張?jiān)?李曉慶 魯翔

心血管疾病是整個(gè)亞洲和中東地區(qū)日益嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題[1]。在我國(guó)，心血管病死亡率居首位，占居民疾病死亡構(gòu)成的40%以上，且現(xiàn)今我國(guó)心血管疾病患病率及死亡率仍處于上升階段[2-3]。冠心病是常見的心血管疾病，其發(fā)生發(fā)展與動(dòng)脈斑塊的形成及破潰密切相關(guān)。脂蛋白相關(guān)磷脂酶 A2(lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)是一種炎癥標(biāo)志物，其介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)參與了動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程，目前已被證實(shí)是冠心病的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因子。抑制Lp-PLA2或能成為冠心病治療新的靶點(diǎn)。

1 Lp-PLA2的結(jié)構(gòu)

Lp-PLA2是一種鈣非依賴性脂肪酶，分子量為45 kDa，屬于PLA2超家族的第Ⅶ組[4]。這種酶主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生[5]。Lp-PLA2一級(jí)結(jié)構(gòu)中存在GXSXG基序[6]，因此它在結(jié)構(gòu)上與中性脂肪酶和絲氨酸酯酶有一定相似度。Lp-PLA2的晶體結(jié)構(gòu)具有經(jīng)典的α/β絲氨酸水解酶折疊，包含催化三元組Ser273、Asp296和His351，另一個(gè)三元組(Trp115、Leu116和Tyr205)參與與LDL-C的相互作用[1]。

2 Lp-PLA2在血液中的分泌和循環(huán)

造血細(xì)胞(單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞和血小板)和肝細(xì)胞(庫(kù)普弗細(xì)胞)均可分泌Lp-PLA2，但是它在循環(huán)中的合成和釋放伴隨著單核細(xì)胞成熟為巨噬細(xì)胞以及炎癥介質(zhì)的激活[7]。

在血液循環(huán)中，Lp-PLA2大約有2/3與LDL-C結(jié)合，1/3與HDL-C結(jié)合[1, 7]。載脂蛋白B100在Lp-PLA2與LDL-C的結(jié)合中起關(guān)鍵作用。此外，Lp-PLA2還存在可分離和不可分離的酶形式[8]。這兩種形式之間的轉(zhuǎn)換可能是調(diào)節(jié)體內(nèi)Lp-PLA2活性的機(jī)制之一。

3 Lp-PLA2的遺傳學(xué)因素

Lp-PLA2基因(PLA2G7)由位于6p21.2～12號(hào)染色體上的12個(gè)外顯子組成[1]。其互補(bǔ)DNA于1995年被克隆，包含1個(gè)開放閱讀框，編碼441個(gè)氨基酸前體，該前體裂解成45.4 kDa成熟蛋白。遺傳力研究表明，遺傳因素導(dǎo)致了其中約62%的Lp-PLA2活性變異[9]。PLA2G7基因具有非同義多態(tài)性，可導(dǎo)致酶活性降低或喪失[7]。目前雖然已經(jīng)確定了PLA2G7的一些遺傳基因變異，如V379A、V279F、R92H、I198T等[4]，并已顯示影響Lp-PLA2的活性，但這些遺傳多態(tài)性的臨床意義尚未確定。

4 Lp-PLA2與動(dòng)脈粥樣硬化

最初，Lp-PLA2被命名為血漿血小板激活因子乙酰水解酶(pPAF-AH)，這是因?yàn)樗梢运庋“寤罨蜃?PAF)sn-2位置的乙酰基[4, 10]。因此，它當(dāng)時(shí)被認(rèn)為具有抗炎和抗動(dòng)脈粥樣硬化的特性。隨后的研究表明，Lp-PLA2具有廣泛的底物特異性。與磷脂酶A2超家族的其他成員相比，Lp-PLA2的一個(gè)顯著特征是其對(duì)待水解的sn-2殘基類型的特異性識(shí)別[4]。氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞釋放Lp-PLA2[11]，而Lp-PLA2可以對(duì)ox-LDL表面磷脂底物的sn-2酰基鏈水解進(jìn)行催化，產(chǎn)生溶血磷脂和氧化非酯化脂肪酸，促進(jìn)黏附分子的表達(dá)，刺激細(xì)胞因子的產(chǎn)生，誘導(dǎo)單核細(xì)胞和白細(xì)胞趨化，促進(jìn)它們進(jìn)入動(dòng)脈壁內(nèi)膜下間隙，內(nèi)膜下間隙溶血磷脂酰膽堿和氧化脂肪酸的積累有助于斑塊脂質(zhì)“核心”的形成，而活化斑塊中補(bǔ)充的炎性因子又會(huì)促進(jìn)ox-LDL和Lp-PLA2的生成，形成惡性循環(huán)[3, 7, 12]。目前來(lái)看，由于Lp-PLA2的促炎癥和促氧化作用，其在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制中起著關(guān)鍵作用。

5 Lp-PLA2與冠心病

第一項(xiàng)顯示Lp-PLA2血漿水平升高與心血管事件相關(guān)的研究是蘇格蘭西部冠狀動(dòng)脈預(yù)防研究(WOSCOPS)[13]。后來(lái)，一些流行病學(xué)研究表明，Lp-PLA2水平與傳統(tǒng)心血管風(fēng)險(xiǎn)因素之間存在相關(guān)性，包括年齡、LDL、HDL、LDL/HDL比率、TC、TG、肥胖和代謝綜合征。然而，即使調(diào)整了這些危險(xiǎn)因素，Lp-PLA2水平升高也與未來(lái)的心血管事件有關(guān)[12, 14]。此后，其他研究證實(shí)Lp-PLA2是不同隊(duì)列中心血管事件的預(yù)測(cè)因子[7, 15]。

目前有研究表明，Lp-PLA2活性與冠心病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[16-17]。而穩(wěn)定型冠心病病人中，Lp-PLA2水平升高與內(nèi)皮功能障礙和動(dòng)脈硬化有關(guān)，與冠心病的經(jīng)典危險(xiǎn)因素(如：性別、年齡、糖尿病、高血壓、血脂、吸煙習(xí)慣、冠心病家族史、心肌梗死史、血糖)、他汀類藥物使用、降壓治療和疾病持續(xù)時(shí)間無(wú)關(guān)[18]。此外，有研究證實(shí)血清Lp-PLA2水平與冠心病不同類型有關(guān)，而與動(dòng)脈狹窄的嚴(yán)重程度無(wú)明顯相關(guān)性[19]，提示Lp-PLA2可能主要通過(guò)影響斑塊穩(wěn)定性來(lái)反映冠心病的嚴(yán)重程度。而另有研究數(shù)據(jù)顯示，Lp-PLA2活性在急性冠脈綜合征早期顯著升高[11, 20]，表明Lp-PLA2活性可能是不穩(wěn)定冠狀動(dòng)脈疾病的一個(gè)新的早期標(biāo)志物。至今已有許多研究支持Lp-PLA2活性作為穩(wěn)定型冠心病病人和普通人群不良結(jié)局的風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)[12]。

經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療(PCI)是目前冠心病病人血管重建的主要方法之一。然而術(shù)后可能出現(xiàn)各種并發(fā)癥。多項(xiàng)研究提示，Lp-PLA2水平升高可能與PCI術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生及其預(yù)后有關(guān)。多因素分析顯示，高Lp-PLA水平是全因死亡和再住院的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子(OR=1.429,95%CI: 1.411～1.448，P<0.05)[21]。一項(xiàng)3年隨訪研究結(jié)果提示，血漿Lp-PLA2水平升高預(yù)示著再狹窄(ISR)和主要不良心血管事件(MACEs)風(fēng)險(xiǎn)的增加[22]。又有研究表明，PCI術(shù)前Lp-PLA2的高水平與圍手術(shù)期心肌損傷(PMI)風(fēng)險(xiǎn)之間存在強(qiáng)且獨(dú)立的相關(guān)性[23]。且Lp-PLA2可預(yù)測(cè)冠狀動(dòng)脈支架植入術(shù)后缺血性心臟病(IHD)病人的不良預(yù)后[24]。

綜上所述，Lp-PLA2可作為普通人群和穩(wěn)定型冠心病病人發(fā)生急性冠脈疾病的早期風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)，預(yù)估冠心病危險(xiǎn)程度，亦可能預(yù)測(cè)發(fā)生急性冠脈事件病人PCI術(shù)后的遠(yuǎn)期預(yù)后。而其與冠心病之間是否存在因果關(guān)系仍存疑，尚缺少其在冠心病診斷價(jià)值方面的研究，目前不能成為有效的臨床診斷手段，其優(yōu)勢(shì)在于對(duì)冠心病的風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)及預(yù)后評(píng)估。

6 Lp-PLA2抑制劑與冠心病

鑒于Lp-PLA2在冠心病發(fā)生發(fā)展中的作用，抑制Lp-PLA2以求治療冠心病成為許多人的研究方向。對(duì)Lp-PLA2抑制劑的開發(fā)已有20余年。目前已出現(xiàn)多種不同結(jié)構(gòu)的抑制劑，如PAF類似物、嘧啶酮衍生物、聯(lián)芳基抑制劑、內(nèi)酰胺抑制劑、磺胺類抑制劑、共價(jià)抑制劑等。但是由于難以平衡抑制效力和理化性質(zhì)，上述化合物很少使用，且Lp-PLA2具有高親脂性，對(duì)于合格的候選藥物來(lái)說(shuō)并不可取[4]。

其中最具代表性的是達(dá)普拉締(darapladib)，它是一種選擇性Lp-PLA2抑制劑，可使 Lp-PLA2活性降低60%以上[25]。動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)證實(shí)，它可以降低冠狀動(dòng)脈斑塊中的溶血磷脂酰膽堿水平，并減少斑塊中的巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)和壞死“核心”[26]。此外，在人類早期臨床研究IBIS-2研究中，與安慰劑組相比，darapladib亦顯著降低了冠狀動(dòng)脈斑塊中的壞死“核心”[25]。但是，在后續(xù)的針對(duì)穩(wěn)定型冠心病[27]和急性冠脈綜合征[28]的兩項(xiàng)臨床試驗(yàn)中，darapladib的使用并未顯示出明顯的臨床獲益(主要對(duì)死亡、心肌梗死、卒中、緊急冠脈血運(yùn)重建)。因此，Lp-PLA2抑制劑暫不能成為有效的臨床治療方案。

后來(lái)亦有部分隨機(jī)試驗(yàn)表明darapladib雖然顯著降低了Lp-PLA2的活性，但是與冠狀動(dòng)脈的內(nèi)皮損傷及斑塊進(jìn)展無(wú)關(guān)[29-30]。提示內(nèi)源性Lp-PLA2通路可能在人類早期動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展中沒有直接作用，但這缺乏更多的證明。Lp-PLA2雖然目前已被確認(rèn)是冠心病風(fēng)險(xiǎn)增加的生物標(biāo)志物，但實(shí)際與臨床終點(diǎn)未必有明確的、直接的因果關(guān)系。而且，動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中包含多種途徑，僅控制其中一種不一定能出現(xiàn)明顯的臨床效果。從現(xiàn)有的數(shù)據(jù)來(lái)看，darapladib可能不是一種有效的治療方法。但考慮到Lp-PLA2在冠心病中的風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)作用，現(xiàn)在更多不同結(jié)構(gòu)的Lp-PLA2抑制劑還在研發(fā)中，未來(lái)需要更多的研究進(jìn)一步明確Lp-PLA2抑制劑是否能轉(zhuǎn)化臨床，應(yīng)用于冠心病治療。

7 總結(jié)

綜上所述，Lp-PLA2在冠心病診斷方面的價(jià)值尚無(wú)定論，但其在冠心病的風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)及危險(xiǎn)程度評(píng)估中有一定的價(jià)值，可以作為普通人群及穩(wěn)定型冠心病病人發(fā)生急性冠脈事件的風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)，對(duì)其預(yù)后的判斷亦有一定的作用。雖然到目前為止，2項(xiàng)大型臨床隨機(jī)試驗(yàn)暫時(shí)否定了Lp-PLA2作為治療靶點(diǎn)的作用。然而，由于其內(nèi)在的局限性，尚不清楚這些結(jié)果是否依賴于Lp-PLA2僅作為心血管事件的標(biāo)志物而缺乏致病作用，或者是否依賴于這些試驗(yàn)中測(cè)試的藥物缺乏療效。我們還需要進(jìn)一步的研究，以更好地了解Lp-PLA2如何調(diào)節(jié)血管炎癥和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的發(fā)展。未來(lái)也需要研發(fā)更多不同結(jié)構(gòu)的抑制劑投入試驗(yàn)，進(jìn)一步驗(yàn)證Lp-PLA2作為冠心病治療靶點(diǎn)的可行性。