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        繡球菌凍干片對(duì)S180 荷瘤小鼠抗腫瘤作用

        2023-04-24 07:14:24徐媛媛徐曉飛
        現(xiàn)代食品 2023年19期
        關(guān)鍵詞:荷瘤凍干球菌

        徐媛媛,陳 萌,徐曉飛

        (廣東海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,廣東 陽(yáng)江 529500)

        食用菌有悠久的食用和藥用歷史,因其富含纖維、多種營(yíng)養(yǎng)素、美味和低熱量而廣受歡迎,許多體外和動(dòng)物研究報(bào)告了食用菌的保健作用,如免疫調(diào)節(jié)、抗氧化等[1]。繡球菌是近年來(lái)人工培育成功的一種新興食用菌,子實(shí)體呈白色或淡黃色,外形似繡球,又名為花椰菜菇,野生資源非常稀少,是名貴食藥用菌[2],在生物學(xué)分類上隸屬繡球菌科(Sparassisidaceae)繡球菌屬(Sparassis)[3]。研究發(fā)現(xiàn),繡球菌中含有高比例高分子多糖、氨基酸和豐富的礦物質(zhì)和維生素[4],此外還有多酚類、黃酮類、萜類、生物堿、鄰苯二甲酸酯等活性成分[5],特別是β-(1,3)-葡聚糖的含量非常豐富。日本食品分析化驗(yàn)所測(cè)得β-(1,3)-葡聚糖含量為43.5 g/100 g干重[2];我國(guó)學(xué)者報(bào)道繡球菌柄部和瓣片部分的含量分別為54%和56%,極顯著高于猴頭菇、香菇、蛹蟲(chóng)草和草原黃蘑菇[6],為已知食用菌之最。因此,對(duì)食用菌進(jìn)行深加工有利于開(kāi)發(fā)食用菌資源,發(fā)揮其活性成分豐富的優(yōu)勢(shì)[7]。

        近年來(lái),我國(guó)腫瘤患者數(shù)量持續(xù)增長(zhǎng),給社會(huì)醫(yī)療系統(tǒng)帶來(lái)巨大負(fù)擔(dān)[8]。機(jī)體免疫功能特性與狀態(tài)在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移過(guò)程中具有重要的作用[9]。因此,增強(qiáng)腫瘤病人的免疫功能成為提高抗腫瘤治療效果的一個(gè)重要手段。在眾多具有激活機(jī)體免疫系統(tǒng)、提高免疫功能的天然活性物質(zhì)中,β-(1,3)-葡聚糖具有來(lái)源廣泛、活性強(qiáng)、耐受性好、副作用小等特點(diǎn)[10],已經(jīng)有超過(guò)10 000 項(xiàng)在同行評(píng)審期刊上發(fā)表的科學(xué)研究[11],也是眾多臨床試驗(yàn)的對(duì)象[12]。繡球菌是β-(1,3)-葡聚糖的良好來(lái)源,日本學(xué)者用繡球菌粉喂食接種S180 腫瘤細(xì)胞的小鼠5 周后,發(fā)現(xiàn)腫瘤重量明顯比對(duì)照組小,且小鼠生存時(shí)間延長(zhǎng)[13],提示繡球菌可應(yīng)用于輔助抑制腫瘤食品。在前期研究中,通過(guò)將繡球菌子實(shí)體粉碎結(jié)合微壓提取方式,開(kāi)發(fā)了一種繡球菌深加工標(biāo)準(zhǔn)化原料,并取得了食品原料標(biāo)準(zhǔn)備案[廣東省食品安全企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《繡球菌濃縮液》(Q/WQYS 0083 S—2022),備案號(hào):44020005S-2023][14]。為方便加工使用,進(jìn)一步將濃縮液凍干制得凍干片[廣東省食品安全企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《繡球菌凍干片(壓片糖果)》(Q/WQYS 0088 S—2023),備案號(hào):44020023S-2023]。本試驗(yàn)通過(guò)建立S180 荷瘤小鼠模型,探究繡球菌凍干片對(duì)S180 腫瘤的抑制作用,檢測(cè)小鼠細(xì)胞免疫和體液免疫功能指標(biāo)變化,分析腸道中短鏈脂肪酸(Short Chain Fatty Acids,SCFAs)水平,旨在為繡球菌凍干片的抗腫瘤作用及機(jī)理提供試驗(yàn)證據(jù),也為食用菌深加工方向提供一種參考。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

        4~8 周齡BALB/C 小鼠,雄性SPF 級(jí)100 只購(gòu)自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(粵)2022-0002,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)№440072001202044。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)環(huán)境:廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院SPF 級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室,設(shè)施使用許可證號(hào):SYXK(粵)2020-0059。試驗(yàn)倫理由廣東省第二中醫(yī)院試驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(049176)。

        1.2 材料與試劑

        繡球菌凍干片(0.5 g/片×3片/袋,每100 g含β-1,3-葡聚糖10.7 g),批號(hào):20230501,本研究團(tuán)隊(duì)研發(fā)并由上海雪榕源生物有限公司制造,推薦服用量1.5 g·d-1。破壁靈芝孢子粉膠囊(0.3 g/?!?0粒,每100 g含多糖1 g,總?cè)? g),批號(hào):2301091P142,廣州白云山漢方現(xiàn)代藥業(yè)有限公司,推薦服用量1.8 g·d-1。茯苓多糖口服液(每100 mL 含茯苓多糖1.6 g),批號(hào):20230601,湖南補(bǔ)天藥業(yè)股份有限公司,臨床治療推薦服用量30 mL·d-1。乙酸(純度99.8%)、丙酸(純度99.5%)、異丁酸(純度99.5%)、丁酸(純度99.5%)、異戊酸(純度99%)、戊酸(純度99%),上海麥克林公司。

        S180 細(xì)胞、L929 細(xì)胞,武漢普諾賽生命科技有限公司;1640 培養(yǎng)基,上海中喬新舟生物科技有限公司;胎牛血清,維森特生物技術(shù)(南京)有限公司產(chǎn)品;CCK-8 試劑盒,北京索萊寶科技有限公司;刀豆凝集素ConA,西格瑪奧德里奇(上海)貿(mào)易有限公司;小鼠白細(xì)胞介素2(IL-2)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、白細(xì)胞介素8(IL-8)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒,江蘇酶免實(shí)業(yè)有限公司。

        1.3 儀器與設(shè)備

        小型高速離心機(jī)(5450 型),德國(guó)Eppendorf 公司;電子天平(BSA2245 型),賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;Varsoskan Flash 多功能酶標(biāo)儀,美國(guó)Thermo 公司;倒置顯微鏡(DMi1 型),Leica 公司;GC-2010PLUS氣相色譜儀,島津儀器公司;DB-FATWAX 毛細(xì)管色譜柱,安捷倫儀器公司。

        1.4 試驗(yàn)方法

        1.4.1 S180 細(xì)胞培養(yǎng)

        S180 細(xì)胞復(fù)蘇后用含10%胎牛血清的培養(yǎng)基于5%CO2、37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),染色鑒定活細(xì)胞數(shù)≥95%,隨后用培養(yǎng)液調(diào)整至106個(gè)/mL 濃度。

        1.4.2 S180 荷瘤小鼠模型建立與試驗(yàn)分組

        取50 只小鼠腹腔注射S180 細(xì)胞,接種7 d 后,在無(wú)菌條件下取荷瘤小鼠的腹水與生理鹽水按1 ∶3 的比例稀釋至2×107~3×107個(gè)/mL 濃度。然后對(duì)剩余50 只小鼠右腋皮下注射0.2 mL 腹水稀釋液,建立S180 荷瘤小鼠模型[15],隨后按表1 將小鼠隨機(jī)分為5 組,每組10 只。本實(shí)驗(yàn)以造模當(dāng)天記為第“0 d”,造模次日,口服灌胃給藥體積0.2 mL,1 次/天,持續(xù)18 d。

        表1 S180 荷瘤小鼠分組與灌胃劑量設(shè)計(jì)表

        1.4.3 荷瘤小鼠體質(zhì)量、瘤體質(zhì)量、瘤體指數(shù)和體積測(cè)定

        每天觀察并記錄小鼠的活動(dòng)情況,在第2 d、4 d、6 d、8 d、10 d、12 d、14 d、16 d、18 d 測(cè)定小鼠的體重。給藥18 d 后斷頸處死小鼠,剖取腫瘤測(cè)定瘤重,按式(1)計(jì)算瘤體指數(shù)。

        式中:m1為腫瘤質(zhì)量,mg;m2為小鼠體重,g。

        用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤尺寸并按式(2)計(jì)算瘤體體積。

        式中:D為腫瘤最大直徑,cm,d為腫瘤最小直徑,cm[16]。

        1.4.4 腫瘤抑制率的測(cè)定

        根據(jù)式(3)計(jì)算各樣品的腫瘤抑制率。

        式中:M為模型組瘤重與小鼠體重的比值;N為試驗(yàn)組瘤重與小鼠體重的比值[15]。

        1.4.5 白細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞因子和臟器指數(shù)的測(cè)定

        結(jié)束實(shí)驗(yàn)后,小鼠麻醉后進(jìn)行眼眶采血,測(cè)定白細(xì)胞數(shù)量;4 ℃、3 000 r·min-1離心l0 min 收集血清,按ELISA 試劑盒操作方法分別測(cè)定小鼠血清中IL-2、IL-6、IL-8 和TNF-α 水平。無(wú)菌剖取小鼠胸腺、脾臟,準(zhǔn)確稱重并計(jì)算胸腺/脾臟指數(shù):臟器指數(shù)=臟器重量(mg)/小鼠體重(g)。

        1.4.6 脾淋巴細(xì)胞增殖活性和脾NK 細(xì)胞殺傷活性測(cè)定

        按照文獻(xiàn)制備脾細(xì)胞懸液[17],用含10%胎牛血清的RPMI1640 培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞數(shù)為2×106/mL 后,將細(xì)胞懸液加入細(xì)胞培養(yǎng)板(0.2 mL/孔),加7.5 μg·mL-1ConA(0.01 mL/孔),以未加ConA孔作對(duì)照孔,5%CO2、37 ℃飽和濕度下培養(yǎng)24 h,于培養(yǎng)結(jié)束前1 h 左右,每孔吸棄100 μL 培養(yǎng)液上清后加入CCK-8(0.01 mL/孔),并設(shè)RPMI1640培養(yǎng)液空白對(duì)照,各處理均采用3個(gè)復(fù)孔。用酶標(biāo)儀450 nm 波長(zhǎng)測(cè)定每孔OD值。脾淋巴細(xì)胞增殖活性=(刺激孔OD值/對(duì)照孔OD值)×100%。

        同上法制備脾細(xì)胞懸液,按文獻(xiàn)報(bào)道方法測(cè)定脾NK 細(xì)胞殺傷活性[18]。

        1.4.7 小鼠結(jié)腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸SCFAs 的測(cè)定

        無(wú)菌剖取小鼠腸組織,于冰上切開(kāi)腸組織,無(wú)菌PE管收集每只小鼠結(jié)腸內(nèi)容物,標(biāo)記后速凍、-80 ℃保存。按照文獻(xiàn)方法檢測(cè)內(nèi)容物中6 種短鏈脂肪酸的濃度[19]。

        1.5 統(tǒng)計(jì)方法

        所有計(jì)量資料以平均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示。多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA),相關(guān)性分析采用Pearson,由SPSS22.0 軟件完成,P<0.05 代表有顯著性差異。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 試驗(yàn)樣品對(duì)小鼠體重的影響

        如圖1 所示,給藥前各組小鼠體重?zé)o明顯差異(P>0.05);試驗(yàn)過(guò)程中,荷瘤模型組小鼠體重呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),GS 和PCP 組體重變化趨勢(shì)與模型組相似(16 d 前);SCL 和SCH 組體重開(kāi)始增長(zhǎng)緩慢然后明顯增加,16 d 后,SCL 和SCH 組小鼠體重均比GS 和PCP 組高。

        圖1 試驗(yàn)期間各組小鼠平均體重的變化圖

        2.2 試驗(yàn)樣品對(duì)小鼠存活率和腫瘤生長(zhǎng)的影響

        試驗(yàn)結(jié)束后,Model、GS、PCP、SCL 和SCH 組分別有4 只、2 只、1 只、2 只和2 只小鼠死亡,各組存活率和對(duì)腫瘤抑瘤作用見(jiàn)表2。各試驗(yàn)樣品均對(duì)S180腫瘤生長(zhǎng)有一定抑制作用;從瘤體指數(shù)分析,與模型組相比,各試驗(yàn)樣品均對(duì)S180 瘤體指數(shù)有極顯著的影響,GS 組和SCH 組的抑制效果相當(dāng),PCP 組和SCL組的抑制效果相當(dāng);從瘤體體積來(lái)看,PCP 組和SCL組的抑制效果相當(dāng)。SCL 組與SCH 組結(jié)果反映了繡球菌凍干片對(duì)腫瘤抑制作用具有劑量依賴性,高劑量?jī)?yōu)于低劑量。

        表2 荷瘤小鼠存活率和試驗(yàn)樣品對(duì)腫瘤抑制作用表

        2.3 試驗(yàn)樣品對(duì)荷瘤小鼠免疫功能的影響

        2.3.1 臟器指數(shù)

        白細(xì)胞是機(jī)體外周血中各種免疫細(xì)胞的統(tǒng)稱,包括T 細(xì)胞、NK 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、B 細(xì)胞等。免疫器官臟器指數(shù)一定程度反映了整體免疫功能強(qiáng)弱。由圖2 可知,各樣品對(duì)荷瘤小鼠的白細(xì)胞數(shù)量無(wú)顯著影響,對(duì)脾臟指數(shù)有一定提高作用,其中SCH 組顯著高于Model 組和PCP 組,說(shuō)明高劑量繡球菌凍干片能明顯提高脾臟指數(shù);各樣品均能極顯著提高荷瘤小鼠的胸腺指數(shù),但各試驗(yàn)組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

        圖2 試驗(yàn)樣品對(duì)荷瘤小鼠白細(xì)胞計(jì)數(shù)和臟器指數(shù)的影響圖

        2.3.2 細(xì)胞因子水平

        細(xì)胞因子水平反映了體液免疫功能的變化,對(duì)荷瘤小鼠外周血細(xì)胞因子水平的影響見(jiàn)圖3。在IL-2 水平上,PCP、SCL 和SCH 組顯著高于Model 組,然而各樣品對(duì)IL-6 和IL-8 作用不明顯,但可以顯著或極顯著提升TNF-α 水平,其中SCH 組提升程度最大。綜上所述,靈芝孢子粉、茯苓多糖和繡球菌凍干片能夠提高荷瘤小鼠IL-2 和TNF-α 水平。

        圖3 試驗(yàn)樣品對(duì)荷瘤小鼠細(xì)胞因子水平的影響圖

        2.3.3 細(xì)胞活性指標(biāo)

        脾淋巴細(xì)胞增殖活性和脾NK 細(xì)胞殺傷活性反映了機(jī)體細(xì)胞免疫功能。由圖4 可知,相比模型組,GS 組脾淋巴細(xì)胞增殖活性有提升但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而PCP、SCL 和SCH 組顯著增強(qiáng)(P<0.01);同時(shí),各樣品也顯著提升了荷瘤小鼠的NK 細(xì)胞殺傷活性,其中以SCH 組提升程度最高。

        圖4 對(duì)荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和NK 細(xì)胞殺傷活性的影響圖

        綜合臟器指數(shù)、細(xì)胞因子水平和細(xì)胞活性指標(biāo),靈芝孢子粉、茯苓多糖和繡球菌凍干片均具有提高荷瘤小鼠體液免疫和細(xì)胞免疫功能的作用。繡球菌凍干片對(duì)荷瘤小鼠的免疫增強(qiáng)作用存在劑量依賴性,以高劑量繡球菌凍干片的效果為好。

        2.4 試驗(yàn)樣品對(duì)腸道SCFAs 濃度的影響

        為考察試驗(yàn)樣品對(duì)腸道菌群代謝的影響,采用GC-MS 檢測(cè)了小鼠結(jié)腸內(nèi)容物中6 種SCFAs(乙酸、丙酸、異丁酸、丁酸、異戊酸和正戊酸)的濃度。Model、GS 和PCP 組各有一只小鼠的結(jié)腸內(nèi)容物中未檢測(cè)出SCFAs,繡球菌凍干片高低劑量組小鼠均可檢出,數(shù)據(jù)結(jié)果如圖5 所示。與模型組相比,各樣品組小鼠的6 種SCFAs 濃度有增加的趨勢(shì)但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,總SCFAs 濃度也呈現(xiàn)類似的結(jié)果,其中繡球菌凍干片SCL 和SCH 組 總SCFAs 分別為(3.40±0.24)mg·g-1和(3.42±0.12)mg·g-1,提示繡球菌凍干片的劑量對(duì)SCFAs 的濃度無(wú)明顯影響。

        圖5 試驗(yàn)樣品對(duì)荷瘤小鼠結(jié)腸內(nèi)SCFAs 濃度的影響圖

        2.5 免疫功能指標(biāo)與抑制腫瘤作用的相關(guān)性

        為探索免疫指標(biāo)與腫瘤抑制效果的關(guān)系,利用Pearson 進(jìn)行相關(guān)性分析,如圖6 所示,瘤體指數(shù)與IL-2、TNF-α 水平的Pearson 相關(guān)系數(shù)(R)分別為-0.538 和-0.536(P<0.01),表明瘤體指數(shù)與兩種細(xì)胞因子濃度具有中等程度的負(fù)相關(guān)性。

        圖6 免疫功能指標(biāo)與瘤體指數(shù)的相關(guān)性圖

        3 討論

        靈芝是我國(guó)傳統(tǒng)的食藥兩用真菌,孢子是靈芝的生殖細(xì)胞。三萜類化合物和多糖是靈芝孢子粉的主要活性成分[20],眾多研究表明靈芝孢子粉可以通過(guò)促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞功能、促進(jìn)NK 細(xì)胞活性和提高細(xì)胞因子分泌,以及調(diào)控程序性細(xì)胞死亡蛋白1 表達(dá)和調(diào)節(jié)腸道菌群平衡,從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)活性,實(shí)現(xiàn)增強(qiáng)機(jī)體免疫功能和抗腫瘤作用[21]。茯苓多糖占茯苓菌核重量的70%~90%,體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證明茯苓多糖通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫和體液免疫功能、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制侵襲轉(zhuǎn)移發(fā)揮抗腫瘤作用[22-23]。繡球菌中富含β-1,3-葡聚糖[2],從繡球菌中分離得到的β-1,3-葡聚糖在20~500 mg·kg-1劑量范圍注射S180荷瘤小鼠,可在小鼠體內(nèi)抑制腫瘤的生長(zhǎng)并呈現(xiàn)量效關(guān)系[24];從繡球菌中提取獲得的多糖,通過(guò)破壞細(xì)胞膜的完整性抑制人類結(jié)腸癌細(xì)胞系Caco-2、LS180 和HT-29 的增殖,表現(xiàn)出抗結(jié)腸癌的潛力[25];繡球菌多糖也可誘導(dǎo)白血病細(xì)胞K562、THP-1 細(xì)胞的凋亡[26]。此外,繡球菌多糖能提高免疫低下小鼠的脾臟指數(shù),增加白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞及血小板數(shù)量,增強(qiáng)T 淋巴細(xì)胞增殖能力,促進(jìn)脾免疫細(xì)胞分泌IFN-γ、TNF-α、顆粒酶B、穿孔素和IL-2,抑制IL-10 的分泌,證明繡球菌多糖可提高免疫低下小鼠細(xì)胞免疫和體液免疫功能[27]。由此可見(jiàn),繡球菌凍干片的抗腫瘤作用與繡球菌多糖的增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。同時(shí),繡球菌中除多糖類成分外,還有其他成分如蛋白質(zhì)和多酚類成分[5]。食用菌中蛋白質(zhì)和多酚成分也具有免疫調(diào)節(jié)作用,同時(shí)不同成分之間也可能存在協(xié)同作用[28]。然而,有關(guān)繡球菌中蛋白質(zhì)和多酚的免疫調(diào)節(jié)作用和機(jī)理暫無(wú)報(bào)道,有待未來(lái)的進(jìn)一步研究。

        本研究中,Pearson 相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)腫瘤指數(shù)與IL-2、TNF-α 濃度呈負(fù)相關(guān)。IL-2 是T 淋巴細(xì)胞和NK 細(xì)胞增殖和分化的刺激因子[29],IL-2 可調(diào)節(jié)CD4+T 細(xì)胞分化和功能,也調(diào)控與癌癥免疫治療有關(guān)的CD8+T 細(xì)胞的殺傷效應(yīng)和記憶反應(yīng)[30],CD8+T 細(xì)胞主要是細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞,具有殺傷包括被病原體感染的體細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的作用。TNF-α 主要由激活的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,TNF-α 通過(guò)與腫瘤細(xì)胞表面腫瘤壞死因子受體1(Tumor Necrosis Factor Receptor 1,NFR1)或TNFR2 結(jié)合,激活與細(xì)胞凋亡相關(guān)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB 和絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)信號(hào)通路,發(fā)揮抗腫瘤作用[31]。眾多研究表明β-葡聚糖可激活中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、NK 細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞,刺激細(xì)胞因子包括白介素IL-2 和TNF-α 的分泌,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和阻斷血管生成等多途徑發(fā)揮抗腫瘤作用[32]。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)樣品增加了荷瘤小鼠細(xì)胞因子IL-2 和TNF-α 濃度,有助于提升抗腫瘤效果,與前人研究結(jié)果相符。

        SCFAs 是腸道菌群的代謝物之一,具有調(diào)節(jié)宿主免疫細(xì)胞發(fā)育、分化和免疫系統(tǒng)功能的作用[33]。眾多研究表明,食用菌多糖可以調(diào)節(jié)腸道菌群組成和促進(jìn)SCFAs 的產(chǎn)生[34]。在本研究中,灌胃茯苓多糖、繡球菌多糖對(duì)結(jié)腸部位6 種SCFAs 和總SCFAs 濃度無(wú)明顯影響,表明試驗(yàn)樣品對(duì)荷瘤小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用可能是通過(guò)非SCFAs 依賴途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)。在小腸部位,由腸上皮細(xì)胞、固有層免疫細(xì)胞和派氏結(jié)等組成腸黏膜免疫系統(tǒng)是識(shí)別和響應(yīng)外來(lái)抗原物質(zhì)的主要系統(tǒng)[35],多糖可以通過(guò)免疫受體介導(dǎo)與黏膜免疫系統(tǒng)作用而調(diào)節(jié)整體免疫系統(tǒng)功能[36],由此說(shuō)明,食用菌多糖可以通過(guò)多種途徑實(shí)現(xiàn)免疫調(diào)節(jié)作用。

        4 結(jié)論

        本文采用S180 荷瘤小鼠模型評(píng)價(jià)繡球菌凍干片的抗腫瘤潛力和小鼠免疫功能指標(biāo)的變化,推測(cè)繡球菌凍干片可能是通過(guò)提高荷瘤小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù),促進(jìn)細(xì)胞因子IL-2 和TNF-α 分泌,增強(qiáng)脾淋巴細(xì)胞增殖能力和NK 細(xì)胞殺傷活性來(lái)抑制S180腫瘤生長(zhǎng)并提高荷瘤小鼠生存率。本研究結(jié)果可以為繡球菌應(yīng)用于提高免疫功能相關(guān)的功能食品開(kāi)發(fā)提供參考。

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