梁慧，陶晨璐，劉艷梅，彭致鋮，潘禮業(yè)，朱德全，丁青

（廣東一方制藥有限公司，廣東省中藥配方顆粒企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東佛山 528244）

石見(jiàn)穿為唇形科植物華鼠尾草（Salvia chinensisBenth.）的干燥地上部分[1]，具有清熱解毒、活血止痛的功效，原植物主要分布在山東、江蘇南部、安徽南部、浙江、湖北、廣東北部、廣西東北部、四川等地[2]?，F(xiàn)代中醫(yī)臨床研究表明，石見(jiàn)穿對(duì)婦科疾病、各類(lèi)炎癥及多種癌癥有良好療效[3]。石見(jiàn)穿在臨床上常以湯劑形式使用，湯劑以水溶性成分為主。黃雯潔等[4]對(duì)石見(jiàn)穿水提物進(jìn)行質(zhì)譜分析，發(fā)現(xiàn)其中含有大量酚酸類(lèi)成分，包括丹參素、原兒茶酸、綠原酸、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C等。酚酸類(lèi)物質(zhì)具有抗氧化、抗菌、抗炎等多種藥理活性[5]，與石見(jiàn)穿清熱解毒的功效相關(guān)，為石見(jiàn)穿的主要活性成分之一。石見(jiàn)穿中的酚酸類(lèi)物質(zhì)較多，目前已有研究針對(duì)其中的迷迭香酸、丹酚酸B、丹參素建立含量測(cè)定方法[6-9]，但多采用HPLC法，且檢測(cè)指標(biāo)較少，亦未對(duì)不同產(chǎn)地的樣品進(jìn)行深入統(tǒng)計(jì)分析。近年來(lái)，聚類(lèi)熱圖、灰色關(guān)聯(lián)度分析與熵權(quán)TOPSIS 分析作為新型的統(tǒng)計(jì)分析工具被廣泛應(yīng)用于中藥研究領(lǐng)域。與傳統(tǒng)的系統(tǒng)聚類(lèi)相比，聚類(lèi)熱圖分析不僅可對(duì)樣品進(jìn)行分類(lèi)，還可結(jié)合熱圖更直觀了解到數(shù)據(jù)的分布?；疑P(guān)聯(lián)度分析可較好的反映數(shù)據(jù)間的非線(xiàn)性關(guān)系[10]，具有樣本要求低、計(jì)算量小的優(yōu)點(diǎn)[11]，其“灰色系統(tǒng)理論”與中醫(yī)藥理論思想相契合，為中藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了新思路。熵權(quán)TOPSIS 分析法是一種常用的組內(nèi)綜合評(píng)價(jià)方法，能充分利用原始數(shù)據(jù)的信息，精確地反映各評(píng)價(jià)方案之間的差距。其方案屬性與效用之間呈線(xiàn)性變化關(guān)系[10]，與灰色關(guān)聯(lián)度分析相互驗(yàn)證能更客觀地評(píng)價(jià)中藥材質(zhì)量。

本研究收集了來(lái)自廣東、廣西、山東、安徽、湖北5 個(gè)產(chǎn)地共20 批藥材，采用UPLC 技術(shù)建立了快速測(cè)定石見(jiàn)穿中5 種酚酸類(lèi)成分的含量測(cè)定方法，同時(shí)參照2020 年版《中國(guó)藥典》測(cè)定其水溶性浸出物，引入近年熱門(mén)的聚類(lèi)熱圖、灰色關(guān)聯(lián)度分析與熵權(quán)TOPSIS 分析綜合評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地石見(jiàn)穿藥材的質(zhì)量，以期為石見(jiàn)穿藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及資源利用提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Thermo Vanquish 型超高效液相色譜儀（美國(guó)賽默飛公司）；Waters H-Class 型超高效液相色譜儀（美國(guó)沃特世公司）；Agilent 1290 型超高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫公司）；ME204E 型萬(wàn)分之一電子分析天平（瑞士Mettler Toledo 公司）；XP26 型百萬(wàn)分之一電子分析天平（瑞士Mettler Toledo 公司）；KQ-500DE 型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；Milli-Q Direct 型超純水系統(tǒng)（默克股份有限公司）。

1.2 材料

丹酚酸B 對(duì)照品（批號(hào)：111562-201917，純度96.6%）、丹參素鈉對(duì)照品（批號(hào)：110855-201915，純度97.8%）、咖啡酸對(duì)照品（批號(hào)：110885-201703，純度99.7%）、綠原酸對(duì)照品（批號(hào)：110753-202018，純度96.1%）、迷迭香酸對(duì)照品（批號(hào)：111871-202007，純度98.1%）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；水為超純水，甲酸（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）、乙腈（德國(guó)默克公司）為色譜純，甲醇（西隴科學(xué)股份有限公司）為分析純。20 批石見(jiàn)穿藥材樣品采購(gòu)自廣東、廣西、山東、安徽、湖北5 個(gè)產(chǎn)地，經(jīng)廣東一方制藥有限公司孫冬梅教授鑒定，均為唇形科植物華鼠尾草（Salvia chinensisBenth.）的干燥地上部分，具體信息見(jiàn)表1。

表1 20批石見(jiàn)穿藥材來(lái)源信息Table 1 Source information of 20 batches of Salvia Chinensis

2 方法

2.1 水溶性浸出物測(cè)定

參照《中國(guó)藥典》2020 年版四部通則2201 項(xiàng)下水溶性浸出物測(cè)定法中的熱浸法進(jìn)行測(cè)定。

2.2 5種酚酸類(lèi)成分測(cè)定

2.2.1 色譜條件 采用Waters BEH C18色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；以0.1%甲酸（A）-乙腈（B）為流動(dòng)相按表2中的洗脫梯度進(jìn)行檢測(cè)；檢測(cè)波長(zhǎng)為290 nm；柱溫為40 ℃；流速為0.4 mL/min；進(jìn)樣量為1 μL。

表2 梯度洗脫表Table 2 Gradient elution procedure

2.2.2 對(duì)照品溶液制備 分別取咖啡酸、綠原酸、迷迭香酸、丹酚酸B 對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加入體積分?jǐn)?shù)為50%的甲醇分別制成每1 mL 含咖啡酸50 μg、綠原酸50 μg、迷迭香酸100 μg、丹酚酸B 50 μg的溶液，即得相應(yīng)的對(duì)照品溶液；另取丹參素鈉對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加入體積分?jǐn)?shù)為50%的甲醇制成每1 mL含50 μg的溶液（相當(dāng)于每1 mL含丹參素45 μg），即得丹參素對(duì)照品溶液。

2.2.3 供試品溶液制備 取石見(jiàn)穿藥材粉末（過(guò)三號(hào)篩）約1.0 g，精密稱(chēng)定，置50 mL 錐形瓶中，精密加入體積分?jǐn)?shù)為50%的甲醇25 mL，稱(chēng)定質(zhì)量，超聲處理（功率250W，頻率40 kHz）30 分鐘，放冷，再稱(chēng)定質(zhì)量，用體積分?jǐn)?shù)為50%的甲醇水溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液即得。

2.2.4 方法學(xué)考察

2.2.4.1 專(zhuān)屬性試驗(yàn) 精密吸取空白溶劑（體積分?jǐn)?shù)為50%的甲醇）、“2.2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液、“2.2.3”項(xiàng)下石見(jiàn)穿（編號(hào)SJC03）供試品溶液各1 μL，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)圖1。如圖1 所示，石見(jiàn)穿藥材供試品溶液色譜圖與對(duì)照品溶液色譜圖在相同保留時(shí)間處有對(duì)應(yīng)色譜峰，且空白溶劑無(wú)干擾，說(shuō)明建立的方法專(zhuān)屬性良好。

圖1 石見(jiàn)穿藥材5種酚酸類(lèi)成分含量測(cè)定專(zhuān)屬性考察色譜圖Figure 1 The chomatograms of specific test

2.2.4.2 線(xiàn)性關(guān)系考察 取丹參素鈉、咖啡酸、綠原酸、迷迭香酸、丹酚酸B 對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，置25 mL棕色量瓶中，加體積分?jǐn)?shù)為50%的甲醇定容，制成每1 mL 含丹參素198.182 μg、咖啡酸40.961 μg、綠原酸40.304 μg、迷迭香酸196.828 μg、丹酚酸B 165.843 μg 的混合對(duì)照品母液；精密吸取混合對(duì)照品母液5、2.5、1.25、1、0.5、0.2 mL，分別置10 mL棕色量瓶中，加體積分?jǐn)?shù)為50%的甲醇水溶液定容，制得系列混合對(duì)照品溶液。取上述系列混合對(duì)照品溶液和混合對(duì)照品母液各1 μL，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄各對(duì)照品峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo)、對(duì)照品的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，結(jié)果如表3所示。

表3 線(xiàn)性關(guān)系考察Table 3 Results of linear relationship investigation

2.2.4.3 精密度試驗(yàn) 取石見(jiàn)穿藥材粉末（編號(hào)SJC03）約1.0 g，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算丹參素、咖啡酸、綠原酸、迷迭香酸、丹酚酸B 的峰面積RSD 分別為0.72%、0.40%、0.39%、0.42%、0.65%，均小于3%，表明儀器精密度良好。

2.2.4.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.2.4.3”精密度項(xiàng)下供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件分別在0、2、4、6、8、12、24 h 進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算丹參素、咖啡酸、綠原酸、迷迭香酸、丹酚酸B 的峰面積RSD 分別為0.81%、0.84%、0.79%、0.45%、0.92%，均小于3%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.4.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取石見(jiàn)穿藥材粉末（編號(hào)SJC03）按“2.2.3”項(xiàng)下方法平行制備6 份供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果，樣品中丹參素、咖啡酸、綠原酸、迷迭香酸、丹酚酸B 的平均含量分別為0.810、0.056、0.148、0.495、1.315 mg/g，RSD分別為1.81%、0.66%、0.77%、0.62%、1.53%，均符合《中國(guó)藥典》2020 年版四部9101“分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則”中的規(guī)定，表明該分析方法重復(fù)性良好。

2.2.4.6 準(zhǔn)確度考察 取丹參素納5.000 mg、咖啡酸3.002 mg、綠原酸7.664 mg、迷迭香酸2.600 mg、丹酚酸B 6.444 mg，加50%甲醇制成每1 mL含丹參素44.010 μg、咖啡酸29.930 μg、綠原酸73.651 μg、迷迭香酸25.506 μg、丹酚酸B 62.249 μg的混合對(duì)照品溶液，作為加樣回收母液。取已知成分含量的石見(jiàn)穿樣品（編號(hào)SJC03）約0.5 g，平行3組，每組3份，精密稱(chēng)定，按樣品中5種成分與對(duì)照品的質(zhì)量比為0.5∶1、1∶1及1.5∶1的比例分別加入5種對(duì)照品，即0.5∶1組加入加樣母液5 mL，再加50%甲醇至25 mL；1∶1組加入加樣母液10 mL，再加50%甲醇至25 mL；1.5∶1組加入加樣母液15 mL，再加50%甲醇至25 mL；將上述9 份供試品超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，濾過(guò)，取續(xù)濾液即得。按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果見(jiàn)表4，丹參素加樣回收率范圍為93.21%～96.46%，RSD為1.25%；咖啡酸加樣回收率范圍為92.31%～95.63%，RSD 為1.71%；綠原酸加樣回收率范圍為93.37%～97.18%，RSD 為1.88%；迷迭香酸的加樣回收率范圍為92.97%～97.49%，RSD 為1.94%；丹酚酸B 的加樣回收率范圍為95.85%～101.22%，RSD 為2.01%。5 種酚酸類(lèi)成分的回收率范圍及RSD 值均符合規(guī)定，表明該分析方法準(zhǔn)確度良好。

表4 準(zhǔn)確度考察結(jié)果Table 4 Results of accuracy examination

2.2.4.7 耐用性試驗(yàn) 取石見(jiàn)穿藥材粉末（編號(hào)SJC03）約1.0 g，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件分別在不同色譜儀（Thermo Vanquish、Waters H-Class、Agilent 1290）、不同流速（0.38、0.40、0.42 mL/min）、不同柱溫（38、40、42 ℃）條件下進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算各指標(biāo)含量并計(jì)算RSD值，結(jié)果見(jiàn)表5。耐用性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本方法在不同色譜儀上均能良好重現(xiàn)，柱溫與流速微小的變動(dòng)后各指標(biāo)的分離度均能保持良好，且在不同條件下5種酚酸類(lèi)成分含量的RSD均小于5%，表明本方法耐用性良好。

表5 耐用性試驗(yàn)結(jié)果Table 5 Results of durability test w/(mg·g-1)

3 結(jié)果與分析

3.1 含量測(cè)定結(jié)果

根據(jù)上述方法測(cè)定20 批石見(jiàn)穿藥材樣品中水溶性浸出物及丹參素、咖啡酸、綠原酸、迷迭香酸、丹酚酸B 含量（為節(jié)約檢測(cè)時(shí)間，5 種酚酸類(lèi)成分測(cè)定所用對(duì)照品為混合對(duì)照品，具體為“2.2.4.2”中線(xiàn)性母液稀釋10倍得到），結(jié)果見(jiàn)表6。其中水溶性浸出物的含量范圍在16.500%～23.485%，丹參素的含量范圍在0.398～1.278 mg/g，咖啡酸的含量范圍在0.035～0.160 mg/g，綠原酸的含量范圍在0.084～0.303 mg/g，迷迭香酸的含量范圍在0.217～1.221 mg/g，丹酚酸B 的含量范圍在0.247～2.042 mg/g。除了水溶性浸出物外，其余5 個(gè)指標(biāo)成分批次間含量差異均較大。

表6 石見(jiàn)穿藥材各指標(biāo)含量測(cè)定結(jié)果Table 6 Results of content determination of various constituents w/(mg·g-1)

3.2 聚類(lèi)熱圖分析[12]

將20批石見(jiàn)穿藥材樣品測(cè)定數(shù)據(jù)經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化（采用Z-score 法）處理后，導(dǎo)入Hiplot 科研繪圖平臺(tái)，選擇基于ward 模式下的“ward D2”法（含量從左到右一般呈現(xiàn)增加趨勢(shì)），以“euclidean”為距離繪制聚類(lèi)熱圖，結(jié)果如圖2所示（圖中顏色由深藍(lán)到深紅代表含量由低到高）。結(jié)果顯示，20 批藥材可分為5 類(lèi)：其中SJC01、SJC02、SJC07、SJC09、SJC11 聚為一類(lèi)，其中有2 批藥材來(lái)自廣東，3 批藥材來(lái)自廣西，該類(lèi)樣品各指標(biāo)含量均較低；SJC03、SJC06、SJC15 聚為一類(lèi)，當(dāng)中有2批樣品來(lái)自廣東，1批樣品來(lái)自山東，該類(lèi)樣品浸出物與丹酚酸B 兩個(gè)指標(biāo)含量較高；SJC05 與SJC14 聚為一類(lèi)，樣品分別來(lái)自廣東與山東，該類(lèi)樣品大部分指標(biāo)含量均較高；SJC04、SJC08、SJC16、SJC20 聚為一類(lèi)，樣品分別來(lái)自廣東、廣西、山東與湖北，該類(lèi)樣品咖啡酸含量均較高；余下SJC10、SJC12、SJC13、SJC17、SJC18、SJC19聚為一類(lèi)，當(dāng)中2 批樣品來(lái)自廣西，2 批來(lái)自安徽，1 批來(lái)自山東，1 批來(lái)自湖北，該類(lèi)樣品沒(méi)有明顯特征?？傮w而言，聚類(lèi)與產(chǎn)地?zé)o明顯相關(guān)性，同一產(chǎn)地的藥材未能都聚為一類(lèi)。

圖2 20批石見(jiàn)穿藥材的聚類(lèi)熱圖分析Figure 2 Cluster heatmap analysis of 20 batches of Salvia chinensis

3.3 灰色關(guān)聯(lián)度分析

目前中藥分析所用的灰色關(guān)聯(lián)度方法較多，主要有相對(duì)關(guān)聯(lián)度與絕對(duì)關(guān)聯(lián)度兩種。相對(duì)關(guān)聯(lián)度源于鄧聚龍教授提出的“鄧氏關(guān)聯(lián)度”[11]，該方法雖有一定缺陷，但大量文獻(xiàn)報(bào)道[13-17]均證實(shí)其具有一定實(shí)用性。而絕對(duì)關(guān)聯(lián)度是改進(jìn)的關(guān)聯(lián)度計(jì)算方法之一，還有T 型關(guān)聯(lián)度、斜率關(guān)聯(lián)度、改進(jìn)的絕對(duì)關(guān)聯(lián)度、B型關(guān)聯(lián)度、C型關(guān)聯(lián)度等[11]，這些方法在中藥質(zhì)量分析領(lǐng)域中應(yīng)用較少，無(wú)法驗(yàn)證其實(shí)用性，故本文不選擇絕對(duì)關(guān)聯(lián)度，而選用較為廣泛應(yīng)用的“相對(duì)關(guān)聯(lián)度”。參考文獻(xiàn)[13-14]中的方法，先按照公式Y(jié)ik=Xik/Xk（Yik為規(guī)格化處理后的數(shù)據(jù)，Xik為第i個(gè)樣品第k個(gè)指標(biāo)的原始數(shù)據(jù)，Xk為i個(gè)樣品第k個(gè)指標(biāo)的平均值）對(duì)20批石見(jiàn)穿藥材樣品測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行規(guī)格化處理，求得其最優(yōu)及最差參考序列，結(jié)果見(jiàn)表7。再按公式（1）（2）計(jì)算各單元相對(duì)于最優(yōu)、最差參考序列的關(guān)聯(lián)系數(shù)，然后按公式（3）（4）計(jì)算各評(píng)價(jià)單元相對(duì)于最優(yōu)、最差參考序列的關(guān)聯(lián)度，最后按公式（5）計(jì)算各評(píng)價(jià)單元的相對(duì)關(guān)聯(lián)度，根據(jù)相對(duì)關(guān)聯(lián)度大小對(duì)各評(píng)價(jià)單元進(jìn)行排序，結(jié)果見(jiàn)表8。結(jié)果顯示，排名前10 的樣品中，有4 批來(lái)自山東，3批來(lái)自廣東，2批來(lái)自廣西，1批來(lái)自安徽，總體來(lái)看，山東產(chǎn)地的石見(jiàn)穿藥材整體排名靠前，質(zhì)量相對(duì)較好；而安徽與湖北產(chǎn)地的藥材排名居中，安徽的排名稍高于湖北的；但廣東與廣西的藥材既有排名靠前的也有排名靠后的，說(shuō)明這兩個(gè)產(chǎn)地的藥材質(zhì)量不穩(wěn)定。

表7 20批石見(jiàn)穿樣品的原始數(shù)據(jù)規(guī)格化處理結(jié)果Table 7 Results of raw data specifiation for 20 batches of Salvia chinensis

表8 20批石見(jiàn)穿樣品關(guān)聯(lián)度與相對(duì)關(guān)聯(lián)度及排序Table 8 Correlation and relative correlation and ranking of 20 batches of Salvia chinensis

3.4 熵權(quán)TOPSIS分析

將20批石見(jiàn)穿藥材含量測(cè)定數(shù)據(jù)導(dǎo)入SPSSPRO在線(xiàn)“專(zhuān)業(yè)統(tǒng)計(jì)服務(wù)的科學(xué)平臺(tái)”[18]進(jìn)行TOPSIS 分析，以熵權(quán)法為變量權(quán)重，得到各指標(biāo)信息熵值及權(quán)重見(jiàn)表9，TOPSIS 評(píng)價(jià)法計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表10。如表9所示，丹參素的熵值最小，對(duì)應(yīng)權(quán)重最大，說(shuō)明丹參素含量對(duì)石見(jiàn)穿藥材的得分排序起重要作用；而咖啡酸熵值最大，對(duì)應(yīng)權(quán)重最小，說(shuō)明咖啡酸含量對(duì)樣品的得分排序影響較小。如表10 所示，熵權(quán)TOPSIS 排序與灰色關(guān)聯(lián)度分析結(jié)果較為相似，均顯示山東省藥材得分排名靠前且質(zhì)量穩(wěn)定，兩種分析方法相互驗(yàn)證，為石見(jiàn)穿藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供較為客觀的數(shù)據(jù)支持。

表9 石見(jiàn)穿含量測(cè)定各指標(biāo)熵值及權(quán)重Table 9 Entropy value and weight of each index for content measurement of Salvia chinensis

表10 20批石見(jiàn)穿樣品TOPSIS得分與排序Table 10 TOPSIS scores and ranking of 20 batches of Salvia chinensis

4 討論

本研究建立了UPLC 法快速測(cè)定石見(jiàn)穿中5 種酚酸類(lèi)成分，在方法摸索階段對(duì)供試品進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描（190～400 nm），并提取254、290、325 nm 3個(gè)不同吸收波長(zhǎng)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)在290 nm 下各色譜峰響應(yīng)較好，基線(xiàn)平穩(wěn)，故選擇290 nm 作為檢測(cè)波長(zhǎng)。研究還比較了Waters BEH C18（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）、YMC Triart C18（100 mm×2.1 mm，1.9 μm）、Agilent SB C18（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）3 種不同品牌色譜柱對(duì)各色譜峰分離度的影響，最終確定以Waters BEH C18（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）為色譜柱，5 個(gè)酚酸類(lèi)指標(biāo)均能達(dá)到基線(xiàn)分離。研究還比較了0.1%甲酸、0.1%乙酸、0.1%磷酸3 種不同水相對(duì)圖譜的影響，最終確定以0.1%甲酸為流動(dòng)相，各色譜峰對(duì)稱(chēng)性較好。為確定最佳的供試品制備方法，研究比較了甲醇、70%甲醇、50%甲醇、70%乙醇、50%乙醇等5種不同提取溶劑，超聲與回流兩種提取方式，10 mL、25 mL、50 mL 3 種不同提取溶劑用量，最終確定以50%甲醇為提取溶劑，超聲為提取方式，25 mL 為溶劑用量，石見(jiàn)穿藥材中的5 個(gè)酚酸類(lèi)成分均能得到充分提取。

為了更好的反映石見(jiàn)穿中的水溶性成分，本研究除了測(cè)定其5 種酚酸類(lèi)成分含量，還增加水溶性浸出物的測(cè)定，以6 個(gè)指標(biāo)含量共同評(píng)價(jià)來(lái)自5 個(gè)產(chǎn)地共20 批藥材的質(zhì)量。研究發(fā)現(xiàn)各批次樣品除水溶性浸出物含量外，其余5 個(gè)指標(biāo)含量差異均較大，最小值與最大值相差達(dá)到3 倍以上。聚類(lèi)熱圖分析表明分類(lèi)與產(chǎn)地?zé)o明顯相關(guān)性，同一產(chǎn)地的藥材未能都聚為一類(lèi)。為了進(jìn)一步評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地藥材的質(zhì)量，本研究對(duì)20批藥材含量測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行了灰色關(guān)聯(lián)度分析與熵權(quán)TOPSIS 分析。熵權(quán)TOPSIS 分析顯示丹參素的權(quán)重最大，其次為綠原酸，說(shuō)明這兩個(gè)指標(biāo)含量對(duì)石見(jiàn)穿藥材的得分排序起重要作用，推測(cè)丹參素與綠原酸的批次間差異也是導(dǎo)致不同產(chǎn)地藥材未能?chē)?yán)格按產(chǎn)地進(jìn)行聚類(lèi)的原因?；疑P(guān)聯(lián)度分析與熵權(quán)TOPSIS 分析結(jié)果較為相似，均表明山東產(chǎn)地的石見(jiàn)穿藥材整體質(zhì)量較優(yōu)，而安徽與湖北產(chǎn)地的藥材排名居中，安徽產(chǎn)地的質(zhì)量稍?xún)?yōu)于湖北產(chǎn)地的，但廣東與廣西產(chǎn)地的藥材質(zhì)量不太穩(wěn)定，排名呈兩頭分布。綜合比較來(lái)看，山東所產(chǎn)的石見(jiàn)穿藥材質(zhì)量較佳。

石見(jiàn)穿為唇形科鼠尾草屬藥材，其酚酸類(lèi)成分與同屬植物丹參類(lèi)似[4，19]。山東為丹參的主產(chǎn)區(qū)之一[20-21]，山東的大部分區(qū)域?yàn)闇貛Ъ撅L(fēng)氣候，較少出現(xiàn)干旱或洪澇災(zāi)害，氣候土壤均適宜丹參生長(zhǎng)。研究表明山東產(chǎn)地的丹參藥材水溶性成分比安徽與湖北的高[19]，推測(cè)山東的環(huán)境氣候同樣較適合石見(jiàn)穿生長(zhǎng)。但中藥材的質(zhì)量受多種因素影響，除了產(chǎn)地外，藥用部位、采收期與加工方式等均會(huì)對(duì)其質(zhì)量造成不同程度影響。本研究組后續(xù)將進(jìn)一步研究石見(jiàn)穿不同藥用部位及不同采收期的藥材質(zhì)量，以期為石見(jiàn)穿藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)完善提供更充分的數(shù)據(jù)支持。