羅煥林

明溪縣總醫(yī)院兒科 (福建明溪 365200)

急性鏈球菌感染后腎小球腎炎(acute poststreptococcal glomerulonephritis，APSGN)是一種小兒多發(fā)性腎小球疾病，常以血尿為主要癥狀表現(xiàn)，并具有蛋白尿、高血壓、補(bǔ)體下降等臨床特征[1]。目前，關(guān)于APSGN的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確。典型APSGN的診斷難度不大，依據(jù)患兒病史、臨床癥狀及體征即可作出判斷，但對于非典型APSGN病例，僅依靠癥狀及體征診斷缺乏敏感性，存在誤診的可能，故有必要尋找更為高效、快速、準(zhǔn)確的實驗室檢測指標(biāo)[2]。臨床實踐證明，血清補(bǔ)體系統(tǒng)異常激活(尤其是血清補(bǔ)體C3)可直接參與腎臟疾病的發(fā)生與發(fā)展[3-4]。不過，目前關(guān)于血清補(bǔ)體對APSGN診斷價值的研究并不多見?；诖耍狙芯恐荚谔接懷錍3在APSGN患兒中的表達(dá)及臨床意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2021年12月我院收治的40例APSGN患兒，設(shè)為試驗組，并依據(jù)試驗組病情程度分為急性腎小球腎炎組與慢性腎小球腎炎組，各20例；選取同期在我院行健康體檢的40名小兒，設(shè)為對照組。試驗組與對照組監(jiān)護(hù)人均簽署知情同意書。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：試驗組患兒符合《小兒腎小球疾病的臨床分類、診斷及治療》[5]中APSGN的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)臨床檢查、影像學(xué)檢查、實驗室檢查、腎活檢確診；對照組為正常健康體檢小兒，無其他器質(zhì)性病變；年齡4～12歲；入院后均完善血清C3檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有腎病綜合征、乙型肝炎、過敏性紫癜等導(dǎo)致腎損傷的疾??；入院前有利尿劑、降壓藥等治療史；伴有心臟、肺部功能先天性缺陷；急性鏈球菌感染后合并其他腎小球疾病。

1.2 方法

3組均使用德國西門子BNII特種蛋白分析儀及配套試劑檢測相關(guān)指標(biāo)：于清晨采集3組空腹靜脈血3 ml，血樣采集容器為含有促凝劑的無菌真空采血管；采樣完成后，在2 h內(nèi)以3 000 r/min進(jìn)行離心處理5 min，吸取上層清液；采用免疫速率散射比濁法檢測血清C3、C4水平；利用RNA提取純化試劑盒吸取血清總RNA，然后利用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)技術(shù)檢測血清miR-4532、miR-2861水平；應(yīng)用溴甲酚綠法檢測血清白蛋白水平；應(yīng)用脲酶-谷氨酸脫氫酶法檢測血清尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)水平；應(yīng)用苦味酸動力學(xué)法檢測肌酐(creatinine，Cr)水平；應(yīng)用腎動態(tài)顯像法檢測腎小球濾過率(rglomerular filtration rate，eGER)水平；應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測血清白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白細(xì)胞介素-18(interleukin-18，IL-18)水平；應(yīng)用特種蛋白分析儀檢測24 h尿蛋白量。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 試驗組與對照組臨床資料比較

試驗組與對照組平均年齡、性別比例比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；試驗組血清C3、C4、miR-4532、miR-2861、白蛋白、eGER水平均低于對照組，血清BUN、Cr、IL-6、IL-18及24 h尿蛋白定量水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；見表1。

表1 試驗組與對照組臨床資料比較

2.2 急性組與慢性組血清C3水平及實驗室相關(guān)指標(biāo)比較

急性組血清C3、C4、miR-4532、miR-2861、白蛋白、eGER水平均低于慢性組，血清BUN、Cr、IL-6、IL-18及24 h尿蛋白定量及水平均明顯高于慢性組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 急性組與慢性組血清C3水平及實驗室相關(guān)指標(biāo)比較

2.3 急性組血清C3水平與實驗室指標(biāo)的相關(guān)性

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，急性組血清C3水平與血清C4、白蛋白、BUN、Cr、IL-6、IL-18及24 h尿蛋白定量水平均成負(fù)相關(guān)，與血清eGER水平成正相關(guān)(r=0.588，P<0.05)，見表3。

表3 急性組血清C3水平與實驗室指標(biāo)的相關(guān)性

3 討論

發(fā)生急性鏈球菌感染后，腎小球內(nèi)的免疫復(fù)合物大量沉積形成阻塞，可引起免疫性炎癥，使腎小球無法實現(xiàn)正常濾過運行而受損，從而導(dǎo)致濾過面積縮小、濾過率下降，使患兒機(jī)體發(fā)生水鈉潴留、細(xì)胞外液大量增加、多種水溶質(zhì)排泄減少，進(jìn)而引發(fā)腎小球腎炎[6-7]。有研究認(rèn)為[8]，腎小球內(nèi)免疫復(fù)合物沉積的形成主要通過補(bǔ)體激活、中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤等途徑實現(xiàn)，可引起腎臟病變。

腎臟內(nèi)的固有細(xì)胞可合成大量補(bǔ)體成分，這些補(bǔ)體成分具有重要的生物學(xué)意義，能參與進(jìn)展性腎病的各個階段，尤其是腎小管上皮細(xì)胞C3補(bǔ)體表達(dá)不僅能參與腎小球病變進(jìn)展，還能加重局部小管間質(zhì)的病變程度[9]。本研究結(jié)果顯示，試驗組血清C3水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；試驗組中急性組血清C3水平低于慢性組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；表明血清C3在APSGN患兒中呈低表達(dá)，可作為該病的診斷依據(jù)。其原因為，補(bǔ)體系統(tǒng)屬于固有免疫系統(tǒng)不可或缺的重要組成部分，與先天免疫、適應(yīng)性免疫關(guān)系密切，能清除免疫復(fù)合物及受損細(xì)胞，同時能調(diào)節(jié)免疫功能[10]；但當(dāng)機(jī)體受到鏈球菌感染時，其所分泌的外毒素會導(dǎo)致補(bǔ)體被激活，從而引起全身性炎性反應(yīng)，使得遠(yuǎn)端器官、腎臟等受損，補(bǔ)體C3也在被動大量消耗下出現(xiàn)表達(dá)降低的情況，故而APSGN患兒血清C3水平普遍下降[11-12]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，急性組血清C3水平與eGER成正相關(guān)(P<0.05)，說明APSGN患兒的血清C3水平可隨eGER降低而降低。顧林婷和劉大軍[13]的研究指出，隨著患兒eGER的逐漸降低，其腎功能損傷逐漸加重，其免疫功能也持續(xù)紊亂，血清C3水平會因消耗量增加而持續(xù)下降。分析其原因為，eGER是評估腎功能的一項重要指標(biāo)，當(dāng)其含量降低時，表明患者存在腎臟疾??；補(bǔ)體C3水平的降低也與機(jī)體免疫力下降、腎臟疾病、傳染性疾病等因素有關(guān)，故而當(dāng)患者發(fā)生急性腎小球腎炎時，其血清補(bǔ)體C3水平可隨eGER的降低而持續(xù)降低。

APSGN通常發(fā)生在皮膚感染后3～5周或咽喉感染后1～2周，具有高血壓、氮質(zhì)血癥、水腫、血尿等臨床表現(xiàn)，也可有腎病綜合征的臨床表現(xiàn)。IL-6、IL-18是Th1/Th2的重要細(xì)胞因子，對多種自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展起著重要作用。在APSGN患兒中，當(dāng)其血清C3表達(dá)降低時，會導(dǎo)致下游相關(guān)炎性因子IL-6、IL-18等不受控而大量分泌釋放，使得血管內(nèi)皮炎癥被激活，繼而誘導(dǎo)炎癥進(jìn)一步損傷腎臟，導(dǎo)致eGER降低，進(jìn)而導(dǎo)致其腎功能下降[14]。miR-4532、miR-2861是兩種可調(diào)控機(jī)體淋巴細(xì)胞功能與免疫功能活性的miRNA，可參與調(diào)控人體大約30%的基因表達(dá)，影響細(xì)胞繁殖、生長發(fā)育、分化、凋亡等生物學(xué)過程；若腎臟中特異性地缺乏miRNA或某些特異miRNA呈低表達(dá)，會導(dǎo)致可調(diào)節(jié)腎臟功能的特異性蛋白大量產(chǎn)生，進(jìn)而參與到腎臟疾病的發(fā)生與發(fā)展中[15]。本研究結(jié)果顯示，急性組血清C4、miR-4532、miR-2861、白蛋白、eGER水平均低于慢性組，血清BUN、Cr、IL-6、IL-18及24 h尿蛋白定量水平均明顯高于慢性組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，證實APSGN患兒病情的進(jìn)展除受補(bǔ)體系統(tǒng)異常激活影響外，還可能受促炎因子分泌、蛋白尿形成、miRNA表達(dá)降低等因素的影響。

綜上所述，血清C3在APSGN患兒體內(nèi)的表達(dá)明顯降低，且可隨eGER的降低而降低；臨床可根據(jù)APSGN患兒血清C3的水平評估其病情。