郭 慶，呂繼明，孟祥俊

1 安徽科寶生物工程有限公司，安徽淮北 235000 2 安徽曦強(qiáng)乳業(yè)集團(tuán)有限公司，安徽淮北 235000 3 淮北市曦強(qiáng)生態(tài)奶牛養(yǎng)殖有限公司，安徽淮北 235000

0 引言

奶牛子宮內(nèi)膜炎指奶牛生產(chǎn)后，子宮產(chǎn)道未完全修復(fù)，自身抵抗力差，使病原體進(jìn)入子宮內(nèi)繁殖，引起子宮內(nèi)膜淺表的炎癥，是影響奶業(yè)發(fā)展和經(jīng)濟(jì)效益的重要疾病之一。該病目前主要用抗生素全身性的治療和針對(duì)子宮局部的治療。但抗生素濫用常使奶牛機(jī)體產(chǎn)生抗藥性以及乳制品殘留，給奶牛場(chǎng)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失[1]。用中藥治療子宮內(nèi)膜炎的研究報(bào)道越來(lái)越多，己有中草藥栓劑、乳劑、灌注劑等，對(duì)子宮內(nèi)膜炎的防治方面發(fā)揮了重要作用[2～4]。目前，亦有微生態(tài)制劑治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的報(bào)道，單純用益生菌制成微生態(tài)制劑及將中藥與益生菌合在一起進(jìn)行炮制[5，6]，但未有將中藥有效成分提取與益生菌一起進(jìn)行發(fā)酵的報(bào)道。本試驗(yàn)將中藥微生態(tài)制劑飼喂患有子宮內(nèi)膜炎奶牛，探索其對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜炎療效、血液生化指標(biāo)以及鈣磷的影響，為中藥微生態(tài)制劑在奶牛子宮內(nèi)膜炎上的合理應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 中藥與菌株

紅花、益母草、桃仁，市養(yǎng)生堂大藥房；紅茶菌，獻(xiàn)華生物科技有限公司。

1.1.2 主要試劑

葡糖糖（食品級(jí)），濟(jì)南遠(yuǎn)聯(lián)化工有限公司；乙醇（食品級(jí)），安徽安特食品股份有限公司；一次性真空采血管，深圳市益希醫(yī)療器械有限公司。

1.1.3 主要儀器

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（型號(hào)：R-1005）、恒溫磁力攪拌器（型號(hào)：SZC-2），鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；超聲波清洗器（型號(hào)：DL-360B），上海之信儀器有限公司；邁瑞半自動(dòng)生化分析儀（型號(hào)：BA-90），咸陽(yáng)銘海醫(yī)療器械有限公司；便攜式陰道鏡（型號(hào)：YKD-3004），徐州益柯達(dá)電子科技有限公司；臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（型號(hào)：TGL-16M），鹽城市凱特試驗(yàn)儀器有限公司；醫(yī)用冷藏箱（型號(hào)：YC-300L），中科美菱低溫科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 中藥微生態(tài)制劑的制備

中藥微生態(tài)制劑參照《一種防治奶牛子宮內(nèi)膜炎中藥微生態(tài)制劑的制備方法》[7]制備。

1.2.2 血液的采集與血清的制備

試驗(yàn)前第0天和第7天進(jìn)行血液的采集，每頭牛在早晨飼喂前于頸靜脈采集新鮮血樣，均采集血樣20 mL，置于取樣袋內(nèi)，然后在4 ℃條件下3 000 r/mim離心15 min，吸出血清-20 ℃保存待測(cè)，將余下血液進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)。

1.2.3 測(cè)定指標(biāo)

用全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行血液和血清的檢測(cè)。

1.2.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取某奶牛場(chǎng)的患有子宮內(nèi)膜炎奶牛20 頭，隨機(jī)分成2組，中藥微生態(tài)制劑治療組（Ⅰ）15 頭和陽(yáng)性對(duì)照組（Ⅱ）5 頭，另選選取胎次、年齡、泌乳月相近、身體狀況良好的陰性奶牛10 頭為陰性對(duì)照組（Ⅲ）。治療組將中藥微生態(tài)制劑10 L讓奶牛自由飲用，連續(xù)用藥7 d。

中藥治療效果評(píng)價(jià)。治愈：末次治療7 d后，不再有排出物（或發(fā)情時(shí)排出正常透明分泌物），直腸檢查子宮恢復(fù)正常，細(xì)菌檢驗(yàn)一般子宮內(nèi)無(wú)病原菌。好轉(zhuǎn)：排出物由膿性變?yōu)闇啙岚胪该?、分泌物量較少，子宮基本恢復(fù)正常。無(wú)效：治療前后子宮炎癥無(wú)變化。同時(shí)比較用藥第0天和用藥后第7天的各組血常規(guī)的變化。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 中藥微生態(tài)劑治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的療效及治愈率

由表1可以看出，患有子宮內(nèi)膜炎奶牛通過(guò)7 d中藥微生態(tài)劑治療治愈率達(dá)86.66%，有效率為93.33%。

表1 中藥微生態(tài)劑治療奶牛子宮內(nèi)膜炎療效及治愈率

2.2 中藥微生態(tài)制劑對(duì)血常規(guī)指標(biāo)的影響

由表2可見(jiàn)，治療前，患病牛中血常規(guī)指標(biāo)與陰性對(duì)照奶牛均差異極顯著（P＜0.01）。用藥7 d后，中藥微生態(tài)制劑治療組血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)恢復(fù)正常，與陰性對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。

表2 中藥微生態(tài)制劑對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜炎血常規(guī)指標(biāo)的影響

2.3 中藥微生態(tài)制劑對(duì)血清指標(biāo)的影響

由表3可知，患牛血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）和乳酸脫氫酶（LDH）第0天與陰性對(duì)照組相比差異極顯著，（P＜0.01）血清鈣和磷與陰性對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05）經(jīng)治療7 d后，患牛血液中ALT、AST、LDH、血清鈣及血清磷與陰性對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。

表3 中藥微生態(tài)制劑對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜炎血清指標(biāo)的影響

3 討論

中藥微生態(tài)制劑配方中，金銀花、白頭翁、紫錐菊等均有清熱解毒、抗炎的功效；益母草、紅花、桃仁等具有活血化瘀、破堅(jiān)散結(jié)的功能；絞股藍(lán)、黃芪、甘草能增強(qiáng)機(jī)體免疫力[8]；紅茶菌是良好的免疫激活劑，可以激活淋巴細(xì)胞活性，提高機(jī)體免疫功能，提高動(dòng)物的抗病力和抗應(yīng)激能力，有效預(yù)防金黃色葡萄球菌等有害菌的感染，降低奶牛子宮內(nèi)膜炎發(fā)病率[9]。將中藥提取有效成分和益生菌進(jìn)行發(fā)酵制成微生態(tài)制劑，能夠起到協(xié)同作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明，中藥微生態(tài)制劑對(duì)奶牛隱性乳房炎有較好的治療效果，治愈率達(dá)86.66%、有效率達(dá)93.33%，為臨床應(yīng)用提供了試驗(yàn)數(shù)據(jù)，但具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步探討。

白細(xì)胞數(shù)的增加，常為細(xì)菌感染所致[10]。病毒性疾病在臨床上多表現(xiàn)出白細(xì)胞總數(shù)降低，淋巴細(xì)胞數(shù)量和比例上升[11]。本試驗(yàn)檢測(cè)20 頭患子宮內(nèi)膜炎奶牛的血液，同時(shí)檢測(cè)10 頭陰性奶牛血液做對(duì)比。通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，患牛白細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)極顯著增加（P＜0.01），淋巴細(xì)胞絕數(shù)沒(méi)有顯著增加（P＞0.05），血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果表明，本次患牛子宮內(nèi)膜炎由細(xì)菌感染引起的。經(jīng)過(guò)7 d中藥微生態(tài)制劑治療后，血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)與陰性對(duì)照組相比差異不顯著。

血清中AST、ALT、LDH等的水平已被臨床作為評(píng)估肝功能損傷程度的指標(biāo)應(yīng)用，ALT只存在于肝細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，具有較高的特異性，如果肝細(xì)胞出現(xiàn)1%的損傷，血液中ALT水平就會(huì)升高1 倍，因此，ALT被認(rèn)為是檢測(cè)肝功能損害的最敏感指標(biāo)[12]。本研究發(fā)現(xiàn)引起患牛的細(xì)菌，隨著病情的延長(zhǎng)，也會(huì)引起肝細(xì)胞不同程度地?fù)p傷，經(jīng)過(guò)中藥微生態(tài)制劑治療后能夠使損傷的肝細(xì)胞恢復(fù)。

鈣、磷是動(dòng)物體內(nèi)含量最多的元素，在動(dòng)物體內(nèi)代謝中起著重要作用，血液中的鈣大部分存在于血清中，幾乎所有奶牛產(chǎn)犢后血鈣的濃度都會(huì)下降[13]，不同泌乳階段鈣含量不同，但泌乳前期鈣含量降至正常范圍內(nèi)最低值，與本研究的陰性對(duì)照組檢測(cè)結(jié)果相近[14]。試驗(yàn)組的血清鈣、磷的含量低于正常值的最低值，且鈣磷比值也發(fā)生變化。經(jīng)過(guò)中藥微生態(tài)治療后，奶牛鈣、磷水平升高，這可能是由于中藥微生態(tài)制劑能夠調(diào)節(jié)鈣、磷代謝。

4 結(jié)論

中藥微生態(tài)制劑經(jīng)過(guò)7 d治療，對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜炎有良好的治療效果，其主要是能夠使血液中炎性細(xì)胞的數(shù)量降低，肝功能指標(biāo)降至正常。