沈玉雪，郭 勇

（1錦欣婦產(chǎn)醫(yī)院超聲影像科 湖北 黃石 435003）

（2黃石港社區(qū)衛(wèi)生服務中心放射科 湖北 黃石 435002）

卵巢癌是女性生殖器官常見的惡性腫瘤，發(fā)病早期癥狀沒有特異性，早期診斷較難，病情進展到晚期可表現(xiàn)為下腹不適、食欲下降、貧血等，通常需要進行手術(shù)及放化療治療[1-2]。卵巢癌早期有效診斷是提高患者生存率的關(guān)鍵，臨床上超聲診斷是常用手段，但敏感性不高。CEUS通過使用微氣泡造影劑可以準確顯示局部組織中的微細血管和血流情況，并對此做出量化評估，輔助診斷病情。韓建梅等[3]研究發(fā)現(xiàn)，卵巢癌患者病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2蛋白含量與正常人相比均處于異常狀態(tài)。本研究旨在探討卵巢癌患者CEUS檢查相關(guān)參數(shù)與病灶組織血管新生程度的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年3月—2022年3月錦欣婦產(chǎn)醫(yī)院收治的卵巢腫瘤患者132例，依據(jù)檢查結(jié)果分成對照組（良性腫瘤，66例）、觀察組（卵巢癌，66例）。對照組年齡28～76歲，平均（56.27±4.36）歲；體重指數(shù)17～30 kg/m2，平均（23.46±3.12）kg/m2。觀察組年齡28～75歲，平均（56.24±4.35）歲；體重指數(shù)17～31 kg/m2，平均（24.02±3.55）kg/m2；病理分期：Ⅱ期35例，Ⅲ期19例，Ⅳ期12例；分化程度：低分化22例，中分化23例，高分化21例。兩組年齡、體重指數(shù)比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），有可比性。

納入標準：①符合《婦產(chǎn)科學》[4]中的診斷標準，經(jīng)實驗室病理檢查確診者；②臨床資料齊全者；③患者未合并其他惡性腫瘤等。排除標準：①嚴重腎、心、肝功能不全者；②妊娠期、哺乳期婦女；③精神異常者等。

1.2 方法

使用彩色多普勒超聲診斷儀（DW-T6，濟南博坤科學儀器有限公司）進行檢查，囑患者排空膀胱，把套有避孕套的探頭置入患者陰道，探頭頂端至陰道宮頸部。探查是否存在病灶，發(fā)現(xiàn)時記錄病灶組織的邊界、形態(tài)、鈣化、內(nèi)部回聲、側(cè)方聲影等情況。確定病灶位置后，換成CEUS模式，使用前通過肘部靜脈快速團注造影劑2 mL，隨后注射0.9%氯化鈉溶液5 mL。選擇最佳造影切面：清晰顯示病灶，所選區(qū)域包括腫瘤的實性部分；病灶下緣放置聚焦帶。注射造影劑的同時開啟超聲儀記錄全過程動態(tài)圖像。依據(jù)病灶大小繪制感興趣區(qū)，記錄時間強度曲線、始增時間、始增強度、峰值時間，測定其基礎強度、峰值強度，增強強度=峰值強度-基礎強度。

1.3 觀察指標

①常規(guī)超聲特征：觀察兩組病灶部位形態(tài)不規(guī)則、邊界不清晰、內(nèi)部回聲不均勻、微鈣化、側(cè)方聲影情況。

②CEUS參數(shù)：記錄兩組始增時間、峰值時間，始增強度、增強強度。

③MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2蛋白含量：采集所有病灶組織樣本蠟塊，制成4 μm厚切片，使用鏈霉素抗生物蛋白-過氧化酶免疫組織化法染色，陽性對照使用已知陽性切片，陰性對照用磷酸鹽緩沖劑代替第一抗體。使用鼠抗人CD34單克隆抗體行免疫組織化法染色找到血管后，先在低倍鏡（×100）下掃查整個切片，再尋找3個血管高密度區(qū)，在高倍鏡下（×400）計數(shù)，這3個視野被染成棕色的微血管數(shù)，取平均值作為MVD計數(shù)。取適量所有病灶組織加入蛋白裂解液，提取總蛋白，使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測兩組VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2蛋白含量。

④CEUS檢查相關(guān)參數(shù)與病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2 蛋白含量的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料以頻數(shù)（n）、百分率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；使用Pearson分析相關(guān)性。P＜0.05則差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 常規(guī)超聲特征

觀察組患者病灶部位形態(tài)不規(guī)則、邊界不清晰、內(nèi)部回聲不均勻、微鈣化、側(cè)方聲影的檢出率均顯著高于對照組（P＜0.01）。見表1。

表1 兩組常規(guī)超聲特征比較[n（%）]

2.2 CEUS參數(shù)

觀察組始增時間、峰值時間顯著短于對照組，始增強度、增強強度顯著高于對照組（P＜0.01）。見表 2。

表2 兩組CEUS參數(shù)比較（）

表2 兩組CEUS參數(shù)比較（）

組別 例數(shù) 始增時間/s 峰值時間/s觀察組 66 11.23±1.34 21.47±4.18對照組 66 14.62±1.57 83.83±8.26 t 13.343 54.725 P＜0.001 ＜0.001組別 例數(shù) 始增強度/dB 增強強度/dB觀察組 66 -58.74±6.51 92.25±10.86對照組 66 -73.47±8.25 67.64±8.13 t 11.387 14.738 P＜0.001 ＜0.001

2.3 MVD 計 數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2蛋白含量

觀察組病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、IGFBP2蛋白含量水平顯著高于對照組，ELF5蛋白含量水平顯著低于對照組（P＜0.01）。見表3。

表3 MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2蛋白含量比較（）

表3 MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2蛋白含量比較（）

CGB5 pg/mL組別 例數(shù) MVD計數(shù)個VEGFR1 ng/mL觀察組 66 36.45±4.62 4.81±0.53 287.55±36.43對照組 66 12.78±2.76 0.94±0.16 96.68±12.76 t 35.493 56.789 40.172 P＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 IGFBP2 pg/mL觀察組 66 4.62±0.78 164.58±24.75 398.36±48.31對照組 66 0.95±0.19 412.63±57.86 115.47±21.58 t 37.139 32.022 43.436 P＜0.001 ＜0.001 ＜0.001組別 例數(shù) CyclinD1 ng/mL ELF5 pg/mL

2.4 CEUS檢查相關(guān)參數(shù)與病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2 蛋白含量的相關(guān)性

經(jīng)Pearson相關(guān)系數(shù)分析，峰值時間與病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、IGFBP2蛋白含量呈負相關(guān)（r=-0.414、-0.345、-0.447、-0.421、-0.411，P＜0.05），峰值時間與病灶部位ELF5蛋白含量呈正相關(guān)（r=0.378，P＜0.05）；增強強度與病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、IGFBP2蛋白含量呈正相關(guān)（r=0.368、0.475、0.387、0.376、0.385，P＜0.05），增強強度與病灶部位ELF5蛋白含量水平呈負相關(guān)（r=-0.384，P＜0.05），而始增時間、始增強度與病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2蛋白含量無明顯相關(guān)性（P＞0.05），見表4。

表4 CEUS檢查相關(guān)參數(shù)與病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、ELF5、IGFBP2蛋白含量的相關(guān)性

3 討論

田麗等[5]研究表明，卵巢癌發(fā)病越來越趨于年輕化，其與環(huán)境影響、食品污染、遺傳、內(nèi)分泌等因素有關(guān)。卵巢腫瘤生長迅速且易擴散[6]。因此，早期診斷對卵巢癌患者的治療及預后十分關(guān)鍵。常規(guī)超聲檢查是通過將正常組織與病灶組織聲阻抗差異進行成像，觀察病灶特征，但對于某些沒有超聲表現(xiàn)的病灶不能有效檢出。

CEUS是通過靜脈注射造影劑至病灶，可以清晰準確地顯示病灶血管及血流情況。峰值時間是注射造影劑到造影增強達到峰值所用的時間，峰值強度是進入腫瘤血管床的微泡數(shù)總量，增強強度通過造影劑流速反映血流豐富程度[7]。本研究結(jié)果顯示，觀察組始增時間、峰值時間較短，始增強度、增強強度較高，分析其原因可能是：惡性腫瘤新生血管較多且血管壁不完整，血流速度快，因此峰值時間短、增強強度高。MVD計數(shù)是檢查腫瘤血管新生的標準，其計數(shù)越大，患者病灶轉(zhuǎn)移的概率越高，預后越差，卵巢癌病灶血管新生促進了癌細胞的增殖及侵襲，加速病情惡化[8]。CyclinD1是細胞調(diào)控因子，能夠加快細胞周期促進癌細胞增殖；IGFBP2是調(diào)控細胞內(nèi)胰島素樣細胞因子的蛋白，增強IGF癌細胞侵襲能力；CGB5是HCG的B5亞基，會促進血管內(nèi)皮生長因子的生成；VEGFR1是血管內(nèi)皮生長因子受體，通過與血管內(nèi)皮生長因子結(jié)合促進血管新生，血管新生可以提供豐富血供，促進癌細胞表達，加快病情進展；ELF5可以增強細胞內(nèi)抑癌基因的生物學功能，拮抗癌細胞增殖，減輕病變程度[9]。腫瘤內(nèi)的新生血管和正常血管存在較大差別，CEUS通過定量參數(shù)測量、動態(tài)記錄血流變化來評估新生血管，腫瘤血管新生、細胞過量增殖、細胞過度侵襲等生物學行為均會引起CEUS相關(guān)參數(shù)的改變，通過CEUS參數(shù)的測定可以反映血管新生情況。本研究結(jié)果顯示，峰值時間與病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、IGFBP2蛋白含量呈負相關(guān)，與ELF5蛋白含量呈正相關(guān)；增強強度與病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、IGFBP2蛋白含量呈正相關(guān)，與病灶部位ELF5蛋白含量呈負相關(guān)，通過對卵巢癌患者進行CEUS檢測可以輔助診斷病情，促進預后恢復。

綜上所述，峰值時間越低，病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、IGFBP2蛋白含量水平越高；峰值時間越高，病灶部位ELF5蛋白含量水平越高；增強強度越高，病灶部位ELF5蛋白含量水平越低；增強強度越高，病灶部位MVD計數(shù)、VEGFR1、CGB5、CyclinD1、IGFBP2蛋白含量水平越高，病情越嚴重，進而通過CEUS檢查相關(guān)參數(shù)可反映病灶組織血管新生程度，進而為卵巢腫瘤的鑒別診斷提供依據(jù)。