摘要：呼腸孤病毒是一種具有傳染性的傳染病，其流行無(wú)明顯的季節(jié)性，可引起多種鳥類的感染，引起禽流感，造成死亡或繼發(fā)性感染，導(dǎo)致養(yǎng)殖戶嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。鴨呼腸孤病毒主要通過橫向和縱向兩種途徑進(jìn)行傳播。水平傳播是由病毒感染的家禽直接或間接造成的；垂直傳染的方式是以卵為媒介。這種病毒在生殖器官中被證實(shí)，但通過卵傳播的可能性更小。近幾年，全國(guó)各地都出現(xiàn)這種病害，給養(yǎng)殖業(yè)造成很大的影響。該病在山東省部分地區(qū)均有發(fā)生，嚴(yán)重影響山東養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展。據(jù)此，文章以山東省部分地區(qū)鴨呼腸孤病毒的診斷與防控為研究方向，旨在為我國(guó)養(yǎng)殖戶鴨呼腸孤病毒診斷與防控提供理論指導(dǎo)與幫助。

關(guān)鍵詞：養(yǎng)殖鴨：呼腸孤病毒；診斷與防控

鴨呼腸孤病毒（NoveI duck orthoreovi rus，NDRV）屬呼腸孤病毒科（Reov i rdae）、正呼腸孤病毒屬（Orthoreov i rus）部分。鴨呼腸孤病毒可引起雛鴨的出雛率下降，初期無(wú)明顯特征，后期生長(zhǎng)緩慢，體重減輕，產(chǎn)量大幅下降。表現(xiàn)為精神萎靡，羽毛凌亂，排出白色的糞便。該病日齡很短，一般在3～5d內(nèi)出現(xiàn)，5～7d后病原體可經(jīng)消化道及呼吸道傳染，并可快速發(fā)展。當(dāng)前，鴨呼腸孤病毒已成為困擾養(yǎng)殖戶的重要問題，為促進(jìn)養(yǎng)殖戶經(jīng)濟(jì)效益最大化及保障農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展，深入研究與分析鴨呼腸孤病毒診斷與防控較為關(guān)鍵。

1 鴨呼腸孤病毒流行病學(xué)

鴨呼腸孤病毒病一年四季均能發(fā)生，根據(jù)山東菏澤地區(qū)鴨呼腸孤病毒統(tǒng)計(jì)，天氣炎熱、潮濕時(shí)發(fā)病率會(huì)顯著上升（圖1，圖2）。

鴨呼腸孤病毒感染是種縱向和橫向兩種途徑，在不同品種的鴨中都可發(fā)生，其發(fā)病率很高。根據(jù)文獻(xiàn)資料，鴨呼腸孤病毒感染具有明顯的年齡依賴性，28日齡以下的鴨最常見，其特征是肝臟和脾組織發(fā)生壞死，進(jìn)而導(dǎo)致免疫抑制，導(dǎo)致其它病原雜菌繼發(fā)感染或混合感染。大部分的成年鴨在感染了呼腸孤病毒后，大多成年鴨感染鴨呼腸孤病毒后無(wú)明顯臨床癥狀，但后期發(fā)現(xiàn)鴨子質(zhì)量偏輕。根據(jù)病鴨間互相傳染的特點(diǎn)，病鴨在被感染后，會(huì)有十天以上的時(shí)間進(jìn)行排毒，而排毒的高峰期是3～6d。

2 臨床癥狀與病理學(xué)研究

病鴨的主要癥狀是進(jìn)餐量減少或不進(jìn)食，其它表現(xiàn)為蜷縮、毛發(fā)蓬松、懶洋洋、精神萎靡、虛弱、腹瀉、倒下等。病程不同，病程從2～14d不等，最嚴(yán)重的是5～7d。2周齡以內(nèi)患病鴨死亡率極高，存活后會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，生長(zhǎng)發(fā)育不良，僵鴨等癥狀。

病死鴨解剖后，其病理改變以肝表面可見大量針頭大小的白色壞死灶及大量出血點(diǎn)，部分聚集成花斑；脾腫大，并伴有脾出血，可見斑塊壞死，局部有出血；腎及法氏囊出血。病理改變表現(xiàn)為肝細(xì)胞發(fā)生不同程度變性、壞死，病變范圍很小，但鄰近的組織結(jié)構(gòu)及功能正常。伴有大量的炎癥細(xì)胞滲出；脾大出血、淋巴細(xì)胞減少、壞死形成壞死；腎小管上皮細(xì)胞退化，從基底膜脫落；黏膜下出血、黏膜上皮壞死、脫落、淋巴結(jié)、淋巴細(xì)胞減少。

3 診斷方法

3.1 臨床診斷

根據(jù)臨床表現(xiàn)，判斷鴨有沒有精神萎靡、進(jìn)食、飲水、食欲下降、多蹲伏、多活動(dòng)、多動(dòng)、腹瀉、排白色稀糞等癥狀。其次，對(duì)病鴨進(jìn)行解剖以確定各器官有無(wú)不同程度的損傷，并與以上所述的病理改變相一致。根據(jù)鴨的病理學(xué)特征，臨床上將其稱為“鴨脾壞死病”或“鴨新肝病”，通過對(duì)鴨的臨床癥狀及解剖組織學(xué)檢查，可以判斷出鴨是否感染鴨的呼腸孤病毒病。

3.2 病原學(xué)判斷

1）聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)作為當(dāng)前生物檢測(cè)主要技術(shù)手段之一，在前鴨呼腸孤疫病診斷中發(fā)揮著積極作用。且從實(shí)施情況來(lái)看，該方法具有操作簡(jiǎn)單，結(jié)果直觀，準(zhǔn)確度高且包容性強(qiáng)等特點(diǎn)，依托起高效、快速技術(shù)可加速對(duì)試驗(yàn)樣品檢驗(yàn)，有利于更好地控制病源。

2）實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是將熒光信號(hào)和常規(guī)RT-PCR反應(yīng)系統(tǒng)中的熒光信號(hào)與已制定的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，從而達(dá)到定量分析被測(cè)對(duì)象的目的。該方法具有靈敏度高、定量準(zhǔn)確、快速、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

3）環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（IAMP）是一種能夠在60～65℃等溫下進(jìn)行的、快速、有效的核酸體外擴(kuò)增技術(shù)。該方法操作簡(jiǎn)便，不需要進(jìn)行凝膠電泳，快速反應(yīng)，能直觀地用肉眼觀察。尤其適用于基層農(nóng)戶的快速檢測(cè)，并可作為流行病學(xué)調(diào)查的有效手段。

3.3 血清學(xué)

1）瓊脂擴(kuò)散法瓊脂擴(kuò)散法具有相對(duì)簡(jiǎn)單、高效的檢測(cè)優(yōu)勢(shì)，較為適用于大規(guī)模且密集型較高的流行性病學(xué)檢測(cè)。在具體檢測(cè)過程中，根據(jù)特定抗原及抗體至于半固態(tài)培基，半固態(tài)介質(zhì)擴(kuò)散后與抗原結(jié)合，可快速診斷得出結(jié)果。如有一條白色的沉淀線，則該試驗(yàn)為陽(yáng)性。我國(guó)學(xué)者采用瓊脂擴(kuò)散法對(duì)興化市100個(gè)大型鴨場(chǎng)進(jìn)行呼腸孤病毒檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)各季節(jié)、各鴨的生長(zhǎng)時(shí)期存在差異。

2）中性測(cè)試血清中和試驗(yàn)是一種特異性高、敏感性高的血清學(xué)檢測(cè)方法。病毒與血清之間的中和反應(yīng)可以作為鑒別診斷的依據(jù)。

3）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?zāi)壳拔覈?guó)常見血清檢測(cè)方法中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)發(fā)揮著積極作用，同時(shí)隨著我國(guó)科技與衛(wèi)生實(shí)施的不斷發(fā)展，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在傳染性疾病診斷及抗體水平評(píng)價(jià)中具有關(guān)鍵作用。依托酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)可快速檢測(cè)、診斷，同時(shí)結(jié)合鴨呼腸孤病毒病原建立ELISA，可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化篩選，節(jié)約大量人力、物力的同時(shí)，ELISA方法的建立為該病的檢測(cè)奠定基礎(chǔ)，也為試劑盒的研發(fā)提供了數(shù)據(jù)支持。

4 防控措施

4.1 治療措施

如發(fā)現(xiàn)可疑病鴨，須立即采取相應(yīng)的隔離措施。鴨呼腸孤病毒高免卵黃抗體緊急注射可以有效地控制該病，達(dá)到康復(fù)治療的效果。制作過程：取鴨的肝臟、脾臟、腎臟等，研磨成細(xì)的均勻漿液，再用細(xì)菌過濾器將其除去，將其接種于鴨胚中，進(jìn)行病毒的凈化。對(duì)雌性進(jìn)行多次免疫，并于兩個(gè)星期后采集。以鴨蛋為原料，以青鏈霉素為原料，進(jìn)行蛋黃抗體的實(shí)驗(yàn)研究。在沒有蛋黃抗體的情況下，可以選擇用頭孢噻呋鈉、禽用干擾素、植物血凝素、頭孢噻呋鈉注射液等聯(lián)合療法。

4.2 預(yù)防措施

目前，比較適合接種的是弱毒苗和滅活苗。弱毒苗是通過病鴨的體表組織進(jìn)行呼腸孤病毒的分離，然后用其胚胎纖維細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)，獲得適用于活疫苗的弱毒菌株。在實(shí)際接種中，該菌株具有很好的免疫能力，具有良好的免疫原性，無(wú)返強(qiáng)毒性，有效保護(hù)率在90%以上，具有一定的推廣價(jià)值。滅活苗，取鴨的肝臟、脾臟、腎臟等，碾碎，均勻稀釋，再用細(xì)菌過濾器將其除去，然后將其接種于鴨胚中，進(jìn)行病毒的凈化。并與病毒適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)相結(jié)合，對(duì)其子代病毒的致病力進(jìn)行了測(cè)定。對(duì)常規(guī)滅活苗、油佐劑滅活苗、左旋咪唑滅活苗進(jìn)行保護(hù)試驗(yàn)。

4.3 管理措施

養(yǎng)殖場(chǎng)在日常管理中要進(jìn)一步加強(qiáng)衛(wèi)生管理，做好定時(shí)消毒工作，做好相關(guān)檢驗(yàn)工作，規(guī)避病鴨進(jìn)入。此外，因鴨呼腸孤病毒屬于新型病毒疾病，所以尚無(wú)專門用于肉鴨的呼腸孤病毒疫苗。在疫區(qū)，受感染的鴨群可以接種番鴨呼腸孤病毒疫苗：①在產(chǎn)卵15～30d內(nèi)接種番鴨呼腸孤病毒油乳劑滅活苗1 mL/羽；②1～2日齡時(shí)，對(duì)未接種種鴨的仔鴨，可接種1～1.5羽份的番鴨呼腸孤病毒弱毒苗。在飲水和飼料中適當(dāng)加入一些營(yíng)養(yǎng)成分，如黃芪多糖、電解多維、葡萄糖等，能改善鴨群的免疫力，預(yù)防脫水，促進(jìn)鴨群的健康。

5 結(jié)論

綜上所述，呼腸孤病毒病是一種新的傳染疾病，具有傳播速度快、發(fā)病速度快、死亡率高等特點(diǎn)。對(duì)該病的藥物治療，大部分病鴨的康復(fù)效果并不明顯。加強(qiáng)對(duì)該病的預(yù)防和治療是防治該病的關(guān)鍵。因此，要在日常生活中加強(qiáng)對(duì)鴨的飼養(yǎng)管理、改善飼喂條件、加強(qiáng)消毒、適時(shí)通風(fēng)、營(yíng)造良好的飼養(yǎng)環(huán)境來(lái)減少該病的發(fā)生。加強(qiáng)對(duì)鴨群的免疫和免疫，提高其抗病能力。

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