劉丹媚,何璐,何朝勇

(1.中國(guó)藥科大學(xué)藥學(xué)院,江蘇 南京 210009;2.中國(guó)藥科大學(xué)天然藥物活性組分與藥效國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 南京 211198)

血管內(nèi)膜增生是由于血管壁損傷的一種愈合反應(yīng),其中涉及血管組織中眾多類(lèi)型細(xì)胞的參與。當(dāng)血管受到血管成形術(shù)、支架植入術(shù)和血流模式改變等侵襲時(shí),內(nèi)皮細(xì)胞受損,血小板細(xì)胞發(fā)生聚集并招募白細(xì)胞黏附和浸潤(rùn)損傷部位,引起血栓形成和炎癥。血小板和白細(xì)胞釋放的炎癥因子和生長(zhǎng)因子促進(jìn)平滑肌細(xì)胞從中膜向內(nèi)膜遷移并在內(nèi)膜下層增殖造成管腔內(nèi)狹窄[1]。正常生理情況下,VSMCs表現(xiàn)為靜止以及低增殖狀態(tài),通過(guò)促收縮型蛋白如α-SMA、SM22α、SMMHC和鈣調(diào)蛋白等,維持血管張力。當(dāng)血管損傷后, VSMCs轉(zhuǎn)化為去分化型,收縮型蛋白顯著降低,引起VSMCs細(xì)胞增殖和遷移,進(jìn)一步合成和分泌大量的細(xì)胞外基質(zhì),從而促進(jìn)血管內(nèi)膜新生的形成[2]。以上表明,VSMCs表型轉(zhuǎn)化在血管內(nèi)膜新生的形成過(guò)程中扮演著舉足輕重的角色。

研究報(bào)道,機(jī)械力、整合素、細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子等,通過(guò)調(diào)控VSMCs分化的核心轉(zhuǎn)錄因子參與VSMC表型轉(zhuǎn)化[3]。目前已報(bào)道的主要轉(zhuǎn)錄因子有血清響應(yīng)因子(serum response factor,SRF)、心肌素(myocardin)、Krüppel-like因子4 (KLF4)、叉頭盒蛋白O4(forkhead box protein O4,FOXO4)、轉(zhuǎn)錄激活因子ETS樣蛋白1(ETS-like 1 transcription factor,ELK-1)、特異性蛋白1(specificity protein 1,Sp1)和Yin Yang-1(YY1)等[4]。SRF作用于大多數(shù)收縮基因的近端啟動(dòng)子或內(nèi)含子中的CArG[CC(A/T)6GG DNA序列]調(diào)控元件維持VSMCs收縮表型。心肌素以及心肌素相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子A和B(myocardin-related transcription factors A and B,MRTF-A和-B)作為一種強(qiáng)有效的SRF共激活因子,增強(qiáng)SRF與CArG調(diào)控元件的結(jié)合和招募額外的調(diào)節(jié)因子發(fā)揮作用[5]。研究發(fā)現(xiàn),KLF4是血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF-BB)引起的重要調(diào)控因子,通過(guò)調(diào)控多種機(jī)制下調(diào)收縮相關(guān)基因的表達(dá),包括與G/C抑制元件結(jié)合和抑制Myocardin/SRF與CArG調(diào)控元件結(jié)合。SP-1 的磷酸化和核轉(zhuǎn)位促進(jìn)KLF4的表達(dá),促使VSMCs從分化向去分化轉(zhuǎn)變[6]。FOXO4抑制轉(zhuǎn)錄共激活因子 Myocardin活性從而抑制 VSMCs 分化表型[7]。YY1通過(guò)抑制Myocardin的活性和阻礙SRF與CArG結(jié)合元件下調(diào)VSMC收縮型蛋白,如SM22α、SMα-actin和SMMHC[8]。轉(zhuǎn)錄因子ELK-1是ETS結(jié)構(gòu)域蛋白的三元復(fù)合物,p-ELK-1和KLF4共同結(jié)合G/C抑制元件抑制VSMCs收縮表型[9]。

因此,闡明VSMC表型轉(zhuǎn)化的調(diào)控機(jī)制可能為治療血管內(nèi)膜增生性疾病提供理論基礎(chǔ)與潛在治療策略。本文將對(duì)近年來(lái)調(diào)控VSMCs表型轉(zhuǎn)化相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和分子通路的研究做一綜述。

1 MAPK信號(hào)通路

絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是屬于一種絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶。配體與酪氨酸激酶受體結(jié)合后引起酪氨酸殘基磷酸化,進(jìn)而激活大鼠肉瘤蛋白(Rat sarcoma,Ras) 、纖維肉瘤激酶(Rapidly accelerated fibrosarcoma,Raf) 、 絲裂原活化蛋白激酶激酶(Mitogen-activated protein kinase kinase,MEK)和MAPK,調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。真核細(xì)胞主要存在3條MAPK信號(hào)通路,即細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK1/2)通路、C-JUN N末端激酶(JNK-SAPK)通路和p38分裂原通路[10]。研究發(fā)現(xiàn),PDGF-BB、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)等細(xì)胞因子,激活VSMCs中MAPK級(jí)聯(lián)反應(yīng)調(diào)控VSMC去分化的轉(zhuǎn)錄因子,如SRF、KLF4和Elk-1等從而促VSMC增殖和遷移[11]。近年來(lái),已有大量研究報(bào)道MAPK信號(hào)通路在內(nèi)膜新生中介導(dǎo)VSMCs增殖和遷移的作用。多種先導(dǎo)化合物,如斑蝥素[12]、百里醌[13]和三七皂甙R1[14]等均通過(guò)抑制MAPK信號(hào)通路,從而緩解VSMCs遷移以及增殖,進(jìn)而減緩內(nèi)膜新生形成。

2 TGFβ信號(hào)通路

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是屬于一組調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的TGF-β家族成員之一。哺乳動(dòng)物中包括TGFβ1、TGFβ2和TGFβ3 這三種亞型,以無(wú)活性的前體形式,依賴于蛋白酶水解方式發(fā)揮生物學(xué)功能。研究表明,TGFβ對(duì)于VSMCs表型轉(zhuǎn)化具有重要的調(diào)控作用。TGF-β與TGF-β Ⅱ型受體(TβRⅡ)結(jié)合和磷酸化,激活Smad2/3/4復(fù)合物并易位細(xì)胞核,結(jié)合VSMCs基因啟動(dòng)子中的特定DNA序列(Smad binding elements,SBE)或識(shí)別收縮表型相關(guān)基因的GC的啟動(dòng)子序列,從而發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用[15]。

小鼠VSMCs特異性敲除Smad4時(shí),α-SMA、SM22α、calponin、SMMHC以及轉(zhuǎn)錄因子Myocardin和SRF的表達(dá)均顯著降低。ShRNA 沉默VSMC中Smad2和Smad3亦得到上述類(lèi)似的結(jié)果,這表明Smad2/3/4通路是參與TGF-β誘導(dǎo)VSMCs的分化、增殖和遷移的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[16]。研究報(bào)道,Smad2/3可直接結(jié)合收縮表型特異性基因的啟動(dòng)子或與SRF/Myocardin相互作用維持VSMCs收縮表型[17]。TGFβ激活SM22α轉(zhuǎn)錄依賴于 Smad3結(jié)合SM22α的第一個(gè)外顯子中的SBE并與SRF形成復(fù)合體[18]。Ad-Smad3轉(zhuǎn)染和TGFβ共刺激VSMCs通過(guò)上調(diào)Krüppel-like因子5(KLF5)抑制收縮表型[19]。除此之外,有文獻(xiàn)報(bào)道,TGFβ信號(hào)通路可引起MircoRNA(miRNA)變化,參與調(diào)控VSMCs表型轉(zhuǎn)化。在人類(lèi)冠狀動(dòng)脈SMCs中,TGFβ1通過(guò)P38 AMPK和Smad3/4信號(hào)通路,顯著上調(diào)miR-143/145的表達(dá),從而維持SMCs的分化表型[20]。

TGFβ對(duì)VSMCs增殖和遷移的調(diào)控作用頗具爭(zhēng)議。大量文獻(xiàn)證實(shí),TGFβ作為VSMCs增殖的強(qiáng)效刺激因子。在移植動(dòng)脈硬化的內(nèi)膜增生病灶中,TGFβ表達(dá)明顯增加。利用TβRI激酶抑制劑 SD-208可減緩小鼠主動(dòng)脈同種異體移植物中的內(nèi)膜增生[21]。在體外實(shí)驗(yàn)中,敲除Smad4或者下調(diào)Smad2和Smad3蛋白顯著抑制VSMCs的增殖和遷移[16]。在大鼠頸動(dòng)脈損傷模型中,Smad3 的過(guò)表達(dá)激活ERK/MAPK級(jí)聯(lián)反應(yīng)從而加劇VSMCs增殖[22]。上調(diào) TGF-β/Smad3 信號(hào)通路也被證明可刺激經(jīng)典 Wnt 的分泌,進(jìn)而加強(qiáng)β-連環(huán)蛋白的穩(wěn)定性促進(jìn) VSMCs 增殖[23]。但是,另外有研究表明,激活TGF- RII/smad2信號(hào)通路可降低PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs增殖和遷移[23]。他莫昔芬誘導(dǎo)的SMCs特異性敲除TβRII成年小鼠表現(xiàn)出SMC基因表達(dá)異常和主動(dòng)脈增厚等病變,這一結(jié)果表示VSMCs 基礎(chǔ)狀態(tài)下TGF-β信號(hào)通路有助于維持出生后主動(dòng)脈穩(wěn)態(tài)[24]。綜上,TGF-β對(duì)VSMCs的調(diào)控呈現(xiàn)截然不同的結(jié)果,可能與影響下游信號(hào)通路密切有關(guān),從而共同維持內(nèi)部穩(wěn)態(tài)。

3 PI3K-Akt-mTOR信號(hào)通路

磷脂酰肌醇-3-羥激酶(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase,PI3K)具有絲氨酸/蘇氨酸(Ser/Thr)激酶活性,其p85亞基被G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)或受體酪氨酸激酶(RTK) 激活后, p110 催化亞基轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜上并催化磷脂酰肌醇(4,5)-雙磷酸(phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate,PIP2)轉(zhuǎn)化為磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸[phosphatidylinositol (3,4,5) -triphosphate,PIP3],其中PTEN可使PIP3 去磷酸化為 PIP2負(fù)調(diào)控PI3K 活性。第二信使PIP3招募并促使PDK1磷酸化 AKT,并將信號(hào)傳遞給雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)調(diào)控下游核糖體 S6 激酶(p70S6K)和4E 結(jié)合蛋白 1(4EBP1)等靶點(diǎn)從而參與VSMCs表型轉(zhuǎn)化和促進(jìn)內(nèi)膜新生[25]。

大量文獻(xiàn)證明, PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路在VSMCs表型轉(zhuǎn)化中起到促進(jìn)去分化的作用。當(dāng)VSMCs特異性缺失PTEN時(shí),PI3K-AKT-mTORC1信號(hào)通路持續(xù)激活導(dǎo)致 SM22α和鈣調(diào)蛋白等收縮表型標(biāo)志物減少以及加劇內(nèi)膜新生[26]。在正常生理狀態(tài)下,PETN與SRF的 N端結(jié)構(gòu)域相互作用促進(jìn)SRF與VSMCs收縮表型基因的啟動(dòng)子元件結(jié)合維持其收縮表型[27]。除此之外,mTORC1復(fù)合物在VSMCs表型轉(zhuǎn)化中亦起到關(guān)鍵作用。研究表明,mTORC1/S6K通路誘導(dǎo)VSMCs去分化,而雷帕霉素治療可恢復(fù)VSMCs收縮表型并減少膠原合成[28]。雷帕霉素逆轉(zhuǎn)mTORC1/S6K對(duì)PI3K的抑制作用從而選擇性激活A(yù)KT2-FOXO4, FOXO4從細(xì)胞核轉(zhuǎn)移到細(xì)胞質(zhì)解除對(duì)Myocardin的抑制作用,從而誘導(dǎo)SMMHC、SM-α-actin和鈣調(diào)蛋白的表達(dá)[29]。綜上,PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路有望成為防治血管內(nèi)膜新生相關(guān)疾病潛在靶點(diǎn)。

4 Notch信號(hào)通路

Notch信號(hào)通路是由受體Notch1、Notch2和Notch3,配體Jag 1(Jagged)和DLL (Delta-like) 4配體以及細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)分子組成。經(jīng)典N(xiāo)otch信號(hào)通路激活后,ADAM金屬蛋白酶和γ-分泌酶分別切割Notch受體的S2和S3位點(diǎn),釋放Notch胞內(nèi)片段(Notch intracellular doain,NICD)并轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核與轉(zhuǎn)錄因子CSL蛋白結(jié)合,調(diào)控下游靶基因HES(Hairy/enhancer of split)和HEY(Hey-hairy/enhancer-of-split related with YRPW motif family members)等在內(nèi)的堿性螺旋-環(huán)-螺旋(Basic helix-ring-helix,bHLH)家族轉(zhuǎn)錄因子,從而調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖[30]。

目前研究表明,Notch信號(hào)在內(nèi)膜新生中調(diào)控VSMC表型轉(zhuǎn)化的作用尚不明確。大部分研究顯示Notch信號(hào)通路是VSMCs分化必不可少。在血管生成過(guò)程中,VSMCs表達(dá)Notch受體與血管內(nèi)皮細(xì)胞Jag1配體結(jié)合激活Notch信號(hào)通路從而誘導(dǎo)α-SMA和SM-22α等收縮表型標(biāo)記物表達(dá)[31]。 腺病毒過(guò)表達(dá)VSMCs中NIC片段,并利用 RNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)分析和比較基因表達(dá)譜。結(jié)果表明,Notch信號(hào)通路的持續(xù)激活導(dǎo)致VSMCs收縮表型相關(guān)基因如SMMHC、Myocd、Cnn-1等表達(dá)增強(qiáng)[32]。在內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞共培養(yǎng)的3D細(xì)胞模型中,siRNA干擾內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)Jag1,可使平滑肌細(xì)胞Notch3和收縮表型標(biāo)記蛋白SM22α和calponin降低[33]。另有研究證明Jag1/Notch信號(hào)通路靶向激活miR143/145從而間接調(diào)控VSMC分化相關(guān)的基因表達(dá)[34]。但仍有少部分研究支持Notch信號(hào)通路可促進(jìn)VSMCs向合成型轉(zhuǎn)化。在體外實(shí)驗(yàn)中,組成性活化人VSMCs的 NICD1和NICD3持續(xù)激活Notch信號(hào)通路從而下調(diào)平滑肌收縮表型標(biāo)記物α-actin、calponin、myosin和smoothelin表達(dá)[35]。

由于體內(nèi)復(fù)雜的生理環(huán)境和病理因素,Notch信號(hào)通路在內(nèi)膜新生中發(fā)揮著不同的調(diào)控作用。對(duì)人動(dòng)脈內(nèi)膜切除術(shù)后動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的血管組織進(jìn)行Notch蛋白免疫熒光染色,發(fā)現(xiàn)Notch1定位于內(nèi)皮細(xì)胞,而Notch2和Notch3定位于中膜和內(nèi)膜的VSMCs,且 Notch3蛋白定位與SMMHC高度重合以及表達(dá)豐富。由此可得出 Notch3可能是人類(lèi)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中更穩(wěn)定的SMC標(biāo)記物[36]。在肺動(dòng)脈高壓(pulmonary arterial hypertension,PAH)小鼠模型中,Notch3標(biāo)記的VSMCs亞群是新生內(nèi)膜細(xì)胞的主要來(lái)源[37]。因此,抑制Notch信號(hào)通路可能改善內(nèi)膜新生。大量研究表明,Notch1和Notch3可促進(jìn)VSMCs增殖和遷移。研究證實(shí),VSMCs中Notch信號(hào)通路特異性失活可減少動(dòng)脈粥樣斑塊中纖維帽的產(chǎn)生[38]。局部血管周?chē)f送 Notch 1 siRNA 可顯著抑制血管損傷誘導(dǎo)的內(nèi)膜新生[39]。在小鼠靜脈移植模型中,γ-分泌酶抑制劑DAPT抑制Notch1信號(hào)通路從而減緩靜脈移植內(nèi)膜增生[40]。此外,可溶性Jagged-1被證明可阻斷Notch1/Hey2信號(hào)通路發(fā)揮治療小鼠靜脈移植再狹窄[41]。相反,Notch2在內(nèi)膜新生中扮演不同的角色。研究發(fā)現(xiàn), Notch2主要定位于受損血管非增殖區(qū)域,正向調(diào)節(jié) VSMC 中 Jag-1 誘導(dǎo)的 p27kip1表達(dá)和停滯生長(zhǎng)。因此,Notch2 的激活可能負(fù)向調(diào)節(jié) VSMC 增殖以減輕血管病變的嚴(yán)重程度[42]。但有趣的是,VSMCs特異性缺失Notch2對(duì)血管內(nèi)膜新生影響不大,這一結(jié)果表明血管重塑過(guò)程中存在其他途徑和介質(zhì)補(bǔ)償Notch2的缺失[43]。Baeten等[44]進(jìn)一步研究證實(shí)Notch2和Notch3對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的增殖具有相反的作用。PDGF-BB處理降低Notch2表達(dá)但增加Notch3表達(dá)。雖然Notch2和Notch3在調(diào)節(jié)VSMC增殖方面的作用相反,但其均促進(jìn)收縮分化。

綜上所述,Notch通路在VSMC表型調(diào)控中作用的不一致性,可能是由于配體的特異性和選擇性激活不同的Notch家族成員。因此,選擇特異性靶向 Notch配體或受體有助于精準(zhǔn)防治血管重構(gòu)類(lèi)疾病。

5 Wnt/β-catenin信號(hào)通路

Wnt是一種以自分泌或旁分泌發(fā)揮作用的分泌型糖蛋白。Wnt/β-catenin信號(hào)通路由分泌蛋白Wnt家族、Frizzled家族跨膜受體家族、糖原合成激酶3(GSK3)、腺瘤病大腸桿菌APC、Axin、β-catenin以及TCF/LEF(T細(xì)胞因子/淋巴增強(qiáng)因子)家族轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子組成。正常狀態(tài)下,β-catenin與鈣粘蛋白相互作用固定在細(xì)胞膜上介導(dǎo)細(xì)胞黏附,或在胞質(zhì)中通過(guò) APC/Axin/GSK-3β 復(fù)合體磷酸化后進(jìn)行泛素化降解。 當(dāng)Wnt/β-catenin信號(hào)通路激活時(shí)可導(dǎo)致β-catenin在細(xì)胞質(zhì)中積累并易位至細(xì)胞核,作為轉(zhuǎn)錄輔激活因子有助于靶基因的TCF/LEF的轉(zhuǎn)錄激活[45]。

近年研究表明,Wnt/β-catenin信號(hào)通路參與VSMCs表型轉(zhuǎn)化從而促進(jìn)內(nèi)膜新生形成。在頸總動(dòng)脈結(jié)扎小鼠模型中,β-catenin在內(nèi)膜新生VSMCs中高度表達(dá)。Wnt/β-catenin促進(jìn) VSMCs增殖和遷移主要通過(guò)促增殖基因Cyclin D的上調(diào)和增殖抑制基因p21的下調(diào)[46-47]。因此,抑制β-catenin可作為改善血管狹窄的潛在療法。在頸動(dòng)脈結(jié)扎后,VSMCs特異性敲除 β-catenin抑制新生內(nèi)膜VSMCs增殖,進(jìn)而減緩血管腔內(nèi)狹窄。Mmp2、Mmp9、Sphk1和S1pr1等合成表型標(biāo)志物在β-catenin缺失的VSMCs中表達(dá)減少。應(yīng)用β-catenin抑制劑PKF118-310和ICG-001治療發(fā)現(xiàn)以劑量依賴的方式抑制VSMCs的增殖[48]。Williams等[49]證實(shí)Ad-TOPTK腺病毒選擇性地靶向殺死β-catenin激活的細(xì)胞可抑制新生內(nèi)膜的形成,這表明該基因治療方法可能具有治療內(nèi)膜新生的潛力,從而降低靜脈移植和支架動(dòng)脈的失敗率。綜上,研究選擇性靶向抑制Wnt/β-catenin通路可為治療血管重塑疾病提供潛在靶點(diǎn)。

6 Hippo信號(hào)通路

Hippo信號(hào)通路是由多個(gè)激酶及其下游轉(zhuǎn)錄因子組成抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的通路。目前,Hippo信號(hào)通路的胞外信號(hào)通路和膜受體還不明確。當(dāng)感知到外界信號(hào)時(shí),胞內(nèi)啟動(dòng)磷酸化MST1/2和LATS1/2激酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)并作用于下游效應(yīng)因子YAP(yes-associated protein)和TAZ(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)誘導(dǎo)其降解。反之,YAP或TAZ易位進(jìn)入細(xì)胞核與轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子激活域(TEADs)形成復(fù)合物,調(diào)控增殖基因表達(dá)[50]。研究表明,在發(fā)育期和成熟期中Hippo信號(hào)通路對(duì)VSMCs表型表現(xiàn)出不同的調(diào)控作用。小鼠VSMCs特異缺失TEAD1由于血管壁發(fā)育不良在第14.5天出現(xiàn)胚胎致死性,這表明Hippo信號(hào)通路參與胚胎期VSMCs分化調(diào)控過(guò)程,是正常動(dòng)脈血管發(fā)育所必需的[51]。但VSMCs在靜息狀態(tài)時(shí), miR-15b/16靶向抑制Hippo/YAP從而維持VSMCs的收縮表型[52]。YAP/TAZ誘導(dǎo)VSMCs合成型主要通過(guò)阻礙SRF/Myocardin復(fù)合物與VSMC收縮基因啟動(dòng)子CArG區(qū)域的結(jié)合和促進(jìn)TEAD 靶基因CyclinD1表達(dá)從而發(fā)揮生物學(xué)功能[53-54]。

近來(lái)研究表明,Hippo/YAP信號(hào)通路在血管再狹窄中起到重要作用。大鼠頸總動(dòng)脈結(jié)扎誘導(dǎo)的動(dòng)脈重塑模型中,其模型組頸總動(dòng)脈YAP、TAZ和TEAD1蛋白水平明顯表達(dá)增加。VSMCs特異性敲除TEAD1和YAP可抑制VSMCs表型轉(zhuǎn)化和減緩小鼠內(nèi)膜增生[55]。Hippo信號(hào)通路除了直接調(diào)控增殖基因外,近年來(lái)被證明可上調(diào)PDGF-BB/PDGFRβ信號(hào)通路,參與 VSMCs增殖和新內(nèi)膜形成。抑制VSMCs內(nèi)源性 PDGFRβ可抑制其YAP1 的基礎(chǔ)表達(dá),表明血管損傷誘導(dǎo)的 PDGFRβ表達(dá)正反饋調(diào)節(jié) YAP1 的表達(dá)[56]。除此之外,亦有文獻(xiàn)報(bào)道Hippo信號(hào)通路與mTORC1通路協(xié)同調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。研究表明,TEAD1通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子SLC1A5,激活mTORC1信號(hào)通路,促進(jìn)VSMCs增殖和新生內(nèi)膜形成[57]。由于Hippo信號(hào)通路胞外信號(hào)通路不明確,有文獻(xiàn)報(bào)道GPCR信號(hào)會(huì)與Hippo信號(hào)通路發(fā)生串聯(lián)作用。3′-5′環(huán)磷酸腺苷(cAMP)可通過(guò)PKA磷酸化和降解YAP/TAZ從而抑制TEAD誘導(dǎo)的增殖和遷移[58]。血栓素A2受體信號(hào)通路也被證明可調(diào)控YAP/TAZ去磷酸化并入核從而促進(jìn)VSMCs的遷移和增殖[59]。同時(shí),有研究發(fā)現(xiàn)YAP的轉(zhuǎn)錄水平受SP-1轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控。利用SP-1抑制劑光輝霉素藥物洗脫支架顯著抑制YAP的表達(dá)從而減輕血管成形術(shù)中的支架內(nèi)再狹窄[60]。因此,激活Hippo或抑制YAP可能成為減少內(nèi)膜形成的潛在治療靶點(diǎn)。

7 總結(jié)與展望

綜上所述,VSMCs具有高度可塑性,在各種因素刺激下發(fā)生可逆地表型轉(zhuǎn)化。VSMCs在分化表型和去分化表型之間的可逆轉(zhuǎn)變是維持正常血管發(fā)育、成熟、修復(fù)和再生的重要組成部分,參與生物合成、增殖、遷移和收縮等多種生物學(xué)功能。本文綜述主要闡述MAPK、TGFβ、Notch、PI3K-AKT-mTOR、Wnt/β-catenin以及 Hippo信號(hào)通路調(diào)控VSMCs表型轉(zhuǎn)化在內(nèi)膜新生中的作用(見(jiàn)圖1)。但是,目前關(guān)于內(nèi)膜新生中VSMCs表型轉(zhuǎn)化的調(diào)控作用尚不明確。在內(nèi)膜新生這一復(fù)雜的病理過(guò)程中,VSMCs表型轉(zhuǎn)化不僅受到某個(gè)信號(hào)蛋白的影響,且多個(gè)信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)參與調(diào)控其過(guò)程。因此,今后的研究工作重點(diǎn)主要探討各個(gè)信號(hào)分子以及各個(gè)信號(hào)通路之間的相互聯(lián)系以及在VSMCs表型轉(zhuǎn)化中的作用,從而影響血管重塑疾病。識(shí)別驅(qū)動(dòng)VSMCs可塑性、異質(zhì)性和表型轉(zhuǎn)化的分子機(jī)制為防治血管重塑疾病提供潛在靶點(diǎn)。

圖1 VSMCs表型轉(zhuǎn)化的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)