管理 賈琳斐 劉衛(wèi)娟 張?chǎng)?/p>

四環(huán)素類、磺胺類、喹諾酮類這3類藥物具有抗菌譜廣、成本低、易獲得等特點(diǎn)，易存在不合理使用的情況，若在食物中殘留超標(biāo)會(huì)對(duì)人體健康造成很大的潛在風(fēng)險(xiǎn)，因此是監(jiān)管部門食品安全監(jiān)督抽檢的必檢項(xiàng)目。2021年9月16日，中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部、國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)、國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布第388號(hào)公告，《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) ?？墒承越M織中氨丙啉殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和高效液相色譜法》（GB 31613.1-2021）等36項(xiàng)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)自2022年2月1日起實(shí)施。此次發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)全部為獸藥殘留檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)，其中GB 31656系列標(biāo)準(zhǔn)基質(zhì)為水產(chǎn)品，GB 31657系列標(biāo)準(zhǔn)基質(zhì)為蜂產(chǎn)品，GB 31658系列標(biāo)準(zhǔn)基質(zhì)為動(dòng)物源性食品。食品安全監(jiān)督抽檢實(shí)施細(xì)則（2022年版）規(guī)定，自2022年2月1日起，不同食品類別在檢測(cè)四環(huán)素類、磺胺類、喹諾酮類藥物時(shí)，需強(qiáng)制采用388號(hào)公告中的特定方法。

本文對(duì)食品檢測(cè)中包含3類藥物共10種現(xiàn)行有效的檢驗(yàn)方法進(jìn)行了總體分析，并在對(duì)獸藥檢測(cè)方法驗(yàn)證和監(jiān)督抽檢工作中存在的實(shí)際問(wèn)題進(jìn)行了總結(jié)梳理，提出了合理化建議，以期為完善獸藥檢測(cè)方法、提升獸藥監(jiān)管水平提供參考依據(jù)。

一、三類藥物殘留量測(cè)定方法總體分析

目前，很多標(biāo)準(zhǔn)中都涉及了食品中四環(huán)素類、磺胺類、喹諾酮類獸藥殘留量的檢測(cè)方法，結(jié)果如表1所示。通過(guò)對(duì)這些標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容進(jìn)行分析，我們得出了以下6個(gè)結(jié)論：

一是3類藥物檢測(cè)方法中多數(shù)使用的是液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，液質(zhì)與液相相比有兩大優(yōu)點(diǎn)：更節(jié)省時(shí)間；通過(guò)母離子碰撞成子離子來(lái)確定目標(biāo)物，更加準(zhǔn)確穩(wěn)定。二是前處理過(guò)程大部分使用固相萃取柱凈化。三是新頒布的標(biāo)準(zhǔn)中，液質(zhì)方法主要使用基質(zhì)匹配方法來(lái)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，此方法能降低前處理過(guò)程及基質(zhì)效應(yīng)的影響。而且新頒布的標(biāo)準(zhǔn)中明確了標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度點(diǎn)的大小范圍，準(zhǔn)確度回收率大部分在60%-110%。四是GB 31658.17-2021標(biāo)準(zhǔn)可以同時(shí)測(cè)定3類藥物共計(jì)36個(gè)項(xiàng)目，稱樣量?jī)H為1g，統(tǒng)一了36個(gè)項(xiàng)目的檢出限、定量限，便于檢驗(yàn)人員實(shí)施方法驗(yàn)證中的方法學(xué)評(píng)測(cè)及日常檢驗(yàn)。五是新版監(jiān)督抽查細(xì)則規(guī)定的檢測(cè)方法中，提取主要使用EDTA.2Na-Mcllvaine溶液，少部分使用酸化乙腈，徹底取消使用乙酸乙酯。六是新頒布的標(biāo)準(zhǔn)中四環(huán)素類藥物檢測(cè)限、定量限都大幅度降低。

二、三類藥物殘留量測(cè)定存在的問(wèn)題

1.參照GB 31658.17-2021進(jìn)行獸藥測(cè)定存在的問(wèn)題。該標(biāo)準(zhǔn)的基質(zhì)包括牛、羊、豬和雞的肌肉、肝臟和腎臟組織。該標(biāo)準(zhǔn)的提取過(guò)程沒(méi)有除油、沉淀蛋白等步驟，筆者在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中遇到高脂高蛋白的樣品時(shí)，提取過(guò)程用標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的高轉(zhuǎn)速冷凍離心也很難將提取液有效地分離澄清，進(jìn)而在過(guò)固相萃取小柱時(shí)易造成小柱堵塞，從而影響目標(biāo)物的凈化洗脫。若樣品中的某些蛋白質(zhì)等成分沒(méi)有去除干凈就一同進(jìn)入質(zhì)譜儀，會(huì)與目標(biāo)分析物爭(zhēng)奪噴霧接口處的離子，進(jìn)而影響目標(biāo)分析物的離子化或者去溶劑化，導(dǎo)致獸藥檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。

2.疑難參數(shù)特殊耗材不明確。磺胺類標(biāo)準(zhǔn)中大部分的檢測(cè)參數(shù)使用常規(guī)色譜柱就可以得到有效分離，但其中有一組質(zhì)荷比相同的參數(shù)：磺胺對(duì)甲氧嘧啶、磺胺甲氧噠嗪、磺胺間甲氧嘧等用實(shí)驗(yàn)室常用的C18柱無(wú)法進(jìn)行有效分離，筆者多次嘗試幾種不同品牌的色譜柱才確定了能同時(shí)檢測(cè)三種參數(shù)的耗材。市面上的C18柱有很多品牌，填料主體相似，但官能團(tuán)、成分比例略有不同，導(dǎo)致柱效針對(duì)某些具體參數(shù)時(shí)的差別很大。

3.多參數(shù)測(cè)定色譜方法不明確。10個(gè)檢測(cè)方法都包含多個(gè)參數(shù)的測(cè)定，筆者進(jìn)行方法驗(yàn)證時(shí)，一個(gè)色譜方法測(cè)定10個(gè)以上參數(shù)時(shí)標(biāo)曲線性、精密度、準(zhǔn)確度等方面都無(wú)法達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求，而相關(guān)的實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)也未對(duì)多參數(shù)測(cè)定色譜方法進(jìn)行明確。

三、提高三類藥物殘留量檢測(cè)效率的建議

1.適當(dāng)公開檢測(cè)方法的方法學(xué)研究資料。獸藥殘留測(cè)定中所有的相關(guān)方法標(biāo)準(zhǔn)都是經(jīng)過(guò)行業(yè)管理部門的大量論證與研究后頒布的，適當(dāng)?shù)毓_配套標(biāo)準(zhǔn)的方法學(xué)研究資料，明確提供不同基質(zhì)、不同提取溶劑的實(shí)驗(yàn)比對(duì)結(jié)果，給予明確的耗材參數(shù)，標(biāo)明多參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)一次可以測(cè)定參數(shù)的上限，有助于基層檢驗(yàn)人員充分理解標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)步驟，高效地開展批量檢驗(yàn)，且對(duì)難以分離的項(xiàng)目也可以減少不必要的人員與物質(zhì)消耗。

2.明確方法驗(yàn)證特性參數(shù)?，F(xiàn)行有效的關(guān)于方法驗(yàn)證的指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)包括《GB/T27417-2017合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》《GB/T32465-2015化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制要求》《GB/T 35655-2017》等，筆者認(rèn)為相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于一線操作人員來(lái)說(shuō)內(nèi)容有些籠統(tǒng)，指導(dǎo)原則也不夠明確，統(tǒng)計(jì)理論敘述內(nèi)容則幾乎沒(méi)有。相關(guān)部門應(yīng)針對(duì)獸藥檢測(cè)方法給出相應(yīng)的方法驗(yàn)證操作實(shí)例文件，增加理論內(nèi)容方面的指導(dǎo)，明確方法驗(yàn)證需提供的樣品涵蓋范圍、具體性能參數(shù)、具體執(zhí)行程序等內(nèi)容，便于工作人員統(tǒng)一理解，并嚴(yán)格執(zhí)行獸藥檢測(cè)方法。

3.開發(fā)新的前處理技術(shù)。凈化使用固相萃取柱的結(jié)果與過(guò)柱液體的流速有很大關(guān)系，而且批量操作耗時(shí)耗力。目前已經(jīng)出現(xiàn)了新的前處理技術(shù)，包括加速溶劑萃取、凝膠滲透色譜及QuEChERS，這些技術(shù)都在朝著高靈敏、高速度、高通量、多殘留、低成本的方向發(fā)展，未來(lái)需要不斷開發(fā)新的前處理技術(shù)來(lái)提高三類獸藥檢測(cè)的準(zhǔn)確度回收率。

綜上，四環(huán)素類、磺胺類、喹諾酮類藥物殘留量測(cè)定是獸藥殘留檢測(cè)中的關(guān)鍵性項(xiàng)目，筆者從基層實(shí)驗(yàn)工作內(nèi)容出發(fā)，首先對(duì)食品中典型獸藥殘留量的測(cè)定方法進(jìn)行了總體分析，然后結(jié)合工作實(shí)際歸納了獸藥測(cè)定工作中存在的問(wèn)題，最后提出了相應(yīng)的合理化建議，希望能為完善食品中獸藥檢測(cè)方法提供參考依據(jù)。

作者簡(jiǎn)介：管理（1989-），女，漢族，陜西咸陽(yáng)人，工程師，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称窓z驗(yàn)檢測(cè)。