白 亮，馬 超，趙宜君，2，張 喆，張立群，徐 軍，2*，陳 昶,2*

（1.河北中保綠農(nóng)作物科技有限公司，北京 100193；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，北京 100193)

吡丙醚（Pyriproxyfen）又名蚊蠅醚，是一種由日本住友化學(xué)公司開發(fā)的殺蟲劑。吡丙醚通過作用于昆蟲的繁殖和蛻變過程，達(dá)到有效控制害蟲的目的。其具有光穩(wěn)定性好、用藥量少、效果佳、對(duì)作物安全等特點(diǎn)，符合生態(tài)環(huán)保的標(biāo)準(zhǔn)[2]。吡丙醚對(duì)介殼蟲、煙粉虱（Bemisia tabaci）、甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）、小菜蛾（Plutella xylostella）、梨黃木虱（Psylla pyricola）、斜紋夜蛾（Spodoptera litura）、薊馬等有較好的防治效果[3-5]。氟啶蟲酰胺（Flonicamid）是一種由日本石原產(chǎn)業(yè)株式會(huì)社發(fā)現(xiàn)并開發(fā)的新型低毒吡啶酰胺類殺蟲劑。其具有內(nèi)吸和觸殺作用，對(duì)蚜蟲等刺吸式口器害蟲有良好的神經(jīng)毒性和快速拒食活性，且其拒食作用具有不可恢復(fù)性，被阻止吸食的害蟲最終因饑餓而導(dǎo)致死亡[6]。氟啶蟲酰胺對(duì)蔬菜蚜蟲、蘋果黃蚜（Aphis citricola）、柑橘蚜蟲等均具有較好的防治效果[7]。

15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺是一種高效低毒的殺蟲劑，但對(duì)其懸乳劑的分析方法目前尚未見報(bào)道。本文采用高效液相色譜法對(duì)丙醚和氟啶蟲酰胺進(jìn)行定量分析，旨在挖掘一種操作簡(jiǎn)便，分離效果好，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性高的分析方法，為吡丙醚·氟啶蟲酰胺產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試劑

甲醇（色譜純），默克（德國(guó)）股份有限公司；乙腈（色譜純），美國(guó)飛世爾科技公司；吡丙醚標(biāo)準(zhǔn)品（純度98.5%）和氟啶蟲酰胺標(biāo)準(zhǔn)品（純度98.9%），沈陽(yáng)化工研究院；15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺懸乳劑（7.5%吡丙醚＋7.5%氟啶蟲酰胺），河北中保綠農(nóng)作物科技有限公司；水（新蒸二次蒸餾水），實(shí)驗(yàn)室自制。

1.2 儀器

Waters e2695高效液相色譜儀、2489UV-Vis紫外檢測(cè)器，沃特世科技（上海）有限公司；C18色譜柱（4.6 mm×200 mm，5 μm），北京海誠(chéng)中儀科技有限公司；UV-6100紫外-可見光分光光度計(jì)，上海元析儀器有限公司；真空抽濾器（內(nèi)置孔徑為0.45 μm的水系濾膜），天津科億龍?jiān)囼?yàn)設(shè)備有限公司；0.45 μm有機(jī)濾膜，上海密粒膜分離技術(shù)有限公司；AL104萬(wàn)分之一電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司。

1.3 液相色譜分析條件

流動(dòng)相：甲醇-乙腈-水（20∶55∶25，V/V/V），經(jīng)濾膜過濾，超聲脫氣后待測(cè)；柱溫：室溫；流速：0.8 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm，進(jìn)樣量體積：2 μL。

1.4 溶液配制

準(zhǔn)確稱取吡丙醚標(biāo)準(zhǔn)品、氟啶蟲酰胺標(biāo)準(zhǔn)品各0.05 g（精確至0.000 2 g），置于100 mL容量瓶中，加入適量甲醇溶解，超聲振蕩20 min后，取出冷卻至室溫，定容，備用。

準(zhǔn)確稱取含吡丙醚和氟啶蟲酰胺0.65 g（精確至0.000 2 g）的樣品，置于100 mL的容量瓶中，加入甲醇溶解，超聲振蕩20 min后，取出冷卻至室溫，定容，備用。

1.5 有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定

在1.3節(jié)中檢測(cè)樣品有效成分的分析條件下平衡檢測(cè)器和色譜柱，使儀器達(dá)到最佳使用狀態(tài)（基線波動(dòng)范圍應(yīng)小于1×10-3），取1.4節(jié)中配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液進(jìn)行測(cè)定。

1.6 計(jì)算

樣品中的有效成分吡丙醚和氟啶蟲酰胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（w）按式（1）進(jìn)行計(jì)算。

式中：A1為標(biāo)樣溶液中吡丙醚（氟啶蟲酰胺）峰面積的平均值，mAU·min；A2為試樣溶液中吡丙醚（氟啶蟲酰胺）峰面積的平均值，mAU·min；m1、m2分別為吡丙醚（氟啶蟲酰胺）標(biāo)樣、試樣的質(zhì)量，g；P為標(biāo)樣中吡丙醚（氟啶蟲酰胺）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

利用紫外-可見光分光光度計(jì)分別對(duì)吡丙醚和氟啶蟲酰胺的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，得到在190～300 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的紫外光譜圖（圖1）。在254 nm波長(zhǎng)條件下，吡丙醚和氟啶蟲酰胺均有較強(qiáng)的吸收峰，且吸收比例合適，各種雜質(zhì)均不影響吡丙醚和氟啶蟲酰胺的測(cè)定。因此，本方法選擇254 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

圖1 吡丙醚和氟啶蟲酰胺紫外吸收光譜圖

2.2 流動(dòng)相的選擇

以甲醇、乙腈和水為流動(dòng)相，調(diào)節(jié)三者的比例對(duì)試樣進(jìn)行分離測(cè)試。當(dāng)甲醇、乙腈和水的體積比為20∶55∶25時(shí)，有效成分吡丙醚和氟啶蟲酰胺與雜質(zhì)可以較好地分離開來(lái)，且基線平穩(wěn)，峰型之間互無(wú)干擾（圖2、圖3）。

圖2 吡丙醚和氟啶蟲酰胺標(biāo)樣液相色譜圖

圖3 吡丙醚和氟啶蟲酰胺試樣液相色譜圖

2.3 分析方法的線性關(guān)系

配制不同濃度的標(biāo)樣溶液，在1.3節(jié)色譜條件下分別進(jìn)行分析，以吡丙醚和氟啶蟲酰胺的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算2種有效成分的線性回歸方程。吡丙醚的質(zhì)量濃度在0.5～5.0 mg/mL之間，與其相應(yīng)的峰面積呈良好的線性關(guān)系，線性方程為y=300 083.043 8x＋14 136.106 8，R2=0.999 8；氟啶蟲酰胺的質(zhì)量濃度在0.5～5.0 mg/mL之間，與其相應(yīng)的峰面積呈良好的線性關(guān)系，線性方程為y=38 283.600 0x-4 732.600 0，R2=0.999 2。

2.4 分析方法的精密度

在1.3所述色譜檢測(cè)條件下，對(duì)15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺懸乳劑試樣進(jìn)行5次獨(dú)立測(cè)試，分析方法的精密度由表1結(jié)果可知，樣品中吡丙醚的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.003%，氟啶蟲酰胺的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.004%，分別小于Horwitz公式[8]［2(1-0.5logC)×0.67，其中C為樣品中有效成分含量的平均值］的計(jì)算值0.989 5。以上結(jié)果均符合分析要求，說(shuō)明該分析方法的精密度良好。

表1 分析方法的精密度結(jié)果（n=5）

2.5 分析方法的準(zhǔn)確度

準(zhǔn)確稱取5份15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺SE樣品再分別加入吡丙醚標(biāo)準(zhǔn)品（0.05 g）和氟啶蟲酰胺標(biāo)準(zhǔn)品（0.05 g），在1.3所述的色譜條件下分別進(jìn)行分析，結(jié)果見表2。吡丙醚和氟啶蟲酰胺的平均回收率分別為99.20%和99.05%，均可以滿足分析方法的要求，說(shuō)明該分析方法準(zhǔn)確度良好。

表2 分析方法的準(zhǔn)確度結(jié)果（n=5）

3 結(jié)論

本文建立了能夠同時(shí)對(duì)15%吡丙醚·氟啶蟲酰胺SE中的有效成分吡丙醚和氟啶蟲酰胺進(jìn)行檢測(cè)的高效液相色譜分析方法，并對(duì)此方法進(jìn)行合理的方法驗(yàn)證。結(jié)果表明，吡丙醚和氟啶蟲酰胺分離度良好，精密度和準(zhǔn)確度高，線性關(guān)系良好，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.003%和0.004%，平均回收率分別為99.20%和99.05%。本方法操作便捷，是進(jìn)行含有吡丙醚和氟啶蟲酰胺復(fù)配樣品質(zhì)量控制較為理想的分析方法。