王曼菲，肖肽平，趙好好，馬祺鑫，艾碧琛

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410208）

酒精性肝?。╝lcoholic liver disease，ALD），又稱為酒精性肝損傷，是由于長期大量飲酒導(dǎo)致的肝臟疾病。ALD初期通常表現(xiàn)為單純性脂肪肝，進(jìn)而可發(fā)展成酒精性肝脂肪變、酒精性肝炎、肝纖維化和肝硬化，嚴(yán)重酗酒時(shí)可誘發(fā)廣泛肝細(xì)胞壞死，甚至肝功能衰竭[1]。研究表明，ALD的主要病因是乙醇的過度攝入，但該疾病的發(fā)生發(fā)展過程則與多種因素有關(guān)[2]。腸黏膜屏障（intestinal barrier function，IBF）是阻止腸道內(nèi)細(xì)菌及內(nèi)毒素進(jìn)入的第一道防線。自1988年馬歇爾提出“腸-肝軸”理論后[3]，腸黏膜屏障及其功能在ALD形成過程中的作用及機(jī)制逐漸成為研究熱點(diǎn)。近年來，大量研究[4-6]表明酒精可造成腸道損傷，使得腸道通透性增加，引起內(nèi)毒素（lipopolysaccharide，LPS）腸滲漏。LPS具有高度的免疫活性，可隨著ALD進(jìn)展而泛濫進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，激活炎癥因子，導(dǎo)致促炎癥因子瀑布式釋放，形成腸源性內(nèi)毒素血癥（intestinal endotoxemia，IETM），對肝臟進(jìn)行第二次打擊，誘導(dǎo)并加重肝損傷，同時(shí)又可加劇腸黏膜屏障的損害，形成惡性循環(huán)。因此，臨床對于肝病的防治日益重視對IBF的保護(hù)，了解腸黏膜屏障在ALD中的保護(hù)作用并探討其相關(guān)性具有重要的臨床意義。茵陳四苓湯出自《杏苑春生》，具有清熱利濕、利膽退黃的功效[7]。實(shí)驗(yàn)研究顯示，茵陳四苓湯具有護(hù)肝抗炎、改善肝纖維化的作用[8]。臨床研究也證實(shí)，茵陳四苓湯治療以濕熱為主的肝病效果顯著[9-10]。本研究以腸黏膜機(jī)械屏障為中心，通過觀察茵陳四苓湯對酒精性肝損傷大鼠腸黏膜血清閉鎖小帶蛋白-1（Zonula occludens-1，ZO-1）和閉鎖蛋白（occludin）的影響，探討本方防治ALD的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)雄性SD大鼠50只，體質(zhì)量（180±20）g，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，生產(chǎn)許可證號(hào)：SYXK（湘2019-0009），動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（湘）2019-0004。飼養(yǎng)于SPF級(jí)動(dòng)物飼養(yǎng)室，室溫20~26 ℃，每籠2~3只，自由飲水及進(jìn)食，每日交替12 h的光明與黑暗周期。本研究已通過湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)的審核，實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格按照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》，遵循人道主義原則，確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的福利倫理，批準(zhǔn)編號(hào)為：LL2021032404。

1.2 藥物與試劑 雙環(huán)醇（北京協(xié)和藥廠，規(guī)格：25mg×18粒/盒，批號(hào)：201204）；茵陳四苓湯（方藥組成：茵陳、澤瀉、白術(shù)各15 g，枳實(shí)、豬苓各10 g，山梔子6 g），飲片購于湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院；高脂飼料[11-13]（77.5%基礎(chǔ)飼料+10%豬油+2%蔗糖+8%蛋黃粉+2%膽固醇+0.5%膽鹽），由湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供；白酒為乙醇體積分?jǐn)?shù)為56%的北京紅星二鍋頭。總膽固醇（TC）試劑盒（批號(hào)：10412001H）、甘油三酯（TG）試劑盒（批號(hào)：10408002H）、谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）試劑盒（批號(hào)：20210728-J8477）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）試劑盒（批號(hào)：20210728-J8478）、脂多糖（LPS）試劑盒（批號(hào)：20210728-J3243）、大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）試劑盒（批號(hào)：20210728-J3056）、大鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）試劑盒（批號(hào)：20210728-J3071）均由湖南艾方生物科技有限公司提供。

1.3 主要儀器 真空采血管（山東省成武縣華博醫(yī)療器械有限公司，普通管、EDTA2K）；離心沉淀機(jī)[微量高速離心機(jī)（國產(chǎn)），TG16W]；電熱恒溫培養(yǎng)箱（武漢一恒蘇凈科學(xué)儀器有限公司，DHP-9012）；移液槍（Finnpipette，4641020N）；洗板機(jī)（Tianshi，988洗板機(jī)）；酶標(biāo)儀（Rayto，RT-6100）；恒溫?fù)u床（上海赫田科學(xué)儀器有限公司，HT-111B）；熒光分光光度計(jì)（BioTeck，Epoch）。

1.4 造模與分組 采用高脂飼料加白酒灌胃方式建立酒精性肝損傷模型[14-16]。50只大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組（n=15）和實(shí)驗(yàn)組（n=35）。空白組予普通飼料喂養(yǎng)，蒸餾水灌胃；其余大鼠用高脂飼料喂養(yǎng)，用乙醇體積分?jǐn)?shù)為56%的白酒灌胃。各組大鼠灌胃量為1 mL/100 g，每周記錄體質(zhì)量1次，根據(jù)體質(zhì)量調(diào)整灌胃量。因酒精過敏、灌胃操作不當(dāng)、大鼠之間斗毆等導(dǎo)致部分大鼠在實(shí)驗(yàn)過程中死亡。12周后，隨機(jī)抽取空白組（n=11）及實(shí)驗(yàn)組（n=22）大鼠各5只，檢測肝功能并取相同部位肝組織HE染色觀察組織形態(tài)學(xué)改變，若實(shí)驗(yàn)組大鼠出現(xiàn)明顯的肝細(xì)胞脂肪變、氣球樣變及部分炎癥細(xì)胞浸潤，且肝功能與空白組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），則造模成功。

1.5 實(shí)驗(yàn)給藥 將造模成功的17只實(shí)驗(yàn)組大鼠，按隨機(jī)數(shù)字表法分為模型組、雙環(huán)醇組、茵陳四苓湯組（以下簡稱茵四組），分別為5只、6只、6只。根據(jù)人與動(dòng)物體表面積-劑量換算法，以70 kg成人劑量進(jìn)行換算，按照茵陳四苓湯組成比例，將所有藥物浸泡1 h后，水煎2次，每次30 min，合并2次濾液，將茵陳四苓湯濃縮至含生藥1.07 g/mL，雙環(huán)醇以0.5%CMC-NA水溶液配制成100 mg/10 mL混懸液，置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。雙環(huán)醇組及茵四組大鼠給予相應(yīng)藥液灌胃，空白組及模型組大鼠以蒸餾水灌胃，每次灌胃量為1 mL/100 g，每日2次（09:00:00和15:00:00各1次），連續(xù)給藥4周。每周稱體質(zhì)量1次，以便根據(jù)體質(zhì)量調(diào)整灌胃量。

1.6 觀察指標(biāo) 末次給藥后，各組大鼠禁食不禁水12 h，予10%水合氯醛腹腔注射麻醉，打開腹腔，腹主動(dòng)脈采血，2000r/min離心15 min后，提取血清及血漿，置于-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆茫磺谐暾闻K，取肝左葉部分肝組織裝入EP管中，用液氮速凍，-80 ℃保存，另取肝左葉5 mm×5 mm×5 mm大小肝組織，置于4%多聚甲醛溶液固定；取臨近回盲部（＜4 cm）的近端結(jié)腸組織，用4%多聚甲醛固定。

1.6.1 一般情況 觀察大鼠的精神狀態(tài)、體質(zhì)量及死亡情況。

1.6.2 肝組織病理學(xué)觀察 取肝組織，4%多聚甲醛固定，常規(guī)脫水處理、石蠟包埋、切片，HE染色，光鏡下觀察肝組織病理學(xué)改變。

1.6.3 血清相關(guān)生化指標(biāo)及血漿內(nèi)毒素測定 采用ELISA檢測血清ALT、AST、TC、TG水平；提取血漿，用ELISA法檢測LPS含量，以上操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.6.4 激活KCs后的炎癥反應(yīng) 取部分肝組織，用ELISA法檢測肝臟組織TNF-α及IL-10水平，觀察LPS激活KCs后的炎癥反應(yīng)。具體操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.6.5 結(jié)腸組織ZO-1、occludin表達(dá) 取結(jié)腸組織，用免疫組化法檢測相關(guān)蛋白表達(dá)。每組選取5個(gè)樣本，分別隨機(jī)觀察3個(gè)視野，通過Image Pro Plus測定陽性表達(dá)的灰度值和面積，計(jì)算平均吸光度（MOD）。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差“（±s）表示，多組間比較采用單因素方差（ANOVA）分析，兩兩比較滿足方差齊性用LSD法，不滿足方差齊性則選用Dunnett’T3檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠一般情況比較 空白組大鼠體型正常，皮毛有光澤，精神佳，活動(dòng)靈活，飲食正常；模型組、雙環(huán)醇組、茵四組大鼠體型較胖，毛色枯槁晦暗，精神欠佳，倦怠，食量減少。

2.2 各組大鼠肝組織病理形態(tài)觀察 空白組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝索排列整齊，呈放射狀，肝細(xì)胞形態(tài)規(guī)則，無明顯脂肪樣變，未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤及壞死。模型組大鼠肝細(xì)胞體積增大，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量的脂肪細(xì)胞堆積，可見大量脂滴空泡形成，肝索排列紊亂，肝竇擠壓變窄，伴有不同程度炎癥細(xì)胞浸潤、壞死，可見氣球樣變或纖維樣變。雙環(huán)醇組和茵四組肝細(xì)胞較模型組脂肪變性均有改善，程度不等，肝索排列也相對整齊，肝細(xì)胞形態(tài)尚規(guī)則，炎癥浸潤情況也明顯減輕。（見圖1）

圖1 各組大鼠肝組織形態(tài) （HE 染色，×200）

2.3 各組大鼠血生化結(jié)果及LPS水平比較 與空白組比較，模型組大鼠血清ALT、AST、TC、TG、LPS水平均升高（P＜0.01）；與模型組比較，雙環(huán)醇組及茵四組大鼠血清ALT、AST、TC、TG、LPS水平均降低（P＜0.05或P＜0.01）。（見表1）

表1 各組大鼠血清ALT、AST、TC、TG、LPS 比較 （±s）

表1 各組大鼠血清ALT、AST、TC、TG、LPS 比較 （±s）

注：與空白組比較，aP＜0.01；與模型組比較，bP＜0.05，cP＜0.01；與雙環(huán)醇組比較，dP＜0.05，eP＜0.01。

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2.4 各組大鼠肝組織TNF-α、IL-10水平比較 與空白組比較，模型組大鼠肝組織TNF-α水平升高（P＜0.01），IL-10水平降低（P＜0.01）；與模型組比較，雙環(huán)醇組及茵四組大鼠肝組織TNF-α水平均降低（P＜0.01），IL-10水平均升高（P＜0.01）。（見表2）

表2 各組大鼠肝組織TNF-α、IL-10 水平比較 （±s，pg/g）

表2 各組大鼠肝組織TNF-α、IL-10 水平比較 （±s，pg/g）

注：與空白組比較，aP＜0.01；與模型組比較，bP＜0.01，與雙環(huán)醇組比較，cP＜0.01。

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2.5 各組大鼠結(jié)腸組織ZO-1、occludin表達(dá)比較 空白組大鼠結(jié)腸ZO-1、occludin陽性表達(dá)較多，黏膜上皮細(xì)胞著色較深，呈棕褐色；模型組大鼠結(jié)腸組織ZO-1、occludin相對減少，著色較淺；雙環(huán)醇組與茵四組大鼠結(jié)腸組織陽性表達(dá)與模型組相比有所增加，著色程度也有不同程度加深。（見圖2）與空白組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織ZO-1、occludin蛋白表達(dá)降低（P＜0.01）；與模型組比較，雙環(huán)醇組及茵四組大鼠結(jié)腸組織ZO-1、occludin表達(dá)升高（P＜0.01）。（見表3）

圖2 各組大鼠結(jié)腸組織ZO-1、occludin 蛋白表達(dá) （免疫組化，×200）

表3 各組大鼠結(jié)腸組織ZO-1、occludin表達(dá)比較（±s，MOD）

表3 各組大鼠結(jié)腸組織ZO-1、occludin表達(dá)比較（±s，MOD）

注：與空白組比較，aP＜0.01；與模型組比較，bP＜0.01。

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3 討論

酒精性肝損傷已成為歐美等發(fā)達(dá)地區(qū)肝硬化形成的首要病因，其發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜。近十余年來研究顯示，除酒精大量蓄積引起肝損傷外，腸道微生物組成比例改變，即生態(tài)失調(diào)、微生物及其代謝產(chǎn)物、細(xì)菌易位導(dǎo)致腸道屏障功能障礙、內(nèi)毒素血癥、機(jī)體免疫損傷也被認(rèn)為是引發(fā)ALD的中心環(huán)節(jié)。越來越多的研究者們開始拓寬視野，逐漸將目光轉(zhuǎn)移到與肝病發(fā)生發(fā)展有關(guān)的其他因素及其關(guān)系中，而肝臟與腸道的關(guān)系正是目前被關(guān)注的重點(diǎn)。已有研究證實(shí)腸黏膜屏障參與肝功能惡化及肝性腦病的發(fā)生發(fā)展[17]。

腸和肝的緊密聯(lián)系始于胚胎發(fā)育期，他們共同起源于腹側(cè)前腸內(nèi)胚層[18]。兩者在生理病理上緊密聯(lián)系，雙向溝通[19]。一方面，肝臟通過膽管排泄膽汁及其他生物活性介質(zhì)與腸道溝通，影響腸道微生態(tài)；另一方面，代謝營養(yǎng)物通過門靜脈運(yùn)輸?shù)礁闻K，同時(shí)腸道細(xì)菌及其產(chǎn)物、內(nèi)毒素和炎癥介質(zhì)也會(huì)通過門靜脈轉(zhuǎn)運(yùn)，從而使得肝臟易受腸道微環(huán)境的影響而發(fā)生病理性改變。當(dāng)腸黏膜屏障結(jié)構(gòu)及功能受損時(shí)，腸黏膜通透性增加，腸道中大量細(xì)菌、內(nèi)毒素及炎癥因子通過門靜脈進(jìn)入肝臟；慢性肝病發(fā)生時(shí)，若腸黏膜通透性增加，進(jìn)入體循環(huán)的內(nèi)毒素含量也隨之增加，從而引發(fā)內(nèi)毒素血癥造成肝微循環(huán)障礙，對肝臟進(jìn)行第二次打擊，加重肝臟疾病[20]。大量研究[21-23]證實(shí)，酒精性或非酒精性脂肪肝、肝纖維化、肝硬化等肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展均與“腸-肝軸”有著密切關(guān)系。因此，“腸-肝軸”理論為肝臟疾病的治療打開新的思路——從腸治肝[24]。

內(nèi)毒素是脂多糖的活性成分，而腸黏膜屏障正是防止其進(jìn)入體循環(huán)的第一道防線。肝臟固有免疫系統(tǒng)也發(fā)揮著重要的防御作用。對于那些逃逸的內(nèi)毒素，作為第二防線的肝臟可通過胞飲的形式將其吞噬，從而維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。無論是IBF功能障礙還是肝臟功能受損均可導(dǎo)致體內(nèi)LPS的蓄積。LPS通過影響肝臟微循環(huán)直接損傷肝細(xì)胞，破壞肝竇內(nèi)皮細(xì)胞和微血管，激活凝血系統(tǒng)，導(dǎo)致微血栓形成，加重肝細(xì)胞損傷和加快肝纖維化過程。此外，LPS還可通過影響炎癥因子、內(nèi)源性介質(zhì)等間接造成肝損傷，LPS與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合后激活肝內(nèi)外單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，通過絲裂原活化蛋白激酶通路、PKC通路、NF-κB通路[25]等，誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)腫瘤壞死因子TNF-α、IL-10、NO等多種炎癥介質(zhì)大量生成、釋放。因此明確LPS與ALD的關(guān)系，減輕炎癥反應(yīng)，在治療ALD等慢性肝病方面至關(guān)重要。

本研究中，與空白組比較，模型組大鼠LPS水平顯著升高（P＜0.01），說明在高脂飼料加白酒刺激下模型組大鼠腸源性內(nèi)毒素血癥形成。經(jīng)治療后，與模型組比較，雙環(huán)醇組及茵四組LPS水平明顯降低（P＜0.01）；茵四組LPS水平低于雙環(huán)醇組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明茵陳四苓湯對減輕ALD模型大鼠血漿內(nèi)毒素水平療效明顯，且茵陳四苓湯對于ALD模型大鼠體內(nèi)LPS水平的改善效果優(yōu)于雙環(huán)醇。模型組大鼠TNF-α水平顯著升高（P＜0.01），作為抗炎因子的IL-10水平則明顯降低（P＜0.01），說明模型組大鼠肝臟炎癥反應(yīng)明顯。經(jīng)治療后，雙環(huán)醇組及茵四組TNF-α水平明顯低于模型組（P＜0.01），IL-10水平也有所上升（P＜0.01）。說明茵陳四苓湯能有效降低ALD模型大鼠的TNF-α水平，激發(fā)抗炎因子釋放，改善炎癥反應(yīng)，從而減少對肝臟的進(jìn)一步損傷。除了降低LPS水平，減輕炎癥反應(yīng)外，恢復(fù)腸道通透性、改善腸黏膜屏障功能也可以治療ALD。ZO-1和occludin是腸黏膜機(jī)械屏障中最重要的結(jié)構(gòu)蛋白，可阻止細(xì)菌微生物、代謝產(chǎn)物和毒素的侵入，對腸黏膜屏障功能的正常發(fā)揮起著直接作用。本研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)茵陳四苓湯治療后，ALD大鼠ZO-1、occludin表達(dá)增加（P＜0.01），ALT、AST、TC、TG水平均明顯降低（P＜0.05），說明茵陳四苓湯對腸黏膜機(jī)械屏障具有修復(fù)作用并能改善肝功能，調(diào)控脂代謝，這一結(jié)果論證了從腸治肝的可行性及有效性。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)所討論的腸道功能可歸于中醫(yī)“脾胃”所主范疇，而解剖學(xué)的肝臟則可與中醫(yī)“肝”的范疇相對應(yīng)。肝脾理論的運(yùn)用早在東漢時(shí)期就有所體現(xiàn)，如《金匱要略》中記載“見肝之病，知肝傳脾，當(dāng)先實(shí)脾”[26]。這句話不僅闡述了肝病的傳變規(guī)律，還在《難經(jīng)》的基礎(chǔ)上補(bǔ)充了治法。肝木患病易乘脾土。這既是中醫(yī)整體觀念的體現(xiàn)，也是對治未病思想的實(shí)踐?！皩?shí)脾，則肝自愈”，因此，在治療肝病的同時(shí)，重視調(diào)補(bǔ)脾氣，使脾臟健運(yùn)正常，不受邪侵，才能早日康復(fù)。此外，脾病亦可侮肝，早在《黃帝內(nèi)經(jīng)》[27]中便提出了相關(guān)理論：“氣有余，則制己所勝而侮所不勝；其不及，則己所不勝，侮而乘之，己所勝，輕而侮之”。肝病實(shí)脾、肝脾同治的學(xué)術(shù)思想一直被世人推崇并逐漸完善。如清代葉天士言“補(bǔ)脾必以疏肝，疏肝即以補(bǔ)脾也”，臨證多重視肝脾同調(diào)；張錫純在《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》[28]中介紹到：“欲治肝者，原當(dāng)升脾降胃，培養(yǎng)中宮，俾中宮氣化敦厚，以聽肝木自理”；再到后來“腸-肝軸”學(xué)說的提出。不難發(fā)現(xiàn)，西醫(yī)所提出的“腸-肝軸”實(shí)際上是對與中醫(yī)肝脾相關(guān)理論另一角度的補(bǔ)充。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為ALD系酒酪不節(jié)所致，常與濕熱侵襲、情志不暢相關(guān)。大量飲酒造成脾胃運(yùn)化失司，濕熱困脾，脾失健運(yùn)，水濕內(nèi)生，痰瘀互結(jié)，阻滯肝脈。臟腑上與肝脾最為密切，病機(jī)不外“濕熱”“氣滯”，辨證多屬濕熱內(nèi)蘊(yùn)，其特點(diǎn)為本虛標(biāo)實(shí)。茵陳四苓湯由茵陳、白術(shù)、澤瀉、豬苓、山梔子、枳實(shí)組成。方中茵陳性微寒，味苦辛，歸脾、胃、肝、膽經(jīng)，具有清利濕熱、利膽退黃的功效，使體內(nèi)稽留之濕熱毒邪外出，同時(shí)還可暢達(dá)肝氣，使氣機(jī)升降功能得以恢復(fù)。現(xiàn)代研究表明，茵陳所含有的茵陳多肽能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，降低TNF-α水平從而減輕炎癥反應(yīng)，保護(hù)肝臟。此外，茵陳與山梔子合用還能穩(wěn)定肝細(xì)胞膜，減少肝細(xì)胞凋亡，從而促進(jìn)肝臟功能的恢復(fù)。白術(shù)歸脾、胃經(jīng)，味甘苦，性溫，具有益氣健脾、燥濕利水之功，用以恢復(fù)脾土治水之功，顧護(hù)后天之本。澤瀉性寒，味甘、淡，歸腎、膀胱經(jīng)，可利水滲濕泄熱?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)其具有利尿、抗炎、降脂、護(hù)肝的作用[29]。豬苓味甘、平，性微熱，歸心、脾、胃、肺、腎經(jīng)，具有祛寒利水、消腫滲濕之功效。山梔子性寒，味苦，入心、肝、肺、胃經(jīng)，可入血分，加強(qiáng)清熱利濕涼血之效。枳實(shí)性微寒，味苦、辛、酸，歸脾、胃經(jīng)，可以破氣消積，化痰散痞?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》中記載枳實(shí)還具有“長肌肉，利五臟，益氣輕身”的功效。諸藥合用，共奏清熱解毒、利水滲濕、涼血止血、利膽退黃的功效，可用于治療酒精性肝損傷之濕熱蘊(yùn)結(jié)證。根據(jù)上述“腸-肝軸”及肝脾相關(guān)理論，本方從“脾”入手，通過健運(yùn)脾胃修復(fù)腸屏障功能從而達(dá)到“治肝”的目的。

綜上，茵陳四苓湯可增加ALD大鼠結(jié)腸ZO-1、occludin表達(dá)，調(diào)節(jié)炎癥因子TNF-α、IL-10水平，保護(hù)腸黏膜屏障，從而降低內(nèi)毒素水平，改善肝功能，調(diào)控血脂。提示茵陳四苓湯可調(diào)節(jié)“腸-肝軸”，也為臨床“從腸治肝”防治慢性肝病提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。