趙緒穩(wěn) 張同強 王金虎 楊福江 杜曉斌 馬 林 胡 博

天津市兒童醫(yī)院(天津大學兒童醫(yī)院) 300074

壞死性小腸結(jié)腸炎(Necrotizing enterocolitis,NEC)是多種因素引起的腸黏膜缺血缺氧性損傷所致小腸及結(jié)腸局部或彌漫性壞死疾病,該病主要發(fā)生在新生兒群體[1]。新生兒NEC在發(fā)病早期一般無典型的癥狀表現(xiàn),但是進一步發(fā)展可引起腸穿孔及腹膜炎等嚴重并發(fā)癥,對新生兒的智力發(fā)育造成不良影響,甚至造成患兒死亡,所以對NEC早期診斷及評估有重要的意義[2]。血小板活化因子(Platelet activating factor,PAF)由機體上皮細胞、巨噬細胞、血小板等多種細胞產(chǎn)生,促進血小板聚集及釋放氧自由基、血管的擴張以及增加血管通透性,此外也參與胃腸黏膜損傷以及血栓形成的炎癥反應(yīng)疾病過程[3]。白細胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)是T細胞來源細胞因子,能刺激上皮細胞、內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等,起到致炎的作用。目前,關(guān)于PAF與IL-17在新生兒NEC的診斷以及預后評估價值的研究報道較少。本文通過回顧性分析的方式,檢測新生兒NEC血清PAF、IL-17表達水平,探討其在患兒臨床診斷及預后預測中的價值,現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2020年1月—2022年1月醫(yī)院新生兒科收治的120例新生兒NEC患兒為實驗組,實驗組患兒納入標準：符合《實用新生兒學》[4]對于NEC的相關(guān)診斷標準,均是新生兒病患;無先天性代謝性疾病;患兒臨床資料完整并在納入研究前未用其他方法治療者;患兒家屬知情同意并且簽署同意書。排除標準：消化道畸形的患兒及合并感染的患兒;圍生期缺血疾病的患兒;合并其他感染性疾病的患兒;中途放棄治療出院的患兒。實驗組患兒男71例,女49例;胎齡34～41周,平均胎齡(37.82±1.22)周;早產(chǎn)兒70例,足月兒50例;Bell標準分級：Ⅰ期34例,Ⅱ期62例,Ⅲ期24例。同時選擇在醫(yī)院正常出生的105例健康新生兒為對照組。對照組患兒男65例,女40例;胎齡34～41周,平均胎齡(38.01±1.25)周;早產(chǎn)兒58例,足月兒47例。兩組新生兒在性別、年齡資料對比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本次研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準同意。

1.2 方法

1.2.1 血清標本檢測：采集新生兒足底靜脈血4ml作為血液標本,注入血液試管中保存,血樣標本置于離心機以3 000r/min速度持續(xù)離心15min分離血清,將血清標本置于-80℃低溫下保存待檢。應(yīng)用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定血清PAF水平,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清IL-17水平,相關(guān)檢測操作均嚴格參照試劑盒說明書進行。

1.2.2 Bell標準分級：Ⅰ期：表現(xiàn)為全身非特異性癥狀以及胃腸道表現(xiàn),經(jīng)腹X線檢查顯示腸間隙增寬,腸壁增厚但無腸壁積氣。Ⅱ期：除了Ⅰ期典型征象,還可見腸鳴音消失以及腹痛加重,經(jīng)X線檢查見腸擴張、腸梗阻,腸壁積氣征或者合并門靜脈積氣表現(xiàn)。Ⅲ期：全身出現(xiàn)進行性惡化情況,表現(xiàn)心動過緩、嚴重呼吸暫停、酸中毒以及彌散型的血管內(nèi)凝血表現(xiàn),多伴腹膜炎體征,經(jīng)X線檢查常見腸穿孔。分析不同分期患兒PAF、IL-17的血清水平。

1.2.3 預后結(jié)局：新生兒出生后60d,記錄患兒的生存情況,對實驗組患兒預后情況進行評價,預后良好：患兒獲得全腸道營養(yǎng)支持,或者雖然未達到全腸道營養(yǎng)供應(yīng),但是患兒生命體征穩(wěn)定,出院后的情況良好;預后不良：新生兒在60d死亡。分析PAF、IL-17的血清水平對NEC患兒不良預后的預測價值。

2 結(jié)果

2.1 兩組新生兒血清PAF、IL-17水平比較 同對照組的患兒比較,實驗組的患兒血清PAF、IL-17指標水平明顯更高(P<0.05),見表1。

表1 兩組新生兒血清PAF、IL-17水平比較

2.2 實驗組不同Bell分期者血清PAF、IL-17水平 隨著Bell分期的不斷增加,血清PAF、IL-17水平也逐漸升高,Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,兩兩資料比較,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表2。

表2 不同Bell分期者血清PAF、IL-17水平比較

2.3 血清PAF、IL-17對新生兒NEC的診斷價值 新生兒NEC的臨床診斷,PAF、IL-17單項檢測,在診斷靈敏度、特異性、準確度無明顯的差異,而PAF、IL-17聯(lián)合,診斷的靈敏度、特異度、準確度分別為85.36%、85.85%、86.85%,聯(lián)合指標的診斷靈敏度與準確度均高于單項檢測,見表3。

表3 血清PAF、IL-17對新生兒NEC的診斷價值分析

2.4 血清PSF-IL-17對預測新生兒NEC不良預后的價值 對患兒的預后進行隨訪,隨訪顯示在實驗組的NEC患兒中,7例患兒在60d存在病死情況,血清PAF、IL-17水平預測新生兒NEC預后不良的AUC面積分別為0.681(0.602～0.753)、0.704(0.626～0.771)。血清PAF≥64.21μg/L預測新生兒NE患兒60d的病死情況,預測的靈敏度、特異度分別是64.25%、94.13%;血清IL-17≥20.81ng/L預測新生兒NEC 60d病死率的靈敏度、特異度分別是74.16%、89.26%。

3 討論

多項研究顯示病原微生物感染以及炎癥反應(yīng)為新生兒NEC發(fā)病的主要原因,多種白細胞介素、白三烯與PAF等炎癥介質(zhì)參與到新生兒NEC的發(fā)生及發(fā)展過程[5]。PAF主要是內(nèi)毒素和細胞因子誘導生成的磷脂介質(zhì),這一介質(zhì)作用主要能提升血管通透性、促進血小板活化及白細胞凝聚,刺激花生四烯酸釋放,對于心臟存在負性激勵的作用[6]。血小板活化因子存在廣泛致血小板聚集作用,可使中性粒細胞聚集以及增加血管通透性。楊紅等[7]的研究中,分析NEC的早產(chǎn)兒在PAF水平的差異,通過ELISA法檢測結(jié)果顯示,早產(chǎn)兒NEC的PAF濃度明顯高于健康足月兒血液中PAF的濃度,證實早產(chǎn)兒NEC發(fā)病,血液中PAF濃度增高,并且反映了PAF在病理情況下參與到NEC的發(fā)病中。孫子梅等[8]研究結(jié)果顯示同對照組的大鼠比較,NEC模型組大鼠腸組織PAF水平升高。這些研究證實了PAF在NEC的發(fā)生發(fā)展中起到一定的作用。本文結(jié)果顯示,實驗組的患兒在血清PAF水平顯著高于對照組,同時實驗組患兒隨著Bell分期的增加,血清PAF水平也升高,差異顯著,證實PAF對于早期診斷新生兒NEC有積極作用。PAF作為可促進血管擴張及參與胃腸黏膜損傷的物質(zhì),PAF通過缺氧及內(nèi)毒素協(xié)同作用誘發(fā)腸壞死,此外PAF可引發(fā)腸上皮細胞中EE-鈣粘連素絡(luò)氨酸磷酸化,增加腸黏膜通透性,促進細菌內(nèi)毒素進入腸上皮細胞,導致炎癥介質(zhì)失控性分泌,進而誘發(fā)NEC[9]。IL-17是重要的細胞因子,在宿主防御、自身免疫疾病發(fā)病以及腫瘤中起到重要作用,相關(guān)研究也漸漸成為醫(yī)學、免疫學研究熱點內(nèi)容,IL-17可推動自身免疫性疾病的炎癥病變,這些細胞因子同新生兒NEC發(fā)病存在一定的聯(lián)系[10]。本文顯示,實驗組IL-17水平高于對照組,并且隨著Bell分期的增加,IL-17水平升高。

本文中,PAF、IL-17聯(lián)合檢測在診斷新生兒NEC的敏感度與準確度方面高于單項監(jiān)測,AUC值為0.821。此外新生兒NEC若是處理不及時也可出現(xiàn)不良預后情況,主要不良預后為死亡,本次納入實驗組的120例患兒,出生后60d的病死例數(shù)7例,血清PAF、IL-17對于預測新生兒NEC患兒60d病死率,敏感度分別為64.25%、74.16%,特異度則是分別為94.13%、89.26%,提示檢測血清PAF與IL-17對于新生兒NEC預后的預測有一定的價值,為臨床預防提供科學參考借鑒。

綜上所述,血清PAF、IL-17檢測在新生兒NEC的診斷以及預后評估中有積極作用,并能預測患兒病情嚴重程度,可作為患兒診療及干預的重要參照指標。