張運依，冉 艷

（貴州省檢測技術(shù)研究應(yīng)用中心，貴州貴陽 550014）

菜籽為最主要的油料作物之一，我國是全球范圍內(nèi)最主要的菜籽生產(chǎn)大國，經(jīng)過加工后形成的菜籽油、菜籽粕也是重要的期貨品種[1]。脂質(zhì)為油、脂肪、類脂的總稱，也是油料作物的重要化學(xué)物質(zhì)，其含量高低將會直接決定菜籽的經(jīng)濟價值[2]。近年來我國菜籽種植面積不斷增加，使得菜籽的經(jīng)濟價值備受社會各界的重視。脂肪含量檢測對于篩選優(yōu)質(zhì)菜籽品種、提升經(jīng)濟收入具有重要意義。索氏抽提法為菜籽脂肪含量的國標(biāo)檢測方法，雖然能夠得出準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，但整個檢測過程耗時長，往往需要10 h才可以得出檢測結(jié)果[3]。自動脂肪抽提儀的出現(xiàn)給菜籽脂肪含量檢測工作提供了全新的選擇，所具有的自動化特點使其能夠在較短的時間內(nèi)得出檢測結(jié)果，大大提升了檢測效率[4]。然而，自動脂肪抽提儀能否取得與索氏抽提法相似的脂肪檢測結(jié)果備受重視，故本研究對此展開分析，內(nèi)容如下。

1 材料與方法

1.1 材料

選取2022年1月—2022年12月貴州省貴陽地區(qū)的菜籽作為研究對象，所有樣本均置于4 ℃冰箱中待用。納入標(biāo)準(zhǔn)：均為本地區(qū)同一個品種的菜籽；含水率相近的菜籽；干凈無雜質(zhì)的菜籽。排除標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)熱生霉的菜籽；干燥條件不一的菜籽；跨年的菜籽。

1.2 儀器與試劑

Soxtherm全自動抽提儀，德國格哈特分析儀器有限公司；SXT-06索氏抽提器，上海本昂科學(xué)儀器有限公司；bsa224s電子天平，德國賽多利斯集團；DZKW-D-1電熱恒溫水浴鍋，北京市永光明醫(yī)療儀器廠；WHL-30B電熱恒溫干燥箱，天津泰斯特儀器有限公司；JFSD-100Ⅱ電動粉碎機，上海隆拓儀器設(shè)備有限公司；格瑞德曼POWTEQ MG200臼式研磨儀，北京格瑞德曼儀器設(shè)備有限公司；HLR-118FL實驗室防爆低溫冰箱，青島海爾生物醫(yī)療股份有限公司；石油醚以及其他試劑均購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司。

1.3 實驗方法

（1）自動脂肪抽提儀。利用電子天平精確稱取500 g菜籽，將浸提燒杯置于干燥箱中干燥處理，60 min后取出冷卻后稱重。用濾紙稱取菜籽樣本5 g，精度控制在0.1 mg以內(nèi)，置于烘干箱內(nèi)干燥30 min，濾紙筒安裝至自動脂肪抽提儀。將稱量好的浸提燒杯置于浸提裝置上，使用溶劑添加筒向燒杯中加入45 ℃的石油醚90 mL，打開冷凝水后設(shè)置檢測參數(shù)，啟動儀器后自動進行測定。

（2）索氏抽提法。通過濾紙筒將菜籽樣本加至提取器中，菜籽高度控制在虹吸管以下，于燒瓶中加入提取溶劑以及沸石，與燒瓶、回流冷凝管連接后接通冷凝水，加熱至沸騰后漫取樣品。索氏提取器內(nèi)脂肪達到一定高度后從側(cè)面虹吸管流入燒瓶，在循環(huán)流動中將脂肪采集至燒瓶內(nèi)。

1.4 自動脂肪抽提儀參數(shù)設(shè)計

（1）粉碎方式確定。沸騰45 min、淋洗20 min、回收10 min，測定不同粉碎方式（粉碎機粉碎、研磨儀粉碎、手工粉碎）下菜籽的脂肪含量。

（2）沸騰時間確定。研磨儀粉碎、淋洗20 min、回收10 min，測定不同沸騰時間（15 min、30 min、45 min、60 min）下菜籽的脂肪含量。

（3）淋洗時間確定。研磨儀粉碎、沸騰45 min、回收10 min，測定不同淋洗時間（10 min、15 min、20 min、30 min）下菜籽的脂肪含量。

（4）回收時間確定。研磨儀粉碎、沸騰45 min、淋洗20 min，測定不同回收時間（5 min、10 min、15 min）下菜籽的脂肪含量。

1.5 脂肪含量測定

脂肪含量按公式（1）計算。

式中：X為待檢測菜籽脂肪含量，g/100 g；m1為恒重后接收瓶與脂肪的總質(zhì)量，g；m0為接收瓶的質(zhì)量，g；m2為菜籽的質(zhì)量，g。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行處理，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較采用t檢驗，多個樣本間比較采用F檢驗，兩兩比較采用LSD-t檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 菜籽脂肪含量結(jié)果比較

采用自動脂肪抽提儀檢測菜籽中脂肪含量，結(jié)果與索氏抽提法無顯著性差異（P＞0.05），見表1。

表1 自動脂肪抽提儀與索氏抽提法測定菜籽中脂肪含量的比較（±s）

表1 自動脂肪抽提儀與索氏抽提法測定菜籽中脂肪含量的比較（±s）

檢測方法菜籽脂肪含量/（g/100 g）tP自動脂肪抽提儀42.13±1.680.701＞0.05索氏抽提法42.30±1.75

2.2 自動脂肪抽提儀的條件優(yōu)化

2.2.1 不同粉碎方式對菜籽脂肪含量檢測結(jié)果的影響

對比不同粉碎方式下菜籽脂肪含量的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中研磨儀粉碎的菜籽脂肪含量最高，詳見表2。

表2 不同粉碎方式對自動脂肪抽提儀測定菜籽脂肪含量的影響（±s）

表2 不同粉碎方式對自動脂肪抽提儀測定菜籽脂肪含量的影響（±s）

粉碎方式菜籽脂肪含量/（g/100 g）FP粉碎機粉碎40.97±1.108.597＜0.05研磨儀粉碎42.23±1.32手工粉碎38.69±1.04

2.2.2 不同沸騰時間對菜籽脂肪含量檢測結(jié)果的影響

對比不同沸騰時間下菜籽脂肪含量檢測結(jié)果，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中沸騰45 min菜籽脂肪含量最高，見表3。

表3 不同沸騰時間對自動脂肪抽提儀測定菜籽脂肪含量的影響（±s）

表3 不同沸騰時間對自動脂肪抽提儀測定菜籽脂肪含量的影響（±s）

沸騰時間/min菜籽脂肪含量/（g/100 g）FP 1539.23±1.0711.234＜0.053040.67±1.194544.59±1.646042.23±1.38

2.2.3 不同淋洗時間對菜籽脂肪含量檢測結(jié)果的影響

對比不同淋洗時間下菜籽脂肪含量檢測結(jié)果，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中淋洗20 min菜籽脂肪含量最高，見表4。

表4 不同淋洗時間對自動脂肪抽提儀測定菜籽脂肪含量的影響（±s）

表4 不同淋洗時間對自動脂肪抽提儀測定菜籽脂肪含量的影響（±s）

淋洗時間/min菜籽脂肪含量/（g/100 g）FP 1041.23±1.1715.610＜0.051541.40±1.222044.06±1.613042.72±1.34

2.2.4 不同回收時間對菜籽脂肪含量檢測結(jié)果的影響

對比不同回收時間下菜籽脂肪含量檢測結(jié)果，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中回收10 min的菜籽脂肪含量最高，見表5。

表5 不同回收時間對自動脂肪抽提儀測定菜籽脂肪含量的影響（±s）

表5 不同回收時間對自動脂肪抽提儀測定菜籽脂肪含量的影響（±s）

回收時間/min菜籽脂肪含量/（g/100 g）FP 541.87±1.238.448＜0.051044.66±1.591542.58±1.37

3 結(jié)論與討論

菜籽蛋白質(zhì)的氨基酸含量與大豆相當(dāng)，而賴氨酸、蛋氨酸含量則顯著高于大豆，因此成為開發(fā)利用前景最廣闊的大宗優(yōu)質(zhì)飼用蛋白源[5]。菜籽除了可以用于榨油以及牲畜飼料外，還被廣泛應(yīng)用于冶金、機械、化工、醫(yī)藥等領(lǐng)域中。脂肪為菜籽的重要物質(zhì)，也是衡量一個菜籽品種經(jīng)濟價值的重要參照指標(biāo)。以往采用的索氏抽提法測定菜籽中脂肪含量耗時長，難以滿足快速檢測所需，而自動脂肪抽提儀則具有操作便捷、檢測迅速等優(yōu)勢，引起了高度重視與關(guān)注[6]。

本研究中采用自動脂肪抽提儀測定的菜籽脂肪含量與索氏抽提法相近，表明該儀器的檢測結(jié)果具有較好的準(zhǔn)確性，能夠滿足菜籽脂肪含量檢測所需，可以成為索氏抽提法的替代方法。自動脂肪抽提儀是基于自動脂肪抽提儀進行的脂肪含量定量檢測，在有機溶劑幫助下溶解菜籽中的油脂，再利用抽提法使脂肪從溶劑中分離出來，經(jīng)過烘干、稱量處理后計算出脂肪含量[7]。整個儀器由加熱抽提、溶劑回收、冷卻3部分組成，在操作過程中可以動態(tài)設(shè)定沸騰時間、淋洗時間、回收時間等參數(shù)，脂肪在抽提過程反復(fù)浸泡以及抽取，實現(xiàn)快速檢測的目的。進一步研究結(jié)果顯示，采用自動脂肪抽提儀檢測菜籽中脂肪含量時，不同粉碎方式、不同沸騰時間、不同淋洗時間、不同回收時間下的檢測結(jié)果之間存在明顯的差異性，表明不同參數(shù)設(shè)定影響菜籽中脂肪含量的測定結(jié)果。結(jié)合該研究結(jié)果，本研究指出，在利用自動脂肪抽提儀進行菜籽中脂肪含量檢測期間采用研磨儀粉碎，并在沸騰45 min、淋洗20 min、回收10 min條件下能將脂肪在最大程度上抽取出來，可作為最優(yōu)條件。