栗澤鵬 丁晨光,2，3 鄭瑾,3 董博清 薛武軍,3

(1 西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎臟病醫(yī)院腎移植科，陜西 西安 710061；2 西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院捐獻(xiàn)器官獲取與分配科；3 西安交通大學(xué)器官移植研究所)

腎移植是目前治療終末期腎病最有效的方式之一。盡管當(dāng)前的手術(shù)方式、免疫抑制治療及監(jiān)測方案的實(shí)施可使同種異體移植物1年內(nèi)的存活率達(dá)到約95%，但是長期移植腎存活率并無顯著提升。目前認(rèn)為影響移植腎長期存活率的主要因素包括移植腎延遲恢復(fù)(DGF)、急性排斥反應(yīng)(AR)、慢性排斥反應(yīng)(CR)和感染等[1]。如何提高移植腎長期存活率是腎臟移植領(lǐng)域中愈來愈重要的課題之一。

相較于傳統(tǒng)藥物，新型納米材料具有高負(fù)荷、特異靶向性和原位治療等特點(diǎn)，更有利于移植腎臟功能的精準(zhǔn)評估與術(shù)后并發(fā)癥的防治[2]。目前納米材料在腎移植的很多方面發(fā)揮了一定的作用，包括構(gòu)建合適尺寸的納米顆粒進(jìn)行腎小球?yàn)V過屏障(GFB)的評估，合成具有抗氧化性能及酶活性的納米材料以減輕缺血再灌注損傷(IRI)，構(gòu)建高效靶向的納米材料遞送系統(tǒng)以精準(zhǔn)化治療等[3]。本文將對目前納米材料在腎臟移植相關(guān)研究領(lǐng)域的進(jìn)展及未來可能發(fā)揮的作用進(jìn)行述評。

1 納米材料在腎臟中的排泄及累積情況

納米材料的大小是決定其與腎臟相互作用的關(guān)鍵因素。目前研究結(jié)果顯示，受限于腎小球基底膜(GBM)上2～8 nm的孔徑，流體力學(xué)直徑(HD)小于6 nm的納米材料可以通過GFB進(jìn)入膀胱中[4]。該尺寸閾值受到納米材料整體形狀的影響，適用于納米分子最短的直徑。有研究觀察到直徑為0.8～1.2 nm，長度為100～1 000 nm的碳納米管可通過尿液有效排泄[5]。此外，由于GBM及足細(xì)胞帶有負(fù)電的特征，納米材料的電荷屬性也會影響納米材料的濾過[4]。在亞納米(<1 nm)層面上似乎納米顆粒的內(nèi)部元素構(gòu)成也會影響其在GFB的濾過率，呈現(xiàn)出隨著納米分子中原子數(shù)量增加，濾過率逐漸增高的趨勢[6]。目前關(guān)于納米材料的粒徑對腎臟的積累或者排泄情況的影響還在逐步明確中[1]：<1 nm的納米材料多會積累于腎小球血管內(nèi)皮糖萼內(nèi)，腎臟清除率降低；直徑1～5 nm的納米材料多可以穿過GFB通過尿液排出體外，其腎臟清除效率與納米材料大小密切相關(guān)，但HD 1～2 nm時，直徑對其排泄情況的影響不再顯著；直徑5～7 nm通?？纱┻^ GFB 并被腎小管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)吞，積聚于近端小管；直徑<100 nm時一般會穿過內(nèi)皮層但不能穿過GBM，積聚在腎小球系膜；而直徑>100 nm的納米材料則被管周毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)吞，然后分泌到腎臟近端小管，從而實(shí)現(xiàn)靶向腎小管。

此外，腎臟的病理狀態(tài)也可能會改變腎小球組織的完整性，影響腎小球的電荷分布和納米材料的濾過模式。CHEN等[7]評估了急性腎損傷(AKI)動物模型中不同電荷的納米材料腎臟積累模式，研究顯示，通常清除較慢的帶負(fù)電和中性聚合物可迅速穿過GFB，隨后被近端小管細(xì)胞重新吸收并停留長達(dá)24 h。這些發(fā)現(xiàn)提示在腎靶向納米粒子的設(shè)計(jì)和制造過程中亦需要考慮AKI對納米顆粒的腎臟積累/清除模式的影響。

在腎臟移植領(lǐng)域中，腎功能的準(zhǔn)確評估、并發(fā)癥的早期診斷及防治需要不同排泄方式的納米材料?？梢越?jīng)過腎臟排泄的多種納米分子，包括有納米金顆粒(AuNPs)、DNA折紙納米結(jié)構(gòu)(DONs)、卟啉聚合物以及多金屬氧酸鹽簇等[8-12]，已可用于GFB完整性的評估，其檢測容易和計(jì)量準(zhǔn)確的特點(diǎn)為精準(zhǔn)估算腎小球?yàn)V過率(eGFR)提供了可能，而且其較高的生物相容性和易于定量的特點(diǎn)也會促進(jìn)更優(yōu)腎功能評估方式的開發(fā)。目前報(bào)道的用于腎臟治療的納米顆粒直徑多在30～150 nm，常見的納米材料包括DONs、摻硒碳量子點(diǎn)、黑色素納米粒子和黑磷納米片等[13-15]，在無病理?xiàng)l件誘導(dǎo)GFB破壞的情況下，可有效地提高全身血液循環(huán)時間，并提高在腎臟中的被動蓄積。此外由于納米材料還具有可編輯性及靶向特異性，從而被設(shè)計(jì)成藥物遞送分子，以達(dá)到療效最大化和副作用最小化的目的。

2 納米材料在腎移植術(shù)后并發(fā)癥早期診斷中應(yīng)用

2.1 無創(chuàng)移植腎功能評估

腎移植術(shù)后為了及時處理并發(fā)癥，往往需要對腎功能進(jìn)行敏感且準(zhǔn)確的評估，傳統(tǒng)方法中使用的肌酐和尿素氮等指標(biāo)多存在靈敏度較低的問題，因此探索新的無創(chuàng)且準(zhǔn)確的腎功能評估方式一直是腎移植研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題之一。

目前AuNPs因其具有X線高密度、易于制備及標(biāo)記等特點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于移植腎功能評估中。XU等[16]合成了一種直徑為2.5 nm且腎臟可清除的近紅外發(fā)射谷胱甘肽涂層AuNPs(GS-AuNPs)，并使用X線對其排泄過程進(jìn)行監(jiān)測，通過小鼠單側(cè)輸尿管梗阻模型進(jìn)行檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其排泄速度較正常腎臟明顯減慢。該研究為未來腎移植后DGF早期診斷提供了參考。由于熒光材料在體內(nèi)的廣泛分布，會產(chǎn)生大量混雜信號，因此利用熒光材料和無創(chuàng)成像技術(shù)對腎臟排泄過程進(jìn)行檢測的研究一直進(jìn)展緩慢，但納米材料的高靶向性可有效避免該問題。研究表明利用近紅外熒光發(fā)射監(jiān)測GS-AuNPs在腎臟中的分布情況，可在肌酐、尿素氮水平改變前識別早期腎功能不全，并進(jìn)行準(zhǔn)確的分期[12,17]。另外對64Cu 標(biāo)記形成的64Cu-NOTA-Au-GSH，PET成像顯示其在腎臟中的排泄半衰期短于6 min，提示其對腎功能的評估準(zhǔn)確性更高[9]。

此外，針對其他種類納米材料的研究也在進(jìn)行中。如通過PET監(jiān)測放射性標(biāo)記的多金屬氧酸鹽簇(POM)，可準(zhǔn)確地對單側(cè)輸尿管梗阻模型腎功能進(jìn)行分期[10]；也有研究報(bào)道熒光二氧化硅納米粒子、碳點(diǎn)、鈀納米片及DONs等在腎臟中分布及其排泄情況，未來也可望用于對腎臟功能的監(jiān)測[18]。

2.2 移植后排斥反應(yīng)的無創(chuàng)檢測

侵入性活檢是評估是否發(fā)生腎臟排斥反應(yīng)的金標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)有的早期識別腎臟排斥反應(yīng)的非侵入性檢測指標(biāo)主要包括肌酐、尿素氮及特異性生物標(biāo)志物，此外納米材料參與的評估方式也許是可行的。絲氨酸蛋白酶顆粒酶B是由受體T細(xì)胞在急性細(xì)胞排斥反應(yīng)發(fā)作期間產(chǎn)生的，可以作為早期排斥反應(yīng)的非侵入性生物標(biāo)志物?；诖耍琈AC等[19]設(shè)計(jì)了一種與絲氨酸蛋白酶顆粒酶B結(jié)合的肽底物納米顆粒，可以對T細(xì)胞介導(dǎo)的排斥反應(yīng)進(jìn)行早期識別，對皮膚移植后急性排斥模型小鼠全身給藥后，發(fā)現(xiàn)肽底物納米顆粒優(yōu)先積聚在同種異體移植組織中，被顆粒酶B切割后，釋放出一種熒光報(bào)告分子，并通過腎臟過濾到受體的尿液中。該研究證實(shí)在移植組織排斥特征明顯之前，尿液分析便能在早期高靈敏度和特異度地判斷出排斥反應(yīng)是否發(fā)生。但目前針對腎臟移植排斥反應(yīng)的相關(guān)研究較少。

MRI相較于CT有著更高的軟組織分辨率，常被用于異常病理解剖的診斷。HULTMAN等[20]研制出了一種可以用于MRI檢測和靶向腎臟輸送的超順磁性氧化鐵納米顆粒(SPIO)。CHAE等[21]以SPIO標(biāo)記巨噬細(xì)胞，通過MRI檢測其分布情況，并在同種異體移植排斥模型中，觀察到了SPIO標(biāo)記巨噬細(xì)胞的歸巢。AGHIGHI等[8]合成了一種可被巨噬細(xì)胞吞噬的超小SPIO，用于監(jiān)測兒童腎移植患者的免疫狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)發(fā)生AR的腎臟同種異體移植物在MRI影像中T2值明顯延長。但目前相關(guān)研究仍較少，還需要大量的研究進(jìn)行詳細(xì)闡述。

2.3 腎臟損傷生物標(biāo)志物的檢測

對胱抑素C(CysC)、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)和腎損傷分子-1(KIM-1)等新型生物標(biāo)志物的快速檢測，是腎移植術(shù)后評估腎臟損傷的關(guān)鍵[22]，而利用納米粒子作為監(jiān)測傳感器可以有效地改進(jìn)現(xiàn)有的檢測手段。LOPES等[23]采用AuNPs以增加傳感器表面積體積比來改善電化學(xué)信號，使得免疫傳感器能夠更加靈敏地對CysC進(jìn)行測量，該傳感器可在極少樣品量(微升級)下顯示出極高的精密度和準(zhǔn)確度。YANG等[24]則應(yīng)用鉑納米顆粒來提高電子轉(zhuǎn)移效率，構(gòu)建了一個電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)生物傳感器來確定KIM-1的水平。另外有研究用原位還原方法將具有氧化還原活性的普魯士藍(lán)納米顆粒沉積在石墨C3N4納米片上，再以抗NGAL抗體進(jìn)行修飾后，作為傳感器，證實(shí)其可快速準(zhǔn)確地檢測NGAL濃度[25-26]。因此，使用納米材料可有效提高現(xiàn)有檢測方式的靈敏度，及時預(yù)知腎移植術(shù)后早期并發(fā)癥的發(fā)生，提高患者預(yù)后。

3 納米材料對IRI的治療作用

IRI是腎移植術(shù)后不可避免的病理生理狀態(tài)之一，是原發(fā)性移植腎無功能的最重要機(jī)制之一。長期結(jié)局方面，其與腎間質(zhì)纖維化和腎小管萎縮引起的慢性移植物功能障礙有關(guān)[27]。傳統(tǒng)小分子藥物由于機(jī)體清除速度快、血液滯留率低和全身劑量要求大等原因致療效不理想。目前有研究利用腎蓄積納米材料，通過清除過量的活性氧(ROS)、中和腎毒素或靶向腎前藥遞送來改善移植后IRI[2]。

DNA納米技術(shù)的發(fā)展為構(gòu)建不同結(jié)構(gòu)、大小的DONs提供了可能，同時DONs結(jié)構(gòu)中的堿基還可以有效清除缺血再灌注所產(chǎn)生的ROS[28]。JIANG等[13]對DONs在腎臟中的分布及清除情況進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其可以在腎臟中停留長達(dá)12 h，為腎臟IRI的治療提供了可能。CHEN等[29]將矩形DONs和抗補(bǔ)體成分C5a配體結(jié)合，構(gòu)建了一種可以序貫預(yù)防治療腎臟IRI的納米材料(aC5a-rDONs)，并發(fā)現(xiàn)其可在小鼠腎蒂鉗夾動物模型中雙相地防治腎臟IRI。aC5a-rDONs可以在缺血再灌注的前8 h內(nèi)有效清除在Ⅰ期產(chǎn)生的ROS，之后則表現(xiàn)出C5a與aC5a配體競爭性結(jié)合以抑制Ⅱ期的炎癥反應(yīng)。這種新的階段性敏感序貫療法可針對IRI每一階段的不同病理生理改變進(jìn)行針對性處理，體現(xiàn)出更高的療效和靶向性。此外，值得注意的是，與游離形式的氮氧自由基相比，依賴pH調(diào)節(jié)的抗氧化劑釋放系統(tǒng)具有更高的治療效果和更低的毒性，可用于精準(zhǔn)化治療。YOSHITOMI等[11]建立了一種pH響應(yīng)型含氮氧自由基共聚物(RNPpH)，用于清除ROS以治療IRI導(dǎo)致的AKI，該分子可在pH值低于7.0時分解產(chǎn)生氮氧自由基清除ROS。RNPpH的應(yīng)用可以顯著改善腎臟功能并減輕腎臟IRI。MINAMI等[30]還合成了一種含有香草醇的具有抗氧化活性的共聚草酸酯分子(APP-103)，并證實(shí)APP-103可減輕熱缺血(腎蒂鉗夾)和長期冷缺血(同基因腎移植)模型中的組織損傷和IRI相關(guān)炎癥反應(yīng)。此外，大量的研究證實(shí)，傳統(tǒng)中藥提取物黃連素具有良好的ROS清除作用，囿于其較低的腎臟富集特性，XIE等[31]合成了黃連素納米顆粒以提高其生物利用度，并證實(shí)其可以顯著減輕腎臟IRI。

此外，在其他原因所致AKI中，也有較多針對可清除腎臟ROS的納米材料的研究。如在橫紋肌溶解導(dǎo)致的AKI中DONs可有效結(jié)合ROS，減輕氧化應(yīng)激損傷[13]。Mn2+螯合黑色素納米粒子基于黑色素實(shí)現(xiàn)抗氧化作用[32]，黑磷納米片自動分解產(chǎn)生磷氧化物以中和腎臟ROS[33]等研究，均顯示可以較好地防治AKI。

除了直接利用可在腎臟中蓄積的納米材料作為還原劑對ROS進(jìn)行清除以減輕IRI引起的AKI外，納米酶的研究也備受關(guān)注，其具有成本低、穩(wěn)定性高、制備簡便等優(yōu)點(diǎn)[34]。一系列具有多酶活性的納米材料，已被創(chuàng)新地用于治療由ROS引起的各類疾病[35]?；诙趸嫾{米粒子的廣譜ROS清除能力和多種酶活性，ZHANG等[15]構(gòu)建了超小二氧化鈰納米酶作為ROS清除劑用于橫紋肌溶解誘導(dǎo)的AKI治療，取得了良好的治療效果。RuO2納米顆粒有良好生物相容性和酶樣活性，還具有過氧化物酶、過氧化氫酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶等多種酶活性,可顯著減輕小鼠AKI損傷程度[14]。VEMURI等[36]研究表明，以凝血酶為靶點(diǎn)的全氟化碳納米顆粒(PFC-NP)可減輕腎臟動脈閉塞后IRI，并證實(shí)用PFC-NP灌注同種異體腎移植物可減輕移植物損傷，保護(hù)移植物功能。

4 納米材料參與組成的藥物遞送系統(tǒng)在腎移植術(shù)后免疫抑制中的應(yīng)用

免疫抑制劑的使用降低了急性移植物排斥的總體發(fā)生率，但同時也會引起感染、心血管疾病、糖尿病和惡性腫瘤等并發(fā)癥。納米材料的理化性質(zhì)可以極大地改變免疫抑制劑藥物代謝動力學(xué)，延長藥物的血液循環(huán)時間，降低其在非靶器官的生物分布，從而達(dá)到將藥物靶向遞送至特定器官、組織或細(xì)胞的目的。大量研究發(fā)現(xiàn)，納米顆粒具有腎小球沉積的固有傾向，可將藥物特異性輸送到腎臟[6]。

糖皮質(zhì)激素對腎臟移植后的免疫抑制作用不可或缺，但其大量不良反應(yīng)限制了其使用。Fc受體是一種細(xì)胞表面糖蛋白，為主要的IgG Fc受體，能夠促進(jìn)IgG易位。此外，F(xiàn)c受體還是一種白蛋白的天然受體。WU等[37]研究合成了一種牛血清白蛋白-甲強(qiáng)龍納米材料(BSA-MP)，在pH 7.4時，該分子穩(wěn)定，沒有MP分子釋放，但是在pH 4.0時，大多數(shù)MP分子被釋放。動物實(shí)驗(yàn)顯示出其可以富集于腎臟中，為腎臟靶向性的糖皮質(zhì)激素輸送提供了可能。JIA等[38]設(shè)計(jì)合成了一種基于聚乙二醇的地塞米松短鏈大分子前藥(ZSJ-0228)，可以在腎臟中有效發(fā)揮作用，并降低其不良反應(yīng)發(fā)生率。此外基于與抗E-選擇素抗體結(jié)合的脂質(zhì)體(AbEsel脂質(zhì)體)進(jìn)行糖皮質(zhì)激素的輸送也被證明是有效的。對脂質(zhì)體包裝的潑尼松龍和常規(guī)潑尼松龍?jiān)诩毙阅I移植排斥小鼠模型中的作用進(jìn)行比較[39]，結(jié)果顯示與常規(guī)潑尼松龍相比，脂質(zhì)體潑尼松龍的腎臟生物利用度明顯增加，巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的數(shù)量減少，減少了同種異體移植物中的細(xì)胞浸潤，Banff 評分顯示間質(zhì)炎癥和腎小管炎減輕，fMRI分析顯示同種異體移植物灌注得到改善，對T細(xì)胞介導(dǎo)的排斥反應(yīng)治療效果較好。

此外，提高新型免疫抑制劑(如他克莫司、霉酚酸酯、雷帕霉素等)的靶向性研究也在持續(xù)進(jìn)行中。目前他克莫司相關(guān)納米分子在心臟移植、角膜移植及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療中效果較好[40]，但針對腎移植相關(guān)研究缺如。UEHARA等[41]開發(fā)一種直接遞送和緩釋霉酚酸酯的系統(tǒng)，在移植前用載有霉酚酸酯納米顆粒灌注供體小鼠心臟，通過抑制移植物內(nèi)促炎細(xì)胞因子和趨化因子的產(chǎn)生來抑制慢性同種異體移植排斥反應(yīng)。研究表明，使用納米載體攜帶免疫抑制劑進(jìn)行給藥，靶向抑制同種異體移植排斥反應(yīng)的方法在臨床中是可行的。SUANA等[42]設(shè)計(jì)出了一種含有霉酚酸酯的靶向大鼠系膜細(xì)胞中的Thy1.1抗原 (OX-7)的免疫脂質(zhì)體，研究證實(shí)效果優(yōu)于傳統(tǒng)給藥方式。此外使用靶向于足細(xì)胞的脂質(zhì)體包裹雷帕霉素進(jìn)行給藥也已被證明是可行的。

5 未來發(fā)展的前景及局限性

綜上所述，目前在腎臟移植及其相關(guān)領(lǐng)域納米材料的應(yīng)用研究中，主要涉及到腎功能的評估、排斥反應(yīng)的早期診斷、IRI的治療及對于免疫抑制劑給藥方式的改良。以往研究認(rèn)為納米材料的腎臟清除是臨床轉(zhuǎn)化的主要障礙，但是目前的研究表明，通過改變納米材料的尺寸、形狀、表面電荷和組成即能有效控制納米材料與腎臟的相互作用[2]。新興的“納米結(jié)構(gòu)-效應(yīng)關(guān)系”理論已經(jīng)促成了許多納米材料的臨床應(yīng)用。目前已有大量的納米材料進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，大部分已獲批用于癌癥的診斷和治療，其積累的臨床轉(zhuǎn)化經(jīng)驗(yàn)為開發(fā)用于腎臟功能評估和治療的新型納米材料提供了有效參考。

納米材料在腎臟移植領(lǐng)域中的應(yīng)用仍存在著大量需要解決的問題。一方面，大多數(shù)研究僅關(guān)注了納米材料在腎臟排泄的過程，而忽略了其在肝臟的排泄。隨著血液循環(huán)，大量納米材料由網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬進(jìn)入肝臟代謝。另一方面，大量研究表明中等大小納米材料可有效地靶向腎小管上皮細(xì)胞[43]，這也提示目前研究還僅停留在GFB層面上，而對管周毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)吞作用、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)的腎臟積累等的研究亦是很有必要的。

此外，腎臟移植術(shù)后腎功能評估及排斥反應(yīng)的早期診斷一直以來都是研究和關(guān)注的熱點(diǎn)，而對于腎移植術(shù)后并發(fā)癥的早期診斷研究較少，多是局限于對巨噬細(xì)胞歸巢的觀察。應(yīng)用納米分子替代肌酐、尿素氮進(jìn)行eGFR計(jì)算及腎功能評估相關(guān)研究也較多，但均處于動物實(shí)驗(yàn)階段，如何將其進(jìn)行臨床轉(zhuǎn)化將會是未來的研究方向之一。

目前針對腎移植術(shù)后IRI的小分子保護(hù)劑水溶性較差，或存在生物不穩(wěn)定性問題，利用納米材料進(jìn)行設(shè)計(jì)給藥可有效解決此類問題。大量研究表明納米材料的理化性質(zhì)決定了藥物藥代動力學(xué)特性，因此將小分子腎臟保護(hù)劑設(shè)計(jì)為納米材料，可有效增加其水溶性，從而提高其生物利用度。此外將已有腎臟保護(hù)劑設(shè)計(jì)為依賴pH調(diào)節(jié)的抗氧化劑釋放系統(tǒng)，可使其在血液循環(huán)和腎臟組織中持續(xù)釋放小分子藥物，從而實(shí)現(xiàn)長效且靶向作用，減輕腎臟IRI。

通過納米材料改良免疫抑制劑給藥方式，也是未來發(fā)展方向之一。通過腎臟的靶向給藥，可以抑制腎移植術(shù)后早期免疫識別，并誘導(dǎo)后期的免疫耐受，改善腎臟移植術(shù)后的免疫狀態(tài)，提高腎臟長期生存率，同時由于降低了其在非靶器官的劑量，也減少了并發(fā)癥的發(fā)生。但目前相關(guān)研究仍然較少。

隨著精準(zhǔn)醫(yī)療理念的不斷深入，在腎移植患者的管理過程中，快速準(zhǔn)確地對腎功能評估、并發(fā)癥的及時診治及低不良反應(yīng)的免疫抑制方案選擇一直以來都是眾多研究者關(guān)心的問題。納米材料因其具有可編輯、高靶向等特性，成為了移植領(lǐng)域相關(guān)研究的熱點(diǎn)[4]。腎移植術(shù)后IRI的研究一直以來囿于小分子藥物富集性差、發(fā)揮作用時間短的問題，而可富集于腎臟的納米材料則可有效解決以上問題。納米材料因其高靶向性的特點(diǎn)，為腎移植術(shù)后精準(zhǔn)、高效、低毒的免疫抑制方案的制定提供了可能性。

利益沖突聲明：所有作者聲明不存在利益沖突。

ConflictsofInterest： All authors disclose no relevant conflicts of interest.

作者貢獻(xiàn)：栗澤鵬、丁晨光、董博清參與了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)；栗澤鵬、丁晨光、鄭瑾、薛武軍參與了論文的寫作和修改。所有作者均閱讀并同意發(fā)表該論文。

Contributions： The study was designed byLIZepeng,DINGChenguang, andDONGBoqing. The manuscript was drafted and revised byLIZepeng,DINGChenguang,ZHENGJin, andXUEWujun. All the authors have read the last version of the paper and consented submission.