關(guān)金連 ,趙志偉 ,韋錦福 ,賀東生
(1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 廣東省動物源性人獸共患病預(yù)防與控制重點實驗室,廣東 廣州 510640;2.廣西賀州市八步區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心,廣西 賀州 542800)
筆者團隊開展了一個豬場暴發(fā)偽狂犬病(Pseudorabies,PR)后的確診和防控實踐。通過發(fā)病情況調(diào)查、觀察臨床癥狀和剖解組織病變,初步判斷某集約化豬場暴發(fā)了偽狂犬病。采集2頭典型病豬的病料經(jīng)PCR鑒定為偽狂犬病毒(PRV)陽性,采集10頭病豬的血清經(jīng)PRV gE-ELISA檢測為陽性(9/10),確診該豬場流行和暴發(fā)的為豬偽狂犬病。確診后對該場豬群采取了隔離、消毒和緊急接種等綜合防控措施,快速制止了該豬場PR的流行,取得顯著的防控效果。
某集約化養(yǎng)豬場于2021年7月出現(xiàn)定位欄懷孕母豬流產(chǎn)、產(chǎn)房母豬出現(xiàn)早產(chǎn)、產(chǎn)死胎及產(chǎn)木乃伊胎的數(shù)量增加,死胎率達30%,并且母豬產(chǎn)后出現(xiàn)高燒不食,產(chǎn)后乳房炎、子宮炎增多現(xiàn)象;產(chǎn)房內(nèi)10日齡仔豬出現(xiàn)高燒扎堆、口吐白沫大量流涎、間歇式發(fā)抖抽搐、運動不協(xié)調(diào)、頸部肌肉僵硬、四肢劃水游泳樣等神經(jīng)癥狀,最后昏迷死亡,部分仔豬還出現(xiàn)腹瀉,發(fā)病率高達100%,死亡率達 95%,腹瀉仔豬按大腸桿菌使用常用抗生素治療無效。
回顧該豬場最近引種情況,發(fā)現(xiàn)豬場同年4月份從某種豬場引進了70頭后備母豬和2頭后備公豬,在豬場發(fā)病時,這批后備豬已投入使用。經(jīng)統(tǒng)計,后備母豬配種后返情率高占35%,此批后備豬流產(chǎn)率也占流產(chǎn)豬總數(shù)的50%。通過臨床癥狀和引種史分析,懷疑是新引進的這批種豬帶有PRV野毒,因為引種前后和混群前都沒有進行PRV野毒抗體和病原檢測,可能攜帶PRV野毒。
產(chǎn)房15日齡內(nèi)仔豬癥狀表現(xiàn)最為明顯,表現(xiàn)在體溫升高到41℃左右、食欲廢絕;出現(xiàn)耳部皮下、腹下潮紅;出現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀,開始為運動不協(xié)調(diào)、身體震顫、唾液分泌增多、頸部肌肉僵硬、四肢劃水樣運動、眼球震顫,發(fā)展至角弓反張,最后昏迷死亡,病程不超過72 h,病死率高達100%。部分48 h內(nèi)新生仔豬發(fā)病,會出現(xiàn)嘔吐、甚至腹瀉,并在24~36 h內(nèi)死亡。15日齡以上仔豬表現(xiàn)略為輕點,癥狀沒那么明顯,病死率約70%。
保育舍仔豬體溫升高;出現(xiàn)噴嚏、流涕及劇烈咳嗽等呼吸系統(tǒng)癥狀,仔豬表現(xiàn)為腹式呼吸,呼吸困難,部分7 d后自行恢復(fù),部分發(fā)生死亡;部分豬還出現(xiàn)肌肉震顫、劇烈抽搐、驚厥,部分豬后軀麻痹,運動失衡;保育舍發(fā)病率約為50%,死淘率約為30%。
懷孕舍的妊娠母豬返情率達到了30%,比往年同期返情率顯著升高。妊娠35日以上的母豬發(fā)生部分流產(chǎn)。產(chǎn)房母豬出現(xiàn)產(chǎn)死胎和木乃伊胎,產(chǎn)弱仔和死胎等現(xiàn)象增多。
剖檢病死仔豬的大體病變有:扁桃體出現(xiàn)充血、出血點、部分扁桃體及咽喉頭出現(xiàn)明顯壞死;出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的仔豬的腦膜表面出血或充血,腦脊液增多;肝臟和脾臟表面出現(xiàn)灰白色壞死病灶;腎臟布滿針尖樣大小出血點;肺表現(xiàn)充血、出血、水腫;卡他性胃炎和腸炎;淋巴結(jié)出血等病變。流產(chǎn)母豬的胎衣可見白色壞死灶。
無菌采集3頭發(fā)病典型的病死仔豬的腦、扁桃體、肝、腎、脾等組織病料,加冰保存送檢。將采集的病料剪碎、同時添加無菌PBS,用組織搗碎機搗碎研磨制成懸液;組織懸液于-80℃與4℃反復(fù)凍融3次;低速離心后小心吸取上清液。上清液置-80℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?/p>
全場使用一次性采血管采用前腔靜脈采血法采集乳豬發(fā)病對應(yīng)的母豬和發(fā)病保育豬群的血液各5份,每頭豬至少采集2 mL。所采集的血液在常溫下靜置30 min后,血清析出來后,置于4℃運輸送檢。
將采集的血清樣品使用離心機低速離心,將析出血清轉(zhuǎn)移至潔凈EP管并保存于4℃冰箱。采用IDEXX的PRV gE ELISA試劑盒按說明書進行偽狂犬野毒抗體檢測。
瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果出現(xiàn)了與PRV陽性結(jié)果預(yù)期大?。?05 bp)相同的DNA條帶(圖1)。
圖1 PRV gE的PCR擴增結(jié)果
10份樣品的PRV gE-ELISA檢測結(jié)果為:母豬偽狂犬野毒抗體陽性率為5/5,保育豬的為4/5。提示豬群為偽狂犬感染。
綜合上述的豬場發(fā)病情況、引種史、臨床發(fā)病癥狀,剖檢病豬組織病變、病料PRV的PCR鑒定和gE ELISA檢測,確診該豬場豬群為偽狂犬的急性爆發(fā)。
(1)病死豬處理。按臨床表現(xiàn)區(qū)分發(fā)病豬和健康豬群,將發(fā)病豬集中隔離飼養(yǎng)。對病死豬、流產(chǎn)胎兒、死胎、胎衣無害化處理。用碘酸、醛類、酚類等消毒劑對全場進行嚴格消毒,尤其是發(fā)病豬舍及周圍環(huán)境,保證每24 h消毒1次,連續(xù)消毒7 d。
(2)野毒抗體檢測和緊急免疫。對全場所有母豬抽血進行實驗室PRV gE-ELISA檢測,將所有g(shù)E抗體陽性豬群集中隔離至一棟豬舍中單獨飼養(yǎng),不可繼續(xù)混養(yǎng),由專人專用工具飼養(yǎng)。全場母豬緊急肌肉注射接種優(yōu)質(zhì)的PRV基因缺失活疫苗,按照正常量的2倍劑量進行肌肉免疫,3周后再加強免疫1次。母豬免疫注射執(zhí)行1頭豬使用1個針頭。淘汰2頭PRV gE-ELISA檢測結(jié)果為陽性的公豬,其它幾頭公豬緊急接種PRV活疫苗,按照正常量的2倍劑量進免疫。3周后再加強免疫1次。對剛出生10日以內(nèi)的仔豬滴鼻免疫1頭份,對10日齡以內(nèi)發(fā)病豬直接淘汰無害化處理。對10日以上的發(fā)病仔豬進行緊急肌肉免疫1頭份,3周后再加強免疫1次。對保育舍仔豬緊急免疫2頭份,3周后再加強免疫1次。
(3)治療和保健。所有豬群飼料添加替米考星、卡巴匹林鈣及電解多維,連用7 d。發(fā)病的乳豬和保育豬都統(tǒng)一肌注長效頭孢、控制細菌的繼發(fā)感染。
(4)加強豬群的科學(xué)飼養(yǎng)管理。做好各項環(huán)控指標的控制,創(chuàng)造優(yōu)良飼養(yǎng)環(huán)境,執(zhí)行全進全出的飼養(yǎng)方法,減少不同豬群疾病的交叉感染,提高營養(yǎng)水平,提高豬群的自身免疫力。采取嚴格的生物安全措施,重點加強滅蚊蠅及滅鼠的相關(guān)工作;各棟豬舍工作人員相對固定,盡量避免流動,若非生產(chǎn)工作需要,減少串舍,禁止發(fā)病豬舍與健康豬舍之間的人流與物流;嚴格執(zhí)行生產(chǎn)線衛(wèi)生防疫制度與消毒規(guī)范;嚴禁貓、狗在豬場內(nèi)隨意活動,加強滅鼠、滅蚊、滅蠅工作。若發(fā)生母豬流產(chǎn)或產(chǎn)死胎,必須要用不滲漏的膠桶收集,收集完后密封,并盡快做無害化處理,對于污染過地面要進行徹底消毒;及時淘汰各階段低價值的病殘豬,減少傳染源,降低環(huán)境的病毒裁量。
通過采取上述防控措施,7日后豬群新發(fā)病率開始減少,新發(fā)病的癥狀開始逐漸減輕、總的死亡率也開始逐漸下降。1個月后,發(fā)病率降低約為30%、死亡率顯著下降。三周后,對豬群再次加強免疫偽狂犬活苗一次,之后一個月的生產(chǎn)成績基本恢復(fù)正常水平,產(chǎn)房成活率從55%恢復(fù)到了90%;保育成活率從78%恢復(fù)到了95%;育肥成活率從90%恢復(fù)到了95%。
豬群穩(wěn)定后,重新調(diào)整整個豬場執(zhí)行的免疫程序,公豬、母豬按1頭份/頭每3個月免疫1次;后備種豬按1頭份/頭配種前6周和3周各免疫1次;產(chǎn)房仔豬按1頭份/頭1天齡之內(nèi)滴鼻免疫1次;商品豬按1頭份/頭8周齡1免,3周后加免1次。使用該防控措施后,3至6個月期間多次回訪該豬場,期間無再次爆發(fā),則防控效果良好。