邱百怡, 秦宗碧, 蔡 翔, 孫邦梅

(湖北省武漢市中醫(yī)醫(yī)院 皮膚醫(yī)療美容科, 湖北 武漢, 430000)

玫瑰痤瘡是一種由面部中央皮膚血管及毛囊皮脂腺引起的慢性炎癥性皮膚病,在臨床上主要表現(xiàn)為丘疹、膿皰、紅斑、毛細(xì)血管擴(kuò)張等,繼而出現(xiàn)瘙癢、燒灼、刺痛等癥狀,嚴(yán)重影響人們的生活[1- 2]。因此,尋找與玫瑰痤瘡相關(guān)的生物標(biāo)志物有助于臨床開發(fā)新的治療靶點(diǎn)。據(jù)報(bào)道,玫瑰痤瘡患者腸道乳酸桿菌和雙歧桿菌的菌落數(shù)量減少與胃腸道疾病高發(fā)病率有關(guān),而腸道菌群又通過免疫系統(tǒng)和炎癥反應(yīng)影響皮膚疾病的發(fā)生[3-4]。睪酮是一種雄性激素,對(duì)維持男性的次要性特征和生育能力至關(guān)重要[5]。此外,睪酮可以通過脂肪組織來調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子水平,在心血管疾病、代謝風(fēng)險(xiǎn)、系統(tǒng)性炎癥中發(fā)揮作用[6-7]。雌二醇是一種雌激素,能夠降低血腦屏障通透性、氧化應(yīng)激、神經(jīng)炎癥和興奮毒性[8]。研究[9]發(fā)現(xiàn),男性體內(nèi)也存在雌二醇,對(duì)骨骼生長和骨骼健康維持、身體組成和葡萄糖代謝以及血管運(yùn)動(dòng)穩(wěn)定性十分重要。本研究檢測玫瑰痤瘡患者血清中睪酮、雌二醇的水平,探討兩者與患者腸道菌群失調(diào)的相關(guān)性,分析兩者在玫瑰痤瘡發(fā)生、發(fā)展中的作用,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年3月—2022年9月診治的102例玫瑰痤瘡患者作為觀察組,其中男56例,女46例; 平均年齡(32.50±5.50)歲; 體質(zhì)量指數(shù)(32.50±5.50) kg/m2; 吸煙者55例,不吸煙者47例; 飲酒者42例,不飲酒者60例。根據(jù)臨床癥狀將患者分為輕度組64例、中度組17例、重度組21例。同時(shí)選取同期105例健康體檢志愿者作為對(duì)照組,其中男55例,女50例,平均年齡(33.20±6.40)歲; 體質(zhì)量指數(shù)(33.20±6.40) kg/m2; 吸煙者53例,不吸煙者52例; 飲酒者40例,不飲酒者65例。與對(duì)照組比較,觀察組玫瑰痤瘡患者在性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、吸煙、飲酒方面比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn): ① 符合玫瑰痤瘡的診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]者; ② 無尋常性痤瘡、皮炎等皮膚病者; ③ 年齡>18周歲,且自愿簽署同意書者; ④ 臨床資料完整者。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 近期有糖皮質(zhì)激素、抗生素、抗過敏藥物或物理治療者; ② 有胃腸道疾病及手術(shù)史者; ③ 妊娠、哺乳期女性; ④ 有多囊卵巢綜合征、卵巢早衰以及心血管系統(tǒng)性疾病者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 樣本收集: 收集所有患者確診當(dāng)天(對(duì)照組為體檢當(dāng)日)空腹靜脈血3～4 mL, 自然冷卻至室溫后進(jìn)行血清分離,于-20 ℃冰箱中保存以備檢測。同時(shí)使用無菌盒收集患者清晨新鮮大便,經(jīng)過系列稀釋后,于-80 ℃超低溫冰箱中保存以備菌群測定。

1.2.2 指標(biāo)檢測: 采用放射免疫法檢測血清睪酮、雌二醇水平: 嚴(yán)格按照人睪酮(貨號(hào)EK-H12047, 博輝生物科技(廣州)有限公司)、雌二醇(貨號(hào)YT10719, 上海韻泰信息科技有限公司)試劑盒說明書配制梯度標(biāo)準(zhǔn)品,利用酶標(biāo)儀(型號(hào)NanoDrop ND-12000, 美國Thermo公司)對(duì)不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值進(jìn)行測定,建立吸光度與濃度的工作曲線。于-20 ℃冰箱中取適量血清樣本,解凍,測定各樣本的吸光度,計(jì)算各樣本血清睪酮、雌二醇水平。

1.2.3 熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測定腸道菌群中雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸埃希桿菌、腸球菌的拷貝數(shù): 對(duì)質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品(貨號(hào)MIR7906, 上海百賽生物有限公司)進(jìn)行多次梯度稀釋,以得到102～1012個(gè)拷貝/mL(質(zhì)粒拷貝數(shù)濃度)的標(biāo)準(zhǔn)品為模板,進(jìn)行熒光定量PCR。反應(yīng)體系為20 μL: SYBR Green Master Mix 10 μL, 上下游引物各0.5 μL, 模板DNA 2 μL, ddH2O 7 μL; 反應(yīng)條件: 1個(gè)循環(huán)(變性5 min 95 ℃), 45個(gè)循環(huán)(變性10 s 95℃、退火20 s 58或52 ℃、延伸30 s 72 ℃); 反應(yīng)完畢后分析溶解曲線,以Ct值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。反應(yīng)體系、條件不變,將稀釋后待測樣品DNA進(jìn)行熒光定量PCR, 對(duì)腸道菌群中雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸埃希桿菌、腸球菌的拷貝數(shù)量進(jìn)行檢測,同時(shí)計(jì)算雙歧桿菌與大腸埃希桿菌的比值(B/E), B/E<1提示患者腸道抗定植能力弱,腸道菌群失調(diào); B/E>1提示患者腸道抗定植能力強(qiáng)[11-13]。見表1。

表1 各菌屬引物信息及退火溫度

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 2組血清睪酮、雌二醇水平比較

與對(duì)照組比較,觀察組玫瑰痤瘡患者血清睪酮水平升高,雌二醇水平降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表2。

表2 2組血清睪酮、雌二醇水平比較

2.2 不同性別玫瑰痤瘡患者血清睪酮、雌二醇水平比較

觀察組玫瑰痤瘡男性患者血清雌二醇水平低于對(duì)照組男性,玫瑰痤瘡女性患者血清睪酮水平高于對(duì)照組女性,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表3。

表3 不同性別玫瑰痤瘡患者血清睪酮、雌二醇水平比較

2.3 2組菌群情況比較

與對(duì)照組比較,觀察組玫瑰痤瘡患者腸道雙歧桿菌、乳酸桿菌菌群數(shù)量減少,大腸埃希桿菌、腸球菌增多, B/E降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表4。

表4 2組菌群情況比較

2.4 不同程度玫瑰痤瘡患者血清睪酮、雌二醇水平比較

與輕度組比較,中度組、重度組玫瑰痤瘡患者血清睪酮水平升高,雌二醇降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 重度組較中度組患者血清睪酮水平升高,雌二醇降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表5。

表5 不同程度玫瑰痤瘡患者血清睪酮、雌二醇水平比較

2.5 玫瑰痤瘡患者血清睪酮、雌二醇水平與腸道菌群數(shù)量的相關(guān)性

Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),玫瑰痤瘡患者血清睪酮水平與雙歧桿菌、乳酸桿菌菌群數(shù)量均呈負(fù)相關(guān),與大腸埃希桿菌、腸球菌菌群數(shù)量均呈正相關(guān)(P<0.05); 血清雌二醇水平與雙歧桿菌、乳酸桿菌菌群數(shù)量均呈正相關(guān),與大腸埃希桿菌、腸球菌菌群數(shù)量均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05), 見表6。

表6 玫瑰痤瘡患者血清睪酮、雌二醇水平

3 討 論

玫瑰痤瘡是一種能夠引起面部紅斑、紅腫的常見皮膚疾病,能夠引起眼睛燒灼感和疼痛,易復(fù)發(fā)且持續(xù)時(shí)間長,易逐漸惡化[14]。研究[15-17]發(fā)現(xiàn),玫瑰痤瘡常與胃腸道疾病并發(fā),受先天性和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)失調(diào)、微生物紊亂、永久性毛細(xì)血管擴(kuò)張等因素影響,一些生物物質(zhì)如腸道堿性磷酸酶、腸道細(xì)菌、血管活性腸肽等與腸道中炎癥反應(yīng)、血漿激肽釋放酶-激肽有關(guān),參與了玫瑰痤瘡的發(fā)生、發(fā)展。因此,尋找與玫瑰痤瘡相關(guān)的因子,及時(shí)加以干預(yù),以便在臨床醫(yī)療中對(duì)患者進(jìn)行及時(shí)治療。

性激素是人體內(nèi)重要的物質(zhì),性激素失調(diào)對(duì)心血管病、冠心病、內(nèi)分泌疾病等都會(huì)產(chǎn)生影響[18]。睪酮和雌二醇是人體內(nèi)主要的性激素,在氧化應(yīng)激、炎癥、血管舒張等方面具有重要的作用。睪酮能夠?qū)?xì)胞間脂質(zhì)的合成、毛發(fā)生長、表皮的有絲分裂活性等許多皮膚功能產(chǎn)生影響,青春期雄激素和酶活性的增加引起皮脂腺產(chǎn)生皮脂[19]。雌二醇可在缺氧等應(yīng)激情況下影響血管系統(tǒng)的血管舒張,能夠調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng),并直接影響免疫系統(tǒng)細(xì)胞[20]。ZH C等[21]在研究性激素水平與玫瑰痤瘡發(fā)展關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn),玫瑰痤瘡是一種激素介導(dǎo)的疾病,男性患者睪酮水平升高,雌二醇水平降低。較高的睪丸激素增加了女性患者2型糖尿病和多囊卵巢綜合征的風(fēng)險(xiǎn)[22]。BISHT A等[23]發(fā)現(xiàn),丙酸桿菌和睪酮能夠誘導(dǎo)痤瘡發(fā)生,造成皮脂腺功能紊亂、皮脂分泌過多和脂肪酸成分改變。本研究發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組比較,觀察組玫瑰痤瘡患者血清睪酮水平明顯升高,雌二醇顯著降低,說明血清中睪酮、雌二醇水平與玫瑰痤瘡具有一定關(guān)系。隨著病情的加重,玫瑰痤瘡患者血清睪酮水平依次升高,雌二醇依次降低,說明睪酮、雌二醇與玫瑰痤瘡關(guān)系密切。進(jìn)一步對(duì)不同性別患者血清中的睪酮、雌二醇水平進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),觀察組玫瑰痤瘡男性患者血清雌二醇水平低于對(duì)照組男性,女性患者血清睪酮水平高于對(duì)照組女性,提示血清中的睪酮、雌二醇水平在不同性別中具有顯著差異,高水平的睪酮造成女性性激素水平紊亂,引起皮脂腺產(chǎn)生皮脂,從而造成女性玫瑰痤瘡發(fā)病,而低水平的雌二醇會(huì)造成血管擴(kuò)張,促進(jìn)炎癥水平升高,對(duì)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響,從而引起男性發(fā)生玫瑰痤瘡。通過對(duì)腸道菌群數(shù)量的研究發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組比較,觀察組玫瑰痤瘡患者腸道雙歧桿菌、乳酸桿菌菌群數(shù)量減少,大腸埃希桿菌、腸球菌增多, B/E降低,說明玫瑰痤瘡患者雙歧桿菌、乳酸桿菌等優(yōu)勢菌群數(shù)量減少,大腸埃希桿菌、腸球菌致病菌增多,定植抗力減弱,腸道免疫、代謝功能出現(xiàn)異常,易感染細(xì)菌,提示腸道菌群失調(diào)與玫瑰痤瘡的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)。Pearson法分析發(fā)現(xiàn),玫瑰痤瘡患者血清睪酮水平與雙歧桿菌、乳酸桿菌菌群數(shù)量均呈負(fù)相關(guān),與大腸埃希桿菌、腸球菌菌群數(shù)量均呈正相關(guān); 血清雌二醇水平與雙歧桿菌、乳酸桿菌菌群數(shù)量均呈正相關(guān),與大腸埃希桿菌、腸球菌菌群數(shù)量均呈負(fù)相關(guān),說明玫瑰痤瘡患者血清睪酮、雌二醇水平與腸道菌群失調(diào)有關(guān)。推測高水平睪酮、低水平雌二醇可引起機(jī)體炎癥因子的釋放,促進(jìn)血管擴(kuò)張,造成腸道菌群失調(diào),從而參與玫瑰痤瘡的發(fā)生、發(fā)展。

綜上所述,玫瑰痤瘡患者血清中睪酮水平升高、雌二醇水平降低與腸道菌群失調(diào)有關(guān),在玫瑰痤瘡的發(fā)生、發(fā)展中具有一定作用。然而睪酮、雌二醇、腸道菌群與玫瑰痤瘡患者嚴(yán)重程度相關(guān)的具體機(jī)制仍需進(jìn)一步探討。