夏濤濤 ，蘇浩昌，胡曉娟，徐 煜，文國(guó)樑，曹煜成 , ，余招龍

1. 上海海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海 201306

2. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所/廣東省漁業(yè)生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部南海漁業(yè)資源開(kāi)發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510300

3. 嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實(shí)驗(yàn)室茂名分中心，廣東 茂名 525400

抗生素的廣泛應(yīng)用及其在生物體內(nèi)的不完全代謝，使其容易殘留在自然環(huán)境中，這是造成抗生素抗性基因 (Antibiotic resistant genes, ARGs) 和抗性菌 (Antibiotic resistant bacteria, ARB) 產(chǎn)生的主要原因[1]。近年來(lái)ARGs作為新型污染物受到廣泛關(guān)注，它借助可移動(dòng)遺傳元件轉(zhuǎn)移到病原菌的基因組中，使其產(chǎn)生抗生素耐藥性，對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物乃至人體健康均造成潛在威脅[2-3]。ARGs在污水處理廠、禽畜養(yǎng)殖場(chǎng)、水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)，以及其他一些自然水體環(huán)境中均曾被檢出[4-6]，并且在部分水產(chǎn)品中磺胺類、四環(huán)素類和鏈霉素類的ARGs亦有檢出[7-8]。Su等[9]研究發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖水源水中的ARGs含量及種類數(shù)量均遠(yuǎn)高于養(yǎng)殖池塘水體，并且未經(jīng)處理的養(yǎng)殖尾水被重復(fù)利用也會(huì)導(dǎo)致ARGs在養(yǎng)殖環(huán)境中傳播[10]；因此，從源頭上防控ARGs在水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境中的傳播尤為重要。科學(xué)使用漁用氧化劑對(duì)池塘環(huán)境進(jìn)行消毒，可有效防治養(yǎng)殖病害，還可改善養(yǎng)殖環(huán)境[11]。含氯氧化劑因價(jià)格低廉、殺菌效果好在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用廣泛[12-13]。三氯異氰尿酸 (C3O3N3Cl3)俗稱強(qiáng)氯精，是養(yǎng)殖生產(chǎn)常用的含氯氧化劑之一，它的有效氯質(zhì)量分?jǐn)?shù)高達(dá)90%，殺菌效果好，對(duì)水中大部分真菌、芽孢及病毒均具有殺滅作用[14]。

采用傳統(tǒng)的污水消毒工藝所產(chǎn)生的細(xì)胞碎片中大多仍含有完整的DNA殘余物，這將會(huì)給下游細(xì)菌種群帶來(lái)ARGs[15]。因而，除了殺滅目標(biāo)微生物之外，還應(yīng)關(guān)注消毒技術(shù)對(duì)微生物DNA的破壞能力。活性氯、臭氧、紫外線或過(guò)渡金屬離子參與的高級(jí)氧化作用均可對(duì)ARGs產(chǎn)生較強(qiáng)的去除效果[10,16-18]。Yoon等[19]發(fā)現(xiàn)有效氯質(zhì)量濃度高于37 mg·L?1時(shí)對(duì)環(huán)境中的ARGs具有明顯的消除效果?？梢?jiàn)，科學(xué)應(yīng)用氧化消毒方法可有效消減養(yǎng)殖水環(huán)境中的ARGs進(jìn)而防控其傳播。

目前有關(guān)漁用氧化劑與氧化消毒處理對(duì)水環(huán)境中 ARGs 消除效果的研究報(bào)道較少。本研究選擇水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中常用的強(qiáng)氯精，分析其對(duì)近海水源水中常見(jiàn)ARGs的去除效果，探討從源頭上控制ARGs在水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境中傳播的可行性，為進(jìn)一步建立養(yǎng)殖環(huán)境質(zhì)量安全控制技術(shù)提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器

TB Green Real Time qPCR Kit 購(gòu)自 TaKaRa 公司，F(xiàn)astDNATMSPIN Kit for Soil購(gòu)自MQBIO公司，實(shí)驗(yàn)用水為屈臣氏蒸餾水。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用的主要儀器包括熒光定量 PCR 儀 qTOWER3 (Analytikjena，德國(guó))，冷凍離心機(jī) (Sigma，德國(guó))，恒溫金屬浴鍋 (上海一恒)，研磨儀 (上海凈信)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組與樣品采集

實(shí)驗(yàn)在廣東省茂名市電白區(qū)廣東冠利達(dá)海洋生物有限公司養(yǎng)殖基地開(kāi)展。根據(jù)水樣來(lái)源實(shí)驗(yàn)分為近海水源水 (SY組)、蓄水沉淀池水體 (XSC組)、氧化消毒處理后的養(yǎng)殖備用水 (XD組) 3組。其中，SY組的水體取自茂名電白雞打港閘口，XSC組水體取自養(yǎng)殖場(chǎng)的蓄水沉淀池，XD組水體取自養(yǎng)殖場(chǎng)棚內(nèi)的消毒池。2021年5月31日對(duì)養(yǎng)殖備用水進(jìn)行消毒處理，消毒水體為500 m3，水體中消毒劑強(qiáng)氯精的質(zhì)量濃度為40 mg·L?1；添加消毒劑后的第二天開(kāi)始取樣，此時(shí)氧化劑基本溶解；實(shí)驗(yàn)期間蓄水池和消毒處理后的養(yǎng)殖備用水不進(jìn)行換水操作，盡量維持實(shí)驗(yàn)環(huán)境穩(wěn)定。水樣采集時(shí)間為2021年6月1、15和29日的9:00—10:00 (該地區(qū)6月13日左右有過(guò)降雨)，每隔14 d取樣1次，分別對(duì)以上3處水體進(jìn)行3次采樣。使用 3 L 有機(jī)玻璃采水器在距離水面30 cm 處采集水樣，每個(gè)采樣點(diǎn)包括3個(gè)不同位置的取水點(diǎn)，每隔20 m分別采樣，將每個(gè)采樣點(diǎn)的水樣注入20 L的聚乙烯桶內(nèi)充分混合后分裝到1 L的聚乙烯樣品瓶?jī)?nèi)，低溫保存并帶回實(shí)驗(yàn)室。取200 mL水樣經(jīng)0.22 μm 孔徑的無(wú)菌濾膜過(guò)濾，獲得的濾膜置于無(wú)菌封口袋內(nèi)?80 ℃保存。3次采集的水體樣品分別命名為水源水 SY1、SY2、SY3，蓄水沉淀池水體 XSC1、XSC2、XSC3，消毒后池塘養(yǎng)殖備用水 XD1、XD2、XD3。

1.2.2 總DNA的提取

無(wú)菌條件下將濾膜剪碎，使用土壤 DNA 提取試劑盒 FastDNATMSPIN Kit for Soil并按照試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟對(duì)水樣中的總 DNA 進(jìn)行提取與純化。提取的總 DNA 使用 NanoDrop 2000 進(jìn)行純度檢測(cè)，要求 260/280介于1.8～1.9。

1.3 RT-qPCR

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

將克隆有目標(biāo)抗性基因的大腸桿菌 (Escherichia coli) 標(biāo)準(zhǔn)菌株SFEC1， 37 ℃培養(yǎng) 20 h 后使用天根質(zhì)粒提取試劑盒 (上海) 提取標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒，并于NanoDrop 2000下測(cè)定濃度及純度后，計(jì)算出目的基因拷貝數(shù)，使用超純水對(duì)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒進(jìn)行10倍梯度稀釋，設(shè)定7個(gè)濃度梯度，進(jìn)行RT-qPCR測(cè)定，根據(jù)回歸系數(shù)R2、擴(kuò)增效率及溶解曲線確定擴(kuò)增良好性及特異性。以拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)lg copies為橫坐標(biāo)，Ct值為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，要求標(biāo)準(zhǔn)曲線滿足以下條件：R2>0.99，擴(kuò)增效率介于 90%～110%。分裝后?20 ℃保存。大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株SFEC1由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所提供。

1.3.2 水樣的RT-qPCR定量檢測(cè)

監(jiān)測(cè)的目標(biāo)ARGs共7種，包括2種磺胺類抗性基因 (sul1和sul2)，2種氯霉素類抗性基因(cmlA和floR)，1種喹諾酮類抗性基因 (qnrA) 和2種四環(huán)素類抗性基因 (tetW和tetX)。樣品qPCR檢測(cè)使用 TB Green Real Time qPCR Kit 在qTOWER3熒光定量 PCR 儀上完成。qPCR的反應(yīng)體系為10 μL，各組分加樣量見(jiàn)表1。反應(yīng)程序：95 ℃ 預(yù)變性 30 s；95 ℃ 變性15 s，退火 20 s，72 ℃延伸30 s，40 個(gè)循環(huán)。按qTOWER3 PCR儀默認(rèn)熔解曲線程序進(jìn)行溶解曲線分析。各目的基因引物序列及退火溫度見(jiàn)表2。

表1 qPCR 反應(yīng)體系Table 1 qPCR reaction solution

表2 本研究中qPCR 所需引物Table 2 Primers used for quantitative PCR in this study

1.4 水質(zhì)因子檢測(cè)方法

1.5 數(shù)據(jù)分析

文中的對(duì)數(shù)取值時(shí)底數(shù)為10，濃度降低量為lg(C0·C?1)，其中 C0表示處理前水源水中 ARGs濃度；C表示處理后水體中ARGs濃度。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 Excel 2010 軟件處理，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并使用SPSS 22.0軟件分析數(shù)據(jù)差異，顯著性水平設(shè)為P<0.05。

2 結(jié)果

2.1 沉淀和氧化處理對(duì)水質(zhì)因子的影響

如表3所示，水樣中SS和COD的質(zhì)量濃度最高，其在水源水中的質(zhì)量濃度分別為9～36 mg·L?1和9.2～22.2 mg·L?1，經(jīng)沉淀處理后分別降至2～12 mg·L?1和 2.9～4.9 mg·L?1，氧化處理后分別降至2～6 mg·L?1和≤0.8 mg·L?1。其他水質(zhì)因子在各水樣中始終保持在較低水平。

2.2 優(yōu)勢(shì)ARGs

在所有檢測(cè)的樣品中sul1、sul2、floR 和 tetX等ARGs的Ct值較小 (表4)，表明其在樣品中的含量較高，為樣品中的絕對(duì)優(yōu)勢(shì)ARGs，因而將它們作為目標(biāo)ARGs用于后續(xù)分析比較沉淀及氧化處理前后不同樣品中ARGs的變化情況。

表4 樣品中ARGs的Ct值檢測(cè)結(jié)果Table 4 Ct value of ARGs in samples

2.3 水樣中ARGs的濃度變化

水源水中ARGs濃度最高為2.3×107～4.7×107copies·mL?1，其次為蓄水沉淀池水體 (2.1×106～1.1×107copies·mL?1），最低為氧化消毒水體 (6.7×105～1.2×106copies·mL?1，圖 1)。

圖1 各樣品中ARGs總濃度變化注：不同字母代表顯著差異 (P<0.05)。Fig. 1 Total ARGs concentrations in samplesNote: Different letters indicate significant difference (P<0.05).

如圖2所示，在所檢測(cè)樣品中sul1、sul2、floR和tetX 4種ARGs的濃度較高，且各個(gè)采樣時(shí)間點(diǎn)的樣品中以上4種ARGs均被檢出。其中，sul2 的濃度為 6.6×105～4.1×107copies·mL?1，sul1 為3.0×103～2.2×105copies·mL?1，tetX 為 7.4×101～2.0×104copies·mL?1，floR 為 1.4×101～1.5×102copies·mL?1。

圖2 不同時(shí)刻相同采樣點(diǎn)各種優(yōu)勢(shì)ARGs的濃度Fig. 2 Concentrations of various dominant ARGs at same sampling point at different time

對(duì)比同一取樣點(diǎn)的3次取樣可知水源水和蓄水沉淀池水體中ARGs濃度隨時(shí)間變化較大(圖3)，其濃度范圍分別介于2.3×107～4.7×107copies·mL?1和 2.1×106～1.1×107copies·mL?1。氧化消毒水體中ARGs濃度維持在較低水平，3次取樣的ARGs總濃度隨時(shí)間變化不明顯，分別為3.5×107、5.0×107和 4.7×107copies·mL?1。

圖3 3次取樣時(shí)ARGs總濃度對(duì)比Fig. 3 Comparison of total ARGs concentrations for three samplings

2.4 沉淀和氧化處理對(duì)水體ARGs去除效果

蓄水池水經(jīng)沉淀處理后的水樣和氧化消毒處理后水體中sul2的濃度分別較水源水下降了3.1×107和 3.6×107copies·mL?1，去除效果為 0.86 lg (P<0.05) 和1.58 lg (P<0.05)。其中氧化消毒對(duì)水體中sul1和tetX去除能力較強(qiáng)，分別達(dá)到0.94 lg (P<0.05) 和1.30 lg (P<0.05)。各水樣中sul2的濃度高出floR、sul1和tetX幾個(gè)數(shù)量級(jí)，sul2濃度與水樣中總ARGs的濃度接近，水樣中總ARGs的濃度下降程度與sul2在水樣中的濃度變化相近。

3 討論

3.1 養(yǎng)殖水體中ARGs的來(lái)源及濃度

在自然水體環(huán)境中ARB是ARGs的主要傳播介質(zhì)，細(xì)胞內(nèi)的ARGs濃度要遠(yuǎn)高于細(xì)胞外[24]，養(yǎng)殖水環(huán)境中ARGs的去除主要針對(duì)胞內(nèi)。Su等[9]研究發(fā)現(xiàn)，在養(yǎng)殖期間水樣中ARGs濃度呈下降趨勢(shì)，水源水中ARGs總濃度顯著高于蝦池。本結(jié)果顯示近海水源水中ARGs的濃度遠(yuǎn)高于蓄水池水體，表明養(yǎng)殖環(huán)境中ARGs主要來(lái)自養(yǎng)殖水源水。而Wang等[25]的研究結(jié)果卻顯示蝦池水中ARGs總濃度高于水源水和養(yǎng)殖尾水。可能由于該池養(yǎng)殖年限久導(dǎo)致ARGs在池塘沉積物中累積，又因未對(duì)沉積物進(jìn)行氧化消毒處理，致使沉積物中的ARGs不斷遷移到養(yǎng)殖水環(huán)境中，因而被大量檢出。

該養(yǎng)殖用水中主要的ARGs是磺胺類，其中在近海水源水中sul2濃度介于2.3×107～4.7×107copies·mL?1(圖2)，有研究表明，磺胺類藥物的廣泛使用會(huì)導(dǎo)致環(huán)境中各種細(xì)菌對(duì)磺胺類抗生素的抗性顯著增加[26]，說(shuō)明該地區(qū)歷史上常用的抗生素可能是磺胺類藥物。Luo等[27]對(duì)海河中ARGs的調(diào)查也發(fā)現(xiàn)sul2水平顯著高于sul3和四環(huán)素類等其他種類。在關(guān)于珠江水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境ARGs 的研究中，同樣發(fā)現(xiàn)磺胺類 ARGs 在養(yǎng)殖水體和沉積物中普遍存在，且檢出率和水平均高于其他種類[28]。上述結(jié)果與本研究結(jié)果一致，說(shuō)明磺胺類的宿主菌對(duì)這些環(huán)境的耐受能力強(qiáng)，有利于這類基因在環(huán)境中的廣泛傳播。

圖3顯示，對(duì)比同一取樣點(diǎn)3次采樣的ARGs，水源水和蓄水沉淀池水體中ARGs的濃度變化均較大。Liu等[29]的研究表明，在人為干擾少的環(huán)境中，ARGs在雨季的檢出濃度低于旱季，推測(cè)降雨可能會(huì)稀釋水環(huán)境中的ARGs。然而有研究顯示，生活污水等的排放不僅增加了地表水中抗生素的濃度，還會(huì)直接增加ARGs的濃度[30]。Ahmed等[31]和Li等[32]在對(duì)人類活動(dòng)頻繁的流域及城市排水系統(tǒng)等的研究中也發(fā)現(xiàn)，雨季的水樣和沉積物樣品中ARGs的濃度和種類均高于旱季。推測(cè)雨季可能給ARB提供了適宜的增殖環(huán)境，同時(shí)雨水將積累在生活社區(qū)內(nèi)的ARGs及ARB輸入開(kāi)闊水域。本實(shí)驗(yàn)中的水源水位于開(kāi)放水域，且該水域受自然和人為活動(dòng)影響大，其水體中ARGs濃度的變化受多種因素影響。蓄水池水體屬于半開(kāi)放水體且面積較小，主要受天氣變化影響，且影響較大。在本次實(shí)驗(yàn)的采樣周期中遇到降雨，導(dǎo)致蓄水池中ARGs濃度明顯下降。而氧化消毒水體中ARGs濃度變化小，可能是由于該養(yǎng)殖備用水位于養(yǎng)殖大棚內(nèi)，因而不受外界環(huán)境變化影響。由此可知，養(yǎng)殖用水經(jīng)氧化處理后在無(wú)外界干擾時(shí)，環(huán)境中的ARGs可以維持在低濃度且相對(duì)穩(wěn)定的水平。

3.2 沉淀和氧化處理對(duì)水體中ARGs的影響

沉淀處理后的水體中總ARGs濃度與近海水源水相比下降了0.86 lg，其中floR下降了0.34 lg，sul1下降了0.17 lg，sul2下降了0.86 lg，tetA下降了?0.32 lg (表5)。由于在該地區(qū)磺胺類抗性基因sul2是養(yǎng)殖水體中主要的ARGs，其濃度最高，且在沉淀處理后下降比例最大，因此沉淀處理對(duì)sul2的去除最明顯。養(yǎng)殖前期提前向蓄水池進(jìn)水，經(jīng)沉淀可有效降低水體中ARGs的濃度，這與Su等[33]和Wang等[25]的研究結(jié)果相似。其中，tetA的去除效果不明顯，根據(jù)Nolvak等[34]的研究結(jié)果顯示，可能是由于tetA在此環(huán)境中具有更廣的宿主范圍。此外，Huang等[35]的研究表明水體中ARGs含量降低主要是由水體中ARB向沉積物中遷移導(dǎo)致。養(yǎng)殖用水雖然可以經(jīng)蓄水池沉淀而降低水體中ARB和ARGs的含量，但同時(shí)也會(huì)造成沉積物中ARGs含量升高。同時(shí)，沉積物與水體中的ARGs關(guān)聯(lián)性很強(qiáng)，在高溫時(shí)會(huì)促進(jìn)ARB的繁殖和水力擾動(dòng)均會(huì)使ARGs進(jìn)入水體[36]，因此需要開(kāi)發(fā)適合的技術(shù)方法來(lái)去除沉積物中的ARGs。

表5 沉淀及氧化處理對(duì)水體中ARGs去除量比較Table 5 Comparison of removal effects of ARGs in water by sedimentation and oxidation treatment lg

目前，關(guān)于氯制劑對(duì)海水水體中ARGs去除的相關(guān)研究較少，本研究旨在探究海水養(yǎng)殖中氯制劑對(duì)養(yǎng)殖水體中ARGs的去除效果。由于氯制劑中的有效成分為次氯酸 (HClO) 和次氯酸根離子 (ClO?)，其中HClO的氧化能力強(qiáng)于ClO?，pH會(huì)通過(guò)影響HClO的含量來(lái)影響氯制劑的氧化能力[37]；因而，在海水養(yǎng)殖中應(yīng)考慮消毒后pH變化對(duì)后續(xù)養(yǎng)殖生產(chǎn)的可能影響。Stange等[38]的研究表明使用氯制劑30 min，可使ARGs減少0.8～2.8 lg，與本實(shí)驗(yàn)經(jīng)強(qiáng)氯精氧化消毒處理后水體中總的ARGs與蓄水池水體相比下降了0.72 lg的結(jié)果類似。據(jù)報(bào)道在低濃度的氯化作用下細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，促進(jìn)質(zhì)粒在細(xì)菌細(xì)胞中的復(fù)制，增加存活細(xì)菌細(xì)胞中質(zhì)粒的拷貝數(shù)，從而導(dǎo)致水中ARGs的相對(duì)豐度增加[39]。Sullivan等[40]的研究表明氯制劑可完全去除水體中的ARB，但無(wú)法完全除去ARGs，因而不能控制氧化處理后ARB的再生。有關(guān)氯制劑對(duì)水體中ARB攜帶ARGs的氧化去除作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

3.3 影響?zhàn)B殖水環(huán)境中ARGs去除的因素

水環(huán)境中的有機(jī)質(zhì)還原性物質(zhì)能與氧化劑發(fā)生反應(yīng)，消耗氧化劑[41]，在污水處理系統(tǒng)中上述還原性物質(zhì)的含量顯著影響水體中ARGs的氧化去除率[19]。本研究結(jié)果顯示水源水中的COD遠(yuǎn)高于經(jīng)沉淀池和氧化消毒池水體，表明在進(jìn)行氧化消毒處理時(shí)會(huì)由于水體中還原性物質(zhì)的存在而導(dǎo)致氧化劑的消耗。此外，Sharma等[42]的研究顯示氯制劑對(duì)鳥(niǎo)嘌呤和胸腺嘧啶有更強(qiáng)的氧化作用，而對(duì)腺嘌呤和胞嘧啶的氧化作用較弱。本實(shí)驗(yàn)中，不同ARGs的去除效果不同，可能與各種ARGs中腺嘌呤和胞嘧啶的占比有關(guān)。此外，具有不同種類抗性基因的同類細(xì)菌對(duì)氯制劑的耐受程度也不同，如紅霉素抗性菌對(duì)氯有更強(qiáng)的耐受能力[37]，可能與其抗性機(jī)制有關(guān)。由此可知，氯制劑對(duì)ARGs的去除作用有一定的局限性，因而，需要相關(guān)技術(shù)手段配合以達(dá)到最優(yōu)效果。Zhao 等[43]的研究表明，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中就氯制劑、溴制劑及高錳酸鉀等而言，氯制劑對(duì)ARGs的氧化去除效果最好，高錳酸鉀在水體中氧化效果更持久。本研究中所使用強(qiáng)氯精的質(zhì)量濃度為40 mg·L?1，它不僅可高效去除養(yǎng)殖水體中的ARGs，且其價(jià)格相對(duì)低廉，具有明顯的市場(chǎng)優(yōu)勢(shì)[43]。

總而言之，在養(yǎng)殖前池塘清理和消毒時(shí)使用強(qiáng)氯精對(duì)水源水進(jìn)行氧化消毒，可有效降低水體中ARGs的含量，從源頭防控ARGs在養(yǎng)殖環(huán)境中的傳播。通常水源水中存在一定量的還原性物質(zhì)，這有可能對(duì)氧化劑的氧化性能產(chǎn)生一定的影響，因此，在對(duì)水源水進(jìn)行氧化消毒前應(yīng)測(cè)定其COD濃度，再根據(jù)所需處理的水體容量和所選擇氧化劑的氧化性能準(zhǔn)確測(cè)算氧化劑用量。此外，對(duì)蝦養(yǎng)殖絕大多數(shù)為海水養(yǎng)殖，其水環(huán)境pH值一般在8左右，堿性環(huán)境對(duì)一些氧化劑的氧化能力有削弱作用。在使用氧化劑進(jìn)行消毒時(shí)，這些環(huán)境因素都應(yīng)被考慮到，以確保其對(duì)ARGs的去除效果。

4 結(jié)論

近海的養(yǎng)殖水源水是養(yǎng)殖環(huán)境中ARGs的主要來(lái)源；在該地區(qū)近海水源水、蓄水池水體及消毒處理后的池塘養(yǎng)殖備用水中磺胺類抗性基因最高；經(jīng)蓄水池沉淀及強(qiáng)氯精氧化消毒處理，可明顯降低水體中常見(jiàn)ARGs的含量。水體中的COD含量及其他還原性物質(zhì)會(huì)影響氧化劑的氧化效果，對(duì)不同環(huán)境應(yīng)選取不同的氧化劑，或?qū)追N氧化劑搭配使用，有利于提高漁用氧化劑對(duì)水體中ARGs的去除效果。