郭贄豪 劉公言 王利華 高淑霞*

(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，青島 266109；2.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，濟(jì)南 250100)

腹瀉是家兔養(yǎng)殖中危害最大的疾病之一，70%以上斷奶仔兔死亡為腹瀉所致[1]。在全面禁抗的大環(huán)境下，如何提高肉兔的免疫力、改善腸道健康是解決家兔生產(chǎn)“卡脖子”問題的關(guān)鍵。低聚木糖(xylo-oligosaccharide，XOS)是由2～7個木糖以β-1，4糖苷鍵連接而成的聚合物的總稱，一般為淡黃色或淺褐色粉末，且具有較好的酸和熱穩(wěn)定性；此外，由于β-1，4糖苷鍵難以被宿主消化酶水解，因此XOS可到達(dá)盲腸，促進(jìn)動物腸道內(nèi)雙歧桿菌等有益菌的增殖，提高動物的抗體水平和抗感染能力[2]。在動物生產(chǎn)上，司梅霞等[3]、周建民[4]研究表明，XOS能提高肉雞和蛋雞的生產(chǎn)性能及免疫能力；王志文等[5]研究表明，XOS可以提高肉鴨生長性能，降低料重比；XOS不僅能提高家禽的生產(chǎn)性能及免疫能力，還具有改善仔豬的腹瀉作用[6]；此外，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，XOS能改善凡納濱對蝦幼蝦的消化酶活性及腸道健康[7]。不過，XOS在肉兔上的研究少見報(bào)道，因此本文旨在研究飼糧中添加不同水平XOS對肉兔生長性能、養(yǎng)分表觀消化率以及血清生化、免疫和抗氧化指標(biāo)的影響，以探究XOS在肉兔生產(chǎn)中的應(yīng)用效果，為XOS在肉兔生產(chǎn)中的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取體重相近的42日齡伊拉商品兔320只，隨機(jī)分為4個組，每組20個重復(fù)(公母各占1/2)，每個重復(fù)4只。基礎(chǔ)飼糧參照《肉兔營養(yǎng)需要量》(NY/T 4049—2021)[8]進(jìn)行配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。各組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0(對照組)、50、100和200 mg/kg的XOS(山東某生物科技股份有限公司提供，含量20%，實(shí)際添加量為換算后純品添加量)。試驗(yàn)預(yù)試期7 d，正試期28 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) %

續(xù)表1項(xiàng)目Items含量Content鈣Ca1.18磷P0.64賴氨酸Lysine1.28蛋氨酸+半胱氨酸Methionine+cystine0.79

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)兔采用雙層的兔籠飼養(yǎng)，試驗(yàn)前對兔舍進(jìn)行充分沖洗與消毒。試驗(yàn)期間每天飼喂2次，試驗(yàn)兔自由采食和飲水，定期打掃兔舍，常規(guī)免疫接種。

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 生長性能

試驗(yàn)開始和結(jié)束時分別對肉兔進(jìn)行空腹(禁食不禁水)稱重，獲得初重和末重并根據(jù)試驗(yàn)天數(shù)計(jì)算平均日增重(ADG)；按重復(fù)統(tǒng)計(jì)正試期內(nèi)的投料量，根據(jù)采食天數(shù)計(jì)算平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)；觀察肉兔的腹瀉和死亡情況，按重復(fù)統(tǒng)計(jì)腹瀉天數(shù)及死亡兔只數(shù)，計(jì)算腹瀉頻率[9]和死亡率。

腹瀉頻率(%)=100×(腹瀉兔只數(shù)×腹瀉天數(shù))/(試驗(yàn)兔只數(shù)×飼養(yǎng)天數(shù))；死亡率(%)=100×死亡兔只數(shù)/兔總只數(shù)。

1.3.2 樣品處理和屠宰性能

在試驗(yàn)結(jié)束前對試驗(yàn)肉兔進(jìn)行12 h禁食處理，試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天每個重復(fù)選取1只試驗(yàn)兔，即每組20只(公母各占1/2)，進(jìn)行稱重記錄為宰前活重，隨后采用心臟采血5 mL于離心管中，并置于3 000 r/min離心機(jī)離心10 min，分離血清，置于-20 ℃保存，用于血清指標(biāo)測定。頸部放血處死后，立即剝皮，前端(腕關(guān)節(jié)處)去除前肢及后端(跗關(guān)節(jié)處)去除后肢，除去腸道及內(nèi)容物和泌尿生殖器官，并在第1頸椎處去頭，同時去除氣管、食管，并保留肝臟(摘去膽囊)、腎臟及腎周脂肪稱重，即為半凈膛胴體重；半凈膛胴體重去除心臟、肝臟、腎臟及腎周脂肪后稱重，即為全凈膛胴體重，并分別除以宰前活重，計(jì)算半凈膛屠宰率和全凈膛屠宰率。

1.3.3 養(yǎng)分表觀消化率

試驗(yàn)第21天，每組選取12個重復(fù)(公母各占1/2)進(jìn)行消化試驗(yàn)。消化試驗(yàn)采用雙內(nèi)源指示劑[鹽酸不溶灰分(AIA)和酸不溶木質(zhì)素(ADL)]法連續(xù)收集3 d新鮮兔糞，同時采集每組飼糧樣品于-20 ℃保存；將采集的糞樣于65 ℃烘干，制成風(fēng)干樣，并測定初水分；將糞樣及飼糧樣品粉碎過40目篩，參照劉磊等[10]的測定方法及計(jì)算公式測定糞樣和飼糧樣品中的AIA和ADL含量；參照張麗英[11]的方法，測定糞樣和飼糧樣品中的粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(EE)、干物質(zhì)(DM)、粗纖維(CF)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)和粗灰分(Ash)含量，并計(jì)算養(yǎng)分表觀消化率[10]。

某養(yǎng)分表觀消化率(%)=100-(飼糧中雙內(nèi)源指示劑含量平均值/糞中雙內(nèi)源指示劑含量平均值)×(飼糧中該養(yǎng)分含量/糞樣中該養(yǎng)分含量)。

1.3.4 血清生化、抗氧化和免疫指標(biāo)

使用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定血清總蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性以及總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)，并計(jì)算球蛋白(globulin，GLB)含量和白球比(A/G)；使用上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒測定血清免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)和免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2021進(jìn)行初步整理，然后采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，死亡率和腹瀉頻率數(shù)據(jù)采用非參數(shù)檢驗(yàn)中的Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，所有結(jié)果數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.05為差異顯著水平。

2 結(jié) 果

2.1 XOS對肉兔生長性能的影響

由表2可知，飼糧添加不同水平XOS對肉兔末重、ADF、ADFI和F/G有顯著影響(P<0.05)，對腹瀉頻率和死亡率無顯著影響(P>0.05)。其中，與對照組相比，各XOS添加組肉兔ADG和ADFI均顯著提高(P<0.05)；100 mg/kg XOS添加組肉兔末重顯著提高(P<0.05)，F(xiàn)/G顯著降低(P<0.05)。

表2 XOS對肉兔生長性能的影響Table 2 Effects of XOS on growth performance of meat rabbits

2.2 XOS對肉兔屠宰性能的影響

由表3可知，飼糧添加不同水平XOS對肉兔宰前活重、半凈膛胴體重、全凈膛胴體重以及半凈膛屠宰率、全凈膛屠宰率均無顯著影響(P>0.05)。

表3 XOS對肉兔屠宰性能的影響Table 3 Effects of XOS on slaughter performance of meat rabbits

2.3 XOS對肉兔養(yǎng)分表觀消化率的影響

由表4可知，飼糧添加不同水平XOS對肉兔CP、EE、CF、ADF、NDF和DM表觀消化率有顯著影響(P<0.05)，對Ash表觀消化率無顯著影響(P>0.05)。其中，與對照組相比，各XOS添加組CP和CF表觀消化率顯著提高(P<0.05)，100 mg/kg XOS添加組EE表觀消化率顯著提高(P<0.05)，50、100 mg/kg XOS添加組DM表觀消化率顯著提高(P<0.05)，200 mg/kg XOS添加組NDF表觀消化率顯著提高(P<0.05)，100、200 mg/kg XOS添加組ADF表觀消化率顯著提高(P<0.05)。

表4 XOS對肉兔營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響Table 4 Effects of XOS on nutrient apparent digestibility of meat rabbits %

2.4 XOS對肉兔血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，飼糧添加不同水平XOS對肉兔血清ALB含量有顯著影響(P<0.05)，對血清TP、GLB含量以及A/G均無顯著影響(P>0.05)。其中，與對照組相比，100 mg/kg XOS添加組肉兔血清ALB含量顯著提高(P<0.05)。

表5 XOS對肉兔血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of XOS on serum biochemical indices of meat rabbits

2.5 XOS對肉兔血清免疫指標(biāo)的影響

由表6可知，飼糧添加不同水平XOS對肉兔血清IgG和IgM含量有顯著影響(P<0.05)，對血清IgA含量無顯著影響(P>0.05)。其中，與對照組相比，各XOS添加組肉兔血清IgG和IgM含量均顯著提高(P<0.05)。

表6 XOS對肉兔血清免疫指標(biāo)的影響Table 6 Effects of XOS on serum immune indices of meat rabbits μg/mL

2.6 XOS對肉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表7可知，飼糧添加不同水平XOS對肉兔血清T-AOC和MDA含量有顯著影響(P<0.05)，對血清SOD活性無顯著影響(P>0.05)。其中，與對照組相比，各XOS添加組肉兔血清T-AOC顯著提高(P<0.05)，100 mg/kg XOS添加組血清MDA含量顯著降低(P<0.05)。

表7 XOS對肉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響Table 7 Effects of XOS on serum antioxidant indices of meat rabbits

3 討 論

3.1 XOS對肉兔生長性能的影響

本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加XOS可以改善肉兔生長性能，這也與國內(nèi)外在肉仔雞、仔豬上的應(yīng)用效果[12-16]基本一致。XOS可以改善肉兔生長性能、降低腹瀉頻率的原因可能是由于XOS可以調(diào)控腸道菌群，改善腸道組織形態(tài)。張國慶等[17]研究表明，XOS降低腹瀉率是通過促進(jìn)有益菌發(fā)育、抑制有害菌繁殖來調(diào)控的。此外，XOS可以提高腸道消化酶活性，進(jìn)而提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率，改善腸道組織形態(tài)[18]，降低腹瀉率。李淑珍等[19]研究表明，XOS可通過促進(jìn)有關(guān)生長激素的分泌等來改善肉雞的生長性能。潘艷等[20]研究表明，XOS還具有防齲齒、促進(jìn)維生素吸收等功能，這些也為動物的生長發(fā)育提供了良好的營養(yǎng)基礎(chǔ)。本試驗(yàn)中，隨著XOS添加水平的提高，肉兔生長性能有所提高，但當(dāng)添加水平達(dá)到200 mg/kg時，其提高效果降低，原因可能是XOS的免疫源性，當(dāng)添加水平過高時，可能會引起肉兔免疫刺激，進(jìn)而影響生長性能。

3.2 XOS對肉兔養(yǎng)分表觀消化率的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加XOS可以提高肉兔CP、CF、NDF、ADF和Ash的表觀消化率，這與黃華山[21]的研究結(jié)果相一致。羅丹等[18]研究表明，飼糧添加XOS可顯著增加盲腸雙歧桿菌的數(shù)量，這可能是由于XOS可以作為腸道雙歧桿菌等有益菌微生物的主要碳源[19]；此外，其發(fā)酵的主要代謝產(chǎn)物包括乙酸、丙酸和丁酸等短鏈脂肪酸(SCFAs)，而SCFAs可以調(diào)節(jié)電解質(zhì)，降低腸腔內(nèi)pH，從而進(jìn)一步改善腸道微生態(tài)[22]。孫海濤等[23]研究表明，盲腸微生物能夠發(fā)酵纖維素產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸為萊蕪黑兔提供能量，因此飼糧添加XOS會使肉兔對纖維的消化能力提升。除此之外，XOS還可以提高腸道絨毛高度，降低隱窩深度，改善肉兔腸道組織形態(tài)，從而提高腸道營養(yǎng)物質(zhì)吸收面積[18]，以及淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶等消化酶活性[24]，增強(qiáng)腸道對CP、EE等營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，這在本試驗(yàn)中也得到了進(jìn)一步證實(shí)。

3.3 XOS對肉兔血清免疫和抗氧化指標(biāo)的影響

本試驗(yàn)中，與對照組相比，100 mg/kg XOS添加組肉兔血清ALB含量顯著提高，各XOS添加組血清IgG和IgM含量均顯著提高。ALB具有保護(hù)免疫球蛋白的功效，血清中ALB含量的增加不僅代表機(jī)體對蛋白質(zhì)的利用率提高，還能增強(qiáng)機(jī)體免疫力，這說明飼糧添加XOS能夠改善肉兔蛋白質(zhì)利用效率及免疫能力。此外，XOS還可作為外來抗原佐劑，通過刺激腸道免疫，影響上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞的增殖分化并調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的合成分泌，從而影響分泌免疫球蛋白細(xì)胞的數(shù)量，進(jìn)而影響細(xì)胞因子的表達(dá)，而細(xì)胞因子在黏膜免疫中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，能夠提高腸道黏膜的免疫力[2]。

Boonchuay等[25]報(bào)道，XOS能夠促進(jìn)腸道有益菌繁殖，而有益菌具有激活機(jī)體細(xì)胞內(nèi)SOD、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶的作用，促使抗氧化物產(chǎn)生，減少自由基對機(jī)體的損傷，提高動物抗氧化能力；同時，趙穎[26]研究表明，XOS能夠顯著降低肉雞血清MDA含量，提升血清T-AOC，這均與本試驗(yàn)結(jié)果一致，這表明飼糧添加XOS可以增強(qiáng)肉兔抗氧化能力。

4 結(jié) 論

飼糧添加適宜水平XOS能夠提高肉兔生長性能和養(yǎng)分表觀消化率，且具有增強(qiáng)肉兔免疫和抗氧化能力的作用。本試驗(yàn)條件下，XOS適宜添加水平為100 mg/kg。