne.Methods：A headspace gas chromatography with an internal standard was used with a capillary column DB-624（30 m×0.53 mm，3.0μm），and with nitrogen as the carrier and an FID as the detector.The column temperature was programmed raising （ the initial temperature was 40℃，maintaining for 11 min，and rose to 200℃at the rate of 40℃·min-1，maintaining for 5 min.Results：The linear range for methanol，methyl formate，acetonitrile and methyl p-toluate was 149.82～898.92μg·mL-1（r=0.9997）、264.50～1587.00μg·mL-1（r=0.9994）、252.90～1770.30μg·mL-1（r=0.9979）、250.00～1500.00μg·mL-1（r=0.9997）、251.56～1509.36μg·mL-1（r=0.9997）、6.534～ 22.869μg·mL-1（r=0.9995）、0.242～0.847μg·mL-1（r=0.9998），respectively.The average recovery was 90.48%（RSD%=3.38%），105.64%（RSD%=3.42%），103.55%（RSD%=3.95%），95.66%（RSD%=3.83%），104.70%（RSD%=2.85%），94.61%（RSD%=3.59%），99.09%（RSD%=6.21%），（n=9），and the LOD were 0.15，0.026，0.015，0.25，0.25，3.27，0.12μg·mL-1，respectively.Conclusion：The method is simple，accurate，sensitive and reproducible.It can be used for the determination of various residual solvents in decitabine.

Key words：Nicardipine hydrochloride；headspace gas chromatography；residual solvents

鹽酸尼卡地平是日本山之內(nèi)制藥株式會(huì)社開發(fā)的動(dòng)脈血管擴(kuò)張劑，用于缺血性腦血管疾病和原發(fā)性高血壓患者。鹽酸尼卡地平在制備工藝中使用有機(jī)溶劑有異丙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、苯、三氯甲烷、甲醇[1～2]，根據(jù)國際人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國際協(xié)會(huì)（ICH）對(duì)有機(jī)溶劑殘留量測定的指導(dǎo)原則，應(yīng)對(duì)此7種有機(jī)組分的殘留進(jìn)行控制，以確保人體的用藥安全。本試驗(yàn)根據(jù)文獻(xiàn)[3～7]建立了鹽酸尼卡地平原料藥中殘留有機(jī)溶劑的頂空氣相色譜測定方法。

1儀器與試藥

島津GC-2010Plus氣相色譜儀、Satorius分析天平（0.0001 g）BSA224S-CW、7697A頂空進(jìn)樣器（美國安捷倫科技有限公司）。

無水甲醇（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20170306，含量：≥99.5%）；乙醚（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20170418，含量：≥99.5%）；丙酮（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：T20090630，含量：≥99.5%）；異丙醇（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20170724，含量：≥99.7%）；乙酸乙酯（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20160902，含量：≥99.5%）；三氯甲烷（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20170215，含量：≥99.0%）；苯（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20061108，含量：≥99.5%）；3批測試樣品（Y201802002、Y201803001、Y201803002）。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件

DB-624毛細(xì)管柱（30 m×0.53 mm，3.0μm），F(xiàn)ID離子化檢測器，檢測器溫度250℃，進(jìn)樣器溫度220℃，載氣為氮?dú)?，分流?，柱流速3.0 mL·mL-1，氫氣流速40 mL·mL-1，空氣流速400 mL·mL-1，柱溫采用程序升溫：初始柱溫40℃維持11 min，以40℃·min-1的速度升溫至200℃，維持5 min。頂空瓶的平衡溫度70℃，平衡時(shí)間30 min。

2.2溶液的制備

1）空白溶液，精密量取DMF2 mL，置10 mL頂空瓶中，密封。

2）對(duì)照品貯備液，分別精密稱取甲醇0.7491 g、乙醚1.3225 g、丙酮1.2645 g、異丙醇1.2500 g、乙酸乙酯1.2578 g，置50 mL量瓶中，用DMF稀釋至刻度，搖勻，分別制成上述各對(duì)照品貯備液。

精密稱取三氯甲烷0.6534 g，置20 mL量瓶中，用DMF稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置100 mL量瓶中，用DMF稀釋至刻度，搖勻，制成三氯甲烷對(duì)照品貯備液。

精密稱取苯0.1209 g，置100 mL量瓶中，用DMF稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置100 mL量瓶中，用DMF稀釋至刻度，搖勻，制成苯對(duì)照品貯備液。

3）對(duì)照品溶液，取對(duì)照品貯備液各1.0 mL置100 mL量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。精密量取 2 mL，置10 mL頂空瓶中，密封，作為對(duì)照品溶液。

4）供試品溶液，精密稱取鹽酸尼卡地平樣品0.4 g，置于10 mL頂空瓶中，精密加入DMF2 mL，振搖溶解，密封，作為供試品溶液。

2.3專屬性與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

在上述色譜條件下，將對(duì)照品溶液和空白溶液分別進(jìn)樣。

結(jié)果表明：空白溶劑（見圖1）對(duì)甲醇、乙醚、丙酮、異丙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷和苯的檢測均無干擾，方法專屬性符合要求；各組分均能完全分離（見圖2）。

2.4線性關(guān)系考察

分別精密量取各對(duì)照品貯備液1 mL，2 mL，3 mL，5 mL，6 mL，7 mL，置100 mL量瓶中，用DMF稀釋至刻度，搖勻；再分別精密量取線性對(duì)照溶液2 mL，置10 mL頂空瓶中，密封，測定：以濃度為橫坐標(biāo)、峰面積（A）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。

結(jié)果表明：在濃度范圍內(nèi)，峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系（見表1及圖3）。

2.5重復(fù)性試驗(yàn)

分別精密量取各對(duì)照品貯備液4 mL，置100 mL量瓶中，用DMF稀釋至刻度，搖勻，作為混合對(duì)照品溶液。精密量取2 mL，置10 mL頂空瓶中，密封按“2.2，步驟4）”項(xiàng)下方法平行制備6份對(duì)照品溶液，測定峰面積。

試驗(yàn)結(jié)果：甲醇、丙酮的RSD%分別為5.0%，2.86%（n=6），見表2，符合《中華人民共和國藥典（2020年版）》殘留溶劑重復(fù)性要求（RSD%≤5%）。

2.6檢測限和定量限的測定

取對(duì)照品溶液用稀釋劑逐級(jí)稀釋，置頂空瓶中進(jìn)樣，重復(fù)測試3次，按信噪比（S/N）10和3，測得甲醇、乙醚、丙酮、異丙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、苯的檢測限結(jié)果見表3。

2.7回收率試驗(yàn)

分別精密量取“2.2，步驟2）”項(xiàng)下的對(duì)照品貯備液2 mL、4 mL、5 mL，置100 mL量瓶中，用DMF稀釋至刻度，制成50%、100%、125%三個(gè)濃度的混合對(duì)照品溶液。精密稱取已知?dú)埩羧軇┝康柠}酸尼卡地平（批號(hào)為130902）0.4 g，共9份，分別置10 mL頂空瓶中，密封，作為供試品溶液。檢測并記錄色譜圖，計(jì)算回收率。甲醇、乙醚、丙酮、異丙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、苯的平均回收率分別為：90.48%（RSD%=3.4%），105.64%（RSD% =3.4%），103.55%（RSD% =4.0%），95.66%（RSD% =3.8%），104.70%（RSD% =2.8%），94.61%（RSD% = 3.6%），99.09%（RSD%=6.2%），（n=9），均在80%～120%之間，符合殘留溶劑準(zhǔn)確度測定的要求。

2.8樣品測定

按“2.2，步驟4）”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別取每一份供試品溶液置頂空瓶中進(jìn)樣，各平行測試2次，計(jì)算樣品中的有機(jī)溶劑殘留量，含量均在規(guī)定限度范圍之內(nèi)。結(jié)果見表4。

3討論

1）溶劑的選擇。鹽酸尼卡地平在水中幾乎不溶，故以DMF為溶劑。

2）根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，經(jīng)試驗(yàn)確定在中等極性色譜柱系統(tǒng)條件下，采用6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷（或極性相近）為固定液的毛細(xì)管色譜柱，起始溫度為40℃時(shí)，甲醇、乙醚、丙酮、異丙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷和苯能夠有效分離。為保證混合對(duì)照品溶液中限度和檢測靈敏度較低的苯和三氯甲烷能夠有效檢出，分流比設(shè)定為1，丙酮和異丙醇則因濃度較大不能達(dá)到基線分離，故將二者分離度定為不小于1.4；其他色譜峰的分離度均能滿足ICH和《中國藥典》中的規(guī)定[8～9]。試驗(yàn)證明，此條件下，分離效果較好，靈敏度高，重現(xiàn)性好。

3）鹽酸尼卡地平分子結(jié)構(gòu)中還有甲氧基，在較高頂空溫度下有可能發(fā)生熱裂解產(chǎn)生甲醇，進(jìn)而影響樣品中甲醇?xì)埩袅康臏y定，故選擇70℃平衡30分鐘的頂空條件。

4小結(jié)

本試驗(yàn)采用頂空色譜法，對(duì)3批次鹽酸尼卡地平原料藥中有機(jī)溶劑殘留物進(jìn)行了檢測，工藝中使用的有機(jī)溶劑檢出甲醇和丙酮，其他有機(jī)溶劑均小于藥典規(guī)定限度[8]，其他有機(jī)溶劑未檢出。該方法簡單、準(zhǔn)確、靈敏度高、重復(fù)性好，適合于鹽酸尼卡地平中殘留溶劑的檢測。

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【作者簡介】

高睿，男，1983年出生，主管藥師，研究方向?yàn)榛瘜W(xué)藥品質(zhì)量分析及標(biāo)準(zhǔn)起草工作。

（本稿審讀：龐燕軍）