趙潔　張清鳳　普春　劉元?jiǎng)Α⑸形洹⊥鯐詪伞●R梅見(jiàn)　宋維際

摘要為了解昭通市馬鈴薯種薯質(zhì)量及生產(chǎn)中病毒病發(fā)生情況，在馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)昭陽(yáng)區(qū)、大關(guān)縣、魯?shù)榭h、鎮(zhèn)雄縣、彝良縣、巧家縣采集具有典型病毒病癥狀的樣品、疑似病毒樣品和隨機(jī)無(wú)癥狀樣品共計(jì)90個(gè)。應(yīng)用DAS-ELISA方法檢測(cè)6種馬鈴薯主要病毒PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA。結(jié)果表明，各縣區(qū)樣品普遍有病毒感染，其中 PVA檢出率最高，PVS最低。不同級(jí)別種薯病毒發(fā)病率最高的為PVA，最低的為PVS。其中感染率表現(xiàn)為原原種＜原種＜商品薯。因此推廣馬鈴薯脫毒種薯是馬鈴薯病毒病防治的重要方法，同時(shí)在生產(chǎn)中主要以預(yù)防為主，通過(guò)減少蚜蟲(chóng)等傳毒媒介對(duì)病毒的傳播來(lái)減少病毒對(duì)馬鈴薯的危害。

關(guān)鍵詞昭通市；馬鈴薯；病毒病

中圖分類(lèi)號(hào)S435.32文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

文章編號(hào)0517-6611（2023）11-0114-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.11.028開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Analysis on the Occurrence of Potato Virus Disease in Zhaotong City

ZHAO Jie， ZHANG Qing-feng， PU Chun et al （Zhaotong Academy of Agricultural Sciences，Zhaotong，Yunnan? 657000）

AbstractIn order to know more about the quality of potato seed and the occurrence of virus disease in potato production in Zhaotong City， we collected 90 samples with typical symptoms of virus disease， suspected virus samples and random disease-free samples in main potato production areas of Zhaoyang District， Daguan County， Ludian County， Zhenxiong County， Yiliang County and Qiaojia County.DAS-ELISA was used for detecting six main potato viruses： potato virus X（PVX）， potato virus Y（PVY）， potato virus M（PVM）， potato virus S（PVS）， potato virus A（PVA） and potato leaf roll virus（PLRV）. The results showed that virus infection was common in the samples from all counties， and the detection rate of PVA was the highest， while PVS was the lowest. PVA was the highest and PVS was the lowest in different grades of seed potato quality. The infection rate of microtuber seed potatoes < original seed potatoes < commercial seed potatoes. The prevention and control of potato virus disease should start from the promotion of virus-free seed potato， and prevention should be given priority in production. The harm of potato virus should be reduced by reducing the transmission of virus by aphid and other transmission vectors.

Key wordsZhaotong City;Potato;Virus disease

昭通市地處烏蒙山腹心地帶，毗鄰云、貴、川、渝4省，氣候環(huán)境與馬鈴薯原產(chǎn)地比較接近，是目前馬鈴薯種薯擴(kuò)繁最適宜的地區(qū)之一，也是云南省馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)，享有中國(guó)南方馬鈴薯種薯之鄉(xiāng)、中國(guó)馬鈴薯產(chǎn)業(yè)助推脫貧攻堅(jiān)示范鄉(xiāng)的美譽(yù)。昭通市是云南省馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)，種植面積在全省排名第二。昭通馬鈴薯夏季高海拔繁種或生產(chǎn)，因氣候冷涼，病毒病危害較輕，但在秋、冬、春季中低海拔生產(chǎn)中，氣候溫?zé)岣稍?，病毒病發(fā)生危害嚴(yán)重，同時(shí)由于馬鈴薯為營(yíng)養(yǎng)體繁殖，病毒會(huì)隨著馬鈴薯繁殖代數(shù)增加而逐年積累，最終導(dǎo)致馬鈴薯種性退化，研究表明馬鈴薯病毒可引起馬鈴薯減產(chǎn)30%～50%，如果是多種病毒復(fù)合侵染，則可以造成 80%以上的減產(chǎn)［1-3］，這嚴(yán)重制約了昭通市馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

已報(bào)道的馬鈴薯病毒病有40多種［4-6］，危害比較嚴(yán)重的主要有馬鈴薯X病毒Potato virus X（PVX）、馬鈴薯Y病毒Potato virus Y（PVY）、馬鈴薯M病毒Potato virus M（PVM）、馬鈴薯S病毒Potato virus S（PVS）、馬鈴薯A病毒Potato virus A（PVA）、馬鈴薯卷葉病毒Potato leaf roll virus（PLRV）。其中，PVY是侵染馬鈴薯最嚴(yán)重的病毒，在我國(guó)各地區(qū)的檢出率均較高。感染PVY的植株通常表現(xiàn)出重花葉或不同程度的壞死斑，危害嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致馬鈴薯減產(chǎn)80%［7］；PLRV侵染馬鈴薯時(shí)可引起馬鈴薯卷葉，對(duì)馬鈴薯的侵染僅次于PVY［8-12］，其他4種病毒（PVX、PVS、PVM、PVA）單獨(dú)侵染馬鈴薯時(shí)，表現(xiàn)癥狀不明顯或不表現(xiàn)癥狀，復(fù)合侵染時(shí)會(huì)因病毒的數(shù)量、種類(lèi)、侵染的程度等不同而表現(xiàn)出不同程度的花葉、卷葉或壞死癥狀［13］。

該研究依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《馬鈴薯脫毒種薯》通過(guò)ELISA的方法對(duì)昭通市主要產(chǎn)區(qū)的馬鈴薯進(jìn)行病毒檢測(cè)，明確昭通市主產(chǎn)區(qū)病毒病發(fā)生情況，為昭通市馬鈴薯種薯生產(chǎn)提供早期檢測(cè)的依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料樣品采集時(shí)間為2021年5—11月，在昭通市馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)昭陽(yáng)區(qū)、魯?shù)榭h、巧家縣、彝良縣、鎮(zhèn)雄縣進(jìn)行取樣，取樣時(shí)間為馬鈴薯盛花期和收獲期。共采集樣品 90 個(gè)。樣品級(jí)別包括馬鈴薯原原種、原種及商品薯，但由于受條件限制，調(diào)查時(shí)有部分地塊找不到種植者，所以有一部分樣品種薯級(jí)別不確定，所采集的樣品表現(xiàn)為卷葉、花葉等典型病毒病癥狀或疑似病毒病癥狀。涉及確定的品種有22個(gè)，分別為“合作88”“云薯104”“云薯105”“云薯108” “云薯109”“云薯304”“云薯305”“云薯902”“云薯921”“洪邦2號(hào)”“青薯9號(hào)”“昭薯6號(hào)”“宣薯2號(hào)”“荷蘭15號(hào)”“麗薯6號(hào)”“麗薯7號(hào)”“師大6號(hào)”“會(huì)薯19”“靖薯7號(hào)”“滇薯6號(hào)”“隴薯7號(hào)”“西森6號(hào)”。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1檢測(cè)方法。對(duì)所采集的90個(gè)樣品檢測(cè)6種病毒，所用的方法為雙抗體夾心酶聯(lián)檢測(cè)法（DAS-ELISA）。該檢測(cè)方法利用抗原（病毒顆粒）與其特異性抗體在離體條件下產(chǎn)生專(zhuān)一性反應(yīng)的原理，快速檢測(cè)馬鈴薯病毒。加入特定的反應(yīng)底物后，通過(guò)酶將底物水解并產(chǎn)生有色的產(chǎn)物。產(chǎn)物顏色的深淺和樣品中的馬鈴薯病毒含量呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀測(cè)OD_405/490值，一般情況下OD_405/490≥2×陰性對(duì)照平均值的樣品判斷為感染病毒。具體操作步驟參照使用說(shuō)明書(shū)。

1.2.2藥品規(guī)格。馬鈴薯病毒 PVX、PVY、PVS、PLRV、PVA 和 PVM 的檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自農(nóng)業(yè)農(nóng)村部脫毒馬鈴薯種薯質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（哈爾濱），其他化學(xué)試劑為分析純。

2結(jié)果與分析

2.1昭通市馬鈴薯主產(chǎn)縣區(qū)病毒病害發(fā)生比較從表1、2 可以看出，昭通市馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)主要的6種病毒發(fā)生都很普遍，其中昭陽(yáng)區(qū)病毒發(fā)病率最高的為PVA 100%，最低的為PVS 28.6%，病毒發(fā)生由高到低表現(xiàn)為PVA＞PVY＞PVX、PVM＞PLRV＞PVS；大關(guān)縣病毒發(fā)病率最高的為PVA 100%，最低的為PVS 33.3%，病毒發(fā)生由高到低為PVA、PVY＞PVX、PLRV、PVM＞PVS；魯?shù)榭h病毒發(fā)生率最高的為PVA 56.0%，最低的為PVS 20.0%，病毒發(fā)生由高到低為PVA＞PVY＞PVM＞PVX、PLRV＞PVS；鎮(zhèn)雄縣病毒發(fā)生率PVS、PLRV、PVA、PVM均為11.2%，PVX、PVY未發(fā)生；彝良縣病毒發(fā)病率最高的為PVA 28.6%，PVX、PVS、PLRV、PVM最低均為14.3%，病毒發(fā)生由高到低為PVA＞PVY＞PVX、PVS、PLRV、PVM；巧家縣病毒發(fā)生率最高的為PVA 76.5%，最低的為PVS 0，病毒發(fā)生由高到低為PVA＞PVM＞PVY＞PLRV＞PVX＞PVS。

從各縣區(qū)的發(fā)病率可以看出，PVA病毒發(fā)病率均最高，且均有不同程度的復(fù)合侵染，其中大關(guān)縣復(fù)合侵染率最高為100%，鎮(zhèn)雄縣最低為7.1%，復(fù)合侵染率由高到低為大關(guān)縣＞昭陽(yáng)區(qū)＞巧家縣＞魯?shù)榭h＞彝良縣＞鎮(zhèn)雄縣。

2.2昭通市不同級(jí)別種薯病毒發(fā)生情況從表3、4 可以看出，不同級(jí)別的種薯，主要病害均有發(fā)生。其中原原種病毒發(fā)病率最高的為PVA 37.5%，最低的為PVS 0，病毒發(fā)生由高到低為PVA＞PVY＞PVM＞PVX、PLRV＞PVS；原種病毒發(fā)生率最高的為PVA，最低的為PVS，病毒發(fā)生率由高到低為PVA＞PVY＞PVM＞PVX、PLRV＞PVS，商品薯發(fā)病率最高的為PVA 78.6%，最低的為PVS、PLRV 32.1%，病毒發(fā)生由高到低為PVA＞PVY、PVM＞PVX＞PVS、PLRV。

由此可見(jiàn)，不同級(jí)別種薯，發(fā)病率最高的為PVA，最低的為PVS。不同級(jí)別的種薯復(fù)合浸染都有不同程度的發(fā)生，其中商品薯發(fā)生率最高為71.4%，原原種復(fù)合侵染率最低為29.2%。

3討論

昭通市主產(chǎn)區(qū)馬鈴薯主要病害均有不同程度的發(fā)生，不同級(jí)別的種薯也有不同程度的發(fā)生，其中檢出率最高的為PVA，最低的為PVS。復(fù)合侵染均有不同程度的發(fā)生。

PVA病毒是馬鈴薯Y病毒屬成員，病毒分布廣，相對(duì)PVY病毒而言，PVA癥狀比較輕，僅出現(xiàn)輕微的花葉、斑駁和皺縮等，塊莖上不會(huì)出現(xiàn)任何癥狀。當(dāng)PVA與PVY復(fù)合浸染時(shí)，發(fā)病情況會(huì)加重，出現(xiàn)嚴(yán)重的花葉，還伴有皺縮脈壞死條紋等癥狀，馬鈴薯感染PVA病毒后，可以造成馬鈴薯減產(chǎn)40%以上［14］。 同時(shí)，在自然條件下，PVA主要通過(guò)蚜蟲(chóng)以非持久性方式傳播，傳播介體蚜蟲(chóng)至少有7種以上，如鼠李蚜、大戟長(zhǎng)管蚜和桃蚜［15］。

PVA 在世界各馬鈴薯種植區(qū)均有廣泛分布，可系統(tǒng)侵染多種茄科植物。新修訂的《中華人民共和國(guó)進(jìn)境植物檢疫性有害生物名錄》將其列為檢疫性病毒病害。目前 PVA 在我國(guó)尚屬局部發(fā)生，需要制定嚴(yán)格的檢疫措施以確保對(duì)該病毒的有效防控［16-17］。

截至目前，還沒(méi)有治療馬鈴薯病毒病的特效藥劑，國(guó)際上通用的最有效的防治方法仍是推廣種植脫毒種薯，進(jìn)行馬鈴薯標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)。根據(jù)病毒靠近生長(zhǎng)點(diǎn)遠(yuǎn)近，馬鈴薯6種病毒脫毒難易程度為PLRV< PVA< PVY< PVM< PVX< PVS［18］，PLRV病毒和PVA病毒相對(duì)較容易脫出，因此通過(guò)馬鈴薯脫毒對(duì)昭通減少PVA病毒的發(fā)生是相對(duì)有效簡(jiǎn)單的方法。

該研究通過(guò)對(duì)昭通市馬鈴薯主要病毒病的發(fā)生調(diào)查可以看出昭通市馬鈴薯種薯質(zhì)量控制首先要從馬鈴薯脫毒種薯做起，通過(guò)提高脫毒技術(shù)，來(lái)保證馬鈴薯原原種薯質(zhì)量，同時(shí)還要持續(xù)開(kāi)展馬鈴薯脫毒苗質(zhì)量普查，脫毒苗要定期進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室抽檢，檢測(cè)認(rèn)證合格的脫毒苗才能投入生產(chǎn)使用；其次要進(jìn)一步擴(kuò)大馬鈴薯脫毒種薯的種植面積，減少自留種現(xiàn)象；最后還要通過(guò)蚜蟲(chóng)監(jiān)測(cè)預(yù)警系統(tǒng)及時(shí)滅蚜，防止蚜蟲(chóng)傳播病毒。

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