趙琳儒 李 杰 張雅筠 蔣境興 郝旭亮

1.山西中醫(yī)藥大學，山西晉中 030619；2.山西省中醫(yī)藥研究院，山西太原 030012；3.山西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，山西太原 030024

中醫(yī)藥作為人類歷史發(fā)展長河中的文化瑰寶，應(yīng)用廣泛，尤其在治療各種疾病中發(fā)揮著重要作用，但隨著中醫(yī)藥的不斷應(yīng)用，中醫(yī)藥在現(xiàn)代化、國際化的發(fā)展過程中卻遇到各種困難，關(guān)鍵問題在于中藥存在多成分、多靶點、多途徑等干擾因素，體內(nèi)過程復(fù)雜，使其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚未明確。因此，尋找明確的中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究方法已成為學術(shù)界研究的熱點問題。本文旨在從該方向入手，對血清藥理學及血清藥物化學、血清譜效關(guān)系、代謝組學、中藥藥動學進行綜述。

1 中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)概述

中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)是指對某一病癥而言中藥發(fā)揮其作用的所有活性成分物質(zhì)的總和，在揭示中藥配伍理論、制訂質(zhì)量評價標準和指導(dǎo)產(chǎn)品研發(fā)中發(fā)揮著重要作用[1-3]。近年來隨著現(xiàn)代化分析手段的快速發(fā)展及多學科交叉滲透、優(yōu)勢互補，使得中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究不斷深入，眾多學者對該領(lǐng)域理論思路的探索使得中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究不斷發(fā)展，通過多種研究思路的指導(dǎo)，眾多學者不斷研究在體內(nèi)作用后的中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究方法，并取得了一定的進展。趙立春等[4]提出霰彈理論，該理論認為中藥復(fù)方是通過多成分、多靶點來發(fā)揮其藥理作用，雖然單個成分或藥物的作用并不是很強，但多種中藥成分的協(xié)同作用可以產(chǎn)生良好的療效。黃熙等[5]提出“證治藥動學”假說，證治藥動學指出方劑的藥物配伍或不同的證候狀態(tài)會明顯影響體內(nèi)化學成分的藥動學參數(shù)，并與療效和毒副作用相關(guān)，這一觀點體現(xiàn)了結(jié)合君臣佐使進行藥代動力學研究的特點。王喜軍[6]在中藥與機體相互作用思想的指導(dǎo)下，基于中醫(yī)理、法、方、藥理論，以及中藥/方劑多種成分發(fā)揮協(xié)同作用的特點提出中藥血清藥物化學。劉昌孝[7]提出方劑代謝物組學新假說，將代謝物組學應(yīng)用于中藥藥物模型的鑒別和確證以及中藥作用機制的研究。

2 中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究方法及進展

2.1 血清藥理學與血清藥物化學研究方法及進展

中藥成分復(fù)雜多樣，但只有入血成分才能發(fā)揮藥效。無論以何種途徑，中藥有效成分通常以血液為載體輸送到靶點（腸道直接起作用及外用藥除外），從而產(chǎn)生藥效作用，因而血清中含有的成分才是中藥在體內(nèi)直接發(fā)揮作用的物質(zhì)。血清藥理學是指將含藥血清代替中藥復(fù)方或粗提取物加入離體的組織器官或細胞中，以建立一種體外模型的實驗方法。Iwama等[8]在1984年經(jīng)過漢方藥的藥理研究，對“血清藥理學”一詞進行了定義，為藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究開創(chuàng)了新紀元，由于中藥及其復(fù)方成分復(fù)雜，發(fā)揮藥物療效并非僅通過直接作用，還可能與藥物在體內(nèi)經(jīng)過血液循環(huán)后的內(nèi)源性代謝物有關(guān)，之后，國內(nèi)科研學者將“中藥血清藥理學”研究運用到了中醫(yī)藥領(lǐng)域，如賀雯茜[9]等用血清藥理學法獲得含藥小鼠血清，通過建立果糖誘導(dǎo)的LO2肝細胞脂肪變性模型并采用活性氧（ROS）及細胞凋亡檢測來揭示體外培育牛黃能抑制肝細胞脂質(zhì)沉積的作用機制。

中藥血清藥物化學是通過研究血清中的移行成分并闡釋藥效間的相關(guān)性從而確定中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的一門應(yīng)用學科。中藥成分復(fù)雜多樣，必須經(jīng)過體內(nèi)過程使有效成運輸?shù)教囟ú课唬蔀槿胙煞植拍馨l(fā)揮療效。董宇等[10]等采用血清藥物化學方法，通過建立UHPLC-Q/TOF-MS技術(shù)，發(fā)現(xiàn)益胃飲中的27個血清移行成分具有防治胃癌的作用。Chen[11]等采用血清藥物化學和靶細胞提取相結(jié)合的方法，發(fā)現(xiàn)益母草葉中有3個潛在的活性物質(zhì)，具有胰腺保護作用。

2.2 血清譜效關(guān)系研究方法及進展

譜效關(guān)系是應(yīng)用現(xiàn)代科學技術(shù)將活性成分群的特征峰與藥效結(jié)果相結(jié)合起來反映藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的一種應(yīng)用方法[12]。中藥譜效關(guān)系研究以HPLC或UPLC指紋圖譜為主，并結(jié)合多種多樣的藥效學模型來反映藥效間的關(guān)系，目前正被廣泛應(yīng)用。林美妤等[13]等通過利用UPLC-Q-TOF-MS建立灌胃后的血清指紋圖譜，發(fā)現(xiàn)西洋參血清指紋圖譜中有8個入血成分，其中人參皂苷Re、Rb1、Rb2這3種活性物質(zhì)具有抗疲勞作用。Chen等[14]通過采用高效液相色譜技術(shù)，對11批不同提取液的指紋圖譜進行研究，發(fā)現(xiàn)黃酮類成分具有抗氧化作用。

藥效差示血清色譜法是通過觀察機體在給藥后產(chǎn)生最大藥效和最小藥效的指紋圖譜差異，進而尋找出藥效物質(zhì)的一種新方法[15]。喬逸等[16]通過將紅花提取物及其陰性提取物產(chǎn)生最大及最小藥效時的血清指紋圖譜進行對比，得出HSYA在紅花降低全血黏度上起重要作用。

2.3 代謝組學研究方法及進展

代謝組學由英國帝國理工大學Jeremy Nicholson教授在1999年通過對生物體液和組織代謝途徑的研究，首次提出了代謝組學的定義，作為一門新興學科，代謝組學發(fā)展迅速，和基因組學、網(wǎng)絡(luò)藥理學、蛋白質(zhì)組學等一起構(gòu)成系統(tǒng)生物學，由于代謝物處于代謝網(wǎng)絡(luò)的末端，代謝組學是通過分析生物系統(tǒng)中所有小分子代謝物的變化，從整體水平描述機體的狀態(tài)和外界刺激的變化，從而反映代謝物進入系統(tǒng)后的特征和影響[17]。它主要應(yīng)用現(xiàn)代儀器技術(shù)，定性定量研究生物體內(nèi)的小分子代謝物的指紋圖譜差異，從而更準確地表現(xiàn)機體所處的狀態(tài)和環(huán)境[18-20]。近年來，隨著現(xiàn)代分析技術(shù)的迅猛發(fā)展。核磁共振和質(zhì)譜技術(shù)更能滿足代謝組學高通量、高靈敏度、無偏性的需求，已成為中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究的重要方法。同時中藥及其復(fù)方成分十分復(fù)雜，無法很好地解釋疾病的發(fā)病機制。因此，尋求新的技術(shù)手段，從科學的角度合理地解釋中藥治療失眠的作用機制顯得尤為重要。而代謝組學在系統(tǒng)生物學的基礎(chǔ)上，通過整體水平描述機體的狀態(tài)和外界刺激的變化，從而反映代謝物進入系統(tǒng)后的特征和影響。這與中醫(yī)藥所強調(diào)的治療思路有異曲同工之處。曾威等[21]運用代謝組學方法并采用UPLCQ-TOF/MS技術(shù)，通過建立高脂血癥模型相關(guān)的評價方法，發(fā)現(xiàn)廣陳皮的入血成分有11個，其中川陳皮素和5-去甲川陳皮葡糖醛酸代謝物可能與調(diào)節(jié)鞘脂代謝和甘油酯代謝有關(guān)。盧盛文等[22]通過應(yīng)用代謝組學方法，并采用UPLCHDMS技術(shù)，通過分析尿液代謝數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)了30個相關(guān)成分，其中五味子木質(zhì)素類及人參皂苷類的多種成分是生脈散預(yù)防老年癡呆的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。李秋菊等[23]采用中醫(yī)方證代謝組學技術(shù)并通過建立缺氧缺血腦癱（HICP）大鼠模型，發(fā)現(xiàn)入血成分中6-O-甲基梓醇、莫諾苷、丹皮酚原苷、毛蕊花苷、獐牙菜苷脫水的代謝產(chǎn)物在治療HICP大鼠模型中發(fā)揮著重要作用。

2.4 中藥藥動學研究方法及進展

中藥藥動學是研究中藥活性成分在體內(nèi)吸收、分布、代謝、排泄等動態(tài)變化規(guī)律的一門學科[24]。由于中藥體系復(fù)雜，進入體內(nèi)后藥物成分經(jīng)過吸收、代謝可能發(fā)生生物轉(zhuǎn)化，而不以原有形式存在，是一個動態(tài)的過程，而中藥藥動學能夠借助其特點更好地反映中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，目前我國相關(guān)研究學者在研究中藥藥動學的時候，主要采用藥物體內(nèi)濃度法、生物效應(yīng)法、中藥藥動學與藥效學結(jié)合（PK-PD）、體內(nèi)藥代動力學、單味藥有效成分藥代動力學等理論方法，并采用色譜法、放射性同位素標記法、免疫法、微透析法等分析手段進行研究，在中醫(yī)藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究中取得了一定的進展。高煥[25]利用HPLC-MS/MS技術(shù)，用藥代動力學的方法，發(fā)現(xiàn)血清中有14個成分，胃腸道內(nèi)容物中有12個成分，其中肉桂酸、6-姜酚和苷類成分被充分吸收發(fā)揮藥效作用，何博賽[26]采用UFLC-MS/MS方法，鑒定出13個化合物，其中有黃酮類6個，三萜類3個，內(nèi)酯類2個，酸類2個，其中斯皮諾素、芒果苷以及阿魏酸和失眠大鼠模型有關(guān)，王冰雨[27]采用紫外分光光度法并通過建立UA檢測系統(tǒng)對大鼠血清及尿液中的成分進行測定，發(fā)現(xiàn)總黃酮和總萜這兩種成分對治療風濕性關(guān)節(jié)炎有用。

3 小結(jié)

綜上，血清藥理學和血清藥物化學能更直接反映物質(zhì)基礎(chǔ)與功效、作用之間的關(guān)系，并能避免粗制劑對實驗產(chǎn)生的干擾，使實驗真實、可靠[28]；血清譜效關(guān)系能更大程度地反映譜效信息和入血成分間的相互作用關(guān)系[29]；代謝組學具有系統(tǒng)性、靈敏性、特異性和動態(tài)性等特點，能全面揭示中藥在體內(nèi)發(fā)揮作用的全過程[30]；中藥藥動學具有整體性、系統(tǒng)性、科學性的特點，能借助藥動學的方法，定性定量地研究機體對中藥的處置[31]，通過動物體內(nèi)實驗，能使有效成分在體內(nèi)充分吸收，更好追蹤發(fā)揮藥效的物質(zhì)，盡管目前對該方向的研究方法尚存在一些不足之處，但隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展和多學科間的相互融合，相信我國的中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究最終會取得突破性進展，為中藥現(xiàn)代化、國際化進程做出巨大貢獻。