高 露 王建民 陳 德 肖傳丕 潘 雪 宋志剛*

(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，泰安 271018；2.山東龍昌動(dòng)物保健品有限公司，齊河 251100;3.青島西海岸農(nóng)高發(fā)展集團(tuán)有限公司，青島 266000)

在現(xiàn)代生產(chǎn)實(shí)際中，飼糧中常常會(huì)添加高能量油脂來滿足商品肉雞對(duì)能量的需求[1]；然而，家禽體內(nèi)有限的內(nèi)源性膽汁鹽往往不能對(duì)飼糧中的高能量油脂進(jìn)行充分的吸收和利用，這樣一方面會(huì)浪費(fèi)飼用資源，增加生產(chǎn)成本，另一方面會(huì)對(duì)家禽健康帶來一定的負(fù)面影響[2-3]；此外，家禽長時(shí)間飼喂高能量油脂會(huì)造成體內(nèi)脂肪沉積，影響機(jī)體物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、消化和吸收，對(duì)肝臟健康產(chǎn)生不利的影響，最終導(dǎo)致脂肪代謝異常[4]。已有研究表明，膽汁酸對(duì)脂肪有乳化和溶解的作用，可將脂質(zhì)乳化為更小的膠束狀微粒，激活更多的脂肪酶，從而提供更多的結(jié)合位點(diǎn)，有助于保護(hù)肝臟健康[5]，緩解家禽消化系統(tǒng)的生理限制，提高家禽對(duì)脂類物質(zhì)的代謝，促進(jìn)機(jī)體生長發(fā)育，從而改善其生產(chǎn)性能[6-9]。

膽汁酸由肝臟中的膽固醇合成，隨后分泌到膽汁中，在空腹?fàn)顟B(tài)下暫時(shí)貯存在膽囊中互溶與濃縮，在動(dòng)物進(jìn)食時(shí)隨食物進(jìn)入腸道中，參與生物合成和腸肝循環(huán)，進(jìn)而調(diào)節(jié)肝臟、腸道、肌肉和脂肪組織中糖類和脂類的消化和吸收[10]。膽汁酸與甘氨酸或者?；撬峤Y(jié)合，可使它們進(jìn)一步水溶，使其不易在含水介質(zhì)中沉淀，因此被認(rèn)為是類固醇分子，參與消化和吸收腸道中的脂肪，從而促進(jìn)脂類代謝[11]。由此可見，膽汁酸在改善生產(chǎn)性能、保肝護(hù)膽和促進(jìn)脂類代謝等方面發(fā)揮著不錯(cuò)的作用效果，能夠?qū)崿F(xiàn)飼用資源的高效利用，是畜禽健康養(yǎng)殖中的重要研究對(duì)象[12-13]。因此，本試驗(yàn)旨在深入探究膽汁酸對(duì)白羽肉雞生長性能、肝臟健康和脂類代謝的影響，為膽汁酸在白羽肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼糧

試驗(yàn)選取體況一致和體重接近的1日齡愛拔益加(AA)肉仔雞240只，隨機(jī)分為2個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中添加300 mg/kg膽汁酸(膽汁酸的添加劑量根據(jù)前人的研究結(jié)果[14-15]進(jìn)行優(yōu)化確定)?；A(chǔ)飼糧參考中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《產(chǎn)蛋雞和肉雞配合飼料》(GB/T 5916—2020)進(jìn)行配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)期42 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) %

續(xù)表1項(xiàng)目Items1～21日齡1to21daysofage22～42日齡22to42daysofage鈣Ca1.000.90有效磷AP0.500.48蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys1.020.96蘇氨酸Thr0.950.90色氨酸Try0.240.20

1.3 飼養(yǎng)管理

本試驗(yàn)在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)泮河校區(qū)畜牧站進(jìn)行。試驗(yàn)全期采用籠養(yǎng)，雞只自由采食和飲水，按正常免疫程序進(jìn)行免疫接種。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能

42日齡時(shí)，對(duì)每個(gè)重復(fù)中的雞只進(jìn)行稱重(禁食12 h后稱重，以克為單位)，并統(tǒng)計(jì)采食量和死淘數(shù)，計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.4.2 屠宰性能

42日齡時(shí)，分別從每個(gè)重復(fù)中選取體重接近的1只雞頸動(dòng)脈放血處死后，浸燙脫毛，稱取宰前體重、屠體重、全凈膛重、腹脂重和肝臟重，參照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量計(jì)算方法》(NY/T 823—2020)計(jì)算肝臟指數(shù)、屠宰率和腹脂率。

人間的好風(fēng)景，就在愛意滿滿的心里。大家的風(fēng)景，就是成為“愛之光”的一束束光源，然后依靠各級(jí)組織的力量，將無數(shù)的光源匯聚在一起，投身到創(chuàng)造尊老、敬老、愛老風(fēng)景的隊(duì)伍中來。別忘了，人生路上，請(qǐng)珍惜一起創(chuàng)造風(fēng)景的人。

1.4.3 肝臟脂肪指標(biāo)

42日齡時(shí)，分別于每個(gè)重復(fù)中選取體重接近的1只雞進(jìn)行麻醉，放血處死，打開腹腔，于肝臟左葉同一位置剪取2份肝臟組織，一份轉(zhuǎn)移到高溫滅菌的1.5 mL凍存管中，做好標(biāo)記后立即放入液氮中，最后轉(zhuǎn)移至-80 ℃中保存待測；另一份進(jìn)行多聚甲醛固定，常溫保存待測。

肝臟中脂肪含量采用索氏浸提法測定；用電子分析天平準(zhǔn)確稱取肝臟組織約0.1 g，按照重量(g)∶體積(mL)=1∶9，加入9倍體積的生理鹽水，進(jìn)行機(jī)械勻漿3 min，4 ℃下2 500 r/min離心10 min，取上清液待測，肝臟脂肪酶活性采用南京建成生物工程研究所試劑盒進(jìn)行測定，所有的測定程序都嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，批內(nèi)和批間變異系數(shù)(CV)均小于10%；將肝臟組織固定樣送至武漢賽維爾生物科技有限公司進(jìn)行油紅O切片染色，測定肝臟組織脂滴數(shù)量。

1.4.4 血清生化指標(biāo)

42日齡時(shí)，分別于每個(gè)重復(fù)中選取體重接近的1只雞翅下靜脈采血3 mL，用采血軟管采集血液后45°斜置，待血清析出后使用離心機(jī)3 000 r/min離心10 min，收集血清于1.5 mL離心管中，標(biāo)記好后于-20 ℃保存待測。采用全自動(dòng)生化分析儀(日立7170A)測定血清葡萄糖(GLU)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性。

1.4.5 回腸末端食糜養(yǎng)分表觀消化率

42日齡時(shí)，分別于每個(gè)重復(fù)中選取體重接近的1只雞，在肉雞回腸末端收集食糜于高溫滅菌的1.5 mL凍存管中，做好標(biāo)記后立即放入液氮中，最后轉(zhuǎn)移至-80 ℃中保存待測。測定回腸末端食糜中粗蛋白質(zhì)(CP)、干物質(zhì)(DM)、粗脂肪(EE)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)和酸不溶灰分(AIA)含量。

使用AIA法計(jì)算養(yǎng)分表觀消化率，計(jì)算公式為：

某養(yǎng)分表觀消化率(%)=100-100×[(M2n×M1m)/(M1n×M2m)]。

式中：M1m為飼糧中AIA含量；M2m為食糜中AIA含量；M1n為飼糧中該養(yǎng)分含量；M2n為食糜中該養(yǎng)分含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2019進(jìn)行初步處理，使用SPSS 26.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，分析比較組間差異，P<0.05為差異顯著，0.05≤P<0.10為差異有顯著趨勢。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞生長性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組白羽肉雞1～42日齡F/G顯著降低(P<0.05)，而末重、ADFI和ADG均無顯著差異(P>0.05)。

表2 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞生長性能的影響Table 2 Effects of dietary bile acid on growth performance of white feather broilers

2.2 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞屠宰性能的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組白羽肉雞屠宰率顯著提高(P<0.05)，腹脂率有降低趨勢(P=0.071)，而肝臟指數(shù)無顯著差異(P>0.05)。

表3 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞屠宰性能的影響Table 3 Effects of dietary bile acid on slaughter performance of white feather broilers %

2.3 飼糧添加膽汁酸對(duì)肉雞肝臟脂肪指標(biāo)的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組白羽肉雞肝臟脂肪含量有降低趨勢(P=0.054)，肝臟脂肪酶活性在數(shù)值上有所提高，但差異不顯著(P>0.05)。

表4 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞肝臟脂肪指標(biāo)的影響Table 4 Effects of dietary bile acid on liver fat indices of white feather broilers

由圖1可知，切片中的脂滴被油紅O染色，脂滴呈深藍(lán)色。在400×顯微鏡下，與對(duì)照組(圖1-A)相比，試驗(yàn)組(圖1-B)肝臟組織脂滴數(shù)量呈現(xiàn)一定程度的減少。

A：對(duì)照組 control group；B：試驗(yàn)組 experimental group。圖1 飼糧添加膽汁酸對(duì)肉雞肝臟組織脂滴數(shù)量的影響(油紅O染色，400×)Fig.1 Effects of dietary bile acid on lipid droplet number in liver tissue of white feather broilers (oil red O staining,400×)

2.4 飼糧添加膽汁酸對(duì)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組白羽肉雞血清AST活性顯著降低(P<0.05)，血清TG含量有降低趨勢(P=0.090)，其他血清生化指標(biāo)無顯著差異(P>0.05)。

表5 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary bile acid on serum biochemical indices of white feather broilers mmol/L

2.5 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞回腸養(yǎng)分表觀消化率的影響

由表6可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組白羽肉雞回腸DM、EE、CP、ADF和NDF表觀消化率均無顯著差異(P>0.05)。

表6 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞回腸養(yǎng)分表觀消化率的影響Table 6 Effects of dietary bile acid on nutrient apparent digestibility in ileum of white feather broilers %

3 討 論

3.1 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞生長性能的影響

生長性能指標(biāo)主要包括ADFI、ADG和F/G等，是評(píng)估肉雞養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益的重要指標(biāo)。在實(shí)際生產(chǎn)中，F(xiàn)/G是評(píng)價(jià)生長性能的代表性指標(biāo)，F(xiàn)/G越低表明生長性能越好[16]。研究表明，飼糧添加膽汁酸可以顯著降低肉雞F/G，提高飼料轉(zhuǎn)化率[17-18]。Parsaie等[19]研究表明，在以小麥為基礎(chǔ)的飼糧中添加膽汁酸可以提高肉雞ADG和ADFI。趙惠媛等[20]研究表明，飼糧添加300 mg/kg膽汁酸可以顯著提高冬毛期烏蘇里貉ADG，降低F/G。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加300 mg/kg膽汁酸可以顯著降低白羽肉雞1～42日齡F/G，這表明飼糧添加膽汁酸對(duì)肉雞的生長性能具有積極影響。

3.2 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞屠宰性能的影響

屠宰性能可以直觀地反映出家禽不同組織部位對(duì)脂肪的消化、吸收和代謝效果，并直接反映肉雞的產(chǎn)肉性能；屠宰性能越高，肉雞養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益也隨之提高[21-22]。Ge等[23]研究表明，在高脂飼糧中添加膽汁酸可使肉雞腹脂率降低17.93%。曹愛智等[15]研究表明，在試驗(yàn)組飼糧中添加300 mg/kg膽汁酸替代5 kg油脂，與對(duì)照組相比，肉雞屠宰率顯著提高了1.86%，腹脂率極顯著降低了13.15%。以上結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果一致，在本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，飼糧添加300 mg/kg膽汁酸能夠顯著提高肉雞屠宰率，對(duì)肉雞腹脂率有降低的趨勢，這說明飼糧添加膽汁酸可以提高肉雞的屠宰性能。

3.3 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞肝臟脂肪指標(biāo)的影響

肝臟是肉雞脂肪代謝的主要器官，肝臟脂質(zhì)代謝直接影響肉雞脂肪沉積[24]。肉雞快速生長對(duì)于高能量的需求加重了肝臟的負(fù)擔(dān)，這使得肝臟有更高的脂肪堆積的風(fēng)險(xiǎn)。肝臟脂肪含量的增加無疑會(huì)引起脂質(zhì)過氧化和脂肪水平的升高，從而引發(fā)肝臟脂肪代謝異常[25]。于漫涵等[26]研究表明，膽汁酸能夠顯著降低花鱸肝臟TG含量，表明膽汁酸可以使肝臟脂肪分解加強(qiáng)。尹暢[27]研究表明，肝臟油紅O染色切片結(jié)果顯示，飼糧添加膽汁酸可以有效減少肉雞肝臟脂質(zhì)的沉積。以上研究與本試驗(yàn)有一定的相似之處，本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加300 mg/kg膽汁酸可以降低白羽肉雞肝臟脂肪含量，并且通過油紅O染色結(jié)果顯示，試驗(yàn)組肝臟組織脂滴數(shù)量呈現(xiàn)一定程度的減少。

脂肪酶是脂肪消化利用最基本的酶，在肝臟脂肪代謝中扮演著重要的角色[28]。Lai等[29]研究表明，飼糧添加膽汁酸能夠有效提高肉雞腸道脂肪酶活性，進(jìn)而改善肉雞的生長性能。向梟等[30]研究表明，在高脂飼糧中添加膽汁酸后，齊口裂腹魚肝胰臟脂肪酶的活性得到了顯著提高，進(jìn)而促進(jìn)了脂質(zhì)代謝。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加300 mg/kg膽汁酸對(duì)肉雞肝臟脂肪酶活性在數(shù)值上有提高的趨勢，從而促進(jìn)了肝臟脂類的代謝，一定程度上減少了肝臟脂肪的沉積。

3.4 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)是與畜禽機(jī)體健康狀況和新陳代謝相關(guān)的重要生物學(xué)指標(biāo)，它們能反映肝臟健康以及血液中的脂肪代謝水平[31]。血清TG、TC含量與肝臟合成脂肪能力密切相關(guān)；HDL參與脂質(zhì)從機(jī)體從外周組織轉(zhuǎn)移到肝臟進(jìn)行分解代謝[32]。研究表明，在黃羽肉雛雞飼糧中添加膽汁酸可顯著提高其血清GLU、總蛋白和球蛋白含量，降低膽固醇和TG含量[33]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加300 mg/kg膽汁酸有降低白羽肉雞血清TG含量的趨勢，同時(shí)試驗(yàn)組血清TC含量也所降低，且血清HDL含量有所提高，這說明飼糧添加膽汁酸能夠在一定程度上促進(jìn)肉雞脂肪的轉(zhuǎn)運(yùn)。

轉(zhuǎn)氨酶在三大營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化和代謝上，尤其在脂肪代謝上有著重要的作用。AST活性通常是反映肝臟健康和預(yù)判機(jī)體脂代謝的關(guān)鍵性指標(biāo)，血液中AST活性升高，說明肝臟中大量的AST釋放到血液中，表明肝臟內(nèi)可能出現(xiàn)脂肪代謝異常[34]。研究表明，在高脂飼糧中添加膽汁酸后顯著降低了42日齡肉雞血清AST活性，這可能與膽汁酸能夠促進(jìn)肝臟脂肪代謝以及降低脂肪沉積有關(guān)[35]。這與本試驗(yàn)結(jié)果相似，在本試驗(yàn)中，飼糧添加300 mg/kg膽汁酸能夠顯著降低白羽肉雞血清AST活性，表明膽汁酸對(duì)肝臟具有保護(hù)作用。

3.5 飼糧添加膽汁酸對(duì)白羽肉雞回腸養(yǎng)分表觀消化率的影響

回腸養(yǎng)分表觀消化率是直觀反映肉雞采食飼糧后對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收能力的重要指標(biāo)，養(yǎng)分表觀消化率能夠直接決定肉雞的生長發(fā)育狀況[35]。吳明海[36]研究表明，在基礎(chǔ)飼糧中添加0.2%膽汁酸鹽顯著提高了奶牛對(duì)EE和ADF的表觀消化率。Hemati Maitin等[37]研究表明，在飼糧中添加膽汁酸提高了肉雞回腸EE表觀消化率。以上研究與本試驗(yàn)結(jié)果有一定的相似之處，本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加300 mg/kg膽汁酸對(duì)肉雞回腸末端養(yǎng)分表觀消化率均無顯著影響，但與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組DM、EE、CP和ADF表觀消化率在數(shù)值上均有所提高，這表明飼糧添加膽汁酸對(duì)肉雞回腸末端營養(yǎng)物質(zhì)消化能力有一定的促進(jìn)作用。

4 結(jié) 論

飼糧添加300 mg/kg膽汁酸可以降低白羽肉雞F/G，提高屠宰率，降低腹脂率和肝臟脂肪含量，降低血清AST活性，表明膽汁酸可以保護(hù)肉雞肝臟健康，促進(jìn)脂類代謝，改善生長性能。