馬玉輝，陳浩南，蔣 碩，阿依尼尕爾·阿不來提，李 海，葉斯哈提·胡安，奴爾蘭·阿克亞孜，楊開倫

（1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830052；2.昭蘇縣西域馬業(yè)有限責(zé)任公司，新疆 昭蘇 835600）

馬玉輝，陳浩南，蔣 碩，等.不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬驅(qū)蟲效果及血液生理指標(biāo)的影響［J］.畜牧與飼料科學(xué)，2023，44（2）：121-128.

寄生蟲病是馬屬動物常見的疾病，防治不科學(xué)會導(dǎo)致寄生蟲病在馬群中發(fā)病率升高，嚴(yán)重影響馬的健康。馬屬動物常見寄生蟲包括馬副蛔蟲、馬圓線蟲、毛細(xì)線蟲、細(xì)頸三齒線蟲和韋氏類圓線蟲等。馬消化道寄生蟲感染嚴(yán)重的情況下會導(dǎo)致馬匹生長發(fā)育受阻、營養(yǎng)不良、貧血、消瘦、下痢、胃腸炎，便秘與腹瀉等癥狀交替出現(xiàn)［1］，有些還會損傷胃腸道黏膜造成出血，降低某些胃腸道酶活性，嚴(yán)重者出現(xiàn)腸梗阻、疝痛，甚至引起死亡［2-5］。因此，應(yīng)用合理、有效的驅(qū)蟲藥物是防治馬腸道寄生蟲感染的主要手段。伊維菌素是常用的抗生素類藥物，對多數(shù)線蟲驅(qū)蟲效果明顯，其作用機(jī)制主要是抑制蟲體α-氨基丁酸的釋放，降低蟲體活性，繼而使蟲體死亡［6］。阿苯達(dá)唑能夠抑制蟲體利用葡萄糖，使其無法獲取能量而死亡［7］。吡喹酮對蟲體的糖代謝有明顯的抑制作用，可使蟲體糖原耗竭，并影響蟲體的離子平衡，適用于各種血吸蟲病的防治［8］。伊維菌素、吡喹酮和阿苯達(dá)唑是畜牧生產(chǎn)中常用的抗寄生蟲藥物，但其對伊犁馬的驅(qū)蟲效果及血液生理指標(biāo)的對比評價研究鮮見。因此，該試驗以伊犁馬為研究對象，通過使用伊維菌素、吡喹酮和阿苯達(dá)唑進(jìn)行驅(qū)蟲，旨在探究不同驅(qū)蟲藥驅(qū)蟲前后馬匹糞便中蟲卵種類及數(shù)量的變化以及驅(qū)蟲藥對馬匹血液生理指標(biāo)的影響，以期為伊犁馬的健康飼養(yǎng)及驅(qū)蟲藥的合理使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 驅(qū)蟲藥物

伊維菌素乳劑，規(guī)格：0.2%；吡喹酮片劑，規(guī)格：0.1 g；阿苯達(dá)唑片劑，規(guī)格：0.1 g；滅蟲舒，規(guī)格：0.36 g（阿苯達(dá)唑350 mg+伊維菌素10 mg）。以上驅(qū)蟲藥均購自漢中市新天源動物藥業(yè)有限責(zé)任公司。

1.2 試驗時間與地點(diǎn)

試驗于2021 年11 月5—18 日，在新疆維吾爾自治區(qū)伊犁哈薩克自治州昭蘇縣某馬場進(jìn)行。

1.3 試驗動物

選擇平均體重 （265.5±35.6）kg、出生日期相近、在同一草牧場放牧的1 歲伊犁馬40 匹，公母各半。試驗前對馬匹進(jìn)行寄生蟲感染的檢測，平均感染率相近。

1.4 試驗設(shè)計

將40 匹伊犁馬隨機(jī)分為5 組，每組8 匹，4公4 母，分別為對照組、試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組，進(jìn)行為期14 d 的驅(qū)蟲效果評價試驗。在相同的飼養(yǎng)管理和日糧營養(yǎng)水平條件下，對照組不驅(qū)蟲，4 個試驗組均驅(qū)蟲1 次。在驅(qū)蟲前及驅(qū)蟲后1、2、3、7、14 d 進(jìn)行蟲卵鑒別與計數(shù)，計算寄生蟲感染率，并在驅(qū)蟲后14 d 采集馬匹血液樣品，測定相關(guān)指標(biāo)。試驗分組、驅(qū)蟲方式及給藥劑量見表1。

表1 試驗設(shè)計及分組

1.5 飼養(yǎng)管理

試驗馬匹單廄飼養(yǎng)，8:00—24:00 在馬廄飼喂，0:00—8:00 在運(yùn)動場活動。試驗期間每日10:00、14:00 和20:00 分3 次飼喂優(yōu)質(zhì)干草，保證自由采食，自由飲水。馬匹驅(qū)蟲方法為經(jīng)口灌喂驅(qū)蟲藥。為了防止各試驗組與對照組交互感染，各組馬匹分別飼養(yǎng)在不同的圈舍和活動場，間隔30 m 以上。日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表2 日糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.6 樣品采集及指標(biāo)測定

1.6.1 蟲卵計數(shù)

于驅(qū)蟲前以及驅(qū)蟲后1、2、3、7、14 d 采集所有試驗馬匹當(dāng)天3 個時間點(diǎn)（8:00、16:00、24:00）的新鮮糞便，參考文獻(xiàn)［9-11］報道的方法鑒定糞便中蟲卵種類并進(jìn)行蟲卵計數(shù)。

1.6.2 血液樣品采集

驅(qū)蟲后14 d 早晨空腹頸部靜脈采集馬匹血樣，使用離心機(jī)制備血漿，血漿于-20 ℃冷凍保存，待測。

1.6.3 血液生理指標(biāo)測定

血液生理常值：白細(xì)胞（WBC）數(shù)量、中性粒細(xì)胞（NE）數(shù)量、淋巴細(xì)胞（LYM）數(shù)量、單核細(xì)胞（MC）數(shù)量、嗜酸性粒細(xì)胞（Eos）數(shù)量、嗜堿性粒細(xì)胞（Bas）數(shù)量、中性粒細(xì)胞百分率（Neu，%）、淋巴細(xì)胞百分率（LYM，%）、單核細(xì)胞百分率（MC，%）、嗜酸性粒細(xì)胞百分率（Eos，%）、嗜堿性粒細(xì)胞百分率（Bas，%）、紅細(xì)胞（RBC）數(shù)量、血紅蛋白（HGB）含量、血細(xì)胞比容（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞體積分布寬度變異 系 數(shù) （RDW-CV）、紅 細(xì) 胞 體 積 分 布 寬 度（RDW）。

血液凝血指標(biāo)：血小板（PLT）數(shù)量、平均血小板體積（MPV）、血小板分布寬度（PDW）、血小板壓積（PCT）。以上指標(biāo)均使用邁瑞B(yǎng)C-5000Vet 獸用全自動血液細(xì)胞分析儀（深圳）測定。

1.6.4 驅(qū)蟲效果判定

參考鄧海峰等［9］報道的方法。

1.7 數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2017 軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理，利用Graphpad Prism 8 軟件作圖，應(yīng)用SPSS 22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行單因素方差分析。試驗結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示，P＜0.05 表示差異顯著，P<0.01 表示差異極顯著，P>0.05 表示差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬糞便中蟲卵種類及數(shù)量的影響

不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬糞便中蟲卵種類和數(shù)量的影響結(jié)果見圖1。蟲卵種類共檢測出5 種，分別為馬副蛔蟲、馬圓線蟲、毛細(xì)線蟲、細(xì)頸三齒線蟲和韋氏類圓線蟲。驅(qū)蟲前各試驗組寄生蟲感染情況相近，毛細(xì)線蟲、細(xì)頸三齒線蟲和韋氏類圓線蟲的感染率較高，試驗Ⅲ組還感染馬副蛔蟲和馬圓線蟲。驅(qū)蟲后1 d 出現(xiàn)蟲卵排出高峰，且各試驗組馬匹糞便中發(fā)現(xiàn)馬副蛔蟲和馬圓線蟲；驅(qū)蟲后2 d各試驗組糞便中蟲卵種類和數(shù)量明顯減少；驅(qū)蟲后3 d 對照組糞便中蟲卵數(shù)量相對升高，各試驗組糞便中蟲卵種類明顯減少，只有馬圓線蟲、毛細(xì)線蟲和細(xì)頸三齒線蟲；驅(qū)蟲后7 d，對照組糞便中蟲卵數(shù)量持續(xù)升高，試驗Ⅱ組糞便中發(fā)現(xiàn)馬圓線蟲和毛細(xì)線蟲；驅(qū)蟲后14 d，除對照組糞便中蟲卵種類和數(shù)量較多，試驗Ⅱ組糞便中有少量馬圓線蟲、毛細(xì)線蟲和細(xì)頸三齒線蟲外，試驗Ⅰ組、試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組糞便中均未發(fā)現(xiàn)蟲卵。

圖1 不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬糞便中蟲卵種類和數(shù)量的影響

2.2 不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬驅(qū)蟲效果的影響

由表3 可知，使用不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬進(jìn)行驅(qū)蟲后，與對照組相比，試驗Ⅰ組、試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組馬匹糞便中每克糞便蟲卵數(shù) （eggs per gram，EPG）均降低了612.50 個（P<0.01）；試驗Ⅱ組EPG降低了562.50 個（P<0.01）。

表3 不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬驅(qū)蟲效果的影響 單位：個

2.3 不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬血液生理指標(biāo)的影響

由表4 可知，給伊犁馬經(jīng)口灌服不同驅(qū)蟲藥后，各組馬匹血液中白細(xì)胞數(shù)量、中性粒細(xì)胞數(shù)量、淋巴細(xì)胞數(shù)量、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量、中性粒細(xì)胞百分率、淋巴細(xì)胞百分率、單核細(xì)胞百分率、嗜酸性粒細(xì)胞百分率、紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白含量、血細(xì)胞比容、平均紅細(xì)胞體積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量、紅細(xì)胞體積分布寬度系數(shù)和紅細(xì)胞體積分布寬度無顯著（P>0.05）差異；試驗Ⅰ組單核細(xì)胞數(shù)量顯著 （P＜0.05）低于對照組，比對照組降低了38.89%；試驗Ⅳ組嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)量極顯著（P＜0.01）高于對照組和試驗Ⅰ組，分別比對照組和試驗Ⅰ組提高了109.10%和109.10%，顯著高于試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組，分別比試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組提高了76.92%（P＜0.05）和53.33%（P＜0.05）；試驗Ⅳ組嗜堿性粒細(xì)胞百分率極顯著（P＜0.01）高于對照組，比對照組提高了133.33%，顯著（P＜0.05）高于試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組，分別比試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組提高了66.25%和72.73%；試驗Ⅳ組平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度極顯著（P＜0.01）高于試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組，分別比試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組提高了4.10%和4.30%。

表4 不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬血液生理指標(biāo)的影響

2.4 不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬血液凝血指標(biāo)的影響

由表5 可知，使用不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬進(jìn)行驅(qū)蟲后，各試驗組血小板數(shù)量、血小板分布寬度和血小板壓積無顯著性（P>0.05）差異；對照組和試驗Ⅰ組平均血小板體積顯著（P＜0.05）高于試驗Ⅳ組，比試驗Ⅳ組分別提高了12.65%和13.86%。

表5 不同驅(qū)蟲藥對伊犁馬血液凝血指標(biāo)的影響

3 討論

胃腸道寄生蟲是影響馬屬動物健康的重要因素。寄生蟲的種類、數(shù)量和感染部位不同，對宿主的危害和影響也各有差異。馬屬動物胃腸道寄生蟲種類多、分布廣，主要以馬副蛔蟲、圓線蟲、馬尖尾線蟲、韋氏類圓線蟲等為主［12］。圓線蟲和馬副蛔蟲會導(dǎo)致宿主腸梗阻、腸破裂以及腸炎，嚴(yán)重時還會高度貧血，引發(fā)疝痛、動脈炎、胰腺炎等，并伴有一定的傳染性，導(dǎo)致幼駒發(fā)育遲緩，成年馬役用能力降低，造成極大損失［13］。因此，在馬屬動物的飼養(yǎng)管理中，寄生蟲防治是馬匹健康養(yǎng)殖的重要環(huán)節(jié)，做好驅(qū)蟲工作，加強(qiáng)馬屬動物寄生蟲感染的綜合防控，對馬產(chǎn)業(yè)的健康快速發(fā)展至關(guān)重要。

賽迪拉木等［14］使用伊維菌素預(yù)混劑對普氏野馬消化道寄生蟲驅(qū)蟲，發(fā)現(xiàn)普氏野馬寄生蟲感染率高達(dá)83%，EPG 范圍在400～1 200 個/g，驅(qū)蟲后7 d 感染轉(zhuǎn)陰率為77%，蟲卵減少率95%，消化道寄生蟲數(shù)量明顯減少。鄧海峰等［9］在馬駒糞便中鑒定出多種寄生蟲，驅(qū)蟲6 d 后發(fā)現(xiàn)馬駒腸道寄生蟲種類和數(shù)量明顯減少。吡喹酮是應(yīng)用較為廣泛的抗寄生蟲藥物，Slocombe等［15］使用吡喹酮給馬驅(qū)蟲，證實吡喹酮對寄生蟲感染的治療具有明顯作用。李麟等［16］研究發(fā)現(xiàn)，馬的肝片吸蟲感染率為100%，糞便中EPG為38.8 個/g，使用吡喹酮驅(qū)蟲后，未發(fā)現(xiàn)肝片吸蟲蟲卵。梁穎欣等［17］對廣東地區(qū)馬匹進(jìn)行驅(qū)蟲，檢查出馬感染有圓線蟲、馬副蛔蟲、類圓線蟲和馬蟯蟲，平均EPG 為126.67 個/g，使用阿苯達(dá)唑和伊維菌素驅(qū)蟲劑對馬匹進(jìn)行驅(qū)蟲后，蟲卵減少量≥90%。以上結(jié)果表明，馬屬動物消化道常感染各種寄生蟲，不同驅(qū)蟲藥對馬匹的驅(qū)蟲效果不同，且相同驅(qū)蟲藥對不同地區(qū)不同馬屬動物的驅(qū)蟲效果也存在差異。

馬匹寄生蟲感染的種類和數(shù)量與馬匹的品種、生活環(huán)境以及飼養(yǎng)管理息息相關(guān)。明·烏爾娜等［18］在新疆昭蘇進(jìn)行馬消化道寄生蟲感染情況調(diào)查時發(fā)現(xiàn)，馬匹感染消化道寄生蟲主要有馬圓線蟲、馬副蛔蟲、毛線蟲、三齒線蟲、尖尾線蟲、韋氏類圓線蟲和球蟲。該研究檢測馬匹共40 匹，經(jīng)形態(tài)學(xué)特點(diǎn)共鑒定出5 種寄生蟲，分別為馬圓線蟲、馬副蛔蟲、細(xì)頸三齒線蟲、毛細(xì)線蟲和韋氏類圓線蟲。與明·烏爾娜研究相比，感染的寄生蟲種類較少，可能與試驗馬匹均為舍飼且間隔距離較大有關(guān)，減少了感染的途徑。驅(qū)蟲后1 d 蟲卵數(shù)量較多，出現(xiàn)排卵高峰，這與驅(qū)蟲藥的藥效有關(guān)；驅(qū)蟲后2 d 和3 d 蟲卵數(shù)量及種類明顯下降；驅(qū)蟲后7 d 和14 d 飼喂伊維菌素和阿苯達(dá)唑及混合驅(qū)蟲藥劑組馬匹均未檢測出蟲卵，說明其對馬匹胃腸道寄生蟲有明顯藥效。對照組馬匹在整個試驗期間蟲卵數(shù)量和種類不斷變化，尤其在驅(qū)蟲后7 d和14 d 有明顯上升趨勢，這可能與對照組馬匹未進(jìn)行驅(qū)蟲，且寄生蟲反復(fù)感染、寄生、繁衍有關(guān)，從而導(dǎo)致糞便排出大量蟲卵。馬匹使用不同驅(qū)蟲藥驅(qū)蟲后，糞便中蟲卵數(shù)量明顯減少，且使用伊維菌素、阿苯達(dá)唑及混合驅(qū)蟲藥劑組蟲卵減少率為100%，說明其對伊犁馬胃腸道寄生蟲感染的治療效果較好。

血液是機(jī)體內(nèi)環(huán)境的重要組成，在物質(zhì)運(yùn)輸和體液免疫調(diào)節(jié)等方面具有重要作用。動物血液生理指標(biāo)能夠客觀反映機(jī)體的生理狀況，同時是診斷動物疾病的重要依據(jù)［19］。白細(xì)胞是機(jī)體血液中重要的血細(xì)胞，包括粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞［20］。單核細(xì)胞能夠吞噬異物產(chǎn)生抗體，在疾病的免疫方面起著重要作用，機(jī)體發(fā)生疾病或組織碎片較多時，單核細(xì)胞數(shù)量會增加［21］。淋巴細(xì)胞包括T 淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，是機(jī)體免疫應(yīng)答的重要部分。薛艷等［22］研究指出，淋巴細(xì)胞減少可能與寄生蟲對淋巴細(xì)胞的破壞作用有關(guān)。該研究中對照組馬匹血中淋巴細(xì)胞數(shù)量低于試驗Ⅳ組，單核細(xì)胞數(shù)量高于各試驗組，可能是由于對照組未進(jìn)行驅(qū)蟲，整個試驗期間寄生蟲數(shù)量較高，破壞了淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞數(shù)量的減少，又因寄生蟲感染，機(jī)體的免疫作用被激活，進(jìn)而使馬匹血中單核細(xì)胞數(shù)量有所上升。嗜酸性粒細(xì)胞在白細(xì)胞中的占比較小，在患有過敏反應(yīng)或寄生蟲病時其數(shù)量明顯增加［23］。Reimert 等［24］研究指出，當(dāng)機(jī)體感染線蟲、蛔蟲、絳蟲等蠕蟲時，嗜酸性粒細(xì)胞明顯增多，其能夠?qū)w內(nèi)寄生蟲蟲體產(chǎn)生實質(zhì)性損傷。在該試驗條件下，對照組和試驗Ⅱ組馬匹血中嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量略高于其余各組，分析其原因可能與對照組和試驗Ⅱ組馬匹感染寄生蟲較多或驅(qū)蟲不徹底仍有寄生蟲感染有關(guān)。馮輝等［25］研究發(fā)現(xiàn)，伊維菌素和阿苯達(dá)唑聯(lián)合使用會導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)輕微中毒癥狀，產(chǎn)生過敏反應(yīng)。鐘文偉等［26］研究指出，嗜堿性粒細(xì)胞是過敏反應(yīng)的重要效應(yīng)細(xì)胞，在過敏性疾病中起著重要調(diào)節(jié)作用。該研究中，試驗Ⅳ組馬匹血中嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)量極顯著高于對照組和試驗Ⅰ組，嗜堿性粒細(xì)胞百分率極顯著高于對照組，可能與試驗Ⅳ組使用伊維菌素和阿苯達(dá)唑的混合驅(qū)蟲藥驅(qū)蟲，導(dǎo)致馬匹出現(xiàn)了過敏癥狀，使嗜堿性粒細(xì)胞的數(shù)量有所升高有關(guān)。

大量研究表明，寄生蟲會通過吸食宿主血液來攝取營養(yǎng)維持生命，感染寄生蟲會導(dǎo)致宿主出現(xiàn)貧血、炎癥等［27］。血小板存在于哺乳動物血液中，在止血、傷口愈合等過程中具有重要作用，是評價機(jī)體凝血功能的重要指標(biāo)。肖鋒等［28］指出，寄生蟲可破壞血小板，且能夠損害血管壁，造成血小板減少。血小板的平均體積能反映機(jī)體的炎癥狀態(tài)。何寶強(qiáng)等［29］研究指出，胃腸道炎癥、血栓形成與血小板體積增加有關(guān)。血小板壓積指單位血液中所含的血小板所占體積占比。該研究中，對照組和試驗Ⅰ組馬匹平均血小板體積顯著高于試驗Ⅳ組，分析可能是由于寄生蟲感染導(dǎo)致馬匹發(fā)生炎癥或炎癥未消除，導(dǎo)致了馬匹血小板平均體積的增加。

4 結(jié)論

4 種驅(qū)蟲藥或其組合對伊犁馬腸道寄生蟲均有顯著的驅(qū)蟲效果，其中，阿苯達(dá)唑能夠顯著減少馬匹糞便中EPG 數(shù)量，有效防治寄生蟲感染，并能對馬匹血液生理常數(shù)有積極影響。