鄭春梅,向慧敏,李 筱,王思繁,饒琴琴

陜西省漢中市中心醫(yī)院精準醫(yī)學(xué)診斷中心,陜西漢中 723000

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率約占女性惡性腫瘤的2.5%,上皮性卵巢癌(EOC)是卵巢癌最常見的類型,其致死率較高[1]。近年來臨床上對EOC的治療有了較大進展,多數(shù)患者可以通過治療獲得臨床緩解,但有超過70%的患者腫瘤可在術(shù)后復(fù)發(fā),并影響患者預(yù)后[2]。如能在早期對EOC的臨床病理特征及復(fù)發(fā)情況進行判斷,對指導(dǎo)患者個性化治療、改善患者預(yù)后具有重要意義。EOC篩查的主要方法包括婦科檢查、B超和CT,其中婦科檢查對醫(yī)生的經(jīng)驗要求較高,且對于疾病早期可能存在漏診的可能,B超和CT等屬于影像學(xué)檢查方法,往往在疾病早期無法發(fā)現(xiàn)病變[3]。血清學(xué)指標具有采集方便、可反復(fù)操作、動態(tài)觀察的優(yōu)點,已成為臨床輔助診斷的重要方法。故探討與EOC復(fù)發(fā)密切相關(guān)的標志物對于指導(dǎo)其治療具有重要意義。糖類抗原125(CA125)是臨床上最為常用的腫瘤標志物之一,已被應(yīng)用于部分EOC的診斷中[4],但是否與EOC復(fù)發(fā)相關(guān)仍不明確。細胞外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)子(CD147)是一種廣泛存在于機體各組織器官細胞膜表面的糖蛋白,與腫瘤增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系[5]。熱休克蛋白40(HSP40)是熱休克蛋白家族成員之一,近年來研究發(fā)現(xiàn),HSP40與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),可能與EOC的復(fù)發(fā)有密切關(guān)系[6]。鑒于此,本研究探討血清CA125、CD147、HSP40與EOC患者臨床病理特征及術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系,旨在為早期EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的診斷提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年5月至2018年12月于本院接受全子宮和雙側(cè)附件切除術(shù)治療的EOC患者68例作為卵巢癌組。納入標準:(1)所有患者均為初診患者,接受全子宮和雙側(cè)附件切除術(shù)治療,標本經(jīng)病理學(xué)檢查確診為EOC[7];(2)患者臨床資料及病理診斷結(jié)果完整;(3)術(shù)前未進行放療、化療及免疫治療。排除標準:(1)同時患有其他惡性腫瘤;(2)入院時已發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移,不符合手術(shù)治療指征;(3)近6個月內(nèi)有炎癥性疾病及感染性疾病;(4)合并其他子宮、輸卵管疾病;(5)長期應(yīng)用激素類藥物。卵巢癌組患者年齡48～73歲,平均(55.87±7.28)歲;絕經(jīng)42例;腫瘤最大徑:≤3 cm 24例,>3 cm 44例;病理類型:漿液性癌41例、黏液性癌27例;組織學(xué)分化:中高分化46例,低分化22例;國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)分期:Ⅰ期17例,Ⅱ期22例,Ⅲ期29例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例;淋巴結(jié)清掃32例。選取同期于本院診治的72例卵巢上皮良性腫瘤患者作為卵巢良性腫瘤組。排除標準:(1)合并其他惡性腫瘤;(2)近6個月內(nèi)有炎癥性疾病及感染性疾病;(3)合并其他子宮、輸卵管疾病;(4)長期應(yīng)用激素藥物。卵巢良性腫瘤組年齡45～72歲,平均(54.56±8.12)歲。選取同期卵巢體檢健康女性60例作為對照組,年齡45～76歲,平均(55.97±8.45)歲。對照組近6個月內(nèi)均無炎癥性疾病及感染性疾病。3組研究對象年齡比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

本研究經(jīng)漢中市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準。所有患者對本研究知情同意且簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1血清CA125、CD147、HSP40水平的檢測 卵巢良性腫瘤組、卵巢癌組患者于手術(shù)前日采集空腹外周靜脈血5 mL,對照組在體檢時采集空腹外周靜脈血5 mL,均經(jīng)3 000 r/min離心10 min,離心半徑12 cm,分離血清。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清CA125、CD147、HSP40水平,試劑盒購自杭州百替生物技術(shù)有限公司。

1.2.2術(shù)后隨訪 EOC患者術(shù)后通過電話或門診復(fù)查隨訪3年。每3個月隨訪一次,隨訪中應(yīng)及時了解患者疾病進展,如腫瘤復(fù)發(fā)經(jīng)過評估給予再次手術(shù)或放、化療等,所有治療符合倫理學(xué)要求,隨訪期間當(dāng)患者復(fù)發(fā)、死亡或隨訪時間截止則隨訪結(jié)束。

2 結(jié) 果

2.1卵巢癌組、卵巢良性腫瘤組與對照組血清CA125、CD147、HSP40水平比較 卵巢癌組血清CA125、CD147、HSP40水平明顯高于卵巢良性腫瘤組與對照組(P<0.05);卵巢良性腫瘤組與對照組血清CA125、CD147、HSP40水平比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 卵巢癌組、卵巢良性腫瘤組與對照組血清CA125、CD147、HSP40水平比較

2.2不同臨床病理特征的EOC患者血清CA125、CD147、HSP40水平比較 組織學(xué)低分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及未進行淋巴結(jié)清掃的EOC患者血清CA125、CD147、HSP40水平顯著高于組織學(xué)中高分化、FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及進行淋巴結(jié)清掃的EOC患者(P<0.05)。不同年齡、絕經(jīng)情況、腫瘤最大徑、病理類型的EOC患者血清CA125、CD147、HSP40水平比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同臨床病理特征的EOC患者血清CA125、CD147、HSP40水平比較

2.3復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組血清CA125、CD147、HSP40水平比較 68例EOC患者隨訪3年,失訪6例,予以剔除,失訪率8.82%。根據(jù)EOC患者術(shù)后是否復(fù)發(fā)分為復(fù)發(fā)組25例,未復(fù)發(fā)組37例。復(fù)發(fā)組血清CA125、CD147、HSP40水平明顯高于未復(fù)發(fā)組(P<0.05)。見表3。

表3 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組血清CA125、CD147、HSP40水平比較

2.4EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組的臨床資料比較 血清CA125、CD147、HSP40以完成隨訪的EOC患者的均值進行分層分析。兩組臨床資料分析顯示:復(fù)發(fā)組組織學(xué)低分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血清CA125≥234.83 ng/mL、CD147≥127.41 pg/mL、HSP40≥253.59 ng/L的比例顯著高于未復(fù)發(fā)組(P<0.05),淋巴結(jié)清掃的比例顯著低于未復(fù)發(fā)組(P<0.05);兩組年齡≥60歲、絕經(jīng)、腫瘤最大徑>3 cm、不同病理類型的比例比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組的臨床資料比較[n(%)]

2.5多因素Logistic回歸分析EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素 回歸設(shè)計: 建立非條件Logistic回歸模型,以本研究資料為樣本,以EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)情況為因變量,以表3和表4中P<0.10的指標/因素為自變量。各變量賦值參見表5。 回歸過程采用逐步后退法進行自變量的選擇和剔除,設(shè)定α剔除=0.10,α入選=0.05。

表5 多因素Logistic回歸分析變量賦值

回歸分析結(jié)果顯示:組織學(xué)低分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血清CA125≥234.83 ng/mL、血清CD147≥127.41 pg/mL、血清HSP40≥253.59 ng/L是EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的危險因素(P<0.05),進行淋巴結(jié)清掃是EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的保護因素(P<0.05)。見表6。

表6 多因素Logistic回歸分析EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素

3 討 論

卵巢癌是目前婦科惡性腫瘤中第二大致死性腫瘤,患者5年生存率為26%～42%[8]。盡管近年來對于卵巢癌的治療方法不斷增多,治療技術(shù)不斷提高,但仍有部分患者接受治療后腫瘤復(fù)發(fā),甚至導(dǎo)致患者死亡[9]。EOC是卵巢癌常見類型,也是一種異質(zhì)性很強的惡性腫瘤。有研究表明,接受相同治療方案的EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)情況和預(yù)后情況有一定差異[10],因此,早期對EOC患者復(fù)發(fā)情況進行判斷對開展EOC分層治療和個性化治療具有重要的臨床意義。目前研究表明,惡性腫瘤細胞可以產(chǎn)生異常的物質(zhì)包括轉(zhuǎn)錄因子、蛋白、炎癥因子或異常抗原等,這些異常物質(zhì)可以進入血液中,進而引起血液中異常物質(zhì)水平升高,而通過檢測這些血清標志物可以反映惡性腫瘤的臨床病理特征及復(fù)發(fā)情況[11]。

本研究對EOC患者、卵巢上皮良性腫瘤患者及同期體檢健康女性血清CA125、CD147、HSP40水平進行了比較,結(jié)果顯示,EOC患者血清CA125、CD147、HSP40水平升高。其中,CA125是一種糖蛋白,在胚胎發(fā)育期機體卵巢上皮會表達CA125,并隨著卵巢上皮的分化程度升高其表達水平會逐漸降低,當(dāng)機體發(fā)生炎癥性疾病或腫瘤性疾病時,血清CA125水平會升高[12]。已有報道顯示,子宮內(nèi)膜癌[13]、乳腺癌[14]、腸癌[15]患者會出現(xiàn)血清CA125水平升高,CA125可以用于上述疾病的輔助診斷、療效評估。但對血清CA125與EOC病理特征及預(yù)后情況的關(guān)系研究較少。CD147是一種跨膜蛋白,屬于免疫超家族成員,其編碼基因位于19p13.3上[16]。有研究報道,CD147是一種多功能的誘導(dǎo)因子,可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞、成纖維細胞產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶,對細胞外基質(zhì)進行降解,從而促進腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[17]。近年來研究發(fā)現(xiàn)HSP40與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展也有密切關(guān)系,HSP40可以通過抑制細胞線粒體的凋亡通路,從而抑制腫瘤細胞凋亡[18]。有研究表明,作為一種分子伴侶,HSP40高表達往往意味著細胞內(nèi)發(fā)生蛋白質(zhì)的錯誤折疊與聚集,可能存在細胞的異常增殖[19]。

本研究結(jié)果提示血清CA125、CD147、HSP40可能參與了EOC的發(fā)生與發(fā)展。分析其原因可能是在EOC發(fā)生、發(fā)展中,卵巢上皮細胞惡變,其分化被阻斷,導(dǎo)致血清CA125水平升高[4],因此組織學(xué)低分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者血清CA125水平升高。CD147水平升高的原因可能是在腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移中會導(dǎo)致CD147水平升高,并誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞、成纖維細胞產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶,對細胞外基質(zhì)進行降解[20]。HSP40水平升高則可能是由于腫瘤細胞在發(fā)展過程中不斷發(fā)生蛋白質(zhì)的錯誤折疊與聚集所致[21]。

進一步研究結(jié)果顯示,組織學(xué)低分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血清CA125≥234.83 ng/mL、血清CD147≥127.41 pg/mL、血清HSP40≥253.59 ng/L是EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的危險因素。分析可能與以下原因有關(guān):組織學(xué)低分化意味著腫瘤細胞惡性程度較高,增殖速度較快,患者可能在早期出現(xiàn)轉(zhuǎn)移[22]。FIGO分期是反映EOC嚴重程度的重要指標,分期越高表明腫瘤擴散范圍更廣,治療難度也越大,因此復(fù)發(fā)率也較高[23]。存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的EOC患者經(jīng)過治療發(fā)生復(fù)發(fā)的危險性增加[24]。血清CA125、CD147、HSP40水平升高意味著EOC患者更容易發(fā)生復(fù)發(fā),也提示臨床上可以通過對EOC患者血清CA125、CD147、HSP40水平進行檢測為EOC的治療和預(yù)后判斷提供輔助參考。臨床上對于接受手術(shù)治療的EOC患者,如血清CA125、CD147、HSP40水平持續(xù)升高,應(yīng)予以重視,并制訂合理的治療方案,預(yù)防EOC術(shù)后復(fù)發(fā)。對于存在復(fù)發(fā)高危因素的患者也可以定期檢測血清CA125、CD147、HSP40水平,以早期發(fā)現(xiàn)疾病進展,給予有效治療,提高患者生存質(zhì)量。相較于婦科檢查、B超和CT等EOC篩查方法,血清CA125、CD147、HSP40檢測具有標本采集更加方便,可反復(fù)操作、動態(tài)觀察的優(yōu)點,更適合基層推廣。但同時值得注意的是,由于血清CA125、CD147、HSP40檢測方法較多,因此對于血清CA125、CD147、HSP40的參考值有待于未來大規(guī)模的試驗研究,不同檢測方法的臨界值也存在一定差異,也有待于未來檢測質(zhì)控的進一步規(guī)范。本研究結(jié)果顯示,進行淋巴結(jié)清掃是EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的保護因素,表明淋巴結(jié)清掃能夠避免EOC術(shù)后復(fù)發(fā),分析其原因可能是EOC最常見的轉(zhuǎn)移方式是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,如術(shù)中不進行淋巴結(jié)清掃可能會有轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的殘留,進而引起腫瘤復(fù)發(fā)[25]。

綜上所述,發(fā)生腫瘤復(fù)發(fā)的EOC患者血清CA125、CD147、HSP40水平升高,組織學(xué)低分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血清CA125≥234.83 ng/mL、血清CD147≥127.41 pg/mL、血清HSP40≥253.59 ng/L是EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的危險因素,進行淋巴結(jié)清掃是EOC患者術(shù)后復(fù)發(fā)的保護因素。檢測血清CA125、CD147、HSP40水平有助于EOC術(shù)后復(fù)發(fā)的診斷。