梅娟 段恩帥 蘇良湖 李賁 周筱潔
摘要:過硫酸鉀能加快大分子降解,促進(jìn)堆肥腐熟。在前期確定的過硫酸鉀添加量(1.2%)基礎(chǔ)上,進(jìn)一步優(yōu)化蔬菜廢棄物堆肥的通風(fēng)速率,并分析最優(yōu)條件下微生物種群結(jié)構(gòu)的變化。試驗(yàn)設(shè)置3 個(gè)通風(fēng)速率VR1、VR2、VR4,分別為100、200、400 mL/min,VR1中加入堆體質(zhì)量為15%的陶粒。結(jié)果表明,各組堆肥過程的理化性質(zhì)差別不大,堆體溫度>55? ℃的時(shí)間超過8 d,產(chǎn)品C/N為11.3~13.0,GI為91.9%~111.2%,均達(dá)到腐熟要求。各組第1天溫度都超過55? ℃,升溫快速,VR1的高溫期溫度高于其他組。堆肥過程中,各組可溶性有機(jī)物的紫外-可見吸收光譜特征值SUVA254、SUVA280值不斷增加,最終VR1的特征值最高,堆肥的腐熟化程度較高。蔬菜廢棄物堆肥的優(yōu)勢種群有厚壁菌門(Firmicutes)、放線菌門(Actinobacteriota)、變形菌門(Proteobacteria)、擬桿菌門(Bacteroidota),相對豐度總和達(dá)96%以上。對比分析VR1、不加過硫酸鉀的常規(guī)處理(通風(fēng)速率400 mL/min)發(fā)現(xiàn),VR1 中Firmicutes的豐度顯著低于常規(guī)處理,而放線菌門的豐度較高。在高溫期,VR1由多樣性的高溫纖維素降解菌種群替代了常規(guī)處理中的優(yōu)勢屬芽孢桿菌屬(Bacillus)。整體上,常規(guī)處理細(xì)菌的種群演替滯后于VR1,VR1的堆肥進(jìn)程更快。本研究證明,添加過硫酸鉀的蔬菜廢棄物在降低通風(fēng)速率至100 mL/min并且加陶粒時(shí),堆肥仍能夠順利進(jìn)行,且堆體升溫快速,有助于蔬菜廢棄物堆肥的工藝優(yōu)化。
關(guān)鍵詞:好氧堆肥;蔬菜廢棄物;通風(fēng)速率;過硫酸鉀;微生物
中圖分類號:X705? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A
文章編號:1002-1302(2023)24-0203-09
2020年我國的蔬菜產(chǎn)量超過7.2億t,位居世界第一[1]。與此同時(shí)也產(chǎn)生了大量的蔬菜廢棄物,其中大多被隨意丟棄或進(jìn)行填埋處置,造成嚴(yán)重的資源浪費(fèi)和環(huán)境污染[2]。蔬菜廢棄物營養(yǎng)成分高、有機(jī)質(zhì)含量豐富,通過好氧堆肥,高溫殺滅其中的蟲卵、病原菌、草籽等,可使廢棄物轉(zhuǎn)化為有機(jī)肥,實(shí)現(xiàn)資源化利用[3]。
在實(shí)際的蔬菜好氧堆肥處理中,往往存在高溫期短,物料降解不充分,進(jìn)而影響堆肥腐熟度的問題[4],同時(shí)有廢氣排放需要處理。最近的研究發(fā)現(xiàn),過硫酸鉀用于堆肥可以促進(jìn)木質(zhì)纖維素等降解,使堆體快速升溫,縮短堆肥周期,并能提高堆肥產(chǎn)品的腐熟度。Wang等發(fā)現(xiàn),過硫酸鉀用于牛糞好氧堆肥,可以大大提高纖維素、半纖維素、木質(zhì)素的降解率,并促進(jìn)溶解性有機(jī)質(zhì)( DOM)的動態(tài)變化,加速腐殖酸的形成[5]。Mei等研究發(fā)現(xiàn),過硫酸鉀作為強(qiáng)氧化劑,可增加嗜熱木質(zhì)纖維素降解菌的豐度,提高高溫期的最高溫度和持續(xù)時(shí)間,減少堆肥過程中的氮素?fù)p失[6]。通過前期研究發(fā)現(xiàn),過硫酸鉀能加速蔬菜廢棄物堆肥的升溫,促進(jìn)高溫降解過程,添加量為1.2%時(shí)效果最好。
通風(fēng)是影響好氧堆肥降解和腐熟過程的關(guān)鍵因素之一。通風(fēng)速率過高,會帶走堆體內(nèi)的大量熱量,不利于物料的高溫降解;通風(fēng)速率過低,不能滿足微生物供氧,影響微生物活性;此外,通風(fēng)速率還會對堆肥過程的廢氣排放量和堆體的碳氮損失造成影響[7-8]。根據(jù)堆肥原料的不同,不同堆肥研究選用的通風(fēng)速率差別很大;[JP3]同樣,在關(guān)于蔬菜堆肥的研究中,通風(fēng)速率的設(shè)定值變化也較大。張陸等在甜瓜秧和雞糞堆肥中選擇的通風(fēng)速率為0.01 m3/(m3·min)[9]。楊巖等在蔬菜廢棄物堆肥研究中選擇的通風(fēng)速率為 0.27 m3/(m3·min)[10]。劉文杰等使用60 L堆肥裝置,設(shè)定通風(fēng)量為25 L/min[11]。本試驗(yàn)在前期研究確定的過硫酸鉀添加量(1.2%)條件下,按一般通風(fēng)速率適當(dāng)遞減通風(fēng)量,進(jìn)一步研究蔬菜廢棄物添加過硫酸鉀堆肥體系中,是否可以減少通風(fēng)速率而不影響堆肥腐熟,旨在減少堆肥過程的動力消耗和廢氣處理量;同時(shí)分析最優(yōu)條件下微生物的種群特征,通過與常規(guī)堆肥條件對比分析,探討低通風(fēng)速率處理蔬菜廢棄物在過硫酸鉀協(xié)同陶粒作用下堆肥體系中微生物種群的變化,以期為蔬菜廢棄物快速好氧堆肥工藝優(yōu)化和蔬菜廢棄物就地堆肥處理技術(shù)的推廣提供參考。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料和裝置
選取包菜葉、萵筍皮2種產(chǎn)生量較大的蔬菜廢棄物作堆肥材料,這些材料取自蘇州科技大學(xué)附近的學(xué)府花苑菜市場。用玉米秸稈、玉米粉、風(fēng)干牛糞、陶粒作堆肥材料的調(diào)理劑,調(diào)節(jié)材料的結(jié)構(gòu)和碳氮比(C/N)。牛糞、秸稈取自于連云港市東海農(nóng)場,玉米粉購自學(xué)府花苑菜市場,陶粒購自淘寶網(wǎng)某園藝用品旗艦店,粒徑0.8~1.0 cm,過硫酸鉀(分析純)購于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。堆肥材料的基本理化性質(zhì)見表1,堆肥反應(yīng)器選用50 L塑料桶[12]。在桶底部放置不銹鋼架,其上放鐵絲網(wǎng)用于承托堆肥材料并保證通風(fēng)布?xì)饩鶆?。桶的底部、頂部分別有進(jìn)氣孔、排氣孔。堆肥桶周圍包裹保溫材料,防止熱量散失。
1.2 堆肥試驗(yàn)方法
將各種堆肥材料破碎至2~3 cm備用。按照初始含水率60%、C/N 20混合各種堆肥原料,每個(gè)處理混合材料濕質(zhì)量為5.50 kg(含包菜葉2.00 kg、萵筍皮2.00 kg、牛糞0.24 kg、玉米粉 0.58 kg、玉米秸稈0.68 kg),過硫酸鉀的添加量為1.2%(濕基添加量)。參考已有研究的適宜通風(fēng)速率[12-13],設(shè)置3個(gè)通風(fēng)速率VR1、VR2、VR4,分別為100、200、400 mL/min,連續(xù)通風(fēng)。對VR1低通風(fēng)速率條件的處理,添加濕質(zhì)量15%的陶粒,以保證空氣傳質(zhì)和擴(kuò)散[14]。研究微生物變化的常規(guī)處理堆肥條件為不加過硫酸鉀,通風(fēng)速率為400 mL/min。
堆肥周期為50 d,在堆肥后1、3、6、10、15、21、35、50 d翻堆并采集樣品。取樣時(shí),在不同深度多點(diǎn)采集混合,以保證樣品具有代表性。每次取100 g鮮樣于-20? ℃保存;另取100 g鮮樣,風(fēng)干后破碎,過80目篩,保存用于后續(xù)分析。每個(gè)樣品測3個(gè)平行樣。
1.3 測定指標(biāo)與分析方法
用風(fēng)干樣品測定固體總有機(jī)碳(total organic carbon,TOC)含量、總氮(total nitrogen,TN)含量。濕樣用于pH值、電導(dǎo)率(electrical conductance,EC)、種子發(fā)芽指數(shù)(seed germination index,GI)、可溶性有機(jī)碳(dissolved organic carbon,DOC)含量、紫外-可見吸收光譜特征值(SUVA254、SUVA280)的測定及微生物多樣性分析。
使用電子測溫計(jì)實(shí)時(shí)監(jiān)測堆體溫度,測溫計(jì)的防水探頭置于堆肥材料的中部。每天09:00和 18:00 記錄堆體溫度和環(huán)境溫度。樣品含水率采用105? ℃ 烘干法測定[12]。
取濕樣10 g與去離子水按1 g ∶10 mL的比例混合,室溫振蕩30 min后過濾,獲得浸提液Ⅰ。 浸提液Ⅰ用于測定pH值、EC值、GI。pH值、EC值分別用雷磁pHS-3C便攜式pH計(jì)、雷磁DDB-303A便攜電導(dǎo)率儀測定[12]。選用顆粒飽滿、無破損的白菜種子測定GI:取10 mL浸提液浸潤種子,在 25? ℃ 恒溫下避光培養(yǎng)48 h,測量種子發(fā)芽數(shù)量和根長,按照式(1)計(jì)算GI[15]。以蒸餾水培養(yǎng)作為空白對照。
將浸提液Ⅰ在7 000 r/min條件下離心 7 min,再用0.45 μm濾膜過濾,獲得浸提液Ⅱ。將 浸提液Ⅱ稀釋50倍,用流動分析儀(Vario TOC select,Elementar,德國)測定DOC含量。同時(shí)使用紫外分光光度儀測定浸提液Ⅱ稀釋10倍后在波長254、280 nm處的吸光度D254 nm、D280 nm,D254 nm、D280 nm與DOC含量的比值記為SUVA254、SUVA280[16]。
固體樣品的TOC、TN含量分別按照NY/T 525—2021《有機(jī)肥料》標(biāo)準(zhǔn)中的重鉻酸鉀容量法、凱式定氮法測定。樣品的碳氮比(C/N)是TOC(總有機(jī)碳)與TN(總氮)的比值。
1.4 微生物多樣性分析
對高溫期溫度最高的VR1和常規(guī)堆肥組,在堆體溫度變化明顯的堆肥后3、6、10、15、21 d取樣,分析細(xì)菌種群多樣性。樣品DNA的提取使用土壤DNA提取試劑盒(Omega Bio-Tek,Inc.,美國)。選用引物515F(5′-GTGCCAGCMGCCGCGG-3′)和806R(5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′),擴(kuò)增16S RNA的V4區(qū)域。PCR反應(yīng)體系為Trans Start Fast Pfu DNA Polymerase 20 μL。PCR反應(yīng)條件為:95? ℃預(yù)變性 3 min;95? ℃變性30 s,53? ℃退火30 s,72? ℃延伸 45 s,共29個(gè)循環(huán);72? ℃延伸10 min。樣品測序由上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司完成,高通量測序使用Illumina MiSeq平臺進(jìn)行(Majorbio Bio Pharm Technology Co.,Ltd.)。
1.5 數(shù)據(jù)處理與分析
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行單因素方差分析和相關(guān)性分析,顯著性差異設(shè)定為P<0.05。采用Origin 2021Pro軟件繪制變化趨勢圖。微生物群落的多樣性和差異性分析在Majorbio在線云平臺(www.majorbio.com)上完成。
2 結(jié)果與分析
2.1 堆肥過程理化參數(shù)的變化
2.1.1 溫度變化 4組處理的溫度變化規(guī)律類似(圖1)。堆肥初期,4組均快速升溫,堆肥后 1 d溫度均超過55? ℃,高溫期(>45? ℃)持續(xù)12 d左右。堆肥后10~15 d,堆體溫度快速降低,之后逐漸接近室溫。 VR1、VR2、VR4的最高溫出現(xiàn)在堆肥后4 d,分別為67.3、64.3、65.8? ℃;VR1的溫度最高,VR2的略低。常規(guī)處理于堆肥后 7 d達(dá)到最高溫度 64.1? ℃。4組處理55? ℃以上時(shí)間在8 d左右,達(dá)到了堆肥化標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 36195—2018《畜禽糞便無害化處理技術(shù)規(guī)范》)的腐熟要求。
2.1.2 pH值和EC值的變化 由圖2-a可知,不同通風(fēng)速率組的pH值變化規(guī)律一致,數(shù)值接近。堆肥的pH值呈先上升后緩慢下降的趨勢,VR1、VR2、VR4這3個(gè)處理組的pH值由起始的5.0~5.3上升至35 d時(shí)的8.77~9.03,再緩慢降至 7.8~8.2;常規(guī)處理的pH值由起始的4.77上升至35 d時(shí)的9.23,再緩慢降至8.14。堆肥結(jié)束后,各組pH值均達(dá)到了成熟堆肥產(chǎn)品的要求[17]。由圖2-b可知,堆肥期間的EC值呈先上升再波動下降的趨勢,VR1、VR2、VR4這3組的EC值由初始的1.95~2.35 mS/cm,升至堆肥結(jié)束時(shí)的3.67~3.88 mS/cm,常規(guī)處理的EC值由起始的1.6 mS/cm上升至21 d的3.88 mS/cm,再緩慢降至3.17 mS/cm。通常堆肥的EC值小于4.00 mS/cm時(shí),對植物生長無毒害作用[18]。因此,所有處理的產(chǎn)品EC值均符合堆肥腐熟的要求。
2.2 堆肥過程中碳、氮元素的變化
由圖3-a可知,各組的總有機(jī)碳(TOC)含量整體呈下降趨勢,VR1、VR2、VR4這3個(gè)處理組的TOC含量由堆肥前期最高的435.00~465.60 g/kg降至最終的378.85~402.66 g/kg,常規(guī)處理的TOC由前期最高的471.65 g/kg降至最終的405.22 g/kg。各組間TOC含量差異不顯著(P>0.05)。由圖3-b可知,各組的水溶性有機(jī)碳(DOC)含量整體呈下降趨勢,VR1、VR2、VR4這3組由初始的1.65~2.11 g/kg下降至0.76~1.21 g/kg。常規(guī)處理的DOC含量由初始的1.90 g/kg下降至最終的 1.51 g/kg。由圖3-c可知,各組的總氮(TN)含量整體呈先降低再升高的趨勢。在堆肥后0~5 d,VR1、VR2、VR4這3[JP3]個(gè)處理組的TN含量由初始的25.96~28.97 g/kg下降至21.98~23.15 g/kg后,最終上升至結(jié)束時(shí)的31.08~34.25 g/kg。在堆肥后0~10 d,常規(guī)處理的TN含量由初始的22.58 g/kg上升至33.23 g/kg后,下降至結(jié)束時(shí)的30.08 g/kg。由圖3-d可知,各組的碳氮比(C/N)都有明顯降低的趨勢,VR1、VR2、VR4這3組的C/N由初始的13.9~15.5降到堆肥結(jié)束時(shí)的11.3~13.0,常規(guī)處理的C/N由初始的17.4下降至結(jié)束時(shí)的13.5。一般研究認(rèn)為,當(dāng)堆肥C/N小于17時(shí),堆肥達(dá)到腐熟[19],可見本研究中各組堆肥均達(dá)到腐熟要求。
2.3 堆肥腐熟度指數(shù)的變化
2.3.1 種子發(fā)芽指數(shù)變化 由圖4可知,除了在堆肥過程中的異常高值外,各組的種子發(fā)芽指數(shù)(GI)隨堆肥的進(jìn)行逐漸升高。VR1、VR2、VR4這3組的GI從初始的10.0%~30.8%升至堆肥結(jié)束時(shí)的91.9%~111.2%,常規(guī)處理的GI由初始的10.0%上升至結(jié)束時(shí)的82.1%。
2.3.2 水溶性有機(jī)物的紫外-可見光譜特性 由圖5可知,在堆肥過程中,各處理DOM的紫外-可見吸收光譜特征值SUVA254、SUVA280的變化規(guī)律一致,均呈現(xiàn)不斷上升的趨勢,組間差異不顯著(P>0.05)。其中SUVA254從最初的0.144~0.229上升至堆肥結(jié)束時(shí)的0.458~0.626(圖5-a);SUVA280從初始的0.126~0.196上升至堆肥結(jié)束時(shí)的0.400~0.528(圖5-b)。
2.4 堆肥過程中微生物種群的變化
2.4.1 門水平的種群變化和演替 由表2可知,樣品的測序文庫覆蓋率均超過0.99,測序結(jié)果代表樣本的真實(shí)情況。CK的Ace指數(shù)和Chao指數(shù)呈波動變化,而VR1整體呈增加的變化規(guī)律。與CK相比,過硫酸鉀的添加減少了VR1堆肥初期的細(xì)菌物種數(shù)量,但堆肥后6 d VR1的物種數(shù)量均比CK高。根據(jù)Shannon指數(shù)可知,2組群落多樣性在降溫期都開始顯著增加。CK的群落多樣性先增加后減小,VR1的群落多樣性整體呈增加的趨勢并在堆肥后期明顯高于CK。而Simpson指數(shù)則有不同的變化規(guī)律,2組群落從堆肥后6 d開始均降低,顯現(xiàn)出部分種群的優(yōu)勢度增大的趨勢。
2組在門水平的優(yōu)勢種群主要有厚壁菌門(Firmicutes)、放線菌門(Actinobacteriota)、變形菌門(Proteobacteria)、擬桿菌門(Bacteroidota),相對豐度總和達(dá)96%以上(圖6)。高溫期,2組群落的種群結(jié)構(gòu)差異顯著。厚壁菌門是常規(guī)處理在高溫期的最優(yōu)勢種群,堆肥后3、6 d的相對豐度分別為81.7%、98.9%。而在堆肥后3 d,放線菌門為VR1群落的最優(yōu)勢種群(58.5%);堆肥后6 d,厚壁菌門變?yōu)槠浣^對優(yōu)勢種群(92.5%)。2組群落的堆體溫度從堆肥后10 d開始下降,組間的種群結(jié)構(gòu)差異隨之變小。整體上,降溫后厚壁菌門的相對豐度降低,逐漸降至30%以下;放線菌門、變形菌門、擬桿菌門的相對豐度增加,放線菌門穩(wěn)定在35%以上,變形菌門在堆肥后21 d的相對豐度增至33%。擬桿菌門的相對豐度較低,除了VR1群落在堆肥后 21 d,其余均低于11.4%。
2.4.2 屬水平的種群變化和演替 常規(guī)處理和VR1在高溫期的優(yōu)勢屬完全不同,降溫期2組優(yōu)勢種群的多樣性增加,且優(yōu)勢種群的組間差別變小(圖7)。高溫期,常規(guī)處理組Bacillus占絕對優(yōu)勢,堆肥后3、6 d的相對豐度分別為68.8%、92.6%,其他屬的豐度均很低。Bacillus(Firmicutes)是重要的嗜熱分解菌,具有廣泛的生化活性,通常是堆肥全過程的優(yōu)勢種群[20-21]。高溫期,VR1中細(xì)菌優(yōu)勢種群的多樣性大大高于對照。堆肥后3 d的優(yōu)勢種群包括Saccharopolyspora、norank_f_Pseudonocardiaceae、Rhodococcus、Gordonia、Thermopolyspora、 Bacillus、Saccharomonospora。VR1堆肥后6 d的優(yōu)勢種群變?yōu)镕irmicutes(92.5%),而且VR1中Firmicutes的多樣性明顯高于常規(guī)處理組。除了芽孢桿菌屬,優(yōu)勢屬還包括Symbiobacterium、Ureibacillus、Caldibacillus、Aeribacillus、Planifilum、Thermobacillus、unclassified_c_Clostridia,均屬于Firmicutes。
堆體溫度降低后,2組群落的種群結(jié)構(gòu)差別變小。高溫雙岐菌屬(Thermobifida)在2組群落中都是最優(yōu)勢種群,在VR1堆肥后15 d的相對豐度高達(dá)49.1%,對Thermobifida更有利。在常規(guī)處理中,Thermobifida相對豐度較高且有波動(6.9%~26.3%),其他的優(yōu)勢種群在降溫期演替的順序?yàn)椋河啥逊屎?0 d的Bacillus、 Aeribacillus、 Caldibacillus變?yōu)槎逊屎?5 d的Bacillus、Saccharomonospora、Saccharopolyspora,再變?yōu)槎逊屎?1 d的Saccharomonospora、Pseudoxanthomonas、Bacillus。
3 討論
3.1 通風(fēng)速率對堆肥過程理化性質(zhì)的影響
本研究參考已有研究,選用常規(guī)通風(fēng)速率為400 mL/min[12-13],與其他蔬菜堆肥研究相比,通風(fēng)速率偏低。劉文杰等在對蔬菜廢棄物的堆肥研究中,對18~24 kg物料的通風(fēng)量設(shè)為25 L/min[11]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在添加1.2%過硫酸鉀條件下,200 mL/min通風(fēng)條件也能順利升溫,只是高溫期溫度稍低,而通風(fēng)速率100 mL/min加陶粒的溫度是3組中最高的。這可能與低通風(fēng)速率和陶粒的添加有關(guān),低通風(fēng)速率減少了熱量散失,而陶粒增加物料的孔隙率,有利于空氣在堆肥物料中的擴(kuò)散[14,22],確保低通風(fēng)速率條件下降解過程對氧氣的需求。在提高材料孔隙率條件下,添加1.2%過硫酸鉀,在降低通風(fēng)速率75%時(shí),物料降解仍能順利進(jìn)行,而且能實(shí)現(xiàn)堆體快速升溫。常規(guī)處理的最高溫度低于其他處理,且溫度峰值的出現(xiàn)明顯滯后于其他處理,表明過硫酸鉀能在一定程度上加速物料進(jìn)入高溫期。
堆肥物料的容重間接反映了堆體的孔隙度,因此容重對堆體的透氣性影響極大。容重越大,孔隙度越小,堆體內(nèi)的氧氣輸送受阻,越不利于提高堆肥效率。本研究堆肥物料的初始容重估算為 0.16~0.22 g/cm3。秦翠蘭等在牛糞堆肥研究中測定的容重變化范圍為0.4~1.3 g/cm3,初始容重為0.8~1.2 g/cm3[23]。相較于此研究,本研究物料的初始容重較小,孔隙較大,空氣擴(kuò)散條件好,對低通風(fēng)速率條件較為適宜。
堆肥過程中,pH值會隨著物質(zhì)的轉(zhuǎn)化和微生物的活動而變化,同時(shí)也是影響堆肥進(jìn)行的重要因素。pH值過高或過低,都不利于堆體中微生物的生長,pH值在6.5~8.5比較合適。各處理組起始的pH值在5.0~5.3之間,為弱酸性,可能是由于初始微生物降解糖類等易降解物質(zhì),產(chǎn)生大量的有機(jī)酸,使得pH值下降[24]。堆肥的前6 d,VR1、VR2、VR4的pH值均快速上升,這是由于高溫階段,物料劇烈分解使大量有機(jī)氮礦化和有機(jī)酸降解而造成的;而常規(guī)處理在堆肥后3 d的pH值降低,與其他3組處理顯著不同(P<0.05),表明添加過硫酸鉀有利于避免易腐有機(jī)物高溫降解初期的酸化問題,有利于堆肥順利升溫。堆肥后35 d,堆肥進(jìn)入腐熟階段,微生物礦化作用減弱,硝化細(xì)菌開始活躍,將銨態(tài)氮通過硝化作用轉(zhuǎn)變?yōu)橄鯌B(tài)氮,pH值又有所降低[25]。
堆肥產(chǎn)品的EC值能夠反映產(chǎn)品中的鹽含量。堆肥前期有機(jī)物被不斷降解,銨鹽、硝酸鹽等不斷釋放,同時(shí)由于物料降解引起質(zhì)量損失,導(dǎo)致鹽分濃縮,最終使堆肥的EC值升高。整體上EC值表現(xiàn)為VR2>VR4>VR1,降低通風(fēng)速率可降低堆肥過程中物料的EC值,最終產(chǎn)品的EC值差別不大(P>0.05)。常規(guī)處理的EC值整體低于其他3組,是因?yàn)闆]有添加過硫酸鉀,鹽含量低。整體上,降低通風(fēng)量對堆肥過程的進(jìn)行和理化性質(zhì)的變化沒有不利影響。
3.2 堆肥過程中碳、氮元素的變化
隨著有機(jī)質(zhì)被微生物降解和利用,堆肥物料中碳含量會逐漸降低[26]。各組初始的總有機(jī)碳含量(TOC)較高,這可能是由于初期物料還處于原始結(jié)構(gòu)狀態(tài),不易風(fēng)干,導(dǎo)致相同風(fēng)干時(shí)間條件下,初始樣品的含水率偏高,造成總有機(jī)碳(TOC)的計(jì)算結(jié)果偏低。
可溶性有機(jī)碳含量(DOC)是反映堆肥穩(wěn)定性的重要參數(shù)之一。DOC是能夠被微生物利用、合成自身生命體的最直接碳源,強(qiáng)烈影響著堆肥分解過程。堆肥中后期出現(xiàn)DOC升高和波動現(xiàn)象,可能是由物料中纖維素等難降解組分引起的。有研究認(rèn)為,有些DOC是腐殖酸形成的前體物,腐殖酸的形成會使堆肥后期的DOC含量降低[25]。在堆肥過程中,VR1的DOC含量基本上低于其他組。堆肥結(jié)束時(shí),各組DOC含量小于初始含量,分別為0.757、1.157、1.208 g/kg,均達(dá)到堆肥穩(wěn)定標(biāo)準(zhǔn)化(<17 g/kg)[27]。
隨著堆肥的進(jìn)行,各組的總氮(TN)含量呈現(xiàn)較大的波動。高溫期,各組TN含量先降低再升高。高溫期TN含量的降低可能與有機(jī)氮的快速降解有關(guān),有機(jī)氮降解產(chǎn)生的氨態(tài)氮在高溫條件下以氨的形式揮發(fā),使TN含量降低。堆肥后期,微生物降解利用木質(zhì)纖維素,干物質(zhì)降解損失,濃縮效應(yīng)使物料的TN含量又增加[28-29]。堆肥結(jié)束時(shí),產(chǎn)品的TN含量增加明顯(P<0.05),比初始含量提高20%左右。VR1最終的TN含量低于其他組,這可能與其高溫條件和高孔隙率導(dǎo)致的氨揮發(fā)有關(guān)。
3.3 通風(fēng)速率對堆肥腐熟的影響
種子發(fā)芽指數(shù)(GI)是綜合評價(jià)堆肥產(chǎn)品腐熟的指標(biāo)。當(dāng)GI達(dá)到腐熟要求時(shí),堆肥產(chǎn)品對植物生長的毒性已消除。與牛糞秸稈等材料的堆肥過程相比,本研究GI達(dá)到腐熟要求的時(shí)間較晚,這可能是堆肥原料的性質(zhì)差異造成的[12,30]。堆肥結(jié)束時(shí),各組GI分別為97.5%、111.2%、91.9%,均達(dá)到NY/T 525—2021《有機(jī)肥料》GI大于70%的腐熟要求。堆肥中后期,VR1的GI高于VR2、VR4,且3組處理的GI均高于常規(guī)處理,此工藝條件對堆肥產(chǎn)品的植物毒性沒有不利影響。
水溶性有機(jī)物DOM的紫外-可見吸收光譜特性被證明可以用于評價(jià)堆肥的腐熟度[31]。本研究選擇紫外-可見吸收光譜特征值SUVA254、SUVA280來評判堆肥的腐熟度。SUVA254與有機(jī)物中C—C鍵化合物組成有關(guān),而SUVA280則受有機(jī)物芳構(gòu)化程度及分子量大小影響,二者的值越大,腐殖化程度越高[32]。隨著堆肥的進(jìn)行,各組SUVA254、SUVA280不斷增加,表明各組在堆肥的中后期腐殖化程度不斷提高。婁義晟等對雞糞和稻殼混堆的研究表明,SUVA254、SUVA280值的增加與堆體的穩(wěn)定性呈正相關(guān),可作為堆肥腐熟的輔助性評價(jià)指標(biāo)[33]。按照此腐熟標(biāo)準(zhǔn)判斷,本研究堆肥結(jié)束時(shí)各組的SUVA254、SUVA280均呈上升趨勢,表明堆肥的腐熟度提高。VR1最終的SUVA254、SUVA280高于VR2、VR4,表明在該條件下堆肥的腐熟化程度較高。
3.4 微生物種群差異性分析
VR1和常規(guī)處理在細(xì)菌種群的多樣性和種群結(jié)構(gòu)方面均有明顯差異。VR1增加了細(xì)菌的豐富度和多樣性,且高溫期的優(yōu)勢種群與常規(guī)處理不同。
在門的水平,2組群落中Firmicutes、Actinobacteriota的差異顯著。VR1中Firmicutes的相對豐度明顯低于常規(guī)處理。尤其在高溫期開始,VR1群落在堆肥后3 d的Firmicutes相對豐度只有26.7%,而常規(guī)處理為81.7%。而VR1對Actinobacteriota的生長和活動有利,Actinobacteriota是VR1的最優(yōu)勢種群,除堆肥后6 d外,相對豐度達(dá)35%~70%。Actinobacteriota可以通過分泌相關(guān)酶來降解木質(zhì)纖維素,是堆肥過程的主要種群之一,其數(shù)量一般在高溫期過后增加,被認(rèn)為是堆肥腐熟的指示菌[34]。而VR1在高溫期Actinobacteriota也有很高的相對豐度(堆肥后3 d為58.5%)。
在屬的水平,常規(guī)處理組高溫期Bacillus占絕對優(yōu)勢(相對豐度68.8%~92.6%)。Bacillus(Firmicutes)是重要的嗜熱分解菌,具有廣泛的生化活性,通常是堆肥全過程的優(yōu)勢種群[35]。而VR1在堆肥后 3 d的優(yōu)勢種群多為嗜熱放線菌,其中最優(yōu)勢種群Saccharopolyspora的相對豐度為27.4%。VR1對高溫放線菌有利,這可能由于堆肥初期過硫酸鉀能夠氧化易降解有機(jī)酸,使堆肥材料的pH值快速升高(見“2.1.2”節(jié)),有利于放線菌的繁殖。VR1在堆肥后6 d的優(yōu)勢種群變?yōu)镕irmicutes(92.5%),但其中除了Bacillus,還包括Symbiobacterium、Ureibacillus等多種高溫耐熱菌,這些屬具有纖維素、半纖維素降解功能,有利于有機(jī)氮、有機(jī)酸快速降解[36-37]。VR1在高溫期Bacillus的相對豐度不超過10%,遠(yuǎn)低于常規(guī)處理組的70%~90%。與常規(guī)處理組相比,VR1在高溫期的Bacillus種群明顯受到抑制(圖8),其他纖維素半纖維素降解高溫厚壁菌及有機(jī)物快速降解菌取代了Bacillus。這種變化可能是堆肥初期過硫酸鉀對有機(jī)物氧化降解造成的。過硫酸鉀對有機(jī)物的分解取代Bacillus種群的功能,減少Bacillus的降解基質(zhì),抑制其生長和活動。
2組對比發(fā)現(xiàn),VR1與常規(guī)處理組的優(yōu)勢種群更替順序一致,但常規(guī)處理的種群演替滯后于VR1,表明VR1的堆肥進(jìn)程更快,可以促進(jìn)物質(zhì)降解和腐熟。由于VR1的處理包括1.2%過硫酸鉀、15%陶粒和100 mL/min通風(fēng)速率,三者協(xié)同作用,單一因素對微生物的影響還需要進(jìn)一步探究。
4 結(jié)論
蔬菜廢棄物在添加1.2%過硫酸鉀的條件下堆肥50 d,通風(fēng)速率100、200、400 mL/min的組間理化性質(zhì)差別不大。各組高溫期(>45? ℃)持續(xù)13 d左右,產(chǎn)品pH值為7.8~8.2,EC值為3.67~3.88 mS/cm,C/N為11.3~13.0,GI為91.9%~111.2%,均達(dá)到腐熟,符合NY/T 525—2021《有機(jī)肥料》的要求。
各處理組均升溫較快,堆肥后 1 d溫度都超過了 55? ℃。VR1的高溫期溫度略高于另外2組,表明添加1.2%過硫酸鉀并提高材料孔隙率條件下,通風(fēng)速率為100 mL/min時(shí)堆肥仍能順利進(jìn)行,而且升溫速度快。VR1最終的TN含量低于其他組,這可能與其高溫條件和高孔隙率導(dǎo)致的氨揮發(fā)有關(guān)。隨著堆肥的進(jìn)行,各組DOM的SUVA254、SUVA280值整體均不斷增加,表明堆肥的腐熟度提高。
蔬菜廢棄物堆肥的優(yōu)勢種群在門水平有Firmicutes、Actinobacteriota、Proteobacteria、Bacteroidota,相對豐度總和達(dá)96%以上。添加過硫酸鉀對Firmicutes、Actinobacteriota影響明顯,尤其在堆肥初期降低了Firmicutes的豐度,而對Actinobacteriota的生長和活動有利。堆肥后3 d,常規(guī)處理中的優(yōu)勢種群是Bacillus,而VR1為多種高溫纖維素降解菌種群。整體上,常規(guī)處理中微生物的種群演替滯后于VR1,VR1的堆肥進(jìn)程更快,VR1條件有利于有機(jī)質(zhì)的降解和腐熟。由于VR1處理添加1.2%過硫酸鉀、15%陶粒并選用低通風(fēng)速率100 mL/min,單一因素對微生物的影響還不夠明晰。今后的研究需要在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探究過硫酸鉀、陶粒及通風(fēng)速率單獨(dú)作用下對蔬菜廢棄物堆肥過程微生物的影響。
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