張 軼，何 宏，劉文華，魏 勇，王晨豫，齊亞銀*

1 天澳牧業(yè)有限公司，新疆奎屯 833200 2 新疆天潤乳業(yè)股份有限公司，新疆烏魯木齊 830000 3 石河子大學動物科技學院，新疆石河子 832000

0 引言

副結(jié)核?。≒aratuberculosis）又稱副結(jié)核腸炎，是由副結(jié)核分支桿菌（Mycobacterium avium subsp.pamtuberculosis，MAP）引起的一種慢性傳染病，由于發(fā)病初期癥狀不典型，因此易與其他腹瀉性疾病混淆。該病呈世界性分布，主要感染牛、羊、鹿等反芻動物，且牛的易感程度遠大于羊[1]。

副結(jié)核病在2歲左右的牛群中易得，發(fā)病中后期時臨床癥狀明顯，主要表現(xiàn)為卡他性腸炎及頑固性腹瀉，患病牛只極度消瘦，生產(chǎn)性能損失嚴重。解剖可見腸黏膜高度增厚（3～20倍），形成皺襞且皺襞間含有大量抗酸桿菌成堆狀。

在檢測方面，實驗室常用血清學ELISA試驗進行大批量樣品檢測，而小批量常采用抗酸染色對疑似感染牛群糞便進行鏡檢。因其為胞內(nèi)寄生菌，故抗生素在治療中無明顯效果，只能緩解臨床癥狀，無法徹底根除。雖無有效的藥物治療，但現(xiàn)已有用滅活苗作預防的報道[2]。

2019年，新疆奎屯部分規(guī)?；翀鲱B固性腹瀉牛只增多，檢測病原為副結(jié)核分支桿菌。隨后連續(xù)3年通過血清學對7 個規(guī)模化奶牛場副結(jié)核病進行監(jiān)測，確定了每年度抗體總陽性率及各個牧場3 年間副結(jié)核的抗體變化，為規(guī)模化牧場副結(jié)核病的防控提供了科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 待檢血清

待檢血清來源于2019—2021年新疆奎屯地區(qū)7 個規(guī)?；膛觯ū?）。

表1 2019—2021年不同牧場血清樣本統(tǒng)計表 單位：頭

1.1.2 主要試劑

牛副結(jié)核分枝桿菌抗體檢測試劑盒，IDEXX公司。

1.1.3 主要儀器

離心機，Sigma公司；酶標儀，美國Bio-Rad公司；移液器，賽默飛公司。

1.2 方法

按照試劑盒說明書進行樣品稀釋、孵育抗原結(jié)合、加酶標抗體、加底物、加終止液，在酶標儀中讀取OD值，根據(jù)公式計算結(jié)果，使用統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

對所有血清進行ELISA檢測后計算統(tǒng)計，結(jié)果表明：3年間副結(jié)核抗體陽性率分別為6.55%（636/9 715）、6.80% （705/10 375）及5.23%（615/11 753），見表2。同時對各個牧場3年間進行統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)大部分牧場抗體陽性率呈現(xiàn)先升后降的趨勢，見表3。

表2 2019—2021年每年度副結(jié)核抗體總陽性率統(tǒng)計表

表3 2019—2021年各年度不同牧場副結(jié)核抗體陽性率統(tǒng)計表

3 討論

奶牛副結(jié)核病危害巨大，因該病具傳染性且無特效藥，一旦患病使牛只生產(chǎn)性能逐漸喪失，外加治療成本會給牧場造成極大經(jīng)濟損失。因此，通常需采取檢疫+淘汰的方法嚴格把控，控制該病的擴散。

對2019—2021年每年抗體總陽性率進行分析，呈現(xiàn)先升后降的趨勢，這與牧場對副結(jié)核病的防控措施有很大關(guān)系。在2019年間通過抗體檢測在7 個牧場中已然發(fā)現(xiàn)該病的存在，但由于對其認知不足，并未采取有效措施。以G場為例，在2019年的抗體陽性率很低，但在2020年卻由0.94%突增到8.12%，正是由于對該病未引起足夠重視所導致。因此在2021年加強了對該病的檢測與陽性牛只的淘汰，故而大部分牛場抗體陽性率均有不同程度的下降，而對于抗體水平未下降的A場與F場，可能由于生產(chǎn)管理方面存在問題，因而并未降低陽性率。

由于該病的廣泛性，國內(nèi)其他地區(qū)對副結(jié)核的抗體水平檢測也有相應(yīng)報道。張麗媛等[3]對新疆北疆地區(qū)某規(guī)?；膛龈苯Y(jié)核病進行調(diào)查，抗體陽性率為17.44%（45/258）。陳志遠等[4]在2018年2月至2019年11月對山東省9 個地區(qū)進行調(diào)查，總體抗體陽性率為17.80%（579/3 253），2019年陽性率22.31%（441/1 976）高于2018年陽性率11.24%（138/1 227），上述結(jié)果遠高于本試驗結(jié)果，說明所涉地區(qū)副結(jié)核感染較為嚴重。

努爾麥麥提·麥麥提敏[5]對新疆南疆不同地區(qū)7 個規(guī)?；翀鲞M行調(diào)查，平均抗體陽性率為6.87%（65/946）。趙怡雯等[6]對大連規(guī)?；翀瞿膛８苯Y(jié)核進行抗體檢測，整體陽性率從2018年的8.04%下降到2019年的2.07%，2020年出現(xiàn)反彈。師慶偉等[7]對黑龍江省不同地區(qū)9 個規(guī)?；翀鲞M行副結(jié)核抗體檢測，發(fā)現(xiàn)每個牛場均檢出血清陽性牛，副結(jié)核陽性場感染率100%；2018年樣品平均陽性率4.74%，2019年樣品平均陽性率4.31%，相較之下說明國內(nèi)大部分地區(qū)副結(jié)核抗體陽性率在10%以下。

總體分析，說明檢疫+淘汰的措施起到較好的效果。若想要進一步淘汰陽性牛只降低陽性率，則應(yīng)配合其他檢測方式。一般來說，ELISA抗體檢測陽性均為副結(jié)核感染中后期，此階段陽性牛只已通過糞便等其他形式進行排菌，進而感染健康個體。若此時淘汰對于牧場成本過高，且嚴重污染環(huán)境及影響健康牛只。γ干擾素檢測可進行早期揭發(fā)已被感染副結(jié)核但ELISA檢測陰性的牛只，通過該方法可有效判斷牛只是否被副結(jié)核分支桿菌感染。

本試驗通過對2019—2021年新疆奎屯7 個規(guī)?；翀瞿膛８苯Y(jié)核病的調(diào)查，明確了牧場副結(jié)核的感染情況，同時配合科學的防控措施，有效降低了副結(jié)核抗體陽性率，為規(guī)?；翀龈苯Y(jié)核病的防控提供了理論依據(jù)。