任朝穎，賀蝶，李楊，彭小倩，王睿，朱成科

（西南大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，重慶市水產(chǎn)科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，淡水魚類資源與生殖發(fā)育教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 402460）

錦鯉（Cyprinus carpio L.）是一種名貴的觀賞性魚類，隸屬于輻鰭魚綱、鯉形目、鯉科、鯉屬，被稱為“水中活寶石”和“會(huì)游泳的藝術(shù)品”，其祖先為紅色鯉，起源于我國廣西、江西、浙江的龍州錦鯉、興國紅鯉、金鯉，在日本經(jīng)改良培育和人工選育后，現(xiàn)已形成豐富的品種體系[1]。因錦鯉具有色彩鮮艷、適應(yīng)性強(qiáng)、飼養(yǎng)簡便、食性較雜、易于繁殖、對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境要求低等特點(diǎn)，加之其獨(dú)具的陽剛之美，深得國人的喜愛，在漁業(yè)轉(zhuǎn)型發(fā)展、休閑漁業(yè)提檔升級(jí)中發(fā)揮了重要作用，在我國觀賞魚貿(mào)易和消費(fèi)中占據(jù)了重要地位。隨著我國人民精神方面的追求不斷提高，錦鯉等觀賞魚的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和附加值也在持續(xù)升高。

小瓜蟲是水產(chǎn)養(yǎng)殖中常見的寄生蟲之一，屬原生動(dòng)物門、纖毛蟲綱、膜口目、凹口科、小瓜蟲屬[2]，是一種個(gè)體較大的纖毛原生動(dòng)物，主要寄生鯉、草魚、鯽等淡水魚體內(nèi)，侵襲魚類的鰓、皮膚、鰭條，在口腔、頭部、眼部等部位也可被附著，由于形成的胞囊在形態(tài)上呈肉眼可見的白色小點(diǎn)，故該病又稱為白點(diǎn)病。春未、初冬是此病的高發(fā)期，在光照和餌料缺乏、魚類苗種下塘體質(zhì)較差、管理不當(dāng)以及低溫條件下更易流行，造成極高的感染率和死亡率?；疾〉拿绶N或成魚死亡率可達(dá)60%以上，故該病又被稱為魚類的“癌癥”，對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)具有較大危害。被小瓜蟲感染的魚類，會(huì)出現(xiàn)攝食異常、游泳無力和應(yīng)激反應(yīng)減弱等癥狀，還會(huì)因?yàn)榧?xì)菌、病毒等病原菌的侵襲導(dǎo)致繼發(fā)性感染，進(jìn)一步加劇病情，造成經(jīng)濟(jì)損失。

2022年10月，西南大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)訓(xùn)基地養(yǎng)殖的錦鯉幼魚連續(xù)出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，對(duì)瀕死病魚進(jìn)行臨床癥狀分析、顯微鏡檢查、病理解剖，綜合診斷為小瓜蟲病?，F(xiàn)從該病例的發(fā)病、診斷、治療等方面，對(duì)錦鯉小瓜蟲病的防治方法進(jìn)行討論，以期為錦鯉養(yǎng)殖過程中預(yù)防和治療小瓜蟲病提供參考。

1 發(fā)病情況

于2022年10月20日，從重慶某養(yǎng)殖場(chǎng)購買一批300 尾錦鯉幼魚，體長（9.86±1.52）cm，體質(zhì)量（28.92±7.28）g，飼養(yǎng)于西南大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院循環(huán)水養(yǎng)殖池（4.2 m×5.2 m×0.8 m）。通過一個(gè)200 W的甬靈增氧泵，24 h 不間斷對(duì)養(yǎng)殖水體增氧。每天08：00、12：00、18：00 各投喂1 次，投喂量約為池塘魚總體質(zhì)量的3%，每天換水量為池水量的1/3。10月24日，天氣突變，連續(xù)7 d 氣溫降至15～19 ℃，10月27日飼喂時(shí)，發(fā)現(xiàn)錦鯉幼魚的鰭條及體表有少許小白點(diǎn)，攝食量減少，次日飼喂時(shí)發(fā)現(xiàn)部分個(gè)體離群獨(dú)游，且體表布滿白點(diǎn)，反應(yīng)遲鈍、游動(dòng)無力、食欲不振，并聚集到充氧頭所在位置上方；有少許病魚死亡，漂浮在水面上，共計(jì)19 尾，死亡率6.33%。

經(jīng)肉眼觀察可見，患病魚離群獨(dú)游、行動(dòng)緩慢、機(jī)體消瘦、食欲不振、呼吸困難、應(yīng)激反應(yīng)顯著降低，全身布滿或零星分布白色小點(diǎn)。感染初期，由于寄生蟲在體表不斷噬咬刺激魚體，導(dǎo)致魚表現(xiàn)狂躁，在水中側(cè)身急速亂蹭，體表分泌大量的黏液，似覆蓋一層白色薄膜，見圖1（a）。患病魚體表大量寄生蟲形成的直徑約1 mm 的白色小點(diǎn)，出現(xiàn)在皮膚、鰭條等部位。隨著病程的發(fā)展，體表鱗片逐漸脫落，表皮發(fā)炎、壞死，寄生蟲寄生在鰭條上，造成鰭條被蛀蝕、缺損，見圖1（b）。寄生在鰓上，引起黏液分泌量增加、鰓絲發(fā)炎變性或局部壞死、呼吸困難窒息而死；寄生在魚的眼部，引起眼睛腫脹發(fā)炎、眼球潰爛。

圖1 患病魚的體表癥狀

2 診斷方法

2.1 顯微鏡檢查

從患病魚池中撈取體表有較多白色小點(diǎn)的病魚3 尾，在超凈工作臺(tái)上分別刮取其體表小白點(diǎn)附著處的黏液，取少量黏液涂于滴有一滴無菌去離子水的清潔載玻片上，蓋上蓋玻片制成水封片，在顯微鏡下由4×10 倍鏡、10×10 倍鏡、40×10 倍鏡依次觀察。同時(shí)用眼科剪刀剪取部分鰭條和鰓絲，其他各組織按上述方法同樣制作2 個(gè)以上水封片進(jìn)行觀察。

觀察結(jié)果顯示，黏液、鰓絲和鰭條樣品中均出現(xiàn)多子小瓜蟲。幼蟲在顯微鏡下大多呈圓筒形或橢圓形，見圖2（a）；小瓜蟲長度為0.03～0.05 mm，前端相對(duì)尖銳，后端相對(duì)圓鈍，見圖2（b）；蟲體表面均勻分布相同長度的可擺動(dòng)的纖毛，見圖2（c）；蟲體的形態(tài)會(huì)因胞質(zhì)的流動(dòng)而不斷變化，蟲體內(nèi)部有兩個(gè)核，分別是位于后方呈圓形的大核和位于前端呈球形的小核，還可見一個(gè)較大的伸縮泡。其成蟲呈卵圓形或球形，見圖3（a）；長度為0.30～0.80 mm，蟲體表面同樣布滿纖毛，最顯著的特征是位于蟲體中部的大核呈馬蹄形或香腸形，見圖3（b）；小核呈球形位于大核之上，成蟲體內(nèi)有大量食物泡，見圖3（c），其活動(dòng)比幼蟲緩慢許多。結(jié)合鏡檢結(jié)果和臨床癥狀，初步診斷為小瓜蟲病。

圖2 患病魚體表黏液中的小瓜蟲

圖3 患病魚尾鰭刮取的小瓜蟲

2.2 解剖

從養(yǎng)殖池中取出患病嚴(yán)重的瀕死病魚3 尾于無菌超凈工作臺(tái)上，用無菌眼科剪剪開其鰓蓋，肉眼可見鰓絲黏液分泌增多、腫脹，鰓絲顏色變淺；解剖發(fā)現(xiàn)，腹壁肌肉完整，未見異常，脾臟、肝臟、腎臟、心臟、腸、鰾等內(nèi)臟器官形態(tài)、顏色均正常，均未觀察到明顯病變。用無菌接種環(huán)在肝臟及腹腔蘸取，接種于LB 培養(yǎng)基后于恒溫培養(yǎng)箱中28 ℃培養(yǎng)，24 h 后取出，從內(nèi)臟器官未分離到病原菌。綜合上述結(jié)果，綜合判定此次錦鯉幼魚發(fā)病為多子小瓜蟲引起的小瓜蟲病。

3 治療方法

針對(duì)發(fā)病的錦鯉幼魚，使用3 g/m3的亞甲基藍(lán)兌水稀釋后，每2 d 對(duì)養(yǎng)殖池全池潑灑1 次，根據(jù)治療情況連用1～3 次；采用1%的食鹽，每天1 次對(duì)發(fā)病魚池中的錦鯉幼魚浸浴4 h；將氟苯尼考、水產(chǎn)用多維（按產(chǎn)品使用說明）拌入餌料投喂，增強(qiáng)機(jī)體的免疫力。經(jīng)亞甲基藍(lán)和食鹽浸浴治療后，魚體表、鰓絲、鰭條上的小瓜蟲逐漸脫落，10 d 后未見錦鯉幼魚死亡，小瓜蟲病得到有效控制。

4 討論

“及早發(fā)現(xiàn)和檢測(cè)、科學(xué)診斷、合理用藥、積極治療、標(biāo)本兼治”是治療錦鯉疾病的總體原則[3]。人工養(yǎng)殖的錦鯉由于先天遺傳、養(yǎng)殖效果、性別年齡的不同，在免疫方面也表現(xiàn)出一定差異。通常來說，年齡較小、營養(yǎng)不良、規(guī)格較小的錦鯉，免疫機(jī)能低下，更易受到病原菌和寄生蟲的侵襲，反之，營養(yǎng)充足、機(jī)體強(qiáng)健的則抗病力較強(qiáng)，成活率也會(huì)較高。此外，由于水生和陸生動(dòng)物棲息環(huán)境的不同，在疾病診斷和治療上存在相對(duì)較大的難度，如發(fā)現(xiàn)不及時(shí)會(huì)造成較高的死亡率，更應(yīng)重視“預(yù)防為主，防治結(jié)合”的基本原則。在養(yǎng)殖前對(duì)池塘徹底消毒殺菌，投放入魚種前先消毒，嚴(yán)格把控水質(zhì)狀況，在養(yǎng)殖中適當(dāng)投喂黃芩多糖、益生菌等能增強(qiáng)魚類免疫的物質(zhì)。一旦發(fā)現(xiàn)異常，應(yīng)立即采取相應(yīng)措施，合理設(shè)計(jì)治療方案，精準(zhǔn)用藥，做到有效防治。

小瓜蟲病是水產(chǎn)行業(yè)危害較大的寄生蟲病之一，該病暴發(fā)迅速，有著較高的感染率和死亡率，一經(jīng)發(fā)病難以治療，目前雖報(bào)道了多種治療方法，但仍然沒有針對(duì)小瓜蟲的特效藥。小瓜蟲的生活史主要有3 個(gè)階段，分別是幼蟲期、成蟲期、包囊期，目前絕大部分方法是針對(duì)幼蟲期進(jìn)行治療，避免二次感染，或針對(duì)離體小瓜蟲進(jìn)行殺滅，對(duì)包囊期和體表的治療的研究報(bào)道較少。

醋酸亞汞、孔雀石綠等對(duì)于小瓜蟲病治療效果甚佳，但由于該類藥物具有致癌、致畸作用，對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境和人體健康有巨大危害，已被明令禁止使用[4]。在生物藥防治方面，姚嘉赟等[5]采用不同極性溶劑回流提取鏈霉菌發(fā)酵液制備的粗提物，對(duì)小瓜蟲幼蟲有不同程度的殺滅效果；閆春梅等[6]構(gòu)建大量重組質(zhì)粒制備抑動(dòng)蛋白基因核酸疫苗，用125 μg/尾的注射劑量肌肉注射免疫魚體發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比有一定的保護(hù)效果，但目前相關(guān)免疫研究還無法廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)。中草藥在治療疾病方面以其無殘留、無公害、效果好、毒副作用小等諸多優(yōu)點(diǎn)，在小瓜蟲病的防治上具有優(yōu)勢(shì)，應(yīng)用前景相對(duì)來說更加廣闊。文獻(xiàn)[7]表明，五倍子、丁香、黧豆葉、檳榔、番木瓜種子、肉桂、烏梅等中草藥成分或其有機(jī)提取物，可有效防治小瓜蟲病，配合升高水溫、辣椒生姜法、食鹽浸浴等方法可顯著提升治療效果。

對(duì)防治小瓜蟲病，應(yīng)遵循“預(yù)防為主，防治結(jié)合”的原則，預(yù)防遠(yuǎn)大于治療。保持良好的水質(zhì)、調(diào)控好養(yǎng)殖水溫、保持水體肥度、合理的放養(yǎng)密度、提高魚體免疫力、補(bǔ)充所需營養(yǎng)、定期抽查檢樣、使用免疫增強(qiáng)劑和底質(zhì)改良劑、外來苗種做好檢測(cè)、轉(zhuǎn)運(yùn)或分池時(shí)做好消毒等都是重要的預(yù)防措施。