李艷玲,郭永剛,李佳禧,趙建平

(河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院 動(dòng)物醫(yī)藥學(xué)院,河南 鄭州 450046)

氟苯尼考是甲砜霉素的單氟衍生物,易溶于有機(jī)溶劑,難溶于水。臨床應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖、牛、豬及雞的細(xì)菌性疾病的防治,主要的劑型有注射劑、粉劑等。在當(dāng)前市場上廣泛應(yīng)用的氟苯尼考制劑主要包括10%氟苯尼考注射液、10%和20%含量的氟苯尼考粉[1]、含2%氟苯尼考的溶液劑和預(yù)混劑等劑型。氟苯尼考的水難溶性使其在臨床應(yīng)用中的利用率較低。因此,急需研發(fā)一種能夠提高氟苯尼考溶解度和吸收利用度的氟苯尼考新劑型[2]。

固體分散技術(shù)是近年來興起的一種能夠改變一些難溶性藥物溶解性的新技術(shù)[2]。它通過物理或者化學(xué)方法將原料藥和輔料高度混合在一起,能使藥物改變?cè)瓉淼膯我淮嬖谛螒B(tài),以更多樣的物質(zhì)結(jié)構(gòu)分散于合適的載體之中。固體分散體具有提高難溶性藥物的生物利用度、提升藥物的穩(wěn)定性等特點(diǎn),具有廣泛的應(yīng)用前景[3-5]。本試驗(yàn)采用熔融法和溶劑法制備氟苯尼考固體分散體,篩選其最佳制備方法和藥輔比,提高氟苯尼考的溶解度和生物利用度,擴(kuò)大其臨床應(yīng)用范圍。

1 材料與儀器

1.1 試劑與藥品

氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào):A11A8L33686,上海源葉生物科技有限公司),氟苯尼考原料藥(鄭州后羿制藥有限公司),聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000(天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所),乙腈(一級(jí)色譜純,默克股份有限公司)。

1.2 儀器設(shè)備

Waters高效液相色譜儀(上海沃特世科技有限公司),BSA224S型分析天平(北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司),RE-2000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海賢德實(shí)驗(yàn)儀器有限公司),Purelab F1型純水機(jī)(威立雅水處理技術(shù)上海有限公司),85-2型磁力加熱攪拌器(江蘇正基儀器有限公司),油浴鍋(上海樹立儀器儀表有限公司),ZRS-6G型智能溶出實(shí)驗(yàn)儀(天津市天大發(fā)科技有限公司)。

2 方法

2.1 氟苯尼考固體分散體的制備

按1∶4、1∶5、1∶7精密稱取一定量的氟苯尼考原料藥和聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000,使用熔融法、溶劑法制備氟苯尼考固體分散體[6,7]。

熔融法制備:先將按比例稱取的聚乙二醇2000放入小瓷缸中,置于油浴鍋中加熱熔融(油浴鍋的溫度為160 ℃),再分次加入處方比例的氟苯尼考原粉,混合熔融。待熔融完全后,利用打蛋器高速攪拌3 min,將熔融物倒在燒杯中,置于磁力加熱攪拌器上充分?jǐn)嚢?將其取出倒在冷凍的玻璃板上,使其迅速冷卻凝固。干燥箱中30℃干燥12小時(shí),待干燥完全后用鑷子將其刮下,粉碎過80目篩,即得氟苯尼考-聚乙二醇2000不同比例的氟苯尼考固體分散體,放于密封袋中保存,備用。同理,不同比例的氟苯尼考聚乙二醇4000、聚乙二醇6000固體分散體也按上述方法制備。

溶劑法制備:按比例稱取聚乙二醇2000、氟苯尼考原粉,先將氟苯尼考原粉放置于帶有適量甲醇的燒杯中使其溶解,然后向燒杯中加入比例量的聚乙二醇2000,在60 ℃的磁力加熱攪拌器上加熱攪拌溶解、混勻,再將其旋蒸除去甲醇,使藥物和載體析出,置于冷凍的玻璃板上冷卻凝固,室內(nèi)放置干燥約24 h,干燥過后用鑷子將其刮下,粉碎過80目篩,密封保存。同樣,不同比例的氟苯尼考聚乙二醇4000、聚乙二醇6000固體分散體也按照此步驟制備。

2.2 氟苯尼考固體分散體溶出度的測定

精密量取氟苯尼考原粉100 mg及不同比例的氟苯尼考-聚乙二醇2000固體分散體適量(含氟苯尼考100 mg)包在稱量紙中做好標(biāo)記備用。配置0.1%的鹽酸(超聲脫氣30 min處理)作為溶出介質(zhì),設(shè)定溶出儀溫度為37 ℃,轉(zhuǎn)速為100 r/min。待所有準(zhǔn)備工作完畢后,開始投放稱量好的氟苯尼考原粉及氟苯尼考-聚乙二醇2000(1∶4、1∶5、1∶7)固體分散體(含氟苯尼考100 mg),在藥物和溶出液開始接觸時(shí),轉(zhuǎn)動(dòng)攪拌釜并按下計(jì)時(shí)裝置,分別在5 min、8 min、20 min、40 min、60 min時(shí)間點(diǎn)取樣5 mL,同時(shí)補(bǔ)充相同體積相同溫度的溶出液,取出的樣液經(jīng)濾膜過濾后置于5 mL EP管中;每個(gè)樣品都按照上述的方法做兩次平行的溶出試驗(yàn),保存所取樣液[8,9]。

配制氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)品:精密稱定氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)品1 mg,倒入10 mL的容量瓶中,加入0.1%的鹽酸溶液并超聲溶解,待其溶解完全后,加入上述溶液定容,于常溫下保存。

高效液相測定氟苯尼考含量:流動(dòng)相為乙腈∶水=35∶65,將樣品溶出液經(jīng)0.22 μm的微孔濾膜過濾后,取續(xù)濾液置于高效液相進(jìn)樣瓶中,進(jìn)樣量為10 μL,柱溫為25 ℃,在224 nm波長處測定樣品中氟苯尼考含量,記錄數(shù)據(jù),計(jì)算溶出度。

3 結(jié)果

3.1 高效液相測定氟苯尼考含量

由圖1可知,檢測波長為224 nm時(shí)氟苯尼考吸收度較好,且無干擾,可以做為測定氟苯尼考含量的測定條件(圖2)。

圖1 氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)品溶液

圖2 氟苯尼考固體分散體

3.2 氟苯尼考固體分散體溶出率的測定

從表1結(jié)果可得,以聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000為載體,用熔融法制備氟苯尼考固體分散體,在不同藥輔比下增溶效果均較為明顯,與原料藥的溶出率(27%)相比,最高能增加到50%,特別是聚乙二醇4000(藥輔比1∶5)累積溶出率最高,在5 min時(shí)即可達(dá)到最大溶出率50%。

表1 氟苯尼考固體分散體溶出率(熔融法)

從表2結(jié)果可以看出,用溶劑法制備的固體分散體和原料藥相比增溶效果明顯,且溶出速率明顯加快,原料藥需要60 min才能達(dá)到最大溶出率27%,而氟苯尼考固體分散體20～40 min即可達(dá)到最大溶出率,且溶出率明顯增加,不同藥輔比下,溶出率均可提高40%以上。

表2 氟苯尼考固體分散體溶出率(溶劑法)

4 討論

試驗(yàn)采用熔融法和溶劑法分別對(duì)氟苯尼考固體分散體進(jìn)行溶出率測定,結(jié)果顯示,對(duì)于兩種方法、不同輔料制成的不同比例的氟苯尼考固體分散體,其溶出率均明顯高于氟苯尼考原粉,表明聚乙二醇2000、4000、6000能夠增加氟苯尼考的溶解度。對(duì)于相同方法、相同輔料、不同比例的氟苯尼考固體分散體來看,氟苯尼考的溶出速率在一定范圍內(nèi)會(huì)隨著輔料比例的增大而增加。一旦超出這個(gè)比例范圍,雖然會(huì)對(duì)氟苯尼考產(chǎn)生助溶作用,但助溶能力與比例將不再呈現(xiàn)正相關(guān)的關(guān)系。相同輔料、相同比例、不同方法制備氟苯尼考固體分散體,可以得出熔融法則更適合氟苯尼考固體分散體的制備。比較相同時(shí)間段氟苯尼考溶出量以及所能達(dá)到的最大溶出量所需時(shí)間,可以得出,不論是熔融法還是溶劑法,氟苯尼考-聚乙二醇 4000(1∶5)制備出的固體分散體的溶出能力要強(qiáng)于其它類型的氟苯尼考固體分散體。

試驗(yàn)操作中為了確保藥物的穩(wěn)定性和可靠性,采用熔融法制備固體分散體時(shí),需注意輔料的熔融時(shí)間。如果用于熔融輔料的容器導(dǎo)熱性差,輔料長時(shí)間處于高溫下,輔料的分子結(jié)構(gòu)極有可能被破壞,從而導(dǎo)致其增溶能力的下降。采用溶劑法制備固體分散體時(shí),需注意除去有機(jī)溶劑試驗(yàn)的操作安全。此外,在倒至玻璃板時(shí),兩種制備方法均需藥物迅速冷卻結(jié)晶,確保固體分散體的高度分散狀態(tài)。

5 結(jié)論

采用熔融法和溶劑法成功制備了穩(wěn)定性較好的氟苯尼考固體分散體。在氟苯尼考-聚乙二醇4000(1∶5)時(shí)熔融法制備的固體分散體溶出率最高,該制備方法操作簡便,易于質(zhì)量控制,可有效提高了氟苯尼考的溶出度。