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        穿心蓮化學(xué)成分與提取工藝研究進(jìn)展

        2022-12-30 15:49:46龔旭昊趙富華段文龍
        中國(guó)獸藥雜志 2022年6期
        關(guān)鍵詞:二萜穿心蓮黃酮類

        龔旭昊,范 強(qiáng),趙富華,段文龍

        (中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所,北京 100081)

        穿心蓮為爵床科植物穿心蓮Andrographispaniculata(Burm.f.)Nees的干燥地上部分,秋初莖葉茂盛時(shí)采割,曬干。其性苦、寒,歸心、肺、大腸、膀胱經(jīng)。具有清熱解毒、消腫止痛的功效,主治感冒發(fā)熱,濕熱下痢,蛇蟲(chóng)咬傷,瘡癰疔毒[1],臨床上多用于呼吸道感染,急性痢疾,腸胃炎及其他感染性疾病的治療,素有“中藥抗生素”之稱[2]。此外還具有降血壓,降血糖及抗腫瘤等功效[3]。

        穿心蓮首次記載于1932年出版的《嶺南采藥錄》,在我國(guó)資源分布廣泛,尤其在華南地區(qū)如廣東、廣西、福建等地栽培面積較大,是最具代表性的“大南藥”之一[4-5]。其價(jià)格經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,藥理作用顯著,為清熱、抗菌、抗炎、抗病毒的首選藥物之一,除廣泛應(yīng)用于人用中藥制劑外,近年來(lái)在中獸醫(yī)臨床及畜牧養(yǎng)殖業(yè)也得到廣泛應(yīng)用和關(guān)注,相關(guān)質(zhì)量研究也越來(lái)越深入。如其注射劑型穿心蓮注射液在治療腸炎、肺炎、仔豬白痢方面療效顯著,為中獸醫(yī)臨床常用制劑品種[6];某獸藥企業(yè)申報(bào)的用于豬支原體肺炎輔助治療的穿心蓮內(nèi)酯磺化物注射液于2021年通過(guò)了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的質(zhì)量復(fù)核檢驗(yàn)。隨著養(yǎng)殖行業(yè)飼料添加劑全面禁抗的推進(jìn),相信將進(jìn)一步拓展穿心蓮在中獸藥及畜牧養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用。但穿心蓮中主要成分穿心蓮內(nèi)酯的含量會(huì)因采收、貯藏、加工、提取等方法的不同而發(fā)生較大的變化,進(jìn)而導(dǎo)致穿心蓮及其制劑質(zhì)量的不穩(wěn)定。本文主要從化學(xué)成分、提取工藝兩個(gè)方面進(jìn)行綜述,以期為穿心蓮藥材在中獸藥及畜牧養(yǎng)殖領(lǐng)域的深入研究、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)與應(yīng)用提供參考。

        1 化學(xué)成分

        1.1 主要成分研究 現(xiàn)代研究表明,從穿心蓮中分離并鑒定的化學(xué)成分種類繁多,主要為二萜內(nèi)酯類、黃酮類、苯丙素類、環(huán)烯醚萜類、甾醇類、生物堿類成分等。其中,二萜內(nèi)酯類成分為穿心蓮的主要活性成分[4,7]。

        1.1.1 二萜內(nèi)酯類 作為穿心蓮的主要藥效成分,二萜內(nèi)酯類研究較為深入,目前已經(jīng)從穿心蓮中分離得到包括穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯、新穿心蓮內(nèi)酯及14-脫氧穿心蓮內(nèi)酯等在內(nèi)的50余種二萜內(nèi)酯類成分[8]。二萜內(nèi)酯類成分主要存在于穿心蓮地上部分,葉中含量明顯高于莖及根中含量[9];其中穿心蓮內(nèi)酯在根、莖、葉、果實(shí)中均有分布,含量高低依次為葉>莖>果實(shí)>根,而脫水穿心蓮內(nèi)酯僅在葉和果實(shí)中有分布,根和莖中檢測(cè)不到[10]。為保證藥材質(zhì)量,《中國(guó)獸藥典》和《中國(guó)藥典》在穿心蓮藥材檢查項(xiàng)下均規(guī)定:“葉不得少于30%”,并在含量測(cè)定項(xiàng)下以“穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯”等二萜內(nèi)酯類成分為指標(biāo),對(duì)藥材質(zhì)量進(jìn)行控制[1,10]。迄今為止,在穿心蓮現(xiàn)有的研究中,其有效成分分析及質(zhì)量控制方面的研究多以內(nèi)酯類成分為主導(dǎo)。

        1.1.2 黃酮類 黃酮類成分含量占比在穿心蓮藥材中僅次于二萜內(nèi)酯類成分,主要存在于藥材根部,在地上部分含量較少[11]。迄今為止,已分離鑒定出70余種黃酮類化合物,主要有黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類及查爾酮類等,其多以游離的黃酮苷元形式存在,包括穿心蓮黃酮、木犀草素、芹菜素、槲皮素等,僅有少部分以結(jié)合成苷的形式存在[9]。穿心蓮黃酮類成分因在抗氧化、降血壓、抗心肌粥樣動(dòng)脈硬化及保護(hù)心腦血管系統(tǒng)方面作用顯著,近年來(lái)也得到越來(lái)越多的關(guān)注[12]。

        1.1.3 苯丙素類 穿心蓮還含有多種苯丙素類成分,迄今共分離出近20種,多為簡(jiǎn)單苯丙素及其衍生物,如咖啡酸、阿魏酸、反式肉桂酸等[13-14]。

        1.1.4 其他成分 除上述化學(xué)成分外,在穿心蓮藥材中還發(fā)現(xiàn)了以6-表哈帕苷等為代表的環(huán)烯醚貼類,以β-谷甾醇-葡萄糖苷等為代表的甾醇類,以鳥(niǎo)嘌呤核苷和尿嘧啶核苷為代表的生物堿類,及部分有機(jī)酸和三萜類成分[15]。

        1.2 影響穿心蓮藥效成分的主要因素 截至目前,穿心蓮主要藥效成分的研究多集中于次生代謝產(chǎn)物二萜內(nèi)酯類,包括穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯等,該類成分含量受種植環(huán)境、生態(tài)氣候、收獲時(shí)間、采收部位、儲(chǔ)存方式及加工技術(shù)等多因素影響而存在較大的差異[16]。

        1.2.1 生態(tài)環(huán)境 種植環(huán)境及生態(tài)氣候因素對(duì)穿心蓮藥效成分的體內(nèi)代謝、富集等過(guò)程影響較為顯著。鄧喬華[17]等研究發(fā)現(xiàn),穿心蓮不同產(chǎn)地、不同采集方式及不同部位的總內(nèi)酯含量存在顯著差異,指出應(yīng)選擇適宜的產(chǎn)地建立GAP基地,適時(shí)采收及加工對(duì)穿心蓮藥材的質(zhì)量控制意義重大。此外,越往南方,脫水穿心蓮內(nèi)酯含量越高,越往北方,脫水穿心蓮內(nèi)酯含量越低。

        穿心蓮喜溫暖濕潤(rùn)氣候,怕干旱,適宜生長(zhǎng)在熱帶和亞熱帶地區(qū),最適宜溫度為25~30 ℃或較高的溫度,從地理環(huán)境上看,廣西、海南等地的穿心蓮藥材,穿心蓮內(nèi)酯含量較高,抑菌效果也更好[18]。此外,強(qiáng)光照射不利于穿心蓮次生代謝產(chǎn)物的積累,適當(dāng)?shù)恼诠馓幚碛欣诖龠M(jìn)穿心蓮藥材品質(zhì)提升[19]。

        1.2.2 采收時(shí)間 藥典中規(guī)定,穿心蓮應(yīng)在秋初莖葉茂盛時(shí)采割,這一對(duì)采摘時(shí)間的描述較為籠統(tǒng)。據(jù)研究,為保證質(zhì)量和產(chǎn)量,穿心蓮應(yīng)在花蕊期至開(kāi)花前期,內(nèi)酯類成分含量較高時(shí)采收[20]。根據(jù)幾十年實(shí)際生產(chǎn)總結(jié)的經(jīng)驗(yàn),穿心蓮遇水或受潮其穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量明顯下降,穿心蓮?fù)瑫r(shí)也應(yīng)在晴天進(jìn)行采收并及時(shí)曬干,同時(shí)做好防雨、防潮等工作[17]。

        1.2.3 采收部位 鑒于穿心蓮內(nèi)酯類成分在葉中含量最高,在其他部位含量較低。因此,穿心蓮藥材總內(nèi)酯的含量與藥材中所含莖和葉的比例有關(guān),所以,穿心蓮在采收和加工過(guò)程中應(yīng)做好葉的回收工作。根據(jù)藥典要求,葉含量不得少于30%。

        1.2.4 加工儲(chǔ)藏 藥典中規(guī)定穿心蓮采割后,采取曬干的加工方式。有研究比較不同干燥方式對(duì)藥材中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量的影響[21],試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)105 ℃烘干(1小時(shí))的樣品中內(nèi)酯類成分的含量和新鮮樣品相當(dāng),但自然曬干(7 d)后,葉、莖和根中穿心蓮內(nèi)酯的含量明顯減少,果實(shí)中穿心蓮內(nèi)酯的含量顯著上升。葉和果實(shí)中的脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量均下降一半以上。指出穿心蓮藥材采收后,烘干有利于防止穿心蓮內(nèi)酯類成分的損失。但對(duì)于穿心蓮大規(guī)模的種植和加工來(lái)說(shuō),產(chǎn)地直接曬干更符合生產(chǎn)實(shí)際,也更節(jié)省資源。

        穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯不穩(wěn)定,研究表明,在貯藏過(guò)程中,穿心蓮內(nèi)酯的含量逐漸下降,到葉陳舊時(shí),下降到50%以上[21]。另外,在高溫高濕或酸性條件下,穿心蓮內(nèi)酯含量也會(huì)顯著下降[22]。因此,制劑原料及飲片最好用當(dāng)年產(chǎn)新藥材,以葉多莖少色綠者為佳。

        2 提取工藝

        迄今為止,穿心蓮大部分提取研究多集中在二萜內(nèi)酯類成分,關(guān)于黃酮類成分的提取研究較少。穿心蓮有效成分的傳統(tǒng)提取方法主要是以水、醇、堿水、酸水等作為提取介質(zhì),用浸泡、滲漉、加熱回流等方式進(jìn)行提取。此外,還有一些現(xiàn)代方法如超臨界CO2萃取法及超分子法等也被用于穿心蓮藥材的提取。

        2.1 傳統(tǒng)煎煮法 煎煮法是傳統(tǒng)提取方法,適用于大部分中藥的提取。該法簡(jiǎn)便易行,且藥材中的大部分成分會(huì)被不同程度的提取出來(lái)。但對(duì)于穿心蓮來(lái)說(shuō),由于穿心蓮二萜內(nèi)酯類的特殊內(nèi)酯結(jié)構(gòu)及水溶性差、遇熱不穩(wěn)定性等因素,長(zhǎng)時(shí)間加熱會(huì)導(dǎo)致內(nèi)酯環(huán)的結(jié)構(gòu)破壞,從而使內(nèi)酯類成分含量下降,提取效率低下,因此并不適用于直接加水煎煮提取[23]。傳統(tǒng)水煎煮提取已被1990年版中國(guó)藥典淘汰。

        筆者曾以穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯總轉(zhuǎn)移率及藥材干膏得率為指標(biāo),考察穿心蓮的不同提取方法的差異,結(jié)果發(fā)現(xiàn),傳統(tǒng)水提煎煮,雖然干膏得率較高,但兩種內(nèi)酯成分的轉(zhuǎn)移率很低。有類似研究證明[24],穿心蓮水煎液中內(nèi)酯類成分含量均不高,傳統(tǒng)水煎法難以保證內(nèi)酯類成分的提取率,而提取介質(zhì)換成70%乙醇則可達(dá)到較好的提取效果。

        由于穿心蓮內(nèi)酯類成分在堿溶液中內(nèi)酯環(huán)容易開(kāi)環(huán),加酸調(diào)pH至中性后又可以重新閉環(huán)為原來(lái)的內(nèi)酯,有試驗(yàn)研究[25-26],將穿心蓮的提取溶劑由水換成不同堿度的碳酸鈉堿水進(jìn)行煎煮提取,發(fā)現(xiàn)不但穿心蓮內(nèi)脂及出膏率均較高,而且提取成本較低,還避免了醇提法導(dǎo)致的葉綠素等脂溶性雜質(zhì)的引入,堿水濃度為0.01%時(shí)提取效果最佳。

        2.2 浸提法 浸提法適用于遇熱易破壞或揮發(fā)性成分,由于穿心蓮內(nèi)酯類成分遇熱不穩(wěn)定,在水溶液中持續(xù)高溫易水解開(kāi)環(huán),有很多文獻(xiàn)報(bào)道采用熱浸或冷浸的方式對(duì)穿心蓮進(jìn)行提取,所用介質(zhì)多為不同濃度的乙醇溶液。

        查閱中國(guó)藥典,從1977年版藥典至2020年版藥典,穿心蓮片的制法均為85%乙醇熱浸提取2次,每次2小時(shí)[27-28,10],表明了乙醇浸提法的穩(wěn)定可靠。

        唐睿[29]等比較不同方法和溶劑組成對(duì)提取穿心蓮中主要有效成分的影響,結(jié)果顯示以內(nèi)酯總量為指標(biāo),提取率以85%乙醇冷浸最高,酸水冷浸最低;以總黃酮提取為考察指標(biāo),同樣以85%乙醇冷浸較高,堿水提取最低。

        冷浸法相較熱浸法具有穿心蓮有效成分破壞較少、收率較高的優(yōu)點(diǎn),但實(shí)際生產(chǎn)成本較高,且較為費(fèi)時(shí)費(fèi)力。

        張建強(qiáng)[30]等通過(guò)研究,建議制備穿心蓮固體制劑,可采用65%及55%乙醇溫浸工藝;對(duì)于穿心蓮液體制劑,以65%及75%乙醇浸漬工藝更為適宜。

        2.3 滲漉法 作為浸漬法的升級(jí)版,滲漉法因在提取過(guò)程中隨時(shí)保持提取溶劑的濃度差,提取效率一般高于浸漬法。

        卓菊[31]等以脫水穿心蓮內(nèi)酯含量為考察指標(biāo),以滲漉法進(jìn)行提取,通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定最佳工藝為用95%的乙醇,浸漬24 h,收集9倍量的滲漉液,脫水穿心蓮內(nèi)酯含量為5.49 mg/g,且該法可以避免內(nèi)酯類成分對(duì)熱不穩(wěn)定性。

        張玲[32]等將穿心蓮藥材粉碎后用85%乙醇以1~3 ml/min的速率進(jìn)行滲漉提取,所得穿心蓮內(nèi)酯的收率高,并且避免了因其不耐熱而導(dǎo)致的藥物結(jié)構(gòu)破壞,且操作簡(jiǎn)便實(shí)用,節(jié)約能源,適合擴(kuò)大生產(chǎn)。

        2.4 回流提取法 由于內(nèi)酯類多為脂溶性成分,穿心蓮的回流提取多以不同濃度的乙醇作為提取溶劑,提取效率較高,為目前生產(chǎn)中最常采用的方法,但提取過(guò)程中一是要關(guān)注溫度對(duì)內(nèi)酯類成分的影響,二是要特別注意安全操作。

        戴平[33]等采用乙醇加熱回流提取穿心蓮內(nèi)酯,先將穿心蓮葉粉碎,過(guò)20目篩,加入80%乙醇6倍量回流提取(溫度80 ℃)2次,每次2小時(shí),所得穿心蓮內(nèi)酯含量最高。

        尹秀蓮[34]等通過(guò)正交試驗(yàn)得出醇回流提取穿心蓮的最佳工藝為:為10 倍量85%乙醇提取2次,每次2小時(shí)。穿心蓮內(nèi)酯平均提取率為4.80‰,工藝穩(wěn)定可靠。

        黃瓊[35]等通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)探索乙醇回流法提取穿心蓮黃酮類化合物的最佳提取工藝,結(jié)果為固液比1∶20、時(shí)間4 h、乙醇濃度60%、溫度50 ℃,得總黃酮49.3 mg,提取率為2.465%。

        謝青[36]等以指紋圖譜為手段研究不同提取方法對(duì)穿心蓮藥材化學(xué)成分提取效果的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)以75%甲醇溶液作為提取溶劑,80 ℃水浴回流2 h的提取條件下獲得的指紋圖譜信息較為豐富,響應(yīng)值較高。

        2.5 超聲提取法 超聲提取法是利用超聲波的空化作用、機(jī)械效應(yīng)和熱效應(yīng)等加速胞內(nèi)有效物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散和溶解,具有提取效率高、提取時(shí)間短、提取溫度低及適應(yīng)性廣等特點(diǎn)。

        周汝順[37]等采用不同提取方法對(duì)穿心蓮進(jìn)行比較研究,通過(guò)單因素及正交試驗(yàn),確定超聲提取工藝因操作簡(jiǎn)便、穩(wěn)定可行、提取率高而最為合適,且最佳超聲工藝為乙醇濃度60%,超聲時(shí)間1 h,料液比為1:15,此條件下穿心蓮二萜內(nèi)酯類成分(穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯、新穿心蓮內(nèi)酯)的總含量為2.27%。

        楊濤[38]等通過(guò)星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化穿心蓮的超聲提取工藝,確定超聲提取工藝條件為乙醇濃度:70%~80%;提取時(shí)間:50~70 min;溶媒比:10~12倍;工藝驗(yàn)證的總評(píng)歸一預(yù)測(cè)值與實(shí)測(cè)值的偏差為-2.6%,二項(xiàng)式擬合的復(fù)相關(guān)系數(shù)r =0.9713,工藝方法簡(jiǎn)便,預(yù)測(cè)性良好。

        趙詠梅[39]等通過(guò)正交試驗(yàn)方法優(yōu)選出超聲提取穿心蓮內(nèi)酯的最佳工藝,乙醇濃度為90%,料液比1∶8,提取時(shí)間為10 min,穿心蓮內(nèi)酯的含量為23.7%。

        郭佳佳[40]等以脫水穿心蓮內(nèi)酯為考察指標(biāo),比較水提、水提醇沉、醇提、堿水提、堿提酸沉、超聲提取的差異,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示超聲提取法所得脫水穿心蓮內(nèi)酯含量最高。

        雖然超聲提取可顯著縮短浸提時(shí)間,明顯加快了穿心蓮內(nèi)酯類成分的溶出效率,同時(shí)也保證了其穩(wěn)定性,但目前工業(yè)化超聲設(shè)備尚不成熟。

        2.6 超臨界CO2流體萃取法 超臨界萃取法是一種集提取與分離于一體,又基本上不用有機(jī)溶劑的技術(shù)。CO2是中藥超臨界流體萃取中最常用的溶劑。超臨界流體萃取中藥成分的主要優(yōu)點(diǎn)包括:可以在接近室溫下進(jìn)行工作,防止某些對(duì)熱不穩(wěn)定的成分被破壞或逸散;萃取過(guò)程中幾乎不用有機(jī)溶劑,萃取物無(wú)有機(jī)溶劑殘留,對(duì)環(huán)境無(wú)公害,提取效率高,節(jié)約能耗。

        葛發(fā)歡[41]等用超臨界CO2流體萃取穿心蓮有效成分,在最佳實(shí)驗(yàn)條件下穿心蓮浸膏的產(chǎn)率為4.85%,浸膏中穿心蓮內(nèi)酯的含量為6.87%,脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量為29.92%。

        有研究表明[42],超臨界CO2萃取運(yùn)用于穿心蓮提取,避免了醇提取過(guò)程中濕、熱等因素引起的化學(xué)變化,萃取穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量高。萃取物為膏狀,無(wú)需進(jìn)一步精制,可直接應(yīng)用于制劑。但不可否認(rèn),超臨界CO2萃取實(shí)現(xiàn)對(duì)穿心蓮高效提取分離過(guò)程的同時(shí),其有效成分的穩(wěn)定性未得到改善。

        2.7 微波提取法 采用微波處理法能較高效率的提取有效活性成分,比傳統(tǒng)的回流法和索氏提取法能大大提高提取效率,具有操作簡(jiǎn)便、省時(shí)、節(jié)能、高效的特點(diǎn)[43]。

        黃瓊[44]等探索微波輔助萃取法提取穿心蓮黃酮類化合物,試驗(yàn)結(jié)果表明,乙醇濃度、微波作用功率、固液比對(duì)總黃酮的提取都有顯著影響,最佳提取工藝為微波功率處于高火、微波作用時(shí)間6 min、固液比1∶50、乙醇濃度60%,總黃酮提取率為4.945%。

        因穿心蓮內(nèi)酯類對(duì)熱不穩(wěn)定,當(dāng)采用高功率的微波處理時(shí)易開(kāi)環(huán)分解,且溶劑揮發(fā)損失較多。丁琤[45]等采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選穿心蓮內(nèi)酯微波輔助提取的最佳條件,結(jié)果為采用低火功率的微波,微波時(shí)間4 min,在60 ℃水浴鍋中保溫浸提20 min后加入活性炭脫色,pH值為2時(shí),提取效率更高。

        2.8 其他提取方法 彭夢(mèng)微[46]等通過(guò)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了減壓內(nèi)部沸騰法提取穿心蓮內(nèi)酯的工藝條件,最佳工藝條件為:解吸劑濃度80%,提取劑濃度32%,提取溫度59 ℃,此條件下,提取得率為0.660%,與模型預(yù)測(cè)值0.662%誤差較小。該法大大縮短了提取時(shí)間,降低了提取溫度,并減少了有機(jī)溶劑的消耗量。

        韓光[47]使用超分子法來(lái)富集穿心蓮中的有效成分,所得的穿心蓮超分子提取物中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量分別達(dá)到了40.41%和10.20%。

        細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,破壞細(xì)胞壁后有利于細(xì)胞內(nèi)有效成分的滲出,減小其溶出阻力?;谝陨显?,馬桔云[48]等在用乙醇浸提之前,用纖維素酶處理穿心蓮原料,結(jié)果加酶后穿心蓮內(nèi)酯的收率提高,且纖維素酶加入后對(duì)穿心蓮內(nèi)的有效成分沒(méi)有影響。

        由于穿心蓮內(nèi)酯為脂溶性成分,且具有熱不穩(wěn)定性。王雅琪[49]等比較減壓提取法、超聲提取法、傳統(tǒng)提取法對(duì)穿心蓮藥材中內(nèi)酯類成分的提取效率,結(jié)果發(fā)現(xiàn)減壓提取法的提取效率顯著高于傳統(tǒng)方法,且減壓提取液對(duì)DPPH自由基清除效果均優(yōu)于其他兩種方法。

        3 展 望

        穿心蓮作為清熱解毒類常用中藥,目前其臨床應(yīng)用及產(chǎn)品開(kāi)發(fā)主要圍繞內(nèi)酯類成分進(jìn)行,除此類成分外,黃酮類成分占比較高,亦具有相關(guān)藥理活性,有研究表明黃酮類活性成分可能是穿心蓮發(fā)揮抗菌作用的物質(zhì)基礎(chǔ),其作用機(jī)制涉及癌癥轉(zhuǎn)化、免疫細(xì)胞的功能激活和炎癥反應(yīng)等[50]。查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),截止目前,有關(guān)穿心蓮黃酮類及其他化學(xué)成分的相關(guān)研究仍然較少。穿心蓮作為一種中藥,其臨床療效的發(fā)揮不是一種或一類成分所完全決定的,必然也是多成分、多途徑、多靶點(diǎn),并符合中藥“整體觀”特征的。因此,為了進(jìn)一步做好穿心蓮的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用,有必要對(duì)除內(nèi)酯類之外的化學(xué)成分開(kāi)展深入研究。

        中獸藥產(chǎn)業(yè)是一個(gè)資源依賴型產(chǎn)業(yè),穿心蓮因資源廣泛、價(jià)格經(jīng)濟(jì)且療效確切,在中獸醫(yī)臨床及畜牧養(yǎng)殖中應(yīng)用廣泛,其制劑類型目前覆蓋注射液、片劑及散劑等。以穿心蓮注射液為例,目前已核發(fā)獸藥批準(zhǔn)文號(hào)441個(gè),屬于獸醫(yī)臨床常用中藥制劑。在現(xiàn)行的獸藥國(guó)家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中[6],穿心蓮注射液主要通過(guò)理化鑒別及薄層鑒別對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制。筆者在工作中發(fā)現(xiàn),不同企業(yè)生產(chǎn)的穿心蓮注射液質(zhì)量差別較大,甚至有部分產(chǎn)品不符合規(guī)定,難以保證臨床療效。究其原因,除企業(yè)自身因素外,穿心蓮提取工藝不夠規(guī)范及科學(xué)是最不容忽視的問(wèn)題。在現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中,穿心蓮提取工藝為水提醇沉法,但對(duì)具體工藝流程及提取參數(shù)等關(guān)鍵信息并未有相關(guān)的描述和規(guī)定,加之穿心蓮內(nèi)酯的特殊內(nèi)酯結(jié)構(gòu)及水溶性差,且對(duì)高溫比較敏感而提取效率有限等因素,極大影響了產(chǎn)品的質(zhì)量和療效。因此,其提取工藝亟待改進(jìn)和規(guī)范。

        通過(guò)文獻(xiàn)查閱,發(fā)現(xiàn)穿心蓮的提取工藝多種多樣,也各有優(yōu)劣。針對(duì)穿心蓮內(nèi)酯類成分的化學(xué)結(jié)構(gòu),堿法提取和酸法提取都能更有效的提取內(nèi)酯成分,但實(shí)際生產(chǎn)提取過(guò)程不易控制,如堿水提取煎煮過(guò)程中要不斷補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水分,以保持堿度,不利于生產(chǎn),目前該法已被淘汰,無(wú)實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。一些新型的提取技術(shù)如酶法提取、超聲波輔助提取、微波輔助提取,雖然都能夠?qū)崿F(xiàn)低溫提取,但酶法提取需要進(jìn)行高溫滅活及酶的成本較高。超聲波、微波輔助提取存在設(shè)備昂貴、安全性差等不足,不適于工業(yè)大規(guī)模應(yīng)用。目前,實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用較多的為醇浸提、醇回流等提取工藝,對(duì)于部分獸藥企業(yè)來(lái)說(shuō),因安全、環(huán)保及設(shè)備等問(wèn)題,在實(shí)際生產(chǎn)中尚受到一定的限制。開(kāi)展實(shí)驗(yàn)研究的最終目的是為了服務(wù)大生產(chǎn),提取工藝的好壞與產(chǎn)品的質(zhì)量及療效密切相關(guān),還直接影響生產(chǎn)成本和生產(chǎn)效率。筆者認(rèn)為,為了確保及提高穿心蓮產(chǎn)品質(zhì)量,保證提取效率和臨床療效,促進(jìn)相關(guān)中獸藥制劑的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用,仍需要借助現(xiàn)代最新的技術(shù)和設(shè)備對(duì)穿心蓮的提取工藝開(kāi)展深入研究,并以“適合生產(chǎn)、操作方便、安全可控、降本增效”作為其工藝發(fā)展的總原則和總目標(biāo)。

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