摘要：雞的安卡拉病是由I群腺病毒引起的急性高度致死性傳染病，死亡迅速，流行面廣，給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經濟損失，嚴重影響?zhàn)B禽業(yè)的健康發(fā)展。本病例從流行情況、病理變化、實驗室檢測確診為肉雞安卡拉病，通過增強機體免疫力治療方案，最終治愈，降低了養(yǎng)殖戶的經濟損失。

關鍵詞：肉雞；安卡拉；腺病毒；PCR診斷；防治

安卡拉病因1987年3月在巴基斯坦卡拉奇附近的安卡拉地區(qū)一個肉雞場發(fā)生暴發(fā)流行而得名[1-3]。安卡拉病也叫“雞心包積液綜合征、心包積液一肝炎癥”，是一種禽腺病毒血清4型感染引起的疾病，在肉雞上發(fā)病較多，而近兩年產蛋雞和青年蛋雞也時常感染并造成一定死亡，造成巨大經濟損失，早發(fā)現早治療可降低經濟損失[4-6]。

石家莊某縣一肉雞養(yǎng)殖戶送來病雞就診，經過解剖、病理變化觀察及實驗室診斷，最終確診為肉雞安卡拉病。

1 主訴及基本情況

該養(yǎng)殖戶共飼養(yǎng)雙A+/羅絲308肉雞18，200只，36日齡，至就診時已發(fā)病5d，共死亡250余只，曾按大腸桿菌病使用抗生素治療未見效果，甚至死亡加重，遂求診。

2 臨床癥狀

病雞精神萎靡，臥地不起，羽毛蓬松，排白色或者綠色稀便。死亡雞只均體格較大、健碩，死亡快，在網上分布比較集中。

3 病理變化

剖檢可見死亡雞只肌肉豐滿，胸肌呈現白色棕紅色條紋狀，氣管白色無異常。腹腔內肝臟腫大，充血，質地變脆；肝顏色淺黃，表面有小米粒大至綠豆大的出血斑壞死灶（圖1）。心包內有黃色積液或呈膠凍樣，心肌柔軟無力，心尖鈍圓（圖2、圖3）。肺臟瘀血嚴重，腺胃肌胃交界處有條紋狀出血。腎臟腫大瘀血有出血斑，花斑腎較輕（圖4）。泄殖腔黏膜出血發(fā)紅，內有白色綠色稀糞。

4 實驗室診斷

無菌采集心包積液、肝臟、脾臟、腎臟，分別獨立包裝，送河北農業(yè)大學動物醫(yī)學院進行PCR檢測。該病例確診為腺病毒血清4型感染。

4.1 引物設計

根據GenBank登錄的FAdV-4 （GenBank：GU188428.1） Hexon基因核苷酸序列，設計用于擴增FAdV-4的PCR引物。引物由生工生物工程（上海）有限公司合成，具體見表1。

4.2 病毒核酸提取

根據病毒核酸提取試劑盒說明書操作，簡述如下：加入20μLProteinase K于1.5mL離心管中；在離心管中加入200μL樣品，加入200μL BB5，渦旋混合15s，56。C孵育15min;加入250μL無水乙醇，渦旋混合15s，室溫放置5min；將溶液和沉淀一起加入離心柱中，12，OOOxg離心1min，棄掉流出液。加入500μL WB5，12，000×g離心1min，棄掉流出液，重復一次。室溫12，000×g離心1min，徹底去除殘留的乙醇，在室溫靜置數分鐘徹底晾干離心柱；將離心柱轉入1. 5mL離心管中，并向離心柱中央加20pL RNase-free Water，室溫靜置1min。室溫12，000×g離心1min，洗脫DNA，-20℃貯存?zhèn)溆谩?/p>

4.3 PCR擴增

取提取的DNA，進行PCR鑒定（圖5）。在25μL體系里，按照比例加入2×TaqPCR Mix，DNA模板，2條引物（10μL）和dd H20。94℃預變性3min；94℃預變性10s，56℃退火30s，72℃延伸57s，共30個循環(huán)；72℃延伸5min。同時設立以水為模板的陰性對照。PCR結束后，取5μL PCR擴增產物，進行1%瓊脂糖凝膠電泳。

5 治療措施

目前，沒有專門針對該病毒病的治療藥物和抗體。遂采用提高免疫力、保肝、通腎方案進行治療，連用5d，死亡明顯減少，回訪基本痊愈。

治療方案為：黃芪多糖口服液Q，000只雞／瓶），清瘟解毒口服液（150kg水／瓶），兩者混合后按全天飲水量分兩次飲水；以VA、VE、vc為主要成分的預混料（500kg飼料／袋），以枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、酵母菌、益生元為主要成分的微生態(tài)制劑（1，000kg/袋），集中拌料；連用5d。

此治療方案作用與用途如下：①刺激免疫系統，增強基礎免疫；②修復受損黏膜、強化屏障作用與器官機能；③解毒排毒，養(yǎng)肺保肝護腎；④調節(jié)腸道機能；⑤強抗應激。

6 預防措施

加強飼養(yǎng)管理，給予充足的全價平衡飼料是防控安卡拉病的關鍵，注意減少應激，降低飼養(yǎng)密度，保持通風，杜絕霉菌毒素的侵害，不使用影響肝臟、加重肝臟負擔的藥物。提高機體免疫力是預防本病的關鍵。

7 免疫程序

肉雞在7日齡接種0. 4mL雞新城疫、禽流感（H9亞型）、禽腺病毒?。?群4型）三聯滅活疫苗（La Sota株+YBF13株+YBAV-4株），可有效降低發(fā)病率。由于腺病毒疫苗免疫一次抗體產生低，效果較差，間隔21d或28d免疫兩次效果較好。但是考慮到疫苗對胴體的影響，不建議肉雞進行第二次免疫接種腺病毒疫苗。

蛋雞在20日齡免疫接種0. 5mL雞新城疫、禽流感（H9亞型）、禽腺病毒?。?群4型）三聯滅活疫苗（La Sota株+YBFB株+YBAV-4株）一次，50～60日齡再免疫接種0.5mL -次，可有效預防安卡拉病的發(fā)生流行。

8 鑒別診斷

禽腺病毒引起的常見疾病有包涵體肝炎（I BH）、心包積液一肝炎綜合征（HHS，也稱為安卡拉?。⒓∥该訝€（AGE）。

患包涵體肝炎的雞只突然發(fā)病死亡，感染后3～5d是死亡高峰，以后逐漸減少，發(fā)病10～15d后基本痊愈；臨床癥狀表現為精神萎靡、炸毛呆立、生長受阻；典型病變在肝臟，腫大易碎，斑駁狀出血，同時肝臟發(fā)黃，無菌采取肝臟涂片染色鏡檢可見許多肝細胞中有大而圓的核內包涵體；脾臟出現白色壞死點；胰腺壞死；腎臟腫脹呈灰白色且有出血點。

9 討論和小結

禽類感染腺病毒后，心包積液和肺水腫的形成涉及多方面的機制。

9.1 組織液生成有效濾過壓的增加是主要原因之一

腺病毒對肝臟組織的損傷導致肝細胞合成的血漿蛋白減少，尤其是血漿白蛋白水平降低，由此引起血漿膠體滲透壓下降。由以下公式可以看出：組織液生成的有效濾過壓=（毛細血管血壓+組織液膠體滲透壓）一（組織液靜水壓+血漿膠體滲透壓），血漿膠體滲透壓下降必然導致心臟、心包和肺臟毛細血管組織液的滲出增多，形成心包積液和肺臟水腫。

9.2 血管的通透性增大更有利于組織液生成，導致肺水腫和心包積液

肝臟是機體清除腸源性細菌和細菌內毒素的主要器官，同時肝臟分泌的膽汁具有穩(wěn)定腸道菌群、腸道黏膜上皮結構屏障的作用。肝臟功能的損傷和衰竭，一方面使得腸道黏膜屏障功能下降，腸源性細菌和毒素內移風險大大增加；同時肝臟對于細菌和細菌內毒素的清除能力又下降，這就使得機體更容易出現菌血癥和毒血癥風險。內毒素進入血液循環(huán)后除了誘發(fā)血管內彌漫性的凝血現象，導致器官循環(huán)障礙和組織細胞物質代謝障礙外，還可以誘發(fā)血管內皮細胞凋亡脫落，使血管通透性增加。加之肺臟由于滲出液增多，肺臟氣液交換屏障增厚，氣體交換困難，肺循環(huán)血液血氧濃度下降，很容易誘發(fā)肺動脈高壓，故此進一步加重心包積液的形成和肺水腫的出現[1，7]。

9.3 腺病毒感染導致腺胃出血、胰腺壞死，嚴重影響蛋白質在胃和小腸的消化吸收，這也是導致肝臟血漿蛋白合成不足的重要原因

不能被消化吸收的蛋白質，會在后端消化道被微生物發(fā)酵產生大量的氨類。氨類由腸道黏膜吸收后經過腸靜脈匯集，經門靜脈進入肝臟，轉化為大量的尿酸鹽，沉積于雞的腎臟，致使腎臟腫脹花斑。甚至又容易引起腎小球供血障礙，誘發(fā)腎性高血壓，這也會促使組織液生成的增加。

參考文獻：

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