張清清 曲穎 蔡曉波 陸倫根

摘要：

膽汁淤積性肝病（CLD）是一類由免疫、遺傳、環(huán)境等因素導(dǎo)致膽汁流動(dòng)障礙，從而造成膽汁酸在肝臟和/或循環(huán)中的淤積的疾病。CLD發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，且治療困難，動(dòng)物模型作為人類疾病的替代對(duì)象，可以為探索疾病的病因病理及尋找合適的治療靶點(diǎn)提供平臺(tái)，本文就目前CLD動(dòng)物模型的研究進(jìn)展作一綜述。

關(guān)鍵詞：肝疾病； 膽汁淤積； 疾病模型， 動(dòng)物

Research advances in animal models of cholestatic liver disease

ZHANG Qingqing， QU Ying， CAI Xiaobo， LU Lungen. （Department of Gastroenterology， The First Peoples Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine， Shanghai 200080， China）

Corresponding author：

LU Lungen， lungenlu1965@163.com （ORCID：0000-0002-1533-4068）

Abstract：

Cholestatic liver diseases （CLD） are a series of diseases due to impaired bile flow and accumulation of bile acid in the liver and/or systemic circulation caused by immune， genetic， and environmental factors. The pathogenesis of CLD remains unclear and CLD is difficult to treat. As a substitute for human diseases， animal models can provide a platform for exploring the etiology and pathogenesis of the disease and finding appropriate therapeutic targets. This article reviews the current research advances in the animal models of CLD.

Key words：

Liver Diseases； Cholestasis; Disease Models， Animal

膽汁淤積性肝?。╟holestatic liver disease，CLD）是一類由免疫、遺傳、環(huán)境等因素導(dǎo)致膽汁形成、分泌和排泄障礙的肝膽疾病總稱。一項(xiàng)基于上海市慢性肝病的多中心流行病學(xué)研究［1］表明，在4 660例慢性肝病患者中，膽汁淤積的患病率為10.26%。CLD起病隱匿，臨床早期無(wú)明顯癥狀，進(jìn)展期可出現(xiàn)黃疸、尿色加深、皮膚瘙癢等一系列高膽紅素血癥相關(guān)表現(xiàn)，可進(jìn)一步發(fā)展為肝纖維化、肝硬化，甚至出現(xiàn)肝衰竭等終末事件。CLD根據(jù)發(fā)生部位可分為肝內(nèi)膽汁淤積和肝外膽汁淤積［2］，包括膽道閉鎖（biliary atresia，BA）、膽石性肝病、藥物性膽汁淤積性肝?。╠rug-induced cholestasis，DIC）、妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥（intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP）、IgG4性自身免疫性肝病、原發(fā)性膽汁性膽管炎（PBC）和原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）［3］。

CLD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，診斷困難，治療亟需解決。為了加深對(duì)CLD本身的認(rèn)識(shí)，同時(shí)幫助臨床醫(yī)師在探究CLD機(jī)制和尋找新療法的研究中更科學(xué)、合理地選擇工具，本文就CLD的動(dòng)物模型的制備、機(jī)制、優(yōu)缺點(diǎn)作一綜述。

1 BA動(dòng)物模型

BA是一種發(fā)生于嬰兒時(shí)期的肝臟內(nèi)膽管異常狹窄、阻塞或者完全缺失的疾病，可導(dǎo)致膽汁淤積、膽道反復(fù)炎癥、膽管纖維化［4］。新生兒膽汁淤積癥患病率為1/2 500，約34%～43%為BA［5］。本病病因尚未明確，如不及時(shí)診治，可迅速進(jìn)展至肝硬化、肝衰竭等終末期肝病而致死亡［6］。因此，對(duì)該病病因及發(fā)病機(jī)制的深入研究對(duì)于預(yù)防疾病尤為關(guān)鍵，而B(niǎo)A模型的構(gòu)建是為其提供重要條件。

（1）膽總管結(jié)扎BA模型：2008年，國(guó)內(nèi)學(xué)者張守華等［7］通過(guò)結(jié)扎5～6周齡BALB/c小鼠膽總管建立梗阻性黃疸模型，炎癥細(xì)胞變化與BA實(shí)際情況相符，術(shù)后剖腹可見(jiàn)近端膽總管囊性擴(kuò)張，膽囊增大，肝臟呈淤膽性改變，但該模型存在以下缺陷：①成年小鼠的膽道系統(tǒng)已經(jīng)發(fā)育成熟，與發(fā)生于嬰兒期的BA年齡不匹配；②臨床癥狀方面未很好地復(fù)現(xiàn)出BA的腹水等門靜脈高壓的并發(fā)癥；③病理組織學(xué)方面可見(jiàn)肝小葉結(jié)構(gòu)模糊，膽汁淤積及大量增生的膽管，以及片狀壞死的肝細(xì)胞，但未見(jiàn)到肝內(nèi)外膽管消失、肝纖維化甚至假小葉形成。而后國(guó)內(nèi)學(xué)者葛軍濤等［８］對(duì)該模型進(jìn)行改良，通過(guò)結(jié)扎新生BALB/c小鼠（出生后5～7天）的膽總管建立BA模型，術(shù)后2天出現(xiàn)黃疸、小便深黃、陶土樣大便、食欲不振、精神狀態(tài)差等癥狀，這與臨床上BA臨床癥狀有較為相似，術(shù)后10天左右出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組小鼠死亡高峰期。該模型的優(yōu)點(diǎn)在于造模方法相對(duì)簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，周期短，但也存在一些缺點(diǎn)：死亡小鼠解剖后可見(jiàn)增寬的膽總管、大膽囊，黃染的腸道及腎臟，但未見(jiàn)嚴(yán)重的肝硬化、門靜脈高壓、肝衰竭［3］等情況，這與臨床上患兒終末期表現(xiàn)不相符，其次該動(dòng)物模型制備在小鼠出生后5～7天進(jìn)行，無(wú)法完全模擬圍生期膽管閉鎖情況。

（2）毒素誘導(dǎo)BA模型：最初探索來(lái)源于1990年澳大利亞學(xué)者Harper和Kopp觀察到孕期進(jìn)食了藻類等植物的牛羊，產(chǎn)下的幼崽在出生后大量死亡，臨床表現(xiàn)符合膽汁淤積癥狀，病理組織學(xué)表現(xiàn)為慢性肝損傷、肝纖維化、肝細(xì)胞壞死及肝硬化等情況，但限于當(dāng)時(shí)醫(yī)學(xué)的局限性，未進(jìn)行動(dòng)物模型的探索［9-10］。2015年，國(guó)外學(xué)者［11］發(fā)現(xiàn)一種新型膽管損傷化合物“異黃酮、膽甾烯”，該化合物可造成斑馬魚(yú)幼蟲(chóng)的肝外膽道系統(tǒng)的選擇性破壞。該團(tuán)隊(duì)還發(fā)現(xiàn)斑馬魚(yú)基因組某個(gè)特定區(qū)域突變可增強(qiáng)該化合物的膽道毒性，可導(dǎo)致培養(yǎng)的新生小鼠肝外膽管細(xì)胞纖毛丟失，并破壞膽管細(xì)胞細(xì)胞極性和細(xì)胞膜的完整性。同時(shí)該團(tuán)隊(duì)證實(shí)該區(qū)域與人類BA易感性位點(diǎn)具有高度同源性。這研究進(jìn)一步證實(shí)了環(huán)境毒物在BA發(fā)生發(fā)展中的作用。2019年我國(guó)國(guó)內(nèi)學(xué)者楊一凡等［12］建立膽閉素誘導(dǎo)斑馬魚(yú)BA模型，通過(guò)膽道排泄功能證實(shí)膽道毒性，并將造模成功的斑馬魚(yú)轉(zhuǎn)移至不含膽閉素的培養(yǎng)水中，發(fā)現(xiàn)其無(wú)法生存超過(guò)12天，這提示膽閉素誘導(dǎo)的膽道畸形是不可逆的，以上在一定程度上揭示環(huán)境毒素與BA發(fā)生的潛在關(guān)系，為BA的預(yù)防和輔助治療提供一定的思路，但目前基于哺乳動(dòng)物的毒物誘導(dǎo)BA模型尚未報(bào)道，對(duì)于以上毒物對(duì)于膽管系統(tǒng)發(fā)育的具體影響尚未揭露，希望能進(jìn)一步建立起與人類BA相近的動(dòng)物模型。

（3）病毒誘導(dǎo)BA模型：目前有統(tǒng)一觀點(diǎn)認(rèn)為各種宮內(nèi)或圍產(chǎn)期感染是BA主要的病因，病毒感染觸發(fā)免疫反應(yīng)，導(dǎo)致膽道進(jìn)行性破壞［13］?；谝陨嫌^點(diǎn)，學(xué)者建立了第一個(gè)小鼠模型，將恒河猴輪狀病毒接種到剛出生的小鼠身上，使肝外膽管出現(xiàn)類似BA的表現(xiàn)［14］。但不幸的是，這個(gè)模型有幾個(gè)實(shí)際的限制影響實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性，包括病毒作用的時(shí)間和劑量，注射相關(guān)的腹部器官的損傷，以及菌株間的差異和模型的低存活率［15］。

2 膽石性肝病動(dòng)物模型

膽石癥是膽道系統(tǒng)的一種常見(jiàn)病，成年人患病率為11%左右［16］。當(dāng)膽汁的化學(xué)成分不平衡，膽固醇在膽汁中呈現(xiàn)過(guò)飽和狀態(tài)進(jìn)而沉淀析出，則會(huì)形成膽結(jié)石［17］。其次在一些溶血性疾病中，紅細(xì)胞破壞程度異常高，導(dǎo)致膽紅素過(guò)量，進(jìn)而形成膽石。此外，膽囊運(yùn)動(dòng)能力低下或收縮能力受損會(huì)影響膽囊內(nèi)膽汁的有效清除，導(dǎo)致膽汁高度濃縮，最后發(fā)展為膽石癥［18］。早期Tepperman等［19］通過(guò)給小鼠喂食含有膽固醇-葉酸的飲食制備膽石癥模型，這種飲食包含高脂肪、高膽固醇和0.5%的膽酸。該研究表明膽酸與膽固醇的結(jié)合對(duì)于膽結(jié)石的形成是必不可少的，而單獨(dú)的膽固醇不能誘發(fā)膽結(jié)石。而后，多位學(xué)者［20-21］對(duì)不同種系的小鼠進(jìn)行造模研究，揭示了Lith1和Lith2基因是膽結(jié)石易感性增加的主要原因。Wilund等［22］利用C57L/J小鼠飼以成石飲食研究耐力運(yùn)動(dòng)的抗結(jié)石效果，為耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可預(yù)防膽結(jié)石的觀點(diǎn)提供了證據(jù)。

3 DIC動(dòng)物模型

DIC是以膽管細(xì)胞損傷為特征，臨床表現(xiàn)為黃疸、瘙癢、堿性磷酸酶升高的疾病。最近一項(xiàng)國(guó)內(nèi)多中心流行病學(xué)調(diào)查［23］表明，在住院的藥物性肝損傷患者中，膽汁淤積型約占20.31%。

目前關(guān)于該病的發(fā)病機(jī)制及治療仍存在爭(zhēng)議，而動(dòng)物模型的研究與開(kāi)發(fā)是解決該問(wèn)題的關(guān)鍵步驟。膽汁酸鹽輸出泵（bile salt export pump，BSEP）是負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)膽汁酸鹽，定位于肝細(xì)胞膽小管側(cè)膜的一類ATP結(jié)合盒超家族蛋白。BSEP的抑制早先被認(rèn)為是一個(gè)關(guān)鍵的分子啟動(dòng)事件。藥物可通過(guò)抑制轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性、減少蛋白表達(dá)、改變其亞細(xì)胞定位、促進(jìn)其突變，影響膽汁酸的轉(zhuǎn)運(yùn)功能，從而影響膽汁酸的平衡［24］。基于以上基礎(chǔ)，有學(xué)者提出BSEP（Abcb11）-/-小鼠模型有助于闡述Bsep擾亂的連續(xù)影響，同時(shí)確定可能的膽汁酸運(yùn)輸系統(tǒng)替代方式。該模型的一個(gè)缺點(diǎn)是出現(xiàn)輕度非進(jìn)行性膽汁淤積，可能是由于小鼠的內(nèi)源性膽汁酸與人類相比具有更強(qiáng)的親水性［25］。Wang等［26］提出可以通過(guò)給BSEP-/-小鼠注射額外的膽汁酸來(lái)解決以上的問(wèn)題。

一些常見(jiàn)的肝損傷藥物也用于DIC模型的制備。氯丙嗪是世界衛(wèi)生組織治療精神類疾病的基本藥物，但該藥物含有許多不良反應(yīng)，其中包括膽汁淤積。目前氯丙嗪被認(rèn)為是通過(guò)直接抑制BSEP來(lái)誘發(fā)膽汁淤積，同時(shí)抑制BSEP和MDR3（肝細(xì)胞基底側(cè)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白）基因的表達(dá)，因該研究基于人的HepaRG細(xì)胞系，缺乏免疫細(xì)胞和其他的肝細(xì)胞的環(huán)境，且該細(xì)胞系來(lái)源于單一的男性捐贈(zèng)者，同時(shí)細(xì)胞系的膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體及膽汁酸合成能力有限，使這個(gè)模型有一定的局限［27］。國(guó)內(nèi)學(xué)者［28］使用氯丙嗪大鼠腹腔內(nèi)注射造模，大鼠血生化指標(biāo)符合DIC變化，電鏡下見(jiàn)擴(kuò)張的毛細(xì)膽管及淤膽樣改變，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張甚至崩解，線粒體腫大，小葉內(nèi)及匯管區(qū)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。該模型的缺陷在于：造模組存在死亡情況，藥物注射劑量需進(jìn)一步調(diào)整。環(huán)孢素A用于防止器官移植后的移植物排斥反應(yīng)。在環(huán)孢素A治療期間觀察到的最嚴(yán)重的副作用是腎臟毒性和肝臟毒性，肝臟毒性多表現(xiàn)為膽汁淤積并伴有低至中度高膽紅素血癥。與氯丙嗪類似，環(huán)孢素A處理的嚙齒動(dòng)物也被廣泛用作DIC的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，考慮該藥物影響膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及膜的流動(dòng)性，但關(guān)于不同親水性膽汁酸是否對(duì)以上因素有影響無(wú)進(jìn)一步研究［29］。

4 ICP動(dòng)物模型

ICP是一種CLD，指是在懷孕的最后3個(gè)月，零星出現(xiàn)復(fù)發(fā)性黃疸、瘙癢、膽汁酸水平升高和/或ALT/AST升高，可導(dǎo)致胎兒不良結(jié)局，如早產(chǎn)、呼吸窘迫綜合征或死胎［30-31］。ICP發(fā)生的危險(xiǎn)因素可能與遺傳、環(huán)境和激素等有關(guān)，但具體發(fā)生機(jī)制尚不清楚。目前研究最多的是ABCB4基因編碼MDR3蛋白，分布于肝細(xì)胞的毛細(xì)膽管面，在正常膽汁形成中存在重要作用，在ICP中，MDR3的突變達(dá)15%［29］。

此外，有研究表明雌激素在ICP的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。ICP多發(fā)生在妊娠的最后3個(gè)月，此時(shí)雌激素水平達(dá)到最大值，其次與單胎妊娠相比，雌激素水平增加的雙胎和三胎妊娠ICP發(fā)生率更高。有ICP家族史或個(gè)人史的婦女在接受高劑量雌激素口服避孕藥治療時(shí)，更容易出現(xiàn)ICP［32］。已經(jīng)確定的環(huán)境因素包括與血漿中硒含量增加有關(guān)的ICP發(fā)病率的增加，這在不同的季節(jié)里是不同的［33］。有研究［34］發(fā)現(xiàn)雌性激素，如雌二醇-17β-D-葡萄糖醛酸，是動(dòng)物體內(nèi)可逆性膽汁淤積的誘導(dǎo)劑。給嚙齒動(dòng)物注射合成的炔雌醇或雌二醇-17βD-葡萄糖醛酸酯可用于研究ICP的基本機(jī)制。

5 PBC動(dòng)物模型

PBC是一種針對(duì)肝內(nèi)中小膽管的自身免疫反應(yīng)引起的緩慢進(jìn)展的CLD。該疾病的特點(diǎn)是免疫介導(dǎo)的肝內(nèi)膽管的破壞和門靜脈炎癥。肝組織學(xué)特征包括早期的門靜脈炎癥，膽管周圍肉芽腫形成，肝門靜脈區(qū)嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，選擇性中小膽管破壞，進(jìn)而可發(fā)展為肝纖維化，甚至肝硬化［35］。PBC臨床表現(xiàn)多樣，可表現(xiàn)為瘙癢、乏力、黃疸、干燥綜合征、腹部不適、骨質(zhì)疏松等，而典型表現(xiàn)為膽汁淤積的血清學(xué)表現(xiàn)和抗線粒體抗體（AMA）陽(yáng)性［36］。

第一個(gè)創(chuàng)建的模擬PBC的模型包括帶有淋巴增生性（lpr）基因的MLL/lpr小鼠［37］。該基因?qū)е聡?yán)重的自身免疫性疾病，包括淋巴結(jié)病、高丙種球蛋白血癥、腎小球腎炎、關(guān)節(jié)炎和干燥綜合征等，且存在一定程度的AMA陽(yáng)性，同時(shí)，MLL/lpr小鼠呈現(xiàn)出類似PBC的組織學(xué)特征如非化膿性破壞性膽管炎、膽管受損甚至缺失等。在這個(gè)模型中，研究者在肝臟中觀察到較高水平的MHC Ⅱ類表達(dá)，且門靜脈中CD4+ T淋巴細(xì)胞占主導(dǎo)位置，考慮以上因素促進(jìn)自身免疫疾病的發(fā)展。該模型存在以下缺陷：（1）AMA陽(yáng)性率不高，大約為50%；（2）MLL/lpr小鼠會(huì)出現(xiàn)與人類PBC臨床特征不相符的情況，包括血清膽紅素、肝酶存在明顯差異；（3）MLL/lpr小鼠并沒(méi)有存活到肝硬化階段，早期大部分因相關(guān)的腎病已死亡［38］。在此基礎(chǔ)上，Zhang等［38］學(xué)者對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行改進(jìn)，創(chuàng)建了基于調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞（Treg）缺陷的Scurfy小鼠。Foxp3基因?qū)reg細(xì)胞的發(fā)育、維持和功能至關(guān)重要，而Scurfy小鼠存在該基因突變，導(dǎo)致Foxp3+ Treg細(xì)胞完全消失，進(jìn)而全身免疫性疾?。ㄈ鏟BC）的易感性增加。該模型表現(xiàn)出與人類相符的血清學(xué)、免疫學(xué)和組織病理學(xué)特征，但其局限性在于免疫耐受破壞嚴(yán)重，壽命短，不利于對(duì)PBC發(fā)病過(guò)程及進(jìn)展機(jī)制的研究［39］。另外，在白細(xì)胞介素2受體α（IL-2Rα）缺乏的基因敲除小鼠中，也取得了類似的疾病表型。IL-2Rα-/-小鼠表現(xiàn)出門靜脈淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和細(xì)胞因子如IFN-γ、TNF-α、IL-2的數(shù)量增加，與PBC早期變化相近，該模型有利于研究其早期發(fā)病機(jī)制。該模型的缺陷在于沒(méi)有形成肉芽腫，并未發(fā)展成慢性膽汁淤積［40］。此后又有學(xué)者［41］開(kāi)發(fā)了新的模型，通過(guò)引入Cl-/HCO-3陰離子交換蛋白2（AE2）基因失效的突變，來(lái)減少Treg細(xì)胞的數(shù)量。AE2參與胃質(zhì)子分泌和分泌素刺激的膽道HCO-3的釋放，其紊亂對(duì)膽汁酸、胃酸平衡有影響。成熟的Ae2（a，b）-/-小鼠顯示出與PBC相似的免疫和肝膽變化，但同樣也有與PBC不同的改變，包括胃酸分泌受損和AMA偏低。非肥胖糖尿?。∟ODc3c4）小鼠可發(fā)展出一種類似于PBC的自身免疫性膽道疾病，具有相似的免疫學(xué)和血清學(xué)特征。然而，NODc3c4小鼠也表現(xiàn)出一些PBC的非特異性特征，包括膽道擴(kuò)張和囊性病變，沒(méi)有出現(xiàn)慢性損傷性膽管炎。ARE-Del-/-小鼠的表型與人類PBC非常相似，尤其是在組織病理學(xué)、免疫學(xué)和血清學(xué)層面。與其他模型不同，這種小鼠模型是能體現(xiàn)出女性占優(yōu)勢(shì)的情況，有益于闡明女性對(duì)PBC的易感性增加背后的關(guān)鍵機(jī)制［42］。

6 PSC動(dòng)物模型

PSC是一種長(zhǎng)期的慢性肝病，以肝內(nèi)和/或肝外膽管的炎癥和纖維化為特征，導(dǎo)致多灶性膽管狹窄、慢性膽汁淤積，嚴(yán)重可進(jìn)展為終末期肝病。臨床上可表現(xiàn)為右上腹痛、瘙癢、疲勞、黃疸、肝腫大和脾腫大。10%～20%的PSC患者會(huì)自發(fā)地發(fā)展成膽管癌［43］。Mdr2-/-小鼠是最早用于研究PSC的動(dòng)物模型。Mdr2基因是人類MDR3（ABCB4）基因的同源物，編碼一種轉(zhuǎn)運(yùn)器，可將磷脂通過(guò)管狀膜分泌到膽汁中。Mdr2基因突變可導(dǎo)致膽管上皮細(xì)胞損傷、膽管纖維化、硬化性膽管炎，與人類PSC組織學(xué)病變相似。Mdr2-/-小鼠模型的主要缺點(diǎn)是無(wú)法創(chuàng)建合并IBD模型和無(wú)法模擬人類PSC肝細(xì)胞癌的自發(fā)發(fā)展［44］。第二個(gè)模型是基于肝臟囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)體（CFTR）的功能障礙會(huì)引發(fā)肝內(nèi)膽管阻塞、膽汁淤積、膽管增生、肝纖維化的原理而創(chuàng)建的。研究［45］表明，Cftr-/-小鼠可發(fā)展為漸進(jìn)性肝病，伴有局灶性膽管炎、漏出的膽汁和膽管增生。但Cftr-/-小鼠只表現(xiàn)出腸道表型，其他器官的病變輕微或不存在［46］，這與以上研究結(jié)果不相符。此外，Cftr-/-小鼠的這種腸道表型更類似于遠(yuǎn)端腸梗阻綜合征和胎糞回流，而不是PSC的典型IBD表型［47］。因此，該模型很少被作為PSC的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>

紅細(xì)胞生成性原卟啉癥是一種遺傳性血紅蛋白合成疾病，該疾病帶來(lái)的鐵螯合酶活性降低容易導(dǎo)致膽管上皮損傷而導(dǎo)致膽道纖維化，出現(xiàn)嚴(yán)重的肝臟疾病。鐵螯合酶缺陷（fch/fch）小鼠表現(xiàn)為明顯的膽汁淤積表型，血清肝酶增加，膽汁酸鹽和原卟啉增加，在3個(gè)月內(nèi)發(fā)生嚴(yán)重的肝纖維化并發(fā)展為肝硬化［48］。

α-萘基異硫氰酸酯（ANIT）是一種用于制備陽(yáng)離子芳香族聚氨酯的化學(xué)品，它能充分誘導(dǎo)大鼠和小鼠的膽汁淤積，導(dǎo)致膽管上皮細(xì)胞損傷，進(jìn)而導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死。長(zhǎng)期接觸ANIT會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)慢性膽管炎、膽管增生和膽管周圍纖維化的情況，以此出現(xiàn)了慢性ANIT模型［49］。3，5-二乙氧基羰基-1，4-二氫吡啶（DDC）是一種致卟啉劑和δ-氨基酮酸合成酶的強(qiáng)啟動(dòng)劑，會(huì)誘發(fā)小膽管的阻塞，從而引發(fā)膽汁淤積。DDC誘導(dǎo)的膽汁淤積癥以硬化性膽管炎和明顯的膽汁纖維化為特征，且伴有導(dǎo)管增生，該動(dòng)物模型制備簡(jiǎn)易，較好地模擬PSC相關(guān)情況，對(duì)進(jìn)一步探索PSC發(fā)病機(jī)制起關(guān)鍵作用［50］。因此，喂養(yǎng)嚙齒動(dòng)物的DDC可用于研究（異物引起的）慢性膽管病。石膽酸是一種有毒的內(nèi)源性膽汁酸，當(dāng)存在異常高的濃度時(shí)也會(huì)誘發(fā)膽汁淤積。據(jù)此，石膽酸嚙齒動(dòng)物模型可用于研究這種內(nèi)源性膽汁酸的作用，以及了解膽汁酸在膽汁淤積癥發(fā)病機(jī)制中的潛在作用［51］。

7 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，膽汁淤積是多種疾病過(guò)程中常見(jiàn)的病理改變，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，至今尚未完全闡明?；诖说哪Ｐ褪茄芯空咛剿髌浒l(fā)病機(jī)制、研究治療方法的方向。目前動(dòng)物模型存在一些問(wèn)題：（1）種內(nèi)差異。主要集中在造模菌種、動(dòng)物模型性別以及年齡的差異。同樣的菌種在不同品系的動(dòng)物中出現(xiàn)不同的表型，不同的動(dòng)物性別以及年齡對(duì)于模型制備的敏感性不同。（2）種間差異。包括不同種間膽汁酸成分親水性不同，膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的底物特異性不同，代謝解毒存在差異等［45］。（3）除了種內(nèi)種間差異之外，以上不同的動(dòng)物模型各有其特有的缺點(diǎn)。因此，應(yīng)充分認(rèn)識(shí)每個(gè)模型的具體局限性，根據(jù)不同的研究目的來(lái)選擇適當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型，并通過(guò)結(jié)合多種體內(nèi)嚙齒動(dòng)物模型來(lái)設(shè)計(jì)新的模型，從而規(guī)避局限性，努力建立一個(gè)低成本、方便操作、易于重復(fù)、病理改變與人類疾病相符的理想動(dòng)物模型。

利益沖突聲明：本文不存在任何利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：張清清負(fù)責(zé)資料分析，查閱文獻(xiàn)，撰寫(xiě)論文；曲穎、蔡曉波負(fù)責(zé)修改論文；陸倫根負(fù)責(zé)擬定寫(xiě)作思路，指導(dǎo)撰寫(xiě)文章并最后定稿。

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收稿日期：

2022-10-13；錄用日期：2023-01-13

本文編輯：王亞南

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