張靜波，史 堅，楊靜云，冉繼朋，張莎莎，劉子騰，駱靜武，郭亞萍

1 保定市第一中心醫(yī)院心臟血管外科，河北 保定 071000

2 保定市第一中心醫(yī)院檢驗科，河北 保定 071000

下肢動脈硬化閉塞癥（arteriosclerosis obliterans，ASO）是指由動脈硬化造成的下肢供血動脈內膜增厚、管腔狹窄或閉塞，病變肢體血液供應不足，引起下肢間歇性跛行、皮膚溫度降低、疼痛，甚至發(fā)生潰瘍或壞死等臨床表現(xiàn)的慢性進展性疾病[1-2]。下肢ASO的預后較差，給個人及社會造成了嚴重的負擔[3]。糖尿病、動脈高壓、吸煙、慢性腎功能不全和血脂異常等是下肢ASO公認的危險因素[1]。有研究發(fā)現(xiàn)，多種炎性指標參與了下肢動脈粥樣硬化的發(fā)生[4]，故炎性反應是下肢ASO發(fā)生的危險因素之一。免疫反應在炎性反應發(fā)生過程中發(fā)揮著重要的保護作用，而免疫調節(jié)功能失調可導致下肢ASO的發(fā)生，并且與病情的不穩(wěn)定性有關[5-7]。因此，免疫反應可能參與了下肢ASO的發(fā)生發(fā)展?？购丝贵w（antinuclear antibody，ANA）是機體對細胞核內DNA、RNA、蛋白或其分子復合物產(chǎn)生的自身抗體。ANA高滴度與系統(tǒng)性紅斑狼瘡和系統(tǒng)性硬化癥等自身免疫性疾病密切相關。在多變量模型中，ANA被證明是動脈粥樣硬化的獨立危險因素[8]。目前，關于ANA與下肢ASO之間關系的報道較少。鑒于此，本研究對ANA與下肢ASO發(fā)生的相關性進行探討，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2019年11月至2021年2月保定市第一中心醫(yī)院收治的下肢ASO住院患者的臨床資料。納入標準：（1）經(jīng)彩色多普勒超聲及計算機斷層掃描血管造影（computed tomography arteriography，CTA）檢查[1]確診為下肢ASO且行大隱靜脈曲張手術；（2）無感染；（3）無靜脈血栓；（4）無冠狀動脈粥樣硬化疾??；（5）病情平穩(wěn)；（6）臨床資料完整。排除標準：（1）存在自身免疫性疾??；（2）應用免疫治療藥物；（3）血栓閉塞性脈管炎；（4）合并甲狀腺疾?。唬?）存在慢性感染；（6）存在外傷；（7）合并腫瘤。根據(jù)納入、排除標準，最終共納入79例下肢ASO患者。另選取84例無下肢ASO的大隱靜脈曲張患者作為對照組，患者均行大隱靜脈曲張手術，無感染、靜脈血栓、動脈粥樣硬化疾病，病情平穩(wěn)。

1.2 數(shù)據(jù)收集

收集所有患者的一般人口學特征、合并癥及生化檢查結果，包括性別、年齡、吸煙史、高血壓情況、高脂血癥情況、踝肱指數(shù)、紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)、血紅蛋白、空腹血糖水平、肌酐水平、D-二聚體水平、肌酸激酶水平、C反應蛋白水平、天冬氨酸轉氨酶（aspartate aminotransferase，AST）/丙氨酸轉氨酶（alanine aminotransferase，ALT）。

1.3 觀察指標

比較兩組患者的臨床特征。比較兩組患者的外周血ANA及其特異性抗體——抗Ro-52抗體表達情況。ANA滴度及抗Ro-52抗體的檢測方法：入院后第1天均抽取所有患者的空腹外周血，應用免疫熒光法嚴格按照說明書的步驟進行檢測，ANA滴度＞1/100判定為ANA陽性，應用EUROLineScan軟件定性分析抗Ro-52抗體表達情況。分析下肢ASO發(fā)生的獨立危險因素。

1.4 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 26.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，符合正態(tài)分布的計量資料采用（±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；不符合正態(tài)分布的計量資料采用M（P25，P75）表示，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗。計數(shù)資料采用n（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。通過二元Logistic回歸模型分析下肢ASO發(fā)生的獨立危險因素。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者臨床特征的比較

兩組患者的性別、年齡、吸煙史、高血壓情況、高脂血癥情況、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白水平、AST/ALT比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。ASO組患者的踝肱指數(shù)、白細胞計數(shù)、空腹血糖、肌酐水平、D-二聚體水平、肌酸激酶水平、C-反應蛋白水平均明顯高于對照組患者，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。（表1）

表1 兩組患者臨床特征的比較

2.2 兩組患者免疫指標的比較

ASO組患者的ANA陽性表達率為38.0%（30/79），明顯高于對照組患者的14.3%（12/84），差異有統(tǒng)計學意義（χ2＝11.944，P＜0.01）。（表2）

表2 兩組患者免疫指標陽性表達情況的比較[n（%）]

2.3 下肢ASO發(fā)生影響因素的多因素分析

以是否發(fā)生下肢ASO為因變量（未發(fā)生＝0，發(fā)生＝1），以入院時白細胞計數(shù)、空腹血糖、肌酐水平、D-二聚體水平、肌酸激酶水平、C-反應蛋白水平、ANA表達情況為自變量納入二元Logistic回歸模型進行多因素分析，結果顯示，白細胞計數(shù)高、ANA陽性均是下肢ASO發(fā)生的獨立危險因素（P＜0.05）。（表3）

表3 下肢ASO發(fā)生影響因素的多因素分析

3 討論

下肢ASO是臨床上較為常見的下肢血管性疾病，好發(fā)于中老年人群，晚期可導致肢體嚴重缺血，給患者增加了相關的醫(yī)療及經(jīng)濟負擔[9]。既往研究表明，有癥狀的下肢ASO患者出現(xiàn)死亡及心血管事件的風險顯著增加[10]。目前認為糖尿病、動脈高壓、吸煙、高同型半胱氨酸血癥、慢性腎功能不全、血脂異常及炎性反應均是下肢ASO發(fā)生的危險因素，但相關研究有限[11-14]。

本研究發(fā)現(xiàn)，ANA在健康人群中的陽性率約為14.28%，與Li等[15]的研究結果一致。本研究中，下肢ASO患者的ANA陽性率明顯高于對照組患者，ANA可能在下肢ASO的發(fā)生機制中發(fā)揮了潛在的作用，并且在下肢ASO持續(xù)存在時可能具有預測價值，因此考慮自身免疫功能可能是下肢ASO發(fā)生的獨立危險因素。有研究發(fā)現(xiàn)，ANA與冠心病的發(fā)生、動脈粥樣硬化、突發(fā)的血栓形成及內皮細胞相關指標密切相關[6-8,16-17]，從而導致下肢ASO的發(fā)生。本研究納入的患者中存在抗Ro-52抗體陽性患者，納入時尚未診斷干燥綜合征等免疫系統(tǒng)疾病，為了避免發(fā)生偏倚，故進行比較，發(fā)現(xiàn)兩組患者的抗Ro-52抗體陽性表達情況無統(tǒng)計學差異。

本研究進一步分析發(fā)現(xiàn)，白細胞計數(shù)高、ANA陽性表達均是下肢ASO發(fā)生的獨立危險因素（P＜0.05），考慮ANA可能通過參與炎性反應而引發(fā)下肢ASO。有研究表明，自身免疫反應與血管炎患者中人血管內皮細胞的改變有關，可能是血管炎的發(fā)生機制[18]。Ye等[19]的研究發(fā)現(xiàn)，中性粒細胞與淋巴細胞比值、血小板與淋巴細胞比值均可預測外周動脈疾病的嚴重程度。Zhang等[20]的研究發(fā)現(xiàn)，膽固醇結晶可引起炎性反應，且與中國男性下肢ASO的發(fā)生密切相關，提示炎性反應在動脈粥樣硬化及下肢ASO的發(fā)生中發(fā)揮著重要作用[21-22]，進一步考慮自身免疫反應可能參與了下肢動脈硬化的形成。

下肢ASO患者中的ANA是否由疾病本身引起對于闡明ANA在動脈粥樣硬化形成中的作用具有重要意義。因此，在較長時間內持續(xù)檢測ANA至關重要，并且通過對ANA與下肢ASO發(fā)生潛在關系的進一步研究，可能會開發(fā)新的診斷工具來識別下肢ASO。本研究存在一定的不足之處，如納入的樣本量較少，缺乏多中心數(shù)據(jù)，結果可能存在一定偏倚。

綜上所述，部分下肢ASO患者的ANA呈陽性表達，ANA可有效輔助下肢ASO發(fā)生的預測、診治及病情評估。在今后大型隊列研究的長期隨訪中，ANA的表達情況作為評估下肢ASO發(fā)生的潛在危險因素具有重要的指導意義。