汪春蕾 李銀喜 余勝斌 曾穎

白癜風(fēng)是一種常見的自身免疫性色素粘膜脫失癥，按白斑的形態(tài)、部位、范圍等分為局限型、散發(fā)型、泛發(fā)型、節(jié)段型、肢端型，按疾病進(jìn)展情況分為穩(wěn)定期和進(jìn)展期。臨床表現(xiàn)為不同程度的色素脫失斑片為主，多見乳白色或淺粉色，可見于全身，一般無自覺癥狀。其病因與神經(jīng)調(diào)節(jié)、免疫功能有關(guān)，外周血免疫細(xì)胞應(yīng)答機(jī)制中［1］T 細(xì)胞跨膜蛋白是免疫機(jī)制靶點(diǎn)［2］。其表面受體接收外來抗原物質(zhì)，引起細(xì)胞免疫，釋放細(xì)胞因子“殺死”外來抗原，其中尤以Th 細(xì)胞、Tc 細(xì)胞發(fā)揮主要作用［3］。研究發(fā)現(xiàn)20%的白癜風(fēng)患者伴不同程度的自身免疫性甲狀腺疾?。?］。為研究白癜風(fēng)患者血清甲狀腺激素、T 淋巴細(xì)胞水平的變化與疾病分期、分型的關(guān)系，以供臨床治療參考，現(xiàn)進(jìn)行如下研究。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取武漢市新洲區(qū)人民醫(yī)院2020 年6 月至2022 年4 月確診的90 例白癜風(fēng)患者（白癜風(fēng)組），其中男47 例、女43 例，年齡平均（45.3±18.0）歲，其中進(jìn)展期50 例、穩(wěn)定期40 例；疾病分型：節(jié)段型18例、尋常型72 例（局限性18 例、肢端性15 例、泛發(fā)性5 例、散發(fā)性34 例）。選取同期90 名健康體檢志愿者（健康組），男52 名、女38 名，年齡平均（43.8±15.8）歲。兩組研究對(duì)象的年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。

診斷及入選標(biāo)準(zhǔn)：①白癜風(fēng)患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)皮膚性病專業(yè)委員會(huì)色素病學(xué)組制定的《白癜風(fēng)臨床分型及療效標(biāo)準(zhǔn)2015 年修訂版》［4］中的標(biāo)準(zhǔn)；②年齡19～75 歲；③病程＞3 個(gè)月；④近3 個(gè)月未使用相關(guān)白癜風(fēng)藥物治療的患者；⑤本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理規(guī)定，患者知情同意，并對(duì)患者個(gè)人資料保密。排除標(biāo)準(zhǔn)：①皮膚感染、皮膚腫瘤；②放化療病史；③妊娠及哺乳期；④免疫學(xué)疾病；⑤原發(fā)性甲狀腺功能疾病。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法

采集兩組人員清晨空腹血液標(biāo)本，使用轉(zhuǎn)速為4 500 r/min 的日本KUBOTA 2420 型離心機(jī)（血細(xì)胞分析用溶血?jiǎng)?，南京邁瑞），離心半徑為8 cm，離心處理20 min，分離血清，放入EP 試管中，在-20℃環(huán)境中保存、待用。采集兩組人員靜脈血液標(biāo)本，使用電化學(xué)發(fā)光法（PR-熒光探針法，湖南，圣湘生物）檢測(cè)兩組樣本促甲狀腺素（thyroid stimulating hormone，TSH）、三碘甲狀腺原氨酸（triiodothyronine，T3）、甲 狀 腺 激 素（Thyroid hormone，T4）、游離三點(diǎn)甲狀腺原氨酸（Free three-point thyrogen，F(xiàn)T3）、游離甲狀腺素（Free thyroxine，F(xiàn)T4）表達(dá)水平，同時(shí)采用（羅氏檢測(cè)試劑盒，上海羅氏）檢測(cè)兩組樣本淋巴細(xì)胞表面抗原（CD3+、CD4+、CD8+）表達(dá)水平。

1.2.2 觀察指標(biāo)

1.2.2.1 VIDA（白癜風(fēng)活動(dòng)程度評(píng)分）標(biāo)準(zhǔn)［5］：最近6 周內(nèi)出現(xiàn)新皮損或原皮損擴(kuò)大+4 分；最近3月內(nèi)出現(xiàn)新皮損或原皮損擴(kuò)大+3 分；最近6 月內(nèi)出現(xiàn)新皮損或原皮損擴(kuò)大+2 分；最近1 年內(nèi)出現(xiàn)新皮損或原皮損擴(kuò)大+1 分；至少1 年內(nèi)穩(wěn)定0 分；至少1 年內(nèi)穩(wěn)定且有自發(fā)色素再生-1 分；VIDA 評(píng)分越低表示患者的疾病活動(dòng)程度越低，得分＜4 分為穩(wěn)定期，得分≥4 分為進(jìn)展期。

1.2.2.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：觀察組所有患者采用同一儀器及方法檢測(cè)甲功五項(xiàng)，A. TSH：20～49 歲正常參 考 值 為0.4～4.2 mU/L；B. T3：100～201 ng/dL；C.FT3：4～10 pmol/L；D.T4：4.5～13 g/dL；E.FT4：10～30 pmol/L；CD8+T 參考范圍為20.39～34.71 之間［6］。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究收集的所有數(shù)據(jù)均在SPSS 21.0 中進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)采用（±s）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 白癜風(fēng)組和健康組的血清甲狀腺激素、外周血T 淋巴細(xì)胞比較

白癜風(fēng)組患者的血清TSH、FT3、FT4、外周血CD8+高于健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；白癜風(fēng)組患者的外周血CD4+、CD4+/CD8+低于健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 白癜風(fēng)組和健康組的血清甲狀腺激素、T 淋巴細(xì)胞比較（±s）Table 1 Comparison of serum thyroid hormones and T lymphocytes between vitiligo group and healthy group（±s）

表1 白癜風(fēng)組和健康組的血清甲狀腺激素、T 淋巴細(xì)胞比較（±s）Table 1 Comparison of serum thyroid hormones and T lymphocytes between vitiligo group and healthy group（±s）

組別白癜風(fēng)組健康組t 值P 值n 90 90 TSH（mIU/L）1.74±0.66 1.28±0.40 5.655 0.000 T3（ng/mL）1.46±0.30 1.38±0.33 1.702 0.091 T4（μg/dL）9.26±3.18 8.67±2.90 1.301 0.195 FT3（pmol/L）5.44±0.86 4.87±0.61 5.129 0.000 FT4（pmol/L）15.40±2.11 13.39±1.85 6.795 0.000 CD3+（%）66.74±6.21 67.38±5.90-0.709 0.479 CD4+（%）36.84±3.81 40.02±4.01-5.454 0.000 CD8+（%）26.11±2.85 23.40±2.70 6.549 0.000 CD4+/CD8+1.41±0.25 1.71±0.28-7.582 0.000

2.2 不同分期的白癜風(fēng)患者血清甲狀腺激素、外周血T 淋巴細(xì)胞比較

進(jìn)展期和穩(wěn)定期白癜風(fēng)組患者的血清TSH、FT3、FT4、T3、T4、外周血CD3+差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；進(jìn)展期白癜風(fēng)患者的外周血CD4+、CD4+/CD8+低于穩(wěn)定期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），進(jìn)展期白癜風(fēng)患者的外周血CD8+高于穩(wěn)定期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同分期的白癜風(fēng)患者血清甲狀腺激素、T 淋巴細(xì)胞比較（±s）Table 2 Comparison of Serum Thyroid Hormone and T Lymphocytes in Vitiligo Patients with Different Stages（±s）

表2 不同分期的白癜風(fēng)患者血清甲狀腺激素、T 淋巴細(xì)胞比較（±s）Table 2 Comparison of Serum Thyroid Hormone and T Lymphocytes in Vitiligo Patients with Different Stages（±s）

分期進(jìn)展期穩(wěn)定期t 值P 值n 50 40 TSH（mIU/L）1.78±0.61 1.69±0.65 0.676 0.501 T3（ng/mL）1.47±0.28 1.44±0.26 0.521 0.604 T4（μg/dL）9.40±3.09 9.09±2.75 0.496 0.621 FT3（pmol/L）5.52±0.82 5.34±0.80 1.046 0.298 FT4（pmol/L）15.62±1.95 15.13±2.06 1.155 0.251 CD3+（%）66.36±5.90 67.22±6.04-0.680 0.498 CD4+（%）35.62±3.45 38.37±3.11-3.924 0.000 CD8+（%）27.08±2.76 24.90±2.44 3.918 0.000 CD4+/CD8+1.31±0.24 1.54±0.21-4.772 0.000

2.3 不同分型的白癜風(fēng)患者血清甲狀腺激素、外周血T 淋巴細(xì)胞比較

節(jié)段型白癜風(fēng)組患者的血清TSH 高于尋常型患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；節(jié)段型白癜風(fēng)組患者與尋常型患者FT3、FT4、T3、T4、外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 不同分型的白癜風(fēng)患者血清甲狀腺激素、T 淋巴細(xì)胞比較（±s）Table 3 Comparison of Serum Thyroid Hormone and T Lymphocytes in Vitiligo Patients with Different Types（±s）

表3 不同分型的白癜風(fēng)患者血清甲狀腺激素、T 淋巴細(xì)胞比較（±s）Table 3 Comparison of Serum Thyroid Hormone and T Lymphocytes in Vitiligo Patients with Different Types（±s）

分型節(jié)段型尋常型t 值P 值n 18 72 TSH（mIU/L）2.00±0.42 1.68±0.63 2.040 0.044 T3（ng/mL）1.50±0.24 1.45±0.28 0.696 0.488 T4（μg/dL）9.38±2.83 9.23±3.12 0.186 0.853 FT3（pmol/L）5.60±0.61 5.40±0.83 0.958 0.341 FT4（pmol/L）15.60±1.88 15.35±2.09 0.463 0.645 CD3+（%）66.58±4.98 66.78±6.13-0.128 0.898 CD4+（%）36.20±3.32 37.00±3.76-0.825 0.412 CD8+（%）26.89±2.60 25.92±2.71 1.369 0.175 CD4+/CD8+1.34±0.22 1.43±0.24-1.446 0.152

2.4 血清甲狀腺激素、外周血T 淋巴細(xì)胞與白癜風(fēng)患者病情程度的關(guān)系

白癜風(fēng)組患者的血清TSH、FT3、FT4、T3、T4、外周血CD3+水平與患者的VIDA 評(píng)分無明顯的相關(guān)性（P＞0.05）；白癜風(fēng)患者的外周血中CD4+、CD4+/CD8+測(cè)定值與患者VIDA 評(píng)分呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），外周血CD8+與VIDA 評(píng)分呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）。見表4。

表4 相關(guān)性分析結(jié)果Table 4 Correlation analysis results

3 討論

白癜風(fēng)患者常伴有甲狀腺等自身免疫性疾病。有研究發(fā)現(xiàn)，白癜風(fēng)與自身免疫性甲狀腺病具有相似的易感基因［7］。甲狀腺激素是參與下丘腦-腺垂體-甲狀腺軸的重要因子，是臨床常用的甲狀腺功能檢測(cè)指標(biāo)［8］。本研究結(jié)果顯示，白癜風(fēng)組患者的血清TSH、FT3、FT4 高于健康組，表明白癜風(fēng)患者的發(fā)病與血清甲狀腺激素有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，白癜風(fēng)患者伴有的黑色素功能異常將阻滯絡(luò)氨酸的黑素合成方向，過多的絡(luò)氨酸將通過合成甲狀腺素來實(shí)現(xiàn)代謝［9］。進(jìn)一步的研究結(jié)果顯示，節(jié)段型TSH 水平顯著高于尋常型，這說明白癜風(fēng)發(fā)病與自身免疫性甲狀腺病的相關(guān)。這也佐證了白癜風(fēng)發(fā)病與甲狀腺激素密切相關(guān)［10］。

本研究結(jié)果顯示，白癜風(fēng)組患者外周血CD8+高于健康組，而CD4+、CD4+/CD8+低于健康組，表明白癜風(fēng)患者的發(fā)病與T 淋巴細(xì)胞有關(guān)。T 淋巴細(xì)胞亞群是臨床常用的免疫功能檢測(cè)指標(biāo)，其中CD3+多表達(dá)與T 細(xì)胞表面，是T 細(xì)胞抗原受體結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的重要因子，同時(shí)還是T 細(xì)胞信號(hào)活化遞質(zhì)［11］；CD4+、CD8+則是T 細(xì)胞抗原受體識(shí)別抗原的共受體，可輔助T 細(xì)胞抗原受體識(shí)別抗原，并轉(zhuǎn)導(dǎo)活化信號(hào)［12］。免疫治療可顯著改善患者癥狀。

進(jìn)一步的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，進(jìn)展期和穩(wěn)定期白癜風(fēng)組患者外周血CD3+差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但進(jìn)展期患者CD4+、CD4+/CD8+高于穩(wěn)定期患者，表明免疫功能紊亂與患者疾病分期密切相關(guān)。研究顯示，患者出現(xiàn)白斑的皮膚處有大量CD4+、CD8+浸潤，說明此皮損處黑素抗原大量活躍，引起細(xì)胞表面抗黑素抗體與其結(jié)合，觸發(fā)T 細(xì)胞表面特異性免疫因子CD4+、CD8+破壞黑素細(xì)胞［13］。CD4+、CD8+還可誘導(dǎo)黑素細(xì)胞吸引腫瘤破壞因子，啟動(dòng)自我凋亡程序，致使患者皮膚表面出現(xiàn)褪黑現(xiàn)象，使病情加重［14］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，節(jié)段型白癜風(fēng)組患者與尋常型患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明免疫功能狀態(tài)與患者疾病分型無明顯聯(lián)系。因外周血免疫應(yīng)答是T 淋巴細(xì)胞接收外界抗原，應(yīng)答因子與抗原結(jié)合，對(duì)抗原進(jìn)行處理，可隨血液循環(huán)至全身的免疫器官和組織中［15］。對(duì)白癜風(fēng)而言，針對(duì)黑色素細(xì)胞，免疫因子均可對(duì)其觸發(fā)應(yīng)答。

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，白癜風(fēng)患者的外周血中CD4+、CD4+/CD8+測(cè)定值與患者VIDA 評(píng)分呈顯著負(fù)相關(guān)且外周血CD8+與VIDA 評(píng)分呈顯著正相關(guān)關(guān)系。說明白癜風(fēng)患者皮損區(qū)域與局部皮神經(jīng)支配區(qū)域以病情程度走向分布，隨著病情的分期和分型，皮膚上出現(xiàn)的斑塊也會(huì)發(fā)生變化［16］。臨床或可通過VIDA 評(píng)分來對(duì)白癜風(fēng)患者進(jìn)行分期、分型診斷，并以此指導(dǎo)治療。

綜上所述，白癜風(fēng)患者存在顯著的免疫功能紊亂及甲狀腺功能紊亂，其中外周血T 淋巴細(xì)胞與疾病分期有關(guān)，血清TSH 與疾病分型有關(guān)。