崔張霞，張娜

子癇前期是妊娠期常見的妊娠疾病，臨床特征為高血壓、蛋白尿等，如不盡早治療，將發(fā)展為子癇，嚴重影響產(chǎn)婦及胎兒的生命[1]。相關(guān)研究報道，初產(chǎn)婦子癇前期發(fā)病率為3%～8%，存在子癇前期病史的經(jīng)產(chǎn)婦子癇前期再發(fā)生率為10%～65%[2]。子癇前期會導致孕婦血壓上升，引起孕婦發(fā)生抽搐、全身痙攣，甚至導致胎盤早剝、胎兒生長受限等，造成圍產(chǎn)期胎兒死亡[3]。因此，發(fā)現(xiàn)與子癇前期孕婦妊娠結(jié)局相關(guān)的指標是臨床研究要點。子癇前期發(fā)病機制尚不清楚，有學者認為子癇前期與胎盤灌注不足、血管內(nèi)皮功能障礙、凝血功能異常等密切相關(guān)[4]。成纖維細胞生長因子5(fibroblast growth factor 5，F(xiàn)GF5)是成纖維細胞生長因子之一，Ren等[5]研究報道，原發(fā)性高血壓患者外周血中FGF5表達水平顯著上升。組織因子(tissue factor，TF)是血管內(nèi)皮下層及周圍組織的組成成分，在降低血管損傷后出血反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用[6]。趙會榮等[7]研究報道，TF在妊娠期高血壓患者血清中表達水平顯著上升?；诖耍狙芯刻骄孔影B前期孕婦血清FGF5、TF水平與妊娠不良結(jié)局相關(guān)性，早期分析孕婦妊娠結(jié)局，有利于早期對孕婦行干預措施，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月—2022年3月在陜西中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院產(chǎn)檢及分娩的子癇前期孕婦72例作為觀察組，均為單胎妊娠，參照“妊娠期高血壓疾病診治指南(2015)”[8]中對子癇前期病情嚴重程度判斷標準，將患者分為輕度亞組(n=40)和重度亞組(n=32)。另選擇同期醫(yī)院產(chǎn)科健康的單胎妊娠孕婦78例作為健康對照組，2組年齡、孕周、BMI、孕次、產(chǎn)次比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準(2016-01205)，受試者及其家屬對本研究均知情同意并自愿簽署知情同意書。

表1 健康對照組與觀察組孕婦基本資料比較

1.2 病例選擇標準 納入標準：(1)符合第8版《婦產(chǎn)科學》關(guān)于子癇前期診斷標準[9]；(2)孕前月經(jīng)周期規(guī)律；(3)在本院分娩。排除標準：(1)有先兆流產(chǎn)史；(2)妊娠期糖尿病、原發(fā)性高血壓患者；(3)免疫性疾病、肝腎功能嚴重不全者；(4)人工授精或試管嬰兒的孕婦。

1.3 觀測指標與方法

1.3.1 實時定量PCR法檢測血清中FGF5表達水平：子癇前期患者在入組次日，健康對照組孕婦在產(chǎn)檢當日早上抽取空腹靜脈血4 ml，4 000 r/min離心，取血清保存于-80℃?zhèn)錅y。用RNA提取試劑盒(日本Takara公司)提取總RNA，依據(jù)PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser(日本Takara公司)指導書反轉(zhuǎn)錄得到cDNA。采用StepOne Plus實時熒光定量PCR儀(美國ABI公司)對血清中FGF5及內(nèi)參GAPDH進行擴增反應(yīng)。FGF5引物序列：上游引物5’-CCCACGAAGCCAGTGTGTTA-3’，下游引物5’-ATCGCGGACGCATAGGTATT-3’。GAPDH引物序列：上游引物5’-AAGGTCATCCCAGAGCTGAA-3’，下游引物5’-CTGCTTCACCACCTTCTTGA-3’。反應(yīng)條件：95℃ 5 min，95℃ 30 s，56℃ 30 s，72℃ 30 s，36個循環(huán)。FGF5相對表達量用2-△△CT法計算。

1.3.2 血清TF水平檢測：上述血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清TF水平，試劑盒購于英國abcam公司，利用酶標儀(美國Thermo Scientific公司)于450 nm處測定吸光度，計算血清TF水平。

1.3.3 凝血功能指標檢測：收集子癇前期患者在入組次日清晨空腹靜脈血3 ml。采用全自動血凝儀(美國Beckman Coulter公司)檢測血漿中活化部分凝血酶原時間(activated partial thromboplastin time，APTT)、纖維蛋白原(fibrinogen，F(xiàn)ib)、凝血酶原時間(prothrombin time，PT)、血小板(platelets，PLT)水平。

1.3.4 隨訪情況：隨訪所有子癇前期患者至妊娠結(jié)束，記錄圍生兒預后情況，不良妊娠結(jié)局包括孕婦不良結(jié)局及胎兒、新生兒不良結(jié)局。孕婦不良結(jié)局：發(fā)展為子癇、重要器官衰竭、胎盤早剝、死亡等；胎兒不良結(jié)局：生長受限、羊水過少、死胎等；新生兒不良結(jié)局：新生兒窒息、死亡等。

2 結(jié) 果

2.1 2組血清FGF5、TF水平比較 與健康對照組比較，觀察組血清FGF5、TF水平升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表2。

表2 健康對照組與觀察組血清FGF5、TF水平比較

2.2 輕度亞組與重度亞組血清FGF5、TF水平比較 與輕癥亞組比較，重癥亞組血清FGF5、TF水平升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表3。

表3 輕度亞組與重度亞組血清FGF5、TF水平比較

2.3 不良妊娠結(jié)局亞組和妊娠結(jié)局良好亞組臨床資料比較 本組子癇患者中，不良妊娠結(jié)局22例，妊娠結(jié)局良好50例。與妊娠結(jié)局良好亞組比較，不良妊娠結(jié)局亞組APTT、PT、PLT水平降低(P<0.01)，F(xiàn)ib、FGF5、TF表達水平升高(P<0.01)，見表4。

表4 妊娠結(jié)局良好亞組和不良妊娠結(jié)局亞組臨床資料比較

2.4 子癇前期孕婦血清FGF5、TF與血漿凝血指標相關(guān)性分析 Pearson分析顯示，子癇前期患者血清中FGF5、TF與APTT、PT、PLT呈負相關(guān)(P<0.01)，與Fib呈正相關(guān)(P<0.01)，見表5。

表5 血清FGF5、TF與血漿凝血指標相關(guān)性分析

2.5 Logistic回歸分析影響不良妊娠結(jié)局的獨立危險因素 將子癇前期患者妊娠結(jié)局作為因變量(妊娠結(jié)局良好=0，不良妊娠結(jié)局=1)，將FGF5、TF、APTT、PT、Fib、PLT作為自變量，Logistic回歸分析顯示，F(xiàn)GF5高、TF高、Fib高、PLT低是子癇前期孕婦不良妊娠結(jié)局的獨立危險因素(P<0.05)，見表6。

表6 Logistic回歸分析影響不良妊娠結(jié)局的獨立危險因素

3 討 論

子癇前期早期表現(xiàn)為全身血管痙攣，血管阻力和血壓迅速上升，隨時可能危害孕婦生命安全，若病情嚴重時未立即終止妊娠，易導致不良妊娠結(jié)局，如胎兒生長受限、死產(chǎn)等[10]。子癇前期孕婦由于體內(nèi)血管內(nèi)皮損傷及小血管痙攣引起凝血功能發(fā)生顯著變化，機體處于高凝狀態(tài)[11-12]。孕婦凝血系統(tǒng)異常最直接的表現(xiàn)是凝血指標異常，凝血系統(tǒng)異常易引起整個循環(huán)系統(tǒng)出現(xiàn)不同程度的供血障礙，機體組織器官也發(fā)生供血障礙，組織血氧供應(yīng)不足，給孕婦帶來較大的危險[13]。因此，尋找可靠的檢測指標預測子癇前期孕婦妊娠結(jié)局，有利于早期對孕婦行干預措施。

目前，大部分學者認為子癇前期發(fā)病的基礎(chǔ)是妊娠期孕婦凝血功能的改變[14]。APTT、PT水平低表示子癇前期孕婦處于高凝狀態(tài)，易發(fā)生微血栓、微血管堵塞。Fib直接參與凝血過程，其水平升高說明機體纖溶活性降低，形成血栓的風險增加；另外，F(xiàn)ib可促進血小板聚集﹑黏附，導致血管內(nèi)皮細胞損傷[13]。妊娠合并血小板減少通常會引起患者貧血、胎兒早產(chǎn)、新生兒貧血等不良后果，嚴重時威脅母嬰生命[15]。本研究顯示，與妊娠結(jié)局良好亞組相比，不良妊娠結(jié)局亞組血漿APTT、PT、PLT水平降低，血漿Fib水平升高，提示子癇前期患者存在凝血功能亢進、抗凝血功能降低，患者處于血管內(nèi)凝血的高凝期[16]。

本研究顯示，觀察組血清FGF5、TF水平顯著高于健康對照組，重度亞組血清FGF5、TF水平明顯高于輕度亞組，提示血清FGF5、TF可能影響子癇前期發(fā)生及發(fā)展。本研究顯示，不良妊娠結(jié)局亞組血清FGF5、TF水平顯著高于妊娠結(jié)局良好亞組，提示血清FGF5、TF可能影響子癇前期妊娠結(jié)局。TF是組織凝血活酶或凝血因子Ⅰ，是生理性凝血級聯(lián)反應(yīng)的主要啟動因子，血管內(nèi)皮損傷時可大量釋放入血，啟動凝血過程，促使血栓形成[17]。TF在生理和病理性止血過程中作為機體內(nèi)最強的促凝物質(zhì)之一，在外源性凝血途徑中，與凝血因子Ⅵ、凝血因子Ⅹ結(jié)合并使其激活，促進凝血酶原生成凝血酶，進而啟動血液凝固級聯(lián)反應(yīng)[18]。趙會榮等[7]研究顯示，妊娠高血壓患者血清中TF與APTT、PT呈密切負相關(guān)。FGF5屬于成纖維細胞生長因子(FGF)家族，F(xiàn)GF5由268個氨基酸組成，具有28個高度保守的氨基酸殘基，其中10個高度保守的氨基酸殘基可與FGF受體結(jié)合[19]。全基因組關(guān)聯(lián)分析報告顯示，F(xiàn)GF5基因內(nèi)部是原發(fā)性高血壓的易感區(qū)域[20]。另外有研究報道，F(xiàn)GF5可促進人主動脈內(nèi)皮細胞(HAEC)的血管生成，且HAEC中的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)-A可刺激FGF5表達水平顯著升高[21]。本研究進一步發(fā)現(xiàn)，子癇前期患者FGF5、TF與APTT、PT、PLT、Fib密切相關(guān)，提示血清FGF5、TF可能通過影響子癇前期患者體內(nèi)凝血功能進而影響子癇前期孕婦妊娠結(jié)局。Logistic回歸分析顯示，F(xiàn)GF5高、TF高、Fib高、PLT低是子癇前期孕婦不良妊娠結(jié)局的獨立危險因素，提示除Fib、PLT外，F(xiàn)GF5、TF也是子癇前期孕婦不良妊娠結(jié)局的獨立危險因素。

綜上所述，子癇前期孕婦血清FGF5、TF水平顯著升高，是子癇前期孕婦不良妊娠結(jié)局的獨立危險因素。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明

崔張霞：研究設(shè)計，論文撰寫；張娜：資料收集，數(shù)據(jù)分析，論文修改