王 西，張龍華，蔣麗萍

(無(wú)錫市婦幼保健院婦產(chǎn)科，江蘇 無(wú)錫 214000)

多囊卵巢綜合征(polycystic ovarian syndrome，PCOS)是臨床上較為多見(jiàn)的內(nèi)分泌代謝性疾病，與焦慮、抑郁及雙向情感障礙等精神疾病的發(fā)生有關(guān)，給患者健康帶來(lái)巨大威脅[1]。目前，PCOS的發(fā)病機(jī)制尚無(wú)明確定論，宮內(nèi)因素、慢性炎癥狀態(tài)、遺傳因素、代謝異常可能與該病的發(fā)生相關(guān)。胰島素抵抗(insulin resistance，IR)是PCOS的重要臨床特性，研究表明，胰島素抵抗的發(fā)生與腸道菌群的改變有一定的關(guān)聯(lián)[2]。人體腸道微生物為人體最直接、最大的外環(huán)境，腸道菌群失調(diào)可能通過(guò)影響能量代謝、介導(dǎo)慢性炎癥、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)等誘發(fā)胰島素抵抗的發(fā)生。有研究指出，PCOS患者腸道菌群失調(diào)與炎癥因子密切相關(guān)，而PCOS肥胖患者的腸道菌群、炎癥因子及IR情況尚不可知[3]，因此本研究旨在觀察PCOS伴肥胖患者中腸道菌群、炎癥因子變化情況，并探究腸道菌群失調(diào)與炎癥因子及IR的關(guān)聯(lián)。

1資料與方法

1.1研究對(duì)象

于2018年3月至2022年1月，選取無(wú)錫市婦幼保健院收治的157例PCOS患者為研究對(duì)象，根據(jù)體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)將研究對(duì)象分為研究組(92例，BMI≥25kg/m2)及對(duì)照組(65例，BMI<25kg/m2)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《多囊卵巢綜合征中國(guó)診療指南》中PCOS的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；②為首次診斷且沒(méi)有接受相關(guān)治療者；③知情同意參與本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并胃腸道疾病、糖尿病、惡性腫瘤者；②合并甲狀腺功能異常、庫(kù)欣綜合征、先天性腎上腺皮質(zhì)增生、高泌乳素血癥等內(nèi)分泌疾??；③合并盆腔粘連、子宮器質(zhì)性疾病、性腺發(fā)育不全、子宮內(nèi)膜異位癥；④既往有卵巢、子宮手術(shù)史；⑤近3個(gè)月內(nèi)使用激素類(lèi)藥物、降糖藥物治療者。該研究已獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2研究方法

1.2.1腸道菌群的檢測(cè)方法

除收集研究對(duì)象一般資料(年齡、病程、受教育程度、BMI等)外，入院次日收集研究對(duì)象1g新鮮自然糞便，放置于無(wú)菌便盒內(nèi)，半小時(shí)內(nèi)送檢。分析天平稱(chēng)取0.1g，使用生理鹽水分別以1∶102、1∶103、1∶104、1∶105、1∶106、1∶107、1∶108的比例稀釋為10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8濃度的稀釋液。腸球菌選擇10-3、10-4、10-5濃度的稀釋液，雙歧桿菌、腸桿菌及乳桿菌選擇10-4、10-5、10-6濃度的稀釋液。腸球菌與腸桿菌常規(guī)恒溫箱中培養(yǎng)24h～48h，乳桿菌與雙歧桿菌厭氧環(huán)境培養(yǎng)48h～72h。計(jì)算各平板平均菌落數(shù)，以Log10CFU/g形式代表結(jié)果，并計(jì)算B/E值=雙歧桿菌的菌落數(shù)/腸桿菌的菌落數(shù)。

1.2.2糖代謝指標(biāo)檢測(cè)方法

入院次日采集4mL空腹靜脈血，通過(guò)BK-600全自動(dòng)生化分析儀(深圳市蘇比特科技有限公司)檢測(cè)患者空腹胰島素(fasting insulin，F(xiàn)INS)與空腹血糖(fasting plasma glucose，F(xiàn)PG)水平，并計(jì)算IR=FINS×FPG/22.5。

1.2.3炎性因子檢測(cè)方法

入院次日另采集4mL空腹靜脈血，離心15min，轉(zhuǎn)速3 000r/min，取上清液備用，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定患者血清與腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)水平，通過(guò)免疫透射法測(cè)定患者血清C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)，試劑盒均購(gòu)自杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1一般資料情況

兩組研究對(duì)象年齡、病程、受教育程度差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組基本情況比較

2.2兩組腸道菌群指標(biāo)水平

兩組腸球菌菌落數(shù)的水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.243)；研究組雙歧桿菌、乳桿菌菌落數(shù)及B/E值均低于對(duì)照組(t值分別為7.344、9.175、3.785，P<0.05)，腸桿菌菌落數(shù)高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=8.993，P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組腸道菌群水平比較

2.3兩組FINS、FPG及IR水平

研究組FINS、IR水平均高于對(duì)照組(t值分別為6.892、8.482，P<0.05)，兩組FPG水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.303)，見(jiàn)表3。

表3 兩組FINS、FPG及IR水平比較

2.4兩組炎癥因子水平比較

研究組血清TNF-α、CRP水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為9.601、9.378，P<0.001)，見(jiàn)表4。

表4 兩組TNF-α、CRP水平比較

2.5 PCOS伴肥胖患者B/E值與IR、血清TNF-α、CRP水平的關(guān)系

Pearson分析顯示，PCOS伴肥胖患者B/E值與IR、血清TNF-α、CRP水平均呈正相關(guān)(r值分別為0.735、0.512、0.473，P<0.05)，見(jiàn)表5。

表5 PCOS伴肥胖患者B/E值與IR、血清TNF-α、CRP水平的相關(guān)性分析

3討論

3.1 PCOS肥胖患者腸道菌群、炎癥因子水平可能存在異常

本研究結(jié)果顯示，與非肥胖PCOS患者相比，肥胖患者其腸道菌群及炎癥因子水平存在明顯差異。腸道菌群是腸道內(nèi)最大的生物屏障，通過(guò)與外界環(huán)境相互作用，影響著人體的病理及生理代謝過(guò)程，可以改善腸道結(jié)構(gòu)、促進(jìn)免疫反應(yīng)與新陳代謝。有研究表明，肥胖可以加重腸道菌群紊亂，腸道菌群紊亂可能參與肥胖的發(fā)生過(guò)程[5]。腸道菌群與肥胖、胰島素抵抗等內(nèi)分泌代謝疾病發(fā)生密切相關(guān)，其與PCOS的關(guān)系也備受關(guān)注[6]。PCOS患者存在腸道菌群代謝紊亂，其中肥胖患者尤為明顯。本研究顯示肥胖PCOS組血清TNF-α、CRP水平明顯高于非肥胖PCOS組，提示PCOS伴肥胖患者的慢性炎癥反應(yīng)更為嚴(yán)重。建議PCOS患者應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)減重，并采取適當(dāng)?shù)闹委煷胧?，以促進(jìn)腸道菌群恢復(fù)穩(wěn)態(tài)及炎癥因子水平恢復(fù)正常，以切實(shí)保護(hù)自身健康。

3.2菌群失調(diào)可能直接誘導(dǎo)胰島素抵抗發(fā)生

腸道菌群是定植在人體消化道內(nèi)的微生物集合，其數(shù)量眾多，種類(lèi)較為復(fù)雜，可在腸粘膜表面形成一層天然保護(hù)層,調(diào)節(jié)人體免疫功能，阻止致病菌，保護(hù)人體健康。雙歧桿菌和乳酸桿菌被稱(chēng)為益生菌,可以調(diào)節(jié)人體腸道內(nèi)的酸堿度,抑制病原體的生長(zhǎng)[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，相較于非肥胖PCOS患者，肥胖PCOS患者的雙歧桿菌及乳桿菌水平降低，而腸桿菌水平增高，B/E值也發(fā)生明顯的改變。有研究指出，腸道菌群比例改變與體內(nèi)糖代謝異常有密切關(guān)聯(lián)[8]。也有研究證明腸道菌群與胰島素抵抗的發(fā)生相關(guān)[2]。菌群結(jié)構(gòu)變化后使得原本腸道糖異生過(guò)程發(fā)生改變,使腸腦調(diào)節(jié)環(huán)路刺激度改變，從而降低對(duì)胰島素的敏感性，發(fā)生胰島素抵抗。

3.3菌群失調(diào)可能通過(guò)炎癥反應(yīng)引起胰島素抵抗發(fā)生

本研究結(jié)果顯示，研究組血清TNF-α、CRP水平明顯高于對(duì)照組，提示PCOS伴肥胖患者的慢性炎癥反應(yīng)更為嚴(yán)重，可能是PCOS肥胖患者血液中炎癥因子水平上升，誘導(dǎo)了慢性炎癥的發(fā)生[9]。慢性炎癥可能通過(guò)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)、擾亂胰島素信號(hào)等途徑，改變機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性，從而參與IR的發(fā)生過(guò)程。TNF-α為脂肪細(xì)胞與炎性細(xì)胞釋放的炎性介質(zhì)。有研究指出，糖尿病患者血清TNF-α水平顯著增加，與IR發(fā)生密切相關(guān)[10]。CRP為一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，與機(jī)體炎性反應(yīng)程度關(guān)系密切，該指標(biāo)能夠作為反映IR的重要炎性標(biāo)志物。本研究發(fā)現(xiàn)B/E值與IR、CRP、TNF-α呈正相關(guān)，說(shuō)明PCOS伴肥胖患者腸道菌群紊亂與IR、炎性狀態(tài)有關(guān)，可能原因?yàn)槲蓙y的腸道菌群會(huì)促進(jìn)炎性因子分泌或通過(guò)脂多糖與胰島素等減弱胰島信號(hào)傳導(dǎo)，從而促進(jìn)IR發(fā)生。既往研究證實(shí)，PCOS患者腸道菌群紊亂與IR、炎性狀態(tài)有關(guān)，與本研究結(jié)論類(lèi)似[11]。腸道菌群失調(diào)可以影響人體免疫系統(tǒng)，促使機(jī)體出現(xiàn)炎癥反應(yīng)[12]。腸道產(chǎn)生的脂多糖是參與炎癥的關(guān)鍵性因子，腸道菌群紊亂引起的炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致IR發(fā)生的重要因素[13]。因此，腸道菌群紊亂可能通過(guò)炎癥反應(yīng)介導(dǎo)IR的發(fā)生。

綜上所述，PCOS伴肥胖患者腸道菌群失調(diào)情況存在異常，且腸道菌群失調(diào)可能與炎性狀態(tài)及IR發(fā)生有關(guān)。通過(guò)監(jiān)測(cè)腸道菌群的水平，可能為胰島素抵抗的預(yù)防、診斷等提出新的思路與想法。但由于本研究選取例數(shù)有限，且為單中心研究，研究結(jié)果可能存在一定偏倚，后續(xù)可擴(kuò)大樣本量進(jìn)行多中心分析PCOS伴肥胖患者腸道菌群失調(diào)與炎性狀態(tài)、胰島素抵抗的關(guān)系。