侯慶同
江蘇聯(lián)合職業(yè)技術(shù)學(xué)院淮安生物工程分院,江蘇淮安 223200
豬圓環(huán)病毒(Porcine Circo virus,PCV)是由德國(guó)科學(xué)家Tischer 等于1974年發(fā)現(xiàn),當(dāng)時(shí)被認(rèn)為是一種細(xì)胞污染物,后被證實(shí)為1 種新的單鏈環(huán)狀DNA 病毒,命名為豬圓環(huán)病毒1 型(PCV-1)。臨床上PCV-1 能感染豬,但不致病,被認(rèn)為廣泛存在于豬體內(nèi)[1-2],后又發(fā)現(xiàn)PCV-1 可經(jīng)垂直傳播感染胎豬,致使初生仔豬發(fā)生“先天性震顫(CT)”[1]。豬巴氏桿菌病又稱為豬肺疫、豬出血性敗血癥,俗稱“鎖喉風(fēng)”,病原為巴氏桿菌屬的多殺性巴氏桿菌,是豬的一種急性烈性傳染病。主要特征為最急性型呈敗血癥經(jīng)過,咽喉及其周圍組織急性炎性腫脹,病豬張口呼吸;急性型呈纖維素性肺炎變化,表現(xiàn)為咳嗽、肺及胸膜有纖維蛋白滲出和粘連;慢性型癥狀通常不明顯,臨床常表現(xiàn)為漸進(jìn)性消瘦,有時(shí)伴發(fā)關(guān)節(jié)炎[3]。急性病例以敗血癥和炎癥出血為主要特征,慢性病例的病變則只局限于局部器官[3-4]。巴氏桿菌病廣泛分布于世界各地,但發(fā)病率一般不高,臨床常繼發(fā)于豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環(huán)病毒病、豬支原體肺炎等傳染病[5]。巴氏桿菌病的發(fā)生有外源性感染和內(nèi)源性感染2 種途徑[6],外源性感染主要是由病畜的排泄物和分泌物排出的病菌,污染飼料、飲水和周圍環(huán)境后經(jīng)消化道或呼吸道侵入健康家畜機(jī)體。內(nèi)源性感染是指健康家畜的扁桃體和上呼吸道在正常情況下棲留有本菌,但毒力微弱而不致病,一旦家畜的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件或氣候劇變而致機(jī)體抵抗力下降時(shí),寄居于呼吸道的病菌毒力增強(qiáng)并趁虛而入,經(jīng)淋巴進(jìn)入血流而導(dǎo)致發(fā)病[7]。
主訴:豬場(chǎng)新購(gòu)入的180 頭仔豬飼養(yǎng)1 周后開始發(fā)病,病初2 d 患病豬已達(dá)30 余頭,其中發(fā)病死亡6 頭,病死率近20%。病豬食欲不振甚至廢絕、嗜睡、體溫可達(dá)40~42 ℃、呼吸困難有黏性鼻汁、咳嗽、皮膚干燥發(fā)紅、少數(shù)病豬后肢關(guān)節(jié)腫脹。發(fā)病期間曾用過頭孢噻呋鈉、林可霉素等藥物,但治療效果不佳。
臨床進(jìn)一步檢查發(fā)現(xiàn),病豬消瘦、生長(zhǎng)發(fā)育不良,腹股溝淋巴結(jié)明顯腫大,可視黏膜發(fā)紺,皮膚有斑點(diǎn)狀出血、尤以兩耳及軀干最為明顯,觸診胸部有明顯的疼痛反應(yīng),聽診可聞及啰音和摩擦音。剖檢主要見纖維素性肺炎,肺臟充血水腫,有出血斑塊,肺間質(zhì)增寬,肺臟肝樣變;胸腔內(nèi)積有含纖維蛋白凝塊的混濁液體,肺臟病變部位及胸膜上附有黃白色纖維素性滲出物;其他器官未見明顯異常。
無(wú)菌采集病豬的肝臟、腎臟、肺臟、心臟及淋巴結(jié),研磨后用磁珠法進(jìn)行PCR 擴(kuò)增。PCR 鑒定結(jié)果顯示,豬圓環(huán)病毒1 型為陽(yáng)線(圖1),其余均為陰性。
圖1 豬圓環(huán)病毒1 型PCR 鑒定結(jié)果
無(wú)菌采集病豬的肝組織,三區(qū)劃線接種于無(wú)菌脫纖維綿羊血瓊脂培養(yǎng)基上[8],置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),37 ℃條件下培養(yǎng)24 h 后觀察。培養(yǎng)基上可見灰白色、圓整、濕潤(rùn)的滴露狀小菌落、菌落周圍不溶血。無(wú)菌采取肝組織,通過革蘭氏染色(圖2)和肝組織觸片(圖3)的方法初步鑒定為多殺性巴氏桿菌感染。
圖2 革蘭氏染色鏡檢(1000X)
圖3 肝組織觸片鏡檢(1000X)
根據(jù)臨床檢查及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果,診斷為豬圓環(huán)病毒1 型和多殺性巴氏桿菌混合感染。
將鑒定為多殺性巴氏桿菌的細(xì)菌培養(yǎng)物在3個(gè)不同區(qū)域隨機(jī)篩選3 個(gè)樣本(1 號(hào)分離菌、2 號(hào)分離菌、3 號(hào)分離菌),分別將每個(gè)樣本分離菌均勻涂布于3 個(gè)血瓊脂培養(yǎng)基上,將藥敏試紙片(復(fù)方新諾明、氟苯尼考、恩諾沙星等15 種藥物)分別貼在每個(gè)分離菌樣本對(duì)應(yīng)的3 個(gè)平皿中,置于恒溫培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)24 h,測(cè)定抑菌圈的直徑大?。ū?)。根據(jù)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)判定藥敏試驗(yàn)結(jié)果:分離菌對(duì)復(fù)方新諾明、氟苯尼考、丁胺卡那、氯霉素、利福平、氨芐西林、青霉素、慶大霉素、卡那霉素和四環(huán)素等藥物敏感。
表1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果
密切觀察豬群狀況,通過精神狀態(tài)、飲食狀況及其他外觀表現(xiàn),及時(shí)隔離病豬,對(duì)病死豬挖坑深埋做無(wú)害化處理。
豬場(chǎng)用戊二醛或聚維酮碘每天消毒1 次,豬糞堆積發(fā)酵。加強(qiáng)護(hù)理,保持豬舍清潔衛(wèi)生,重點(diǎn)做好豬舍保溫和通風(fēng)換氣工作。
1)病豬按每千克體重,用氟苯尼考注射液30 mg、青霉素G 鉀5 萬(wàn)~8 萬(wàn)單位、氨基比林注射液0.2 mL,混合肌內(nèi)注射,2 次/d,連用5 d。
2)肌內(nèi)注射黃芪多糖注射液,0.2 mL/kg,2 次/d,連用5 d。
大群豬投藥,按每千克飼料添加氟苯尼考粉劑50 mg、黃芪多糖粉劑400 mg,每千克飲水中加入電解多維0.5 g,連用7 d。防治3 d 后豬場(chǎng)反饋,病豬狀況好轉(zhuǎn),已無(wú)病豬死亡,且豬群的發(fā)病率已明顯下降。1 周后,疫情得到有效控制。
臨床上豬感染PCV-1 很常見,普遍認(rèn)為廣泛存在于豬體內(nèi)及豬源傳代細(xì)胞系[1],由于其無(wú)致病性,所以無(wú)法通過臨床癥狀或病理診斷來(lái)確定是否感染PCV-1[1-2]。
多殺性巴氏桿菌是一種條件致病菌,廣泛存在于動(dòng)物體內(nèi),通常附殖在健康動(dòng)物的上呼吸道,在機(jī)體抗病力低下時(shí)可發(fā)生內(nèi)源性感染。在養(yǎng)殖過程中通過加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,定期消毒,在季節(jié)交替、寒潮來(lái)臨之前、長(zhǎng)途運(yùn)輸、轉(zhuǎn)群轉(zhuǎn)舍等應(yīng)激發(fā)生時(shí),做好預(yù)防性投藥[9],可減少該病的發(fā)生;對(duì)新購(gòu)入豬要隔離觀察1 個(gè)月后再合群并圈[10]。豬場(chǎng)要合理選用并規(guī)范使用生產(chǎn)中所需要的抗菌藥物,以減少細(xì)菌的耐藥性問題。治療可根據(jù)藥敏試驗(yàn)篩選敏感藥物,早期綜合治療具有較好的療效。