陳嘉欣 王志超 楊 銳 駱其君 陳娟娟 陳海敏

（寧波大學(xué)，浙江省海洋生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/海洋學(xué)院，浙江 寧波 315211）

紫菜是重要的大型經(jīng)濟(jì)海藻，于我國(guó)東部沿海廣泛栽培。壇紫菜（Neoporphyra haitanensis）［1］的生產(chǎn)過程包括絲狀體室內(nèi)培育和葉狀體海區(qū)養(yǎng)殖兩個(gè)階段。每年3 月中下旬，利用前一年采收的成熟葉片采集果孢子或利用保存的絲狀體種質(zhì)接種貝殼，待其鉆入貝殼，生長(zhǎng)成為貝殼絲狀體。隨后，絲狀體擴(kuò)增生長(zhǎng)，并在高溫縮光等條件下被誘導(dǎo)形成殼孢子囊枝。處暑至白露前后，經(jīng)冷水刺激，成熟的殼孢子囊枝釋放殼孢子。殼孢子附著在網(wǎng)簾上，萌發(fā)成葉狀體［2］。葉狀體在海區(qū)栽培養(yǎng)成，11月底至翌年的2月收獲種菜。

近年來，由于秋季溫度反彈，紫菜農(nóng)場(chǎng)經(jīng)常經(jīng)歷超過30 ℃的持續(xù)高溫［3］，致使其易發(fā)生病爛，最終脫離栽培網(wǎng)，造成產(chǎn)量損失［4-5］。而且，在壇紫菜殼孢子采苗期間和海區(qū)栽培的前期，臺(tái)風(fēng)與高溫天氣時(shí)常發(fā)生，會(huì)影響殼孢子萌發(fā)和葉狀體生長(zhǎng)，嚴(yán)重時(shí)會(huì)引起大規(guī)模掉苗和爛苗，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失［6-7］。因此，行業(yè)發(fā)展迫切要求開發(fā)產(chǎn)量高、抗性強(qiáng)的新品種作為產(chǎn)業(yè)支撐。

紫菜育種是通過人為方式改變?cè)弩w的某些性狀，培育出能穩(wěn)定遺傳且具有優(yōu)良性狀的品種的過程［8］。目前壇紫菜有5 個(gè)國(guó)家審定的新品種，即申福1 號(hào)（GS-01-003-2009）、閩豐1 號(hào)（GS-04-002-2012）、申福2 號(hào)（GS-01-009-2013）、浙東1 號(hào)（GS-01-013-2014）和閩豐2 號(hào)（GS-01-010-2020）。這些新品種的育成與推廣大大推動(dòng)了紫菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，但與生產(chǎn)需求相比，良種數(shù)量和可提供苗種數(shù)量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)不足。

目前，關(guān)于紫菜抗高溫機(jī)制的研究是藻類學(xué)家關(guān)注的熱點(diǎn)［9-11］。在已有紫菜育種的研究報(bào)道中，多數(shù)為關(guān)注葉狀體的性狀分析，而對(duì)絲狀體的評(píng)價(jià)及報(bào)道則較少。然而，絲狀體選育是紫菜育種的首要環(huán)節(jié)，建立絲狀體優(yōu)良性狀評(píng)價(jià)體系，對(duì)提高良種選育效率，縮短選育時(shí)間十分重要。因此，本試驗(yàn)以壇紫菜不同品系GS-1（選育品系）、MF-2（閩豐2號(hào)）和FJ-W18（福建野生種）的絲狀體為研究對(duì)象，檢測(cè)其在高溫脅迫下的生長(zhǎng)速率、光合參數(shù)、光合色素含量、初始藻落密度、殼孢子放散量等生產(chǎn)性狀；通過品系間的比較分析，建立壇紫菜絲狀體生產(chǎn)性狀的評(píng)價(jià)指標(biāo)，以期為篩選高抗高繁殖力的優(yōu)良品系提供數(shù)據(jù)和理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與處理

本研究采用的壇紫菜自由絲狀體品系：選育品系（GS-1）和福建野生種（FJ-W18）為浙江省海洋生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室大型海藻種質(zhì)庫(kù)制備，閩豐2 號(hào)（MF-2）由集美大學(xué)謝潮添教授惠贈(zèng)。

選取色澤鮮紅、生長(zhǎng)狀態(tài)良好的自由絲狀體進(jìn)行試驗(yàn)。取文蛤殼刷洗干凈，用2%～3%稀鹽酸浸泡20 min 左右，繼續(xù)刷洗至表面干凈光潔，再次沖洗，晾干并滅菌。取約0.01 g 自由絲狀體，粉碎機(jī)徹底粉碎至0.2～0.3 mm 左右的小段，用10～20 倍海水稀釋，然后按照密度200～250 段·cm-2，均勻噴灑在貝殼上。

壇紫菜培養(yǎng)參照王素娟等［12］的方法，略有改動(dòng)。絲狀體接種貝殼完成后，先黑暗培養(yǎng)3 d，pH 值8.0±0.2，培養(yǎng)溫度為（22±1） ℃。隨后轉(zhuǎn)為光周期：10 h 光照/14 h 黑暗，光照強(qiáng)度6 μmol photons·m-2·s-1。接種貝殼14 d 后，清洗貝殼并更換培養(yǎng)液，光照強(qiáng)度升至30 μmol photons·m-2·s-1，其他條件不變，每7 d 換一次水，使貝殼浸沒在海水中。培養(yǎng)液為寧大Ⅲ號(hào)［13］母液與滅菌海水以1∶1 000（V/V）稀釋。

1.2 儀器與設(shè)備

GXZ 型智能光照培養(yǎng)箱，寧波江南儀器廠有限公司；WATER-PAM 葉綠素?zé)晒鈨x，德國(guó)Walz 公司；3001酶標(biāo)儀，美國(guó)Thermo Fisher Scientific 公司；1-16K 離心機(jī)，德國(guó)Sigma 公司；ECLIPSE Ti 倒置熒光顯微鏡、SMZ18體式熒光顯微鏡，日本Nikon公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 不同品系壇紫菜絲狀體相對(duì)生長(zhǎng)率測(cè)定 將不同品系壇紫菜自由絲狀體分別置于100 mL 錐形瓶中，在20、25、30、32 ℃條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為14 d，每個(gè)處理設(shè)置3 個(gè)重復(fù)。培養(yǎng)結(jié)束后將培養(yǎng)液用篩絹過濾，用鑷子將絲狀體挑出并用無菌濾紙吸附過多的水分，稱量鮮重，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。按照下列公式計(jì)算相對(duì)生長(zhǎng)率（relative growth rate，RGR）：

式中，W0表示藻體初始重量（g），Wt表示試驗(yàn)結(jié)束后藻體鮮重，t表示培養(yǎng)天數(shù)（d）。

1.3.2 不同品系壇紫菜絲狀體葉綠素?zé)晒鈪?shù)檢測(cè) 分別在1、4、7 和14 d，按照文獻(xiàn)［14］的方法，利用WATER-PAM 葉綠素?zé)晒鈨x測(cè)定樣品光系統(tǒng)Ⅱ（photo-system Ⅱ，PS Ⅱ）的最大光化學(xué)量子產(chǎn)量（maximum photochemical quantum of PSⅡ，F(xiàn)v/Fm）。用篩絹收集鮮重約0.01 g藻體，用無菌海水沖洗，以清除表面雜質(zhì)。將收集的絲狀體暗處理15 min 后，測(cè)定其Fv/Fm。

1.3.3 不同品系壇紫菜絲狀體葉綠素a 含量比較參照Wellvurn等［15］的方法測(cè)定不同品系壇紫菜自由絲狀體中葉綠素a（chlorophyll a，Chl a）的含量。稱取樣本鮮重0.02 g，液氮研磨，加入5 mL 無水甲醇，將研磨后的樣本轉(zhuǎn)移至離心管中，4 ℃避光浸提24 h后混勻靜置，取上清液。用酶標(biāo)儀測(cè)定在750、665 和652 nm 處樣本浸提液的吸光值，以無水甲醇作為空白對(duì)照。根據(jù)公式計(jì)算Chl a的含量（mg·g-1）：

式中，A750、A665、A652表示樣本在750、665、652 nm波長(zhǎng)下的吸光值，V 表示提取液的體積（mL），F(xiàn)W 表示藻體鮮重（g）。

1.3.4 不同品系壇紫菜絲狀體藻膽蛋白測(cè)定 參照熊玉琴等［16］的方法測(cè)定壇紫菜自由絲狀體中藻紅蛋白（phycoerythrin，PE）和藻藍(lán)蛋白（phycocyanin，PC）以及別藻藍(lán)蛋白（allophycocyanin，APC）的含量。準(zhǔn)確稱取各組別藻體0.02 g，液氮研磨后置于1.5 mL 離心管中，加入2 mL 磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline,PBS）。測(cè)定樣品上清液于565、615 和650 nm 處吸光值，以PBS作為空白對(duì)照。PE、PC和APC含量（mg·g-1）的計(jì)算公式如下：

式中，A565、A615和A650表示樣品在各波長(zhǎng)下的吸光值，V為提取液的體積（mL），F(xiàn)W為絲狀體鮮重（g）。

1.3.5 不同品系壇紫菜絲狀體鉆殼效率 參考孫霖清等［17］的方法，以絲狀體鉆入貝殼形成的初始藻落密度評(píng)估壇紫菜絲狀體的鉆殼效率。壇紫菜自由絲狀體接種貝殼14 d 后，洗去貝殼表面多余的藻體，并更換培養(yǎng)液，每組隨機(jī)選取8個(gè)貝殼，每個(gè)貝殼在體視顯微鏡下計(jì)數(shù)5個(gè)視野（放大倍數(shù)1×4）內(nèi)的藻落個(gè)數(shù)，根據(jù)視野面積計(jì)算單位面積內(nèi)的藻落個(gè)數(shù)，即初始藻落密度。

1.3.6 不同品系壇紫菜貝殼絲狀體促熟和殼孢子放散量計(jì)數(shù) 接種完成后，各品系貝殼絲狀體繼續(xù)培養(yǎng)50 d 后，將培養(yǎng)溫度升至29 ℃，光照強(qiáng)度30 μmol photons·m-2·s-1，光周期8 h 光照/16 h 黑暗，每7 d更換培養(yǎng)液，誘導(dǎo)貝殼絲狀體形成殼孢子囊枝。培養(yǎng)85 d左右時(shí)，殼孢子囊枝成熟，將單個(gè)貝殼放入200 mL燒杯中，加入50 mL 培養(yǎng)液充氣培養(yǎng)，溫度降至（25±1） ℃，促進(jìn)殼孢子放散。將50 mL 殼孢子水倒入直徑為9 cm 的培養(yǎng)皿內(nèi)，在倒置顯微鏡下，統(tǒng)計(jì)40 個(gè)視野（放大倍數(shù)10×10）內(nèi)的殼孢子數(shù)，取其平均值，根據(jù)視野面積與培養(yǎng)皿的底面積，計(jì)算出每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)的殼孢子數(shù)，即單個(gè)貝殼的殼孢子日放散量。每個(gè)貝殼在殼孢子開始放散后連續(xù)計(jì)數(shù)3 d，其總和為該貝殼的總殼孢子放散量。每組貝殼全部計(jì)數(shù)，取其平均值，為該組的平均放散量。每個(gè)貝殼在殼孢子開始放散后連續(xù)計(jì)數(shù)3 d，其總和為該貝殼的總殼孢子放散量。每組貝殼全部計(jì)數(shù)，取其平均值，為該組的平均放散量。

1.3.7 不同品系壇紫菜殼孢子放散量 按照上述貝殼接種方法，移植14 d 后洗去貝殼表面多余絲狀體，分別置于20、25、30 和32 ℃條件下培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為10 μmol photons·m-2·s-1，光周期為14 h光照/10 h 黑暗，每7 d 更換一次培養(yǎng)液，每2 周拍照觀察，促熟和殼孢子放散量計(jì)數(shù)同1.3.6。

1.3.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 采用Excel 2016、Designexpert-8、SPSS17.0 等統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差（One-Way ANOVA）、多因素方差（Multi-Factor ANOVA）和t-test 分析，Origin 2018繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品系壇紫菜絲狀體相對(duì)生長(zhǎng)率（RGR）

不同品系壇紫菜絲狀體的相對(duì)生長(zhǎng)率（RGR）如圖1所示。在不同溫度下，藻體相對(duì)生長(zhǎng)率從大到小依次為20 ℃＞25 ℃＞30 ℃＞32 ℃，20 ℃是各品系最佳生長(zhǎng)溫度，此時(shí)FJ-W18 的相對(duì)生長(zhǎng)率最高為2.72%，顯著高于GS-1（2.35%，P＜0.05）和MF-2（1.34%，P＜0.05）。25 ℃時(shí)各品系壇紫菜絲狀體的生長(zhǎng)較20 ℃稍有下降，GS-1 的相對(duì)生長(zhǎng)率為1.5%，顯著高于MF-2（0.45%，P＜0.05）和FJ-W18（0.79%，P＜0.05）。30 ℃高溫對(duì)紫菜絲狀體的生長(zhǎng)產(chǎn)生明顯抑制作用，雖然MF-2 的相對(duì)生長(zhǎng)率仍為正增長(zhǎng)，但長(zhǎng)幅極小，且GS-1 和MF-2的差異不顯著；而FJ-W18 受高溫影響最大。32 ℃是極限高溫，各品系均呈現(xiàn)負(fù)增長(zhǎng)。綜合而言，F(xiàn)J-W18雖然在20 ℃表現(xiàn)出高生長(zhǎng)率，但其抗高溫性狀表現(xiàn)較差；GS-1的抗高溫表現(xiàn)與MF-2無顯著差異，但其生長(zhǎng)速度更快，具有培育成為抗高溫良種的潛質(zhì)。

圖1 壇紫菜絲狀體在不同溫度下的相對(duì)生長(zhǎng)率Fig.1 RGR of the conchocelis of Neoporphyra haitanensis cultivars under different temperatures

2.2 不同品系壇紫菜絲狀體葉綠素?zé)晒鈪?shù)差異

Fv/Fm通常反映植物的光合能力。在健康生理狀態(tài)下，植物的Fv/Fm值穩(wěn)定；當(dāng)受到脅迫時(shí)，F(xiàn)v/Fm下降［18］。由圖2 可知，3 個(gè)品系壇紫菜絲狀體Fv/Fm下降幅度由小到大依次為20 ℃＜25 ℃＜30 ℃＜32 ℃。在20 ℃下，3 個(gè)品系的Fv/Fm比較穩(wěn)定（P＞0.05）。在25 ℃下，GS-1和MF-2表現(xiàn)相似，均較穩(wěn)定，7 d后FJ-W18的Fv/Fm與1 d 相比極顯著下降（P＜0.01）。在30 ℃下，GS-1和FJ-W18的Fv/Fm均在7 d時(shí)極顯著下降（P＜0.01），而MF-2在7 d時(shí)較1 d顯著下降（P＜0.05）。在32 ℃下，各品系絲狀體Fv/Fm均在4 d時(shí)極顯著下降（P＜0.01）。

圖2 不同溫度下壇紫菜品系絲狀體的Fv/FmFig.2 Fv/Fm of the conchocelis of Neoporphyra haitanensis cultivars under different temperatures

2.3 不同品系壇紫菜絲狀體葉綠素a含量差異

葉綠素a 是壇紫菜主要的光合色素，也是影響其光合作用的重要因子［19］。本研究測(cè)定了不同溫度下不同品系絲狀體的葉綠素a 含量，結(jié)果如圖3 所示。20 ℃下，各品系葉綠素a 含量無顯著變化；25 ℃時(shí)，各品系葉綠素a含量較20 ℃均有所下降，但比較穩(wěn)定；30和32 ℃時(shí)，MF-2 絲狀體葉綠素a 含量下降幅度大于GS-1 和FJ-W18；GS-1 葉綠素a 含量在30 ℃，7 d 時(shí)顯著降低（P＜0.05），F(xiàn)J-W18在32 ℃，7 d時(shí)顯著降低（P＜0.05）。在所有溫度下，GS-1葉綠素a含量均最高。

2.4 不同品系壇紫菜絲狀體藻膽蛋白的差異

光合色素是藻類進(jìn)行光合作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，其中藻膽蛋白參與光能傳遞，起著至關(guān)重要的作用［20］。GS-1、MF-2和FJ-W18壇紫菜絲狀體在不同溫度下的藻紅蛋白含量變化如圖4所示。20 ℃時(shí)，3個(gè)品系壇紫菜絲狀體的藻紅蛋白含量未隨時(shí)間發(fā)生顯著變化。25 ℃時(shí)，不同品系藻紅蛋白含量的降幅由大到小為FJ-W18＞GS-1＞MF-2。30 和32 ℃時(shí)，3 個(gè)品系的藻紅蛋白含量下降幅度變大，且下降幅度由大到小為MF-2＞FJ-W18＞GS-1；其中，MF-2 在30 ℃和32 ℃下藻紅蛋白含量下降最快，在32 ℃、14 d時(shí)，該數(shù)值接近于0。

圖4 不同溫度下壇紫菜品系絲狀體藻紅蛋白含量Fig.4 Phycoerythrin contents of the conchocelis of Neoporphyra haitanensis cultivars under different temperatures

壇紫菜絲狀體在不同溫度下的藻藍(lán)蛋白含量變化如圖5 所示。整體上MF-2 的藻藍(lán)蛋白含量在不同溫度下均為最高，其次為GS-1，F(xiàn)J-W18 最低。20 ℃時(shí)，各品系的藻藍(lán)蛋白含量隨時(shí)間延長(zhǎng)無顯著變化。25 ℃時(shí)，GS-1 藻紅蛋白含量隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而下降，在7 d 時(shí)極顯著降低（P＜0.01）；MF-2 藻藍(lán)蛋白含量變化無顯著差異；FJ-W18藻藍(lán)蛋白含量變化明顯，在4 d時(shí)極顯著降低（P＜0.01）。在30 和32 ℃高溫下，3 個(gè)品系的藻藍(lán)蛋白含量下降趨勢(shì)相同，且MF-2 藻藍(lán)蛋白含量下降幅度大于GS-1和FJ-W18。

圖5 不同溫度下壇紫菜品系絲狀體藻藍(lán)蛋白含量Fig.5 Phycocyanin contents of the conchocelis of Neoporphyra haitanensis cultivars under different temperatures

壇紫菜絲狀體在不同溫度下的別藻藍(lán)蛋白含量變化如圖6 所示。20 ℃時(shí)，各品系的別藻藍(lán)蛋白含量隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)無顯著變化。25 ℃時(shí)，各品系的別藻藍(lán)蛋白含量均呈下降趨勢(shì)，且都在7 d 時(shí)呈顯著性差異（P＜0.05）；30 和32 ℃時(shí)，各品系的藻藍(lán)蛋白含量下降趨勢(shì)相似，且降幅比25 ℃大，其中GS-1 和MF-2 別藻藍(lán)蛋白含量降幅大于FJ-W18。

圖6 不同溫度下壇紫菜品系絲狀體別藻藍(lán)蛋白含量Fig.6 Allophycocyanin contents of the conchocelis of Neoporphyra haitanensis cultivars under different temperatures

2.5 不同品系壇紫菜絲狀體鉆殼效率的比較

GS-1 絲狀體的初始藻落密度為5 760 個(gè)·cm-2，顯著高于MF-2 和FJ-W18（P＜0.05）；是MF-2 絲狀體初始藻落密度（4 167個(gè)·cm-2）的1.38倍，是FJ-W18絲狀體初始藻落密度（3 360 個(gè)·cm-2）的1.71 倍（圖7）。這表明GS-1絲狀體具有更高的鉆殼效率。

圖7 壇紫菜品系絲狀體的初始藻落密度Fig.7 Initial algal colony densities of the conchocelis of Neoporphyra haitanensis cultivars

2.6 不同品系壇紫菜殼孢子放散量的比較

當(dāng)接種量相同，在不同溫度培養(yǎng)14 d后，隨溫度升高，貝殼絲狀體生長(zhǎng)越快，但32 ℃時(shí)各品系貝殼絲狀體的生長(zhǎng)明顯受到抑制，MF-2 和FJ-W18 貝殼幾乎漂白，而GS-1 雖仍保留少量貝殼絲狀體，但3～4 d 后同樣全部漂白（圖8-A）。經(jīng)相同條件促熟后，各品系殼孢子放散量最高是在20 ℃下培養(yǎng)的貝殼絲狀體，其次為25 ℃組，殼孢子放散量最低的是30 ℃組；GS-1貝殼絲狀體殼孢子放散量在不同溫度培養(yǎng)條件下均為最高，其次是MF-2 和FJ-W18（圖8-B）。20 ℃時(shí)，GS-1殼孢子放散量顯著高于MF-2和FJ-W（P＜0.05），25 ℃時(shí)，GS-1 殼孢子放散量顯著高于FJ-W（P＜0.05），與MF-2 無顯著差異，30 ℃時(shí)各品系殼孢子放散量均無顯著差異（圖8-C）。

圖8 壇紫菜品系的殼孢子放散情況Fig.8 Numbers of conchospores released of Neoporphyra haitanensis cultivars

3 討論

溫度是影響壇紫菜絲狀體生長(zhǎng)發(fā)育的重要環(huán)境因子。研究表明，壇紫菜自由絲狀體在19～23 ℃生長(zhǎng)最快，且隨著溫度的上升，低于最適溫度時(shí)促進(jìn)生長(zhǎng)，高于最適溫度后減緩或抑制生長(zhǎng)［21］。本研究中，GS-1在25 ℃中的生長(zhǎng)表現(xiàn)優(yōu)于MF-2 和FJ-W18，表現(xiàn)出較好生長(zhǎng)特性，具備培育抗高溫品系的潛力。壇紫菜自由絲狀體能耐受的極限高溫為29 ℃［21］，前人推測(cè)由于高溫破壞藻體細(xì)胞結(jié)構(gòu)，抑制相關(guān)“促進(jìn)生長(zhǎng)類”激素合成，導(dǎo)致藻體出現(xiàn)生長(zhǎng)抑制現(xiàn)象［22-23］。本研究中，在30 ℃以上高溫時(shí)，所有品系紫菜生長(zhǎng)都受到明顯抑制，與前人發(fā)現(xiàn)一致。

光合作用是植物響應(yīng)熱脅迫的關(guān)鍵生理過程之一。在光合組織中，光系統(tǒng)Ⅱ（photosystem Ⅱ，PSⅡ）被認(rèn)為是最敏感的組分，主要限制應(yīng)對(duì)環(huán)境擾動(dòng)和脅迫（如高溫、光強(qiáng)等）的光化學(xué)反應(yīng)［24］。Fv/Fm值反映了光系統(tǒng)Ⅱ的最大光量子產(chǎn)量［25］，是藻類應(yīng)對(duì)各種脅迫時(shí)響應(yīng)最迅速的參數(shù)之一，其變化程度可以反映藻體受脅迫的強(qiáng)弱［26］。高溫脅迫后紫菜PSⅡ受到損傷，導(dǎo)致Fv/Fm值下降［27］。本研究中，各品系絲狀體在高溫脅迫下PSⅡ的Fv/Fm值均極顯著下降，證明該參數(shù)對(duì)篩選抗高溫品系有較好評(píng)價(jià)參考，可用作抗高溫篩選的指標(biāo)。

光合色素的組成及其含量變化與藻體生理活性密切相關(guān)。葉綠素a是光合作用的中心色素［28］，葉綠素a在光和作用中直接參與光反應(yīng)，葉綠素a 含量越高，光合能力越強(qiáng)，增產(chǎn)潛力越強(qiáng)［29-30］。藻膽蛋白是紫菜光合作用中重要的輔助色素，有利于藻類在自然界中的生存競(jìng)爭(zhēng)［31］；同時(shí)，藻膽蛋白具有較強(qiáng)的抗氧化活性，在抗脅迫方面發(fā)揮著重要作用［32］。本研究中，在不同溫度下，隨時(shí)間延長(zhǎng)，GS-1 絲狀體葉綠素a 含量均高于MF-2 和FJ-W18。3 個(gè)壇紫菜品系的藻膽蛋白含量均隨溫度升高和培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而降低，且溫度越高，藻膽蛋白含量降幅越大。雖然GS-1 絲狀體藻膽蛋白含量稍遜低于抗高溫良種MF-2，但GS-1 隨溫度和時(shí)間變化下降幅度顯著低于MF-2 和FJ-W18。GS-1 光合色素指標(biāo)的綜合表現(xiàn)佐證了該品系具有抗高溫的優(yōu)勢(shì)。因此，通過檢測(cè)葉綠素a 和藻膽蛋白含量及其變化幅度也可以幫助篩選抗高溫品系。

初始藻落密度高，說明自由絲狀體鉆殼效率高，能更快布滿貝殼，形成更密的藻絲層［33］；殼孢子放散量提高表示絲狀體能夠產(chǎn)生更多生產(chǎn)用苗種［34］。因此，這兩個(gè)參數(shù)可以作為篩選高繁殖力良種的指標(biāo)。本研究中，在不同溫度下GS-1 均比MF-2 和FJ-W18 有更高的初始藻落密度和殼孢子放散量，進(jìn)一步說明該品系具備成為高繁殖力良種的潛力。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果顯示，相對(duì)生長(zhǎng)率、最大光化學(xué)量子產(chǎn)量（Fv/Fm）、葉綠素a 和藻膽蛋白含量，以及自由絲狀體鉆殼效率（初始藻落密度）和貝殼絲狀體殼孢子放散量等指標(biāo)可以用于評(píng)價(jià)壇紫菜絲狀體生長(zhǎng)生理指標(biāo)和生產(chǎn)性狀，作為良種選育的重要參數(shù)。綜合各指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，品系GS-1表現(xiàn)出較高的抗高溫性能和高繁殖力，具備培育成良種的潛力。