顧夢云,曾偉達(dá),宿慶連,黃明翅,馮肖梅,劉艷艷,張雪蓮,周曉云
(廣州花卉研究中心,廣東 廣州 510360)
【研究意義】紅掌(Anthurium andraeanum)又名花燭、火鶴花,天南星科(Araceae)花燭屬(Anthurium)多年生常綠草本植物,為國內(nèi)國際市場頗受歡迎的重要花卉品種之一[1-2]。目前,我國大部分地區(qū)均有栽培紅掌,據(jù)不完全統(tǒng)計,國內(nèi)紅掌年產(chǎn)3 000 萬~ 3 500 萬盆,種苗8 000萬~9 000 萬株,其中以廣東、福建和云南產(chǎn)量最多[3]。近年來,國內(nèi)紅掌品種創(chuàng)新也不斷取得新突破,如雙冠紅掌[4]、小嬌紅掌[5]、粉黛[6]、夏焰[7]、明農(nóng)月華[3]等多個自主紅掌新品種相繼報道;由廣州花卉研究中心主持、華南農(nóng)業(yè)大學(xué)參加選育的紅掌新品種福星深受種植者和消費(fèi)者喜愛,具有葉色濃綠、佛焰苞顏色鮮紅,且夏季不褪色等優(yōu)點(diǎn),在國內(nèi)有大量用種需求。為穩(wěn)定紅掌福星組培種苗生產(chǎn),除調(diào)整、優(yōu)化培養(yǎng)基配方等外,借鑒LED 在其他作物種植的應(yīng)用研究和開發(fā)經(jīng)驗,采用更加適合的光質(zhì)比例和光照強(qiáng)度,提高光合效率和種苗健壯度,是組培生產(chǎn)首要考慮的重要因素。研究紅掌福星組培愈傷誘導(dǎo)、增殖培養(yǎng)及壯苗培養(yǎng)等階段適宜的LED 光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度,開發(fā)成套的組培生產(chǎn)技術(shù),對促進(jìn)國內(nèi)紅掌新品種研發(fā)、花卉生產(chǎn)節(jié)能降耗和經(jīng)濟(jì)效益提高具有重要意義?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】光作為植物生長最重要生長因子之一,在調(diào)控植物形態(tài)構(gòu)建、生長發(fā)育、物質(zhì)代謝方面發(fā)揮重要作用[8]。LED 光源為冷光源,具有光能利用率高、光譜性能好、發(fā)熱量小、壽命長等眾多優(yōu)點(diǎn),在照明、家居等各行業(yè)廣泛應(yīng)用[9]。目前已有國內(nèi)外學(xué)者研究報道LED 光源對蝴蝶蘭[10]、觀賞石斛[11]、杉木[12]、觀賞海棠[13]等觀賞植物組織培養(yǎng)有良好的促進(jìn)作用,并篩選出了適宜相應(yīng)組織培養(yǎng)用LED 光源和光質(zhì)比,如紅光更有利于蝴蝶蘭單芽增殖、干重、鮮重以及株高的增加,迷你秋石斛在R6B3G0 光質(zhì)培養(yǎng)下增殖效果最好、增殖系數(shù)達(dá)到2.35,觀賞海棠在藍(lán)光LED 下植株生長旺盛、愈傷組織形成最好;LED 光質(zhì)在紅掌如阿拉巴馬[14]、Violeta[15]、Pink Lady[15]、驕陽[16-17]、維多[18]等品種組培中的應(yīng)用也取得一些進(jìn)展,主要研究了LED 光照條件對紅掌愈傷組織培養(yǎng)[18]、增殖分化[19]、組培苗生長[17]其中1~2個階段的影響,但對紅掌愈傷組織誘導(dǎo)以及組培各個階段LED 光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度的系統(tǒng)研究報道較少?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】紅掌對培養(yǎng)條件、外源激素的種類等較為敏感[20],不同紅掌品種組培的適宜光照條件存在差異,本試驗以自主培育的紅掌新品種福星為研究對象,結(jié)合現(xiàn)代LED 光源照明技術(shù),研究LED 不同光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度對紅掌福星組培愈傷組織誘導(dǎo)、增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)階段生長的影響,進(jìn)一步優(yōu)化組培光照條件,提高種苗生產(chǎn)質(zhì)量和效率?!緮M解決的關(guān)鍵問題】本研究探討適宜紅掌新品種福星組培重要階段的LED 光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度,建立一套適應(yīng)紅掌福星組培LED 光調(diào)控技術(shù)體系,提高愈傷組織誘導(dǎo)率、增殖率和種苗品質(zhì),培育壯苗,降低生產(chǎn)成本,為紅掌高效組培技術(shù)提供重要技術(shù)參考。
試驗于2021 年4 月至2022 年10 月在廣州花卉研究中心從化基地組培實驗室和溫室大棚進(jìn)行。供試材料紅掌福星為廣州花卉研究中心主持、華南農(nóng)業(yè)大學(xué)參加選育的新品種,組織培養(yǎng)材料均由紅掌葉片為外植體誘導(dǎo)。
1.2.1 不同LED 光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度對紅掌福星愈傷組織誘導(dǎo)的影響 試驗設(shè)7 個光照處理:Dark、10%R(100 lx)、20%R(200 lx)、30%R(300 lx)、R∶B=1∶1(300 lx)、R:B=2∶1(300 lx)、R∶B=3∶1(300 lx);光照系統(tǒng)為多路LED 可調(diào)光組培照明系統(tǒng)(下同),R(Red)表示波長為660 nm 的純紅光,B(Blue)表示波長為450 nm 的純藍(lán)光,Dark 為黑暗條件、零光照,每種光質(zhì)的額定功率為35 W,光照10 h/d,溫度均為24(±1)℃。將紅掌福星葉片外植體消毒滅菌后,轉(zhuǎn)接放入同種誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng),每瓶放4 片,每個處理設(shè)3 次重復(fù),每個重復(fù)轉(zhuǎn)接20 瓶,分別放在7 種不同LED 光照條件下培養(yǎng),120 d 后統(tǒng)計愈傷組織誘導(dǎo)率和葉片死亡率,觀察愈傷組織狀態(tài),篩選適宜的光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度。
1.2.2 不同LED 光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度對紅掌福星愈傷組織增殖的影響 試驗設(shè)6 個光照處理:WL、R、R∶B=3∶1、R∶B=2∶2、R∶B=1∶3、B;光照強(qiáng)度為300 lx,WL(White light)為白光(波長400~750 nm),光照10 h/d,溫度均為24(±1)℃。將紅掌福星葉片誘導(dǎo)出的愈傷組織塊,剪切成質(zhì)量為0.3 g 左右的方形小塊,放入同種增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織增殖培養(yǎng),每瓶放4 塊,每個處理設(shè)3 次重復(fù),每個重復(fù)轉(zhuǎn)接10 瓶,分別放在6 種不同LED 光照條件下培養(yǎng),50 d 后統(tǒng)計愈傷組織塊質(zhì)量增殖系數(shù),篩選適宜的光質(zhì)配比。
之后設(shè)置3 個不同的光照強(qiáng)度300、600、900 lx 處理,轉(zhuǎn)接方法同上,50 d 后統(tǒng)計愈傷組織塊質(zhì)量增殖系數(shù),篩選適宜的光照強(qiáng)度。
1.2.3 不同LED 光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度對紅掌福星愈傷組織芽分化的影響 試驗設(shè)4 個光照處理:WL、R∶B=4∶1、R∶B=2∶2、R∶B=1∶4;光照強(qiáng)度為1 200 lx,光照10 h/d,溫度均為24(±1)℃。將紅掌福星愈傷增殖后的組織塊剪切成1.0 g 左右的均勻方塊放在同種增殖分化培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),每瓶放4 塊,每個處理設(shè)3 次重復(fù),每個重復(fù)轉(zhuǎn)接10 瓶,分別放在4 種不同光質(zhì)條件下培養(yǎng),50 d 后統(tǒng)計芽分化個數(shù),增殖分化芽生長狀態(tài),篩選適宜的光質(zhì)配比。
之后設(shè)置3 個不同的光照強(qiáng)度1 000、1 500、2 000 lx 處理,轉(zhuǎn)接方法同上,50 d 后統(tǒng)計芽分化個數(shù),增殖分化芽生長狀態(tài),篩選適宜的光照強(qiáng)度。
1.2.4 不同LED 光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度對紅掌福星壯苗階段組培苗的影響 試驗設(shè)4 個光照處理:WL(CK)、R∶B=4∶1、R∶B=2∶2、R∶B=1∶4;光照強(qiáng)度為1 000 lx,光照10 h/d,溫度均為24(±1)℃。將紅掌福星帶有4 株生長均勻、三葉一心的增殖分化苗組織塊接入同種壯苗培養(yǎng)基中進(jìn)行壯苗培養(yǎng),每瓶放4 塊,每個處理設(shè)3 次重復(fù),每個重復(fù)轉(zhuǎn)接10 瓶,分別放在以上4 種不同光質(zhì)條件下培養(yǎng),50 d后統(tǒng)計組培苗葉片數(shù)、葉長、葉寬、根數(shù)、莖粗、株高、SPAD 值,篩選適宜的光質(zhì)配比。
之后試驗設(shè)置3 個不同的光照強(qiáng)度900、1 200、1 500 lx 處理,轉(zhuǎn)接方法同上,分別放在3種不同光照強(qiáng)度下培養(yǎng),50 d 后統(tǒng)計組培苗葉片數(shù)、葉長、葉寬、根數(shù)、莖粗、株高、SPAD 值,篩選適宜的光照強(qiáng)度。
SPAD 值測定:采用SPAD 502plus 葉綠素含量測定儀,測定組培苗的第一片平展葉,每個處理設(shè)3 次重復(fù),每個重復(fù)測30 株。
試驗數(shù)據(jù)用Excel 2010 辦公軟件進(jìn)行統(tǒng)計整理,利用統(tǒng)計分析軟件SAS 9.2(Statistical analysis system)進(jìn)行方差分析和多重比較(Duncan)。
由表1 可知,紅掌福星在相同的光照強(qiáng)度條件下,30%R 光質(zhì)處理的葉片死亡率(25%)顯著低于3 個紅藍(lán)組合光質(zhì)配比處理(葉片死亡率均在60%以上),30%R 光質(zhì)處理的葉片愈傷組織誘導(dǎo)率(66.67%)顯著高于紅藍(lán)組合光質(zhì)配比處理(30%以下)。這表明,相比于單色紅光條件,紅藍(lán)組合光質(zhì)配比下葉片死亡率高,愈傷組織誘導(dǎo)率低,不適于紅掌福星葉片愈傷組織誘導(dǎo)。
表1 不同LED 光質(zhì)配比對紅掌福星愈傷組織誘導(dǎo)的影響Table 1 Effects of different LED light quality ratio on callus induction of Anthurium andraeanum Fuxing
在Dark 和不同光照強(qiáng)度紅光光質(zhì)(10%R、20%R、30%R)條件下,福星葉片死亡率隨著紅光光照強(qiáng)度增強(qiáng)(0~300 lx)呈上升趨勢,其中在Dark 下最低、為7.50%,其次是10%R 光質(zhì)條件(10.42%);葉片愈傷組織誘導(dǎo)率在Dark 和10%R 光照條件達(dá)到最高,均為79.58%。Dark 條件下,愈傷組織呈白色蓬松狀,體積大,有黃白色顆粒物,狀態(tài)表現(xiàn)一般(圖1A);10%R、20%R、30%R 光質(zhì)條件下,愈傷組織均狀態(tài)為黃綠色,緊實,體積大,狀態(tài)表現(xiàn)好(圖1B~D)。表明紅光光質(zhì)條件較適宜紅掌福星愈傷組織誘導(dǎo),愈傷組織狀態(tài)表現(xiàn)好,且需要控制在較低的光照強(qiáng)度下。
圖1 不同LED 光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度對紅掌福星愈傷組織誘導(dǎo)的效果Fig.1 Effects of different LED light quality ratio and light intensity on callus induction of Anthurium andraeanum Fuxing
綜上,紅光光質(zhì)條件較適宜紅掌福星愈傷組織誘導(dǎo),以光照強(qiáng)度100 lx 的10%R 光質(zhì)條件下愈傷組織誘導(dǎo)率最高(79.58%),且愈傷組織狀態(tài)表現(xiàn)好,葉片死亡率較低(10.42%),僅次于黑暗條件,綜合比較效果最優(yōu)。
由圖2 可知,經(jīng)R、B兩種紅藍(lán)單色光質(zhì)照射后紅掌福星愈傷組織增殖系數(shù)均低于WL(5.18),而紅藍(lán)光組合光質(zhì)條件下,其中經(jīng)R∶B=3∶1 組合光照射后,紅掌福星愈傷組織增殖系數(shù)最高、為5.79,高于WL;隨著藍(lán)光比例增加,紅光比例減少,增殖系數(shù)呈下降趨勢,其中R∶B=1∶3 的LED 組合光質(zhì)條件下,紅掌福星愈傷組織增殖系數(shù)最低(3.91),顯著低于WL。表明紅藍(lán)單色光質(zhì)條件下紅掌愈傷組織增殖系數(shù)較低,不適于紅掌愈傷組織增殖;適合的LED紅藍(lán)光質(zhì)配比有利于紅掌愈傷組織增殖培養(yǎng),其中R∶B=3∶1 的LED 光質(zhì)條件下紅掌愈傷組織增殖系數(shù)最高,最適于紅掌愈傷組織增殖培養(yǎng)。
圖2 不同LED 光質(zhì)配比對紅掌福星愈傷組織增殖的效果Fig.2 Effects of different LED light quality ratio on callus proliferation of Anthurium andraeanum Fuxing
由圖3 可知,在R∶B=3∶1 的LED 光質(zhì)條件下,光照強(qiáng)度從300 lx 提高至600 lx 時愈傷組織增殖系數(shù)上升,當(dāng)光照強(qiáng)度高于600 lx 時增殖系數(shù)呈下降趨勢,表明適宜的光照強(qiáng)度有利于愈傷組織增殖,以光照強(qiáng)度為600 lx 時愈傷組織增殖系數(shù)最高(6.44),最適于紅掌福星愈傷組織增殖培養(yǎng)。
圖3 不同光照強(qiáng)度對紅掌福星愈傷組織增殖的效果Fig.3 Effects of different light intensity on callus proliferation of Anthurium andraeanum Fuxing
從4 種LED 光質(zhì)條件對紅掌福星愈傷組織芽分化的影響結(jié)果(表2)可以看出,經(jīng)WL 照射后,紅掌福星增殖分化芽芽個數(shù)最多(22.17 個),株高最大(2.63 cm),莖粗最?。?.33 mm),增殖分化芽細(xì)長、多而密(圖4A);經(jīng)R∶B=4∶1、R∶B=2∶2、R∶B=1∶4 紅藍(lán)組合光照射,芽個數(shù)和株高均低于WL,莖粗均顯著高于WL,增殖分化芽均比WL矮壯,但在R∶B=2∶2、R∶B=1∶4兩種LED 光質(zhì)配比條件下出現(xiàn)少量黃葉現(xiàn)象,且隨著藍(lán)光光質(zhì)比例增加黃葉呈加重的趨勢(圖4C、D)。表明WL 照射后紅掌愈傷組織塊增殖分化芽個數(shù)最多,但增殖分化芽狀態(tài)不夠健壯,密多,細(xì)高;R∶B=4∶1 紅藍(lán)光質(zhì)配比照射后增殖分化芽個數(shù)適當(dāng)減少,芽矮壯,且增殖分化芽葉片無黃葉,最適宜紅掌愈傷組織芽分化階段培養(yǎng)。
圖4 不同LED 光質(zhì)配比下紅掌福星愈傷組織芽分化情況Fig.4 Bud differentiation under different LED light quality ratio of Anthurium andraeanum Fuxing callus
表2 不同LED 光質(zhì)配比對紅掌福星愈傷組織芽分化的影響Table 2 Effects of different LED light quality ratio on bud differentiation of Anthurium andraeanum Fuxing callus
由表3 可知,在R∶B=4∶1 的L ED 光質(zhì)條件下,在光照強(qiáng)度1 000~2 000 lx 范圍內(nèi),隨光照強(qiáng)度升高,紅掌福星愈傷組織塊增殖分化芽個數(shù)和株高呈下降趨勢,莖粗呈上升趨勢,當(dāng)光照強(qiáng)度達(dá)1 500 lx 時增殖分化芽有少量黃葉(圖5B),光照強(qiáng)度升至2 000 lx 時增殖分化芽整體生長較緩慢,且?guī)в悬S葉和干葉(圖5C)。表明較高光照強(qiáng)度對紅掌福星愈傷組織芽生長和分化有抑制作用,且增殖分化芽會產(chǎn)生黃葉和干葉現(xiàn)象,以光照強(qiáng)度為1 000 lx時,增殖分化芽矮壯,無黃葉,生長勢好,適宜紅掌福星愈傷組織塊芽分化。
圖5 不同光照強(qiáng)度下紅掌福星愈傷組織芽分化情況Fig.5 Bud differentiation under different light intensity of Anthurium andraeanum Fuxing callus
表3 不同光照強(qiáng)度對紅掌福星愈傷組織芽分化的影響Table 3 Effects of different light intensity on bud differentiation o Afnthurium andraeanum Fuxing callus
由表4 可知,經(jīng)WL 照射后的紅掌福星組培苗,葉片數(shù)最多(7.42 片),根條數(shù)最少(4.79 條),株高最大(3.25 cm),莖粗(1.29 mm)、葉長(9.24 mm)、葉寬(7.32 mm)均最小,組培苗呈現(xiàn)瘦高狀態(tài)(圖6A);經(jīng)R∶B=4∶1、R∶B=2∶2、R∶B=1∶4 組合光照射后的紅掌組培苗,葉片數(shù)和株高均顯著小于WL,莖粗和根條數(shù)大于WL,葉長、葉寬顯著大于WL,葉片的SPAD 值均高于WL,其中R∶B=2∶2 光質(zhì)條件下組培苗葉片SPAD 值最高(41.63)。3 種紅藍(lán)組合光質(zhì)照射后組培苗植株均較WL 矮壯,但R∶B=2∶2、R∶B=1∶4 兩種光質(zhì)條件下組培苗有黃葉現(xiàn)象,且隨著藍(lán)光光質(zhì)比例增加黃葉呈加重的趨勢(圖6C、D)。表明WL 光照條件下紅掌福星組培苗縱向生長速度快,葉片數(shù)多,葉片小,株型細(xì)高,組培苗不夠健壯;R∶B=4∶1 光質(zhì)條件下,根條數(shù)多,株型矮壯,葉面積大,葉綠素含量較高(SPAD 值為39.2),且葉片無黃葉現(xiàn)象。綜合比較,R∶B=4∶1 光質(zhì)條件最適于紅掌福星壯苗階段組培苗的培養(yǎng)。
圖6 不同LED 光質(zhì)配比下紅掌福星壯苗階段組培苗生長情況Fig.6 The growth of tissue culture under different LED light quality ratio of Anthurium andraeanum Fuxing in the strong seedling stage
表4 不同LED 光質(zhì)配比對紅掌福星壯苗階段組培苗生長的影響Table 4 Effects of different LED light quality ratio on the growth of tissue culture of Anthurium andraeanum Fuxing in the strong seedling stage
從表5 可以看出,3種不同光照強(qiáng)度對紅掌福星壯苗階段組培苗的影響,在光照強(qiáng)度900~1 500 lx 的范圍內(nèi),隨光照強(qiáng)度升高,葉片數(shù)、根條數(shù)、株高、SPAD 值呈下降趨勢,葉長、葉寬呈上升趨勢,莖粗差異不大。其中光照強(qiáng)度為1 200 lx 時組培苗植株帶有少量黃葉(圖7B),光照強(qiáng)度達(dá)1 500 lx 時組培苗植株黃葉較嚴(yán)重且?guī)в猩倭扛扇~(圖7C)。表明紅掌福星壯苗階段組培苗適宜在900 lx 的較低光照強(qiáng)度下培養(yǎng),根條數(shù)多(5.67),生長勢好,葉片無黃葉現(xiàn)象,葉綠素相對含量高(SPAD 值為39.23)。
圖7 不同光照強(qiáng)度下紅掌福星壯苗階段組培苗生長情況Fig.7 The growth of tissue culture under different LED light intensity of Anthurium andraeanum Fuxing in the strong seedling stage
表5 不同光照強(qiáng)度對紅掌福星壯苗階段組培苗生長的影響Table 5 Effects of different light intensity on the growth of tissue culture of Anthurium andraeanum Fuxing in the strong seedling stage
光照是植物生長關(guān)鍵的環(huán)境因子之一,光質(zhì)和光強(qiáng)對植物的生長發(fā)育、形態(tài)構(gòu)建、光合作用、物質(zhì)代謝及基因表達(dá)均有調(diào)控作用[21-22],對紅掌組織培養(yǎng)也有一定影響[23]。吳鵬飛[24]、谷艾素[14]分別對草莓、花燭葉片愈傷組織誘導(dǎo)發(fā)現(xiàn),紅光有利于草莓、花燭葉片愈傷組織的誘導(dǎo)與形成,與本研究結(jié)果較為一致。Budiarto[15]認(rèn)為,紅藍(lán)光質(zhì)組合隨著藍(lán)色光質(zhì)的減少,紅掌愈傷組織的誘導(dǎo)明顯加快;本試驗發(fā)現(xiàn),增加藍(lán)光光質(zhì),紅掌福星愈傷組織誘導(dǎo)率明顯降低,葉片死亡率明顯增高,說明篩選合適的LED 光質(zhì)條件對植物愈傷組織誘導(dǎo)非常重要。
增殖培養(yǎng)是種苗擴(kuò)繁的重要階段,對種苗生產(chǎn)的質(zhì)量和效率都有很大的影響。對Bob’s yellow高山杜鵑[25]、紅貝露礬根[26]、都克藍(lán)莓[27]、彩色馬蹄蓮[28]等的研究表明,紅光或紅光成分較多的紅藍(lán)光組合有利于增殖培養(yǎng)。本研究發(fā)現(xiàn),紅掌福星愈傷組織在R∶B=3∶1 的LED 組合光質(zhì)條件下,增殖系數(shù)最高,而增殖分化芽在R∶B=4∶1 光照條件下,芽分化個數(shù)適當(dāng)減少,矮壯,無黃葉,適宜增殖分化芽的培養(yǎng),與上述結(jié)果相一致。潘曉韻等[23]研究發(fā)現(xiàn),紅掌自育品系36-06 愈傷增殖和組培苗生長以光質(zhì)配比較均衡的組合光源紅∶藍(lán)∶黃=1∶1∶1 為好,與本研究結(jié)果不同,這可能是由于LED 燈質(zhì)材料不同,其他光質(zhì)對紅掌福星增殖培養(yǎng)的影響還需做進(jìn)一步研究。
適宜的LED 紅藍(lán)光配方復(fù)合光能夠促進(jìn)植物組培苗的形態(tài)構(gòu)建和提高葉綠素含量[29]。謝苗苗等[30]研究發(fā)現(xiàn)4R1B 處理有助于礬根組培苗的形態(tài)建成,竇同心等[31]研究也發(fā)現(xiàn)紅光∶藍(lán)光=4∶1 處理的香蕉組培苗較對照(熒光燈)生長更健壯、根系更發(fā)達(dá),均與本試驗紅掌福星在R∶B=4∶1 的LED 組合光質(zhì)條件下組培苗較對照根條數(shù)多、株型矮壯的試驗結(jié)果一致。光質(zhì)不僅影響植株的光形態(tài)建成,同時也調(diào)控光合色素的合成[16]。陳孝丑等[32]研究發(fā)現(xiàn),70%紅光+30%藍(lán)光的復(fù)合光能顯著提高紅掌陽光紅心葉片葉綠素a 和葉綠素b 的含量,這與本試驗結(jié)果不一致,可能是不同品種的紅掌組培苗對紅藍(lán)光質(zhì)的反應(yīng)不同,紅掌福星組培苗在R∶B=2∶2紅藍(lán)LED 組合光照條件下,組培苗葉片SPAD 值最高,葉綠素相對含量也最高,但其他葉片有少量黃葉;R∶B=4∶1 的光質(zhì)條件下,SPAD 值較高,葉綠素相對含量較高,且無黃葉,說明不同紅掌品種需根據(jù)組培苗的生長狀態(tài)綜合研究最適宜該品種的LED 光質(zhì)配比。
不同光照強(qiáng)度對不同植物組織培養(yǎng)的影響也各不相同,李林山[33]研究發(fā)現(xiàn),粗肋草如意皇后和煙花莖段愈傷組織誘導(dǎo)最適的光照強(qiáng)度分別為3 000 lx 和2 500 lx,紅掌福星葉片愈傷組織誘導(dǎo)最適的光照強(qiáng)度為100 lx,這可能是由于不同的植物愈傷誘導(dǎo)的外植體材料不同。潘曉韻等[23]研究發(fā)現(xiàn)紅掌愈傷培養(yǎng)以1 支白光LED 燈管為宜,光照過強(qiáng)則愈傷組織增殖放緩,褐化死亡率增加,本研究也顯示光照強(qiáng)度高于600 lx 時紅掌福星愈傷組織增殖系數(shù)下降,說明適當(dāng)?shù)墓庹諒?qiáng)度有助于紅掌愈傷組織增殖培養(yǎng)。尚文倩等[21]研究發(fā)現(xiàn),LED 光質(zhì)比為70%R +30%B、光照強(qiáng)度為50 μmol/m2·s 更適于金娃娃萱草試管苗的生長及品質(zhì)的提高,其株高、葉數(shù)、根數(shù)、葉綠素含量達(dá)最大,而本研究中紅掌福星組培苗在LED光質(zhì)比為R∶B=4∶1、光照強(qiáng)度為900 lx(近15 μmol/m2·s)時,組培苗株高、葉數(shù)、根數(shù)、莖粗、葉綠素相對含量達(dá)最大,植株整體生長健壯,可見這兩種植物存在差異,這可能是由于LED 不同光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度對兩種植物相互作用的結(jié)果。LED 不同光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度對紅掌組培苗內(nèi)源激素影響以及組培各階段光化學(xué)反應(yīng)的分子機(jī)理,還有待進(jìn)一步研究。
LED 光質(zhì)配比和光照強(qiáng)度對紅掌福星愈傷誘導(dǎo)、增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)均有不同的影響,應(yīng)根據(jù)不同組培階段光質(zhì)需求,選擇適宜的LED 光質(zhì)配比。其中,光照強(qiáng)度為100 lx 的10%R 光質(zhì)適于其愈傷組織誘導(dǎo),誘導(dǎo)率最高、達(dá)79.58%,愈傷組織狀態(tài)呈黃綠色,緊實,體積大,狀態(tài)表現(xiàn)好;光質(zhì)配比為R∶B=3∶1、光照強(qiáng)度為600 lx,適宜愈傷組織增殖培養(yǎng),愈傷組織增殖系數(shù)達(dá)最高(6.44);與WL 光照條件相比,R∶B=4∶1 光質(zhì)配比更適宜紅掌福星愈傷組織芽分化培養(yǎng),在光照強(qiáng)度為1 000 lx 時,愈傷組織塊的增殖分化芽個數(shù)較少,為19.44 個,芽矮壯,無黃葉現(xiàn)象,生長勢好;紅掌福星壯苗階段組培苗培養(yǎng),適合的光質(zhì)配比是R∶B=4∶1,光照強(qiáng)度為900 lx,紅掌福星壯苗植株根條數(shù)較多,平均為5.67 條,株高2.88 cm、莖粗1.44 mm,葉長10.69 mm、葉寬8.54 mm,植株葉片大,葉片葉綠素含量更高,SPAD 值為39.23,植株整體生長健壯且無黃葉現(xiàn)象。