李 托 屈 雷 朱海鯨 李隴平*

(1.榆林學(xué)院，陜西省陜北絨山羊工程技術(shù)研究中心，榆林719000；2.榆林學(xué)院，生命科學(xué)學(xué)院，榆林719000)

硒作為動(dòng)物生長(zhǎng)和生產(chǎn)必需的微量元素之一，具有抗氧化、抗衰老、抗輻射等多種功效。硒不僅可以預(yù)防動(dòng)物某些疾病，還可以促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)維持動(dòng)物正常生長(zhǎng)發(fā)育和生產(chǎn)性能有著極其重要的作用[1-2]。陜北白絨山羊是陜北地區(qū)(榆林和延安)主要飼養(yǎng)的絨肉兼用型絨山羊，具有產(chǎn)絨量高和肉品質(zhì)好等特點(diǎn)，僅榆林地區(qū)飼養(yǎng)量就達(dá)800萬(wàn)只，絨山羊養(yǎng)殖也已發(fā)展成為榆林市畜牧業(yè)的主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)和陜北地區(qū)鄉(xiāng)村振興的重要途徑。研究表明，陜北白絨山羊飼養(yǎng)區(qū)土壤中硒及陜北白絨山羊血液中硒的含量分別為0.069 mg/kg和0.040 mg/L，說(shuō)明陜北白絨山羊飼養(yǎng)區(qū)屬于嚴(yán)重缺硒地區(qū)，陜北白絨山羊體內(nèi)硒含量也低于國(guó)際上公認(rèn)的0.05 mg/kg硒含量最低閾值，需要通過(guò)飼糧添加劑補(bǔ)充硒元素[3]。飼糧中補(bǔ)充硒能夠改善反芻動(dòng)物瘤胃微生物抗氧化狀態(tài)，從而促進(jìn)瘤胃微生物生長(zhǎng)和瘤胃發(fā)酵，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，最終促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)[4-6]。Cui等[7]報(bào)道，在飼糧中添加酵母硒能夠顯著提高藏羊瘤胃氨態(tài)氮(NH3-N)、總揮發(fā)性脂肪酸(TVFA)、乙酸鹽、丁酸鹽和丙酸鹽濃度。Wei等[8]發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加硒代蛋氨酸羥基類(lèi)似物提高了奶牛瘤胃發(fā)酵和粗蛋白質(zhì)(CP)、中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)的表觀消化率。也有研究表明，飼糧中添加酵母硒可以提高奶牛的產(chǎn)奶量[9]和綿羊干物質(zhì)(DM)、有機(jī)物(OM)、NDF、ADF的表觀消化率和氮代謝[10]。然而，關(guān)于硒元素在陜北白絨山羊上的研究鮮見(jiàn)報(bào)道，只有熊忙利[3]研究了亞硒酸鈉對(duì)陜北白絨山羊羔羊斷奶成活率的影響和馬雄等[11]研究了酵母硒對(duì)絨山羊生長(zhǎng)和組織抗氧化的影響。高羊毛氨酸硒(selenohomolanthionine，Se-HLan)是以甘油為生長(zhǎng)介質(zhì)，產(chǎn)朊假絲酵母(Candidautilis)進(jìn)行連續(xù)發(fā)酵獲得的一種新型有機(jī)硒[12]。Se-HLan與硒代蛋氨酸(SeMet)在體內(nèi)的代謝途徑不同，SeMet除參與硒蛋白合成外，還有相當(dāng)一部分被當(dāng)作蛋氨酸參與正常的蛋白質(zhì)代謝，而Se-HLan主要被用于硒蛋白的合成。研究表明，水溶性Se-HLan在動(dòng)物體內(nèi)具有更高的生物利用率和沉積率，如果以畜禽產(chǎn)品沉積量作為評(píng)價(jià)硒生物利用率的指標(biāo)，Se-HLan至少比SeMet高出10%[13-14]。因此，本研究以生長(zhǎng)期陜北白絨山羊羯羊?yàn)樵囼?yàn)對(duì)象，研究飼糧添加不同水平Se-HLan對(duì)生長(zhǎng)期陜北白絨山羊羯羊生長(zhǎng)性能、血液常規(guī)參數(shù)、血清生化和抗氧化指標(biāo)、瘤胃發(fā)酵、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和氮代謝的影響，以期為Se-HLan在陜北白絨山羊養(yǎng)殖過(guò)程中的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

選取體重[(26.18±2.71) kg]相近、健康狀況良好的6月齡陜北白絨山羊羯羊32只，隨機(jī)分為4組，每組8只羊。試驗(yàn)羊每天飼喂2次(08:00和17:00)，自由飲水。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 飼養(yǎng)試驗(yàn)

參照中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 816—2004)[15]中育肥山羊體重25 kg、日增重100 g時(shí)的營(yíng)養(yǎng)需要配制基礎(chǔ)飼糧，加工為顆粒料，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。基礎(chǔ)飼糧中硒含量為0.016 mg/kg，分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0、71、146、296 mg/kg的Se-HLan(硒含量為4 000 mg/kg，載體為麥芽糊精)，使飼糧硒含量分別為0.016(對(duì)照組，Ⅰ組)、0.300(Ⅱ組)、0.600(Ⅲ組)和1.200 mg/kg(Ⅳ組)。飼養(yǎng)試驗(yàn)包括10 d預(yù)試期和60 d正試期。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束前1 d，所有試驗(yàn)羊晨飼前通過(guò)頸靜脈采集5 mL新鮮血液。其中一份血液(肝素鈉抗凝血)當(dāng)天測(cè)定血常規(guī)參數(shù)，另外一份不加抗凝劑的血液3 000 r/min離心10 min制備血清，用于后續(xù)血清生化和抗氧化指標(biāo)的測(cè)定。另外，于飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天早上晨飼前，用胃管式瘤胃液采樣管經(jīng)口腔采集所有試驗(yàn)羊瘤胃液20 mL，為了避免動(dòng)物唾液的污染，收集20 mL瘤胃液之前先棄去剛開(kāi)始經(jīng)口腔抽出的50 mL瘤胃液。采集的瘤胃液用4層紗布過(guò)濾后，迅速用便攜式pH計(jì)測(cè)定瘤胃液pH后，低溫運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)移至-80 ℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.2.2 消化試驗(yàn)

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，將所有試驗(yàn)羊放入自制的消化代謝籠，上層為飼養(yǎng)活動(dòng)籠，下層為糞尿自動(dòng)分離裝置，飼養(yǎng)活動(dòng)籠的底部為漏縫地板、前方有料槽和飲水槽、后方設(shè)置控位門(mén)。按照全收糞、尿法進(jìn)行為期11 d的消化代謝試驗(yàn)，其中預(yù)試期7 d，正試期4 d。消化試驗(yàn)正試期內(nèi)每天記錄每只試驗(yàn)羊的給料量和剩料量，準(zhǔn)確計(jì)算每1只試驗(yàn)羊的采食量；每天08:00和17:00從代謝籠中的糞便收集板收集每只羊的糞便，同時(shí)準(zhǔn)確稱(chēng)量糞便重量?；靹蚝蟀纯傊亓康?0%取樣，其中一部分按100 g鮮糞加10%的硫酸10 mL固氮，避免糞中氨氮損失，-20 ℃保存，用于測(cè)定糞氮代謝；一部分用于風(fēng)干樣品制備及營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定。同時(shí)，每天用盛有100 mL 10%(v/v)硫酸的塑料盆收集每只羊的尿液，記錄每只試驗(yàn)羊的尿液容積后，經(jīng)4層紗布過(guò)濾，按10%比例取樣，將收集的每只羊4 d尿樣混合到一起，放入-20 ℃冰箱冷凍保存，以備測(cè)定尿液中氮含量。所有的羊做完消化代謝試驗(yàn)之后放回原圈。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)

飼養(yǎng)試驗(yàn)過(guò)程中，每天記錄每圈羊的給料量和剩料量并計(jì)算平均日采食量(ADFI)，試驗(yàn)期間每15 d測(cè)定1次所有羊的體重，計(jì)算平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

ADG=(終末體重-初始體重)/試驗(yàn)天數(shù)；ADFI=[(試驗(yàn)期內(nèi)每組
羊總給料量-試驗(yàn)期內(nèi)
每組羊總剩料量)/試驗(yàn)天數(shù)]/組內(nèi)試驗(yàn)羊數(shù)；F/G=ADFI/ADG。

1.3.2 血常規(guī)指標(biāo)

用肝素鈉抗凝管采集的血液樣品，在采用后2 h內(nèi)使用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(PE-6800，深圳市普康電子有限公司)及配套試劑測(cè)定試驗(yàn)羊的血常規(guī)參數(shù)，包括紅細(xì)胞參數(shù)、白細(xì)胞參數(shù)和血小板參數(shù)等。

1.3.3 血清生化和抗氧化指標(biāo)

血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和尿素氮(UN)含量測(cè)定使用日本富士全自動(dòng)干式生化分析儀(4000ie)；超氧化物歧化酶(SOD，A001-1)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px，A005-1)活性和丙二醛(MDA，A003-1)含量測(cè)定采用南京建成生物工程研究所的試劑盒。

1.3.4 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率

飼糧和糞樣中DM含量參照GB/T 6435—2014中的方法，采用105 ℃烘干法測(cè)定；粗脂肪(EE)含量參照GB/T 6433—2006中的方法，采用索式抽提法測(cè)定；粗灰分(Ash)的含量參照GB/T 6438—2007中的方法，采用550 ℃灼燒法測(cè)定；OM含量為DM和Ash之間的差值計(jì)算；粗蛋白質(zhì)(CP)含量和含氮量根據(jù)凱氏定氮法，采用全自動(dòng)凱氏定氮儀(K9860，濟(jì)南海能儀器有限公司)測(cè)定；將飼糧和糞便烘干、粉碎、壓塊，采用氧彈量熱儀(ZDHW-5微機(jī)全自動(dòng)量熱儀，鶴壁華諾電子科技有限公司)測(cè)定飼糧及糞中的能量；根據(jù)Van Soest等[16]提出的方法測(cè)定NDF和ADF含量。

飼糧中某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(%)=100×

(該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的攝入量-糞中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的量)/
該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的攝入量；攝入總能(GEI，MJ/d)=日干物質(zhì)采食量(kg/d)×
飼糧燃燒值(MJ/kg)；糞能(FE，MJ/d)=糞便重量(kg/d)×
糞便燃燒值(MJ/kg)；消化能(DE，MJ/d)=GE(MJ/d)-FE(MJ/d)；能量表觀消化率(%)=100×[DE(MJ/d)/
GE(MJ/d)]；食入氮(MJ/d)=日干物質(zhì)采食量×
飼糧DM含氮量；可消化氮(g/d)=攝入氮-糞氮；總排出氮(g/d)=糞氮+尿氮；沉積氮(g/d)=食入氮-糞氮-尿氮；氮消化率(%)=100×可消化氮/食入氮；氮沉積率(%)=100×沉積氮/食入氮。

1.3.5 瘤胃發(fā)酵參數(shù)

用Staidson(SG2)手持式pH計(jì)測(cè)定瘤胃液pH；按照?qǐng)F(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)(T/NAIA 005—2020)中的方法，用GC102AF型氣相色譜儀測(cè)定瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸濃度；按照?qǐng)F(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)(T/NAIA 0004—2020)用堿性次氯酸-苯酚分光光度法(722型分光光度計(jì))測(cè)定瘤胃液NH3-N濃度。

1.4 數(shù)據(jù)處理分析

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤的形式表示，數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件one-way ANOVA程序進(jìn)行單因素方差分析。若有顯著差異則采用LSD法對(duì)組間差異進(jìn)行多重比較，采用正交多項(xiàng)式對(duì)比法確定飼糧Se-HLan添加量的線(xiàn)性和二次效應(yīng)。P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，隨著Se-HLan添加量的增加，試驗(yàn)羊ADFI呈現(xiàn)出先增加后降低的二次變化(P<0.05)，Ⅲ組試驗(yàn)羊ADG、ADFI和終末體重均最高，且Ⅲ組ADG顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，其他各組之間差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ組和Ⅳ組ADFI顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)，Ⅲ組和Ⅳ組之間以及Ⅰ組和Ⅱ組之間差異不顯著(P>0.05)。Ⅲ組試驗(yàn)羊F/G最低，顯著低于Ⅰ組(P<0.05)。

表2 不同Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊血液常規(guī)參數(shù)的影響

由表3可知，飼糧添加Se-HLan影響陜北白絨山羊羯羊白細(xì)胞計(jì)數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，其中Ⅲ組試驗(yàn)羊嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)，其他各組之間較差異不顯著(P>0.05)，Ⅳ組白細(xì)胞計(jì)數(shù)最高，Ⅲ組次之，Ⅰ組最低，且Ⅲ組和Ⅳ組顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)。飼糧添加Se-HLan對(duì)其余血常規(guī)參數(shù)均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表3 不同Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊血液常規(guī)參數(shù)的影響

續(xù)表3項(xiàng)目 Items組別 GroupsⅠⅡⅢⅣSEMP值 P-value方差分析ANOVA線(xiàn)性L(fǎng)iner二次Quadratic嗜堿性粒細(xì)胞比率 BASO percentage/%0.570.620.950.820.230.6280.2570.346中性粒細(xì)胞比率Neu percentage/%42.1342.7946.5944.143.690.4810.4230.257血小板類(lèi)指標(biāo) Platelet indexes血小板計(jì)數(shù)PLT count/(×109個(gè)/L)111.38117.50119.25113.132.210.3200.1520.326血小板平均體積MPV/fL14.8314.4414.6514.700.560.3220.1120.604血小板分布寬度PDW/%17.5916.7917.9817.700.680.9560.5890.912血小板壓積 PCT/%0.140.140.150.140.010.5830.4550.309血小板大細(xì)胞比率P-LCR/%5.586.046.006.310.530.1320.7090.103

2.3 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊血清生化和抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可知，隨著Se-HLan添加量的增加，試驗(yàn)羊血清ALB和TP含量呈現(xiàn)出先升高后降低的二次變化(P<0.01)，UN含量則線(xiàn)性降低(P<0.01)，Ⅲ組血清ALB含量顯著高于I組和Ⅳ組(P<0.05)，Ⅱ組和Ⅲ組血清TP含量顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，Ⅲ組和Ⅳ組血清UN含量顯著低于Ⅰ組(P<0.05)。

隨著Se-HLan添加量的增加，試驗(yàn)羊血清SOD和GSH-Px活性呈現(xiàn)出先升高后降低的二次變化(P<0.01)，MDA含量則呈現(xiàn)出先降低后升高的二次變化(P<0.01)。與Ⅰ組相比，Ⅲ組試驗(yàn)羊血清SOD和GSH-Px活性顯著升高(P<0.05)，其他3組試驗(yàn)羊血清MDA含量顯著降低(P<0.05)。Ⅲ組血清SOD活性顯著高于其他3組(P<0.05)，Ⅲ組血清GSH-Px活性顯著高于Ⅳ組和Ⅰ組(P<0.05)；Ⅲ組血清MDA含量最低，Ⅰ組最高，且顯著高于其他3組(P<0.05)。

表4 不同Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊血清生化和抗氧化指標(biāo)的影響

2.4 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊瘤胃液發(fā)酵參數(shù)的影響

由表5可知，添加Se-HLan有增加陜北白絨山羊羯羊瘤胃液pH的趨勢(shì)，但各組之間差異不顯著(P>0.05)；隨著Se-HLan添加量的增加，瘤胃液NH3-N濃度呈現(xiàn)出先增加后降低的二次變化趨勢(shì)(P<0.05)，Ⅲ組瘤胃液NH3-N濃度最高，極顯著高于其他3組(P<0.01)；Ⅲ組瘤胃液乙酸濃度最低，顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)；Ⅲ組瘤胃液丙酸濃度最高，顯著高于其他3組(P<0.05)；Ⅱ組瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸濃度最高，顯著高于Ⅰ組和Ⅳ組(P<0.05)；瘤胃液丁酸濃度各組之間差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ組和Ⅳ組瘤胃液乙酸/丙酸值顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)，Ⅰ組和Ⅱ組以及Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著(P>0.05)。

表5 不同Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊瘤胃液pH、氨態(tài)氮和揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響

2.5 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊能量消化的影響

由表6可知，飼糧添加Se-HLan極顯著影響陜北白絨山羊羯羊GEI、FE和DE(P<0.01)。隨著Se-HLan添加量的增加，試驗(yàn)羊GEI、FE和DE呈現(xiàn)出先升高后降低的二次變化(P<0.01)。其中，Ⅲ組GEI和FE均極顯著高于其他3組(P<0.01)，其他各組之間差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ組DE極顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.01)；Ⅳ組總能表觀消化率最高，但各組之間差異不顯著(P>0.05)。

表6 不同Se-HLan添加水平對(duì)陜北白絨山羊羯羊能量消化的影響

2.6 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表7可知，添加Se-HLan顯著或極顯著影響陜北白絨山羊羯羊DM、OM、NDF、ADF、EE、Ca和P的表觀消化率(P<0.05或P<0.01)。隨著飼糧Se-HLan添加量增加，DM、OM、NDF、ADF、EE和Ca的表觀消化率呈現(xiàn)出逐漸增高的變化趨勢(shì)(P<0.05或P<0.01)；P的表觀消化率表現(xiàn)出先增高后降低的二次變化(P<0.05)，且Ⅲ組P表觀消化率顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。

表7 不同Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

2.7 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊氮代謝的影響

由表8可知，Se-HLan添加量極顯著影響陜北白絨山羊氮利用及氮利用率各項(xiàng)指標(biāo)(P<0.01)。隨著Se-HLan添加量的增加，食入氮、可消化氮、沉積氮、氮消化率和氮沉積率均呈現(xiàn)出先增高后降低的二次變化(P<0.01)。其中，Ⅲ組食入氮顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，極顯著高于Ⅱ組(P<0.01)；與Ⅰ組相比，Ⅲ組可消化氮、沉積氮和氮沉積率極顯著升高(P<0.01)。

表8 不同Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊氮代謝的影響

3 討 論

3.1 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊生長(zhǎng)性能的影響

關(guān)于飼糧添加硒元素對(duì)綿羊和山羊生長(zhǎng)性能影響的報(bào)道中，以前的研究結(jié)果不太一致。張永翠等[17]和賈雪婷等[18]的研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加酵母硒對(duì)杜寒雜交羊(0、0.2、0.4和0.8 mg/kg Se)和灘羊(0、0.25、0.50、1.00和2.00 mg/kg Se)ADG和ADFI均無(wú)顯著影響；馬雄等[11]的研究表明，飼糧添加酵母硒對(duì)4～6月齡絨山羊ADG無(wú)顯著影響。但是，郭孝等[19]研究表明，添加15%高硒苜蓿極顯著影響杜泊羊ADG和飼料利用率；郭元晟等[5]的研究表明，添加酵母硒顯著提高蒙古羊ADG；張春香等[20]和朱翱翔等[21]研究表明，飼糧中添加亞硒酸鈉顯著影響山羊生長(zhǎng)性能(體重、ADG和飼料轉(zhuǎn)化效率)；陳啟康等[22]對(duì)海門(mén)山羊的研究也表明，含硒顆粒飼料極顯著影響海門(mén)山羊的ADG。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中不同Se-HLan添加量顯著提高了陜北白絨山羊羯羊ADFI和ADG。本試驗(yàn)研究結(jié)果與多數(shù)試驗(yàn)結(jié)果顯示的飼糧添加硒具有提高肉羊生長(zhǎng)性能的報(bào)道結(jié)果一致。硒參與甲狀腺激素的代謝，而甲狀腺素具有促進(jìn)生長(zhǎng)和發(fā)育的功能。飼糧缺硒會(huì)導(dǎo)致三碘甲狀腺原氨酸(T3)減少和四碘甲狀腺原氨酸(T4)增加，降低血液T3/T4的比值，T3減少影響動(dòng)物生長(zhǎng)速率。5-碘甲狀腺原氨酸脫碘酶是一種硒依賴(lài)性硒蛋白，具有激活T4向T3轉(zhuǎn)化的功能，也是缺硒狀態(tài)下最后一個(gè)活性受到影響的硒蛋白[23]。這表明不同硒蛋白對(duì)硒的敏感性存在差異。這在一定程度上解釋了補(bǔ)硒并未對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能(體重、ADG)產(chǎn)生影響的原因。另外，造成硒對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能研究結(jié)果不一致的原因還與飼糧添加不同硒源(亞硒酸鈉、酵母硒、蛋氨酸硒和Se-HLan)和不同品種動(dòng)物(杜寒雜交羊、灘羊和絨山羊)對(duì)硒元素的吸收和利用有關(guān)[1-2,23]。

3.2 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊血常規(guī)參數(shù)和血清生化指標(biāo)的影響

白細(xì)胞參數(shù)、紅細(xì)胞參數(shù)和血小板參數(shù)構(gòu)成血常規(guī)檢測(cè)的主要指標(biāo)，可以反映動(dòng)物機(jī)體的健康狀態(tài)。白細(xì)胞是機(jī)體防御衛(wèi)士，白細(xì)胞數(shù)量變化是衡量機(jī)體免疫力的重要指標(biāo)[18]。單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞參與調(diào)節(jié)機(jī)體局部免疫[24]。本研究結(jié)果表明，添加Se-HLan提高了陜北白絨山羊羯羊血液中白細(xì)胞計(jì)數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，改善了其免疫狀態(tài)。血小板計(jì)數(shù)大于400×109個(gè)/L即為血小板增多癥，導(dǎo)致皮下出血和血栓病發(fā)生[17]。本研究中，試驗(yàn)羊各組間血小板計(jì)數(shù)無(wú)顯著差異，表明飼糧添加Se-HLan不會(huì)對(duì)陜北白絨山羊羯羊機(jī)體產(chǎn)生不利影響。血清TP、ALB和UN含量反映了機(jī)體蛋白質(zhì)代謝情況，本試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著飼糧Se-HLan添加量的增加，血清TP和ALB含量均呈現(xiàn)出先增加后降低的二次變化趨勢(shì)，且Ⅲ組含量顯著高于對(duì)照組(I組)；血清UN含量隨著Se-HLan添加量的增加逐漸降低，對(duì)照組血清UN含量最高，且顯著高于Se-HLan添加組，這些結(jié)果與張春香等[20]和魯玉花等[25]關(guān)于山羊的研究結(jié)果類(lèi)似，表明添加Se-HLan降低了陜北白絨山羊羯羊血清UN含量，促進(jìn)氮素利用，有利于機(jī)體蛋白質(zhì)合成。另外，添加Se-HLan能夠顯著提高陜北白絨山羊羯羊血清SOD和GSH-Px活性，降低血清MDA含量，張春香等[20]對(duì)山羊的研究、黃玉邦等[26]和秦順義等[27]對(duì)羔羊的研究以及石磊等[28]對(duì)妊娠母羊的研究也得到了類(lèi)似的結(jié)果，說(shuō)明添加不同形式硒源均能起到保護(hù)動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞氧化損傷作用，提高山羊和綿羊機(jī)體抗氧化能力。本研究中，飼糧Se-HLan的添加量為146 mg/kg (硒含量為0.600 mg/kg)，對(duì)陜北白絨山羊羯羊血清抗氧化效果最為明顯。

3.3 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊瘤胃健康的影響

瘤胃液pH是反映瘤胃發(fā)酵的重要指標(biāo)，瘤胃pH的高低直接影響瘤胃微生物活力及瘤胃健康狀態(tài)。最適宜瘤胃微生物生長(zhǎng)、繁殖和機(jī)體健康的pH為6～7，本研究所有試驗(yàn)羊瘤胃液pH均在此范圍里內(nèi)，表明飼糧添加Se-HLan不會(huì)對(duì)陜北白絨山羊羯羊瘤胃微生物活動(dòng)造成不利影響。NH3-N是瘤胃代謝的中間產(chǎn)物，瘤胃液NH3-N濃度變化反映了瘤胃微生物對(duì)飼料蛋白質(zhì)的降解(氮降解)和微生物蛋白合成(氮吸收)之間的平衡狀態(tài)，是衡量反芻動(dòng)物對(duì)氮利用效率的重要指標(biāo)。研究表明，瘤胃氨含量過(guò)高，瘤胃微生物不能利用的那部分氨就會(huì)以NH3-N的形式損失掉；但也有研究表明，瘤胃高水平氨是瘤胃微生物高效利用飼料蛋白質(zhì)的結(jié)果，其和血液蛋白質(zhì)代謝相關(guān)[25]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加Se-HLan降低了陜北白絨山羊羯羊血清UN含量，增加了血清TP和ALB含量，顯著增加了瘤胃液NH3-N濃度，說(shuō)明添加Se-HLan增強(qiáng)了陜北白絨山羊羯羊瘤胃微生物活力，提高了瘤胃微生物利用NH3-N合成自身蛋白質(zhì)的能力，增加了體蛋白的沉積，有利用增重。朱翱翔等[21]和Wang等[10]對(duì)綿羊的研究，魯玉花等[25]對(duì)山羊研究以及柏建明[29]對(duì)湖羊的研究也得出與本試驗(yàn)基本類(lèi)似的結(jié)果。瘤胃微生物對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用產(chǎn)生大量的揮發(fā)性脂肪酸，對(duì)于評(píng)估瘤胃發(fā)酵和瘤胃微生物活力具有重要的參考價(jià)值。本研究結(jié)果表明，添加Se-HLan提高了陜北白絨山羊羯羊瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸和丙酸濃度，降低了瘤胃液乙酸濃度和乙酸/丙酸值，使瘤胃趨于丙酸型發(fā)酵類(lèi)型。反芻動(dòng)物丙酸型發(fā)酵可以產(chǎn)生較多的葡萄糖，可以為機(jī)體提供更多的能量物質(zhì)，有利用育肥，從而提高增重。這與Xun等[30]和Cui等[7]對(duì)綿羊的研究得出的結(jié)果一致。這說(shuō)明添加Se-HLan對(duì)陜北白絨山羊羯羊瘤胃發(fā)酵具有顯著的促進(jìn)作用，也驗(yàn)證了飼糧添加Se-HLan提高了能量表觀消化效率。本研究中飼糧Se-HLan的添加量為146 mg/kg (硒含量為0.600 mg/kg)，對(duì)陜北白絨山羊羯羊瘤胃發(fā)酵效果最好。

3.4 飼糧Se-HLan添加量對(duì)陜北白絨山羊羯羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和氮代謝的影響

有關(guān)硒對(duì)絨山羊飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率影響的研究較少，但對(duì)豬、禽和其他類(lèi)型的反芻動(dòng)物的研究較多。研究發(fā)現(xiàn)，蛋氨酸硒能夠顯著或極顯著提高豬、禽飼料轉(zhuǎn)化率[31-32]。劉強(qiáng)等[33]對(duì)西門(mén)塔爾牛的研究表明，飼糧添加蛋氨酸能夠顯著提高OM、CP、EE、NDF和ADF表觀消化率。魯玉花等[34]的體外試驗(yàn)表明，添加較低水平硒(0.2、0.3和0.5 mg/kg)顯著提高纖維素消化率，添加較高水平硒(1.0和2.0 mg/kg)有降低纖維素消化率的作用，而添加高水平硒(5～20 mg/kg)顯著降低了纖維素消化率。董升[35]的研究也證實(shí)，飼糧添加0.2～0.5 mg/kg的硒能夠顯著提高纖維降解率。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，添加Se-HLan能夠顯著或極顯莉提高陜北白絨山羊羯羊DM、OM、NDF、ADF、EE、Ca和P的表觀消化率。本試驗(yàn)研究還發(fā)現(xiàn)，飼糧添加Se-HLan增強(qiáng)了陜北白絨山羊羯羊?qū)︼暭Z總能的表觀消化率。這可能的原因是Se-HLan促進(jìn)了瘤胃微生物的活性，從而提高了飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率。另外，瘤胃絕大多數(shù)微生物屬于原核生物細(xì)菌，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的完整性對(duì)于離子交換、電子傳遞和ATP利用等至關(guān)重要，而硒作為GSH-Px重要組分，具有捕獲和清除自由基，減少脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的作用，還參與輔酶A和輔酶Q生物合成，在三羧酸循環(huán)和呼吸鏈電子傳遞中發(fā)揮重要作用[36]。因此，Se-HLan促進(jìn)了瘤胃細(xì)菌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性，有利于瘤胃發(fā)酵、能量代謝等功能的發(fā)揮。另外，本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，添加Se-HLan增加了陜北白絨山羊羯羊食入氮、消化氮和沉積氮，其中0.600 mg/kg Se-HLan組(Ⅲ組)的效果最好。氮是動(dòng)物生長(zhǎng)和育肥期肉羊代謝最重要的營(yíng)養(yǎng)素，但是關(guān)于硒對(duì)反芻動(dòng)物氮代謝的研究報(bào)道較少。有報(bào)道對(duì)植物氮代謝進(jìn)行研究，結(jié)果表明硒可以通過(guò)促進(jìn)硝酸鹽還原酶、谷氨酰胺合成酶和谷氨酸合成酶的活性，從而促進(jìn)氮代謝[37]。Shi等[4]研究了硒對(duì)綿羊飼糧消化率和瘤胃發(fā)酵的影響，發(fā)現(xiàn)硒可以刺激綿羊瘤胃微生物活性和酶活性，進(jìn)而提高瘤胃發(fā)酵和飼料利用率。Wang等[9]對(duì)添加酵母硒的藏綿羊進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加0.4 mg/kg硒顯著提高了NDF、ADF和EE的消化率，并增加了藏綿羊食入氮、消化氮和沉積氮，與本試驗(yàn)結(jié)果類(lèi)似。這些研究表明，硒主要是通過(guò)增強(qiáng)瘤胃微生物及其酶活，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，進(jìn)而促進(jìn)氮的攝入、消化和沉積，但是具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。此外，本研究飼糧營(yíng)養(yǎng)水平是按照山羊25 kg體重設(shè)計(jì)，經(jīng)過(guò)飼養(yǎng)試驗(yàn)后開(kāi)展消化試驗(yàn)的試驗(yàn)羊體重均已達(dá)到30 kg，飼糧適宜的營(yíng)養(yǎng)水平是動(dòng)物健康生長(zhǎng)和生產(chǎn)的重要保障，原有的營(yíng)養(yǎng)水平在一定程度上可能限制了試驗(yàn)羊?qū)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率和氮代謝，試驗(yàn)羊ADG、瘤胃總揮發(fā)性脂肪酸濃度均較低。但是，與不加硒的對(duì)照組比較，本試驗(yàn)中添加Se-HLan的試驗(yàn)羊均表現(xiàn)出較高的飼糧常規(guī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率、氮代謝、ADG和瘤胃總揮發(fā)性脂肪酸濃度，提示在飼喂?fàn)I養(yǎng)水平相對(duì)較低的飼糧條件下，硒對(duì)飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用和動(dòng)物健康也發(fā)揮了積極的作用，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究和分析。

4 結(jié) 論

① 以Se-HLan為補(bǔ)充硒源，飼糧0.600 mg/kg硒含量具有提高生長(zhǎng)期陜北白絨山羊羯羊ADFI、ADG、血清抗氧化水平、瘤胃發(fā)酵、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和氮代謝，促進(jìn)生長(zhǎng)的作用。

② 以Se-HLan為補(bǔ)充硒源，飼糧硒含量在0.300～1.200 mg/kg時(shí)不會(huì)對(duì)生長(zhǎng)期陜北白絨山羊羯羊的血液健康和生長(zhǎng)產(chǎn)生負(fù)面影響。

③ 根據(jù)本試驗(yàn)結(jié)果，生長(zhǎng)期陜北白絨山羊羯羊飼糧Se-HLan的適宜添加量為146 mg/kg (硒含量為0.600 mg/kg)。