劉景彬, 黃偉麗, 陳麗英

（云浮市婦幼保健院檢驗(yàn)科, 廣東 云浮 527300）

0 引言

甲狀腺相關(guān)激素檢查臨床上主要用于甲狀腺功能相關(guān)疾病的診療, 但隨著對(duì)其深入研究發(fā)現(xiàn), 甲狀腺相關(guān)激素異常與人體多個(gè)系統(tǒng)疾病存在一定相關(guān)性, 因此, 甲狀腺相關(guān)激素檢查廣泛應(yīng)用于臨床。檢測(cè)甲狀腺相關(guān)激素的方法有很多種, 目前最常用的方法是化學(xué)發(fā)光免疫分析法。為了滿足臨床需要, 本科新購(gòu)置了一臺(tái)亞輝龍iFlash3000C全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀, 根據(jù)ISO15189 CNAS-CL02：2012《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)基和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》, 對(duì)新購(gòu)置的儀器實(shí)驗(yàn)室必須對(duì)其方法學(xué)分析性能予以驗(yàn)證, 并對(duì)廠家提供的主要性能評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)予以確認(rèn)[1]。因此, 本研究參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)文件（CLSI）、ISO15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求》及ISO17025相關(guān)文件[2-4], 并以東曹AIA2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀為參照, 對(duì)iFlash3000C全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)T3、T4、FT3、FT4及TSH的正確度、精密度、攜帶污染率、靈敏度及與參照分析儀檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性等性能進(jìn)行了評(píng)價(jià), 現(xiàn)報(bào)導(dǎo)如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

相關(guān)性評(píng)價(jià)標(biāo)本來源于醫(yī)院體檢科健康體檢人員的標(biāo)本, 其它評(píng)價(jià)標(biāo)本均來源于各分析儀的參考品及質(zhì)控品。

1.2 儀器與試劑

iFlash3000C全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、試劑、參考品及質(zhì)控品（深圳亞輝龍生物科技）；東曹AIA2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、試劑、參考品及質(zhì)控品（日本東曹）。

1.3 方法

分析前做好儀器維護(hù)及校準(zhǔn), 分析期間做好室內(nèi)質(zhì)控, 所有操作均嚴(yán)格按照儀器和試劑說明書及科室SOP操作規(guī)程進(jìn)行。

1.3.1 正確度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

采用iFlash3000A分析儀分別測(cè)定儀器配套的高、低正確度參考品各1份, 每份測(cè)定2次, 分別計(jì)算均值（）及相對(duì)偏倚（Bias%）。計(jì)算公式：（Bias%）=（-靶值）/靶值×100%。

1.3.2 精密度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

參考CLSIEP5-A2文件, 批內(nèi)精密度：對(duì)高、低兩個(gè)濃度水平的同一質(zhì)控品同一時(shí)間內(nèi)連續(xù)測(cè)定20次。批間精密度：高、低兩個(gè)濃度水平的同一質(zhì)控品, 每天測(cè)定一次, 連續(xù)測(cè)20天。分別計(jì)算各濃度水平的、標(biāo)準(zhǔn)差（S）及變異系數(shù)（CV）。

1.3.3 攜帶污染率評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

取1份高濃度標(biāo)本連續(xù)測(cè)定3次（H1, H2, H3）, 再取1份低濃度標(biāo)本連續(xù)測(cè)定 3次（L1, L2, L3）。計(jì)算公式：攜帶污染率（%）=（L1-L3）/（H3-L3）×100 。

1.3.4 靈敏度評(píng)價(jià)

實(shí)驗(yàn)分別取T3, T4, FT3, FT4及TSH試劑盒中空白液連續(xù)測(cè)定5次, 計(jì)算和S, 并以2S作為相應(yīng)檢測(cè)項(xiàng)目的靈敏度。

1.3.5 相關(guān)性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

采用iFlash3000C分析儀與東曹AIA2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀對(duì)20份臨床標(biāo)本進(jìn)行T3、T4、FT3、FT4及TSH水平對(duì)比檢測(cè), 評(píng)估兩臺(tái)儀器檢測(cè)結(jié)果的一致性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 精密度評(píng)價(jià)結(jié)果

iFlash3000C分析儀檢測(cè)T3、T4、FT3、FT4及TSH批內(nèi)和批間精密度CV%值分別為1.86%～5.37%和2.05%～7.01%, 均小于廠家給定的允許范圍（≤8.0%）, 結(jié)果見表1、2。

表1 批內(nèi)精密度CV（%）評(píng)價(jià)結(jié)果（n=20）

2.2 正確度評(píng)價(jià)結(jié)果

iFlash3000C分析儀測(cè)定T3、T4、FT3、FT4及TSH的相對(duì)偏倚（Bias%）在-7.58%～7.63%之間, 均小于廠家允許要求范圍（≤10.0%）, 結(jié)果見表3。

表3 iFlash3000C分析儀測(cè)定T3、T4、FT3、FT4及TSH相對(duì)偏倚（Bias%）結(jié)果

2.3 攜帶污染率評(píng)價(jià)結(jié)果

iFlash3000C分析儀測(cè)定T3、T4、FT3、FT4及TS H攜帶污染率均低于廠家要求（≤1.0%）, 結(jié)果見表4。

表4 iFlash3000C分析儀測(cè)定T3、T4、FT3、FT4及TSH攜帶污染率（%）評(píng)價(jià)結(jié)果

2.4 靈敏度評(píng)價(jià)結(jié)果

iFlash3000C分析儀檢測(cè)T3、T4、FT3、FT4及TSH指標(biāo)的靈敏度分別為0.16nmol/L、0.25nmol/L、0.19pmol/L、0.23pmol/L及0.11mIU/L, 與廠家提供的基本一致。

2.5 相關(guān)性

iFlash3000C分析儀檢測(cè)T3、T4、FT3、FT4及TSH的結(jié)果與東曹AIA2000分析儀檢測(cè)結(jié)果具有良好的相關(guān)性, 相關(guān)系數(shù)（r）分別為0.9265、0.9547、0.9354、0.9402及0.9023, 符合臨床質(zhì)量要求。

表2 批間精密度CV（%）評(píng)價(jià)結(jié)果（n=20）

3 討論

甲狀腺是人體內(nèi)主要分泌T3、T4等甲狀腺功能相關(guān)激素的一個(gè)重要內(nèi)分泌器官, 當(dāng)甲狀腺分泌的激素紊亂, 導(dǎo)致甲狀腺功能亢進(jìn)或甲狀腺功能減退, 進(jìn)而影響人體內(nèi)多個(gè)系統(tǒng)功能異常。若甲狀腺出現(xiàn)實(shí)質(zhì)性病變時(shí), 會(huì)導(dǎo)致甲狀腺囊腫、甲狀腺結(jié)節(jié), 嚴(yán)重者會(huì)引發(fā)甲狀腺癌[5-7], 同時(shí)有研究表明, 人體多個(gè)系統(tǒng)器官發(fā)生實(shí)質(zhì)性病變也會(huì)引起甲狀腺激素水平異常表達(dá)。因此, 檢測(cè)甲狀腺功能相關(guān)激素對(duì)甲狀腺功能及其相關(guān)性疾病的診療工作具有一定的必要性和重要性。

為臨床疾病診療提供科學(xué)、準(zhǔn)確及可靠的檢測(cè)結(jié)果是實(shí)驗(yàn)室最核心和基本的要求, 而準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)結(jié)果有賴于分析儀的檢測(cè)性能, 檢測(cè)系統(tǒng)及儀器性能評(píng)價(jià)是保障臨床檢驗(yàn)質(zhì)量的重要措施[8-9]。目前化學(xué)發(fā)光免疫分析法是檢測(cè)甲狀腺功能相關(guān)激素最常用的方法, 其中亞輝龍iFlash3000C全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀是我國(guó)自主研發(fā)的一款運(yùn)用先進(jìn)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù), 具有檢測(cè)快速、準(zhǔn)確、自動(dòng)化高及檢測(cè)項(xiàng)目覆蓋范圍廣（如貧血、骨標(biāo)志物、腫瘤、甲狀腺、心肌標(biāo)志物、激素及傳染?。┑榷喾N特點(diǎn), 廣泛應(yīng)用于臨床多種疾病的診療[10-12]。但不同實(shí)驗(yàn)室因工作人員操作習(xí)慣、中介水質(zhì)、室內(nèi)溫度及濕度等條件存在很大差異, 進(jìn)而影響其各項(xiàng)檢測(cè)性能的穩(wěn)定性[13-14]。因此, 每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須根據(jù)自身的檢測(cè)系統(tǒng)和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)環(huán)境對(duì)新購(gòu)置的儀器進(jìn)行檢測(cè)各項(xiàng)性能學(xué)評(píng)價(jià)和驗(yàn)證, 只有待儀器驗(yàn)證通過后才能用于臨床檢測(cè), 且在日后使用過程中還要按一定周期進(jìn)行再次驗(yàn)證。

精密度是反映同一標(biāo)本同一時(shí)間內(nèi)檢測(cè)多次結(jié)果之間的一致性和重現(xiàn)性, 其性能評(píng)價(jià)是檢測(cè)系統(tǒng)和儀器性能學(xué)評(píng)價(jià)中最基本的一項(xiàng)性能指標(biāo)。本評(píng)價(jià)結(jié)果顯示, 亞輝龍iFlash3000C檢測(cè)高低值T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的批內(nèi)和批間精密度CV%值分別為1.86%～5.37%和2.05%～7.01%, 均小于廠家要求（≤8.0%）, 說明該分析儀在本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)環(huán)境內(nèi)檢測(cè)T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的重復(fù)性好, 符合質(zhì)量要求。

正確度是反映在一定條件下通過對(duì)定值的參考品、質(zhì)控品或校準(zhǔn)品進(jìn)行多次測(cè)定的均值與靶值之間的吻合程度, 計(jì)算其相對(duì)偏倚（Bias%）, 若Bias%在廠家規(guī)定范圍內(nèi)則可認(rèn)為正確度評(píng)價(jià)可接受。按照NCCLS EP15-A[6]文件和 ISO15189文件中對(duì)正確度的評(píng)價(jià)要求, 可通過比對(duì)定值的校正品來對(duì)系統(tǒng)的正確度進(jìn)行驗(yàn)證。本評(píng)價(jià)結(jié)果顯示, 亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測(cè)高低值T3、T4、FT3、FT4及TSH水平均值與靶值的Bias%在-7.58%～7.63%之間, 均小于廠家要求（≤10.0%）, 同時(shí)亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測(cè)結(jié)果與參加衛(wèi)健委會(huì)臨床檢驗(yàn)中心能力比對(duì)的東曹AIA2000分析儀的結(jié)果具有良好的相關(guān)性（r＞0.900）, 表明該分析儀正確度良好, 性能驗(yàn)證符合臨床室驗(yàn)室質(zhì)量要求。

攜帶污染是評(píng)價(jià)檢測(cè)結(jié)果可能受到該標(biāo)本之前或之后標(biāo)本的攜帶交叉污染影響, 確保檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性和準(zhǔn)確性, 而靈敏度是評(píng)價(jià)分析儀檢測(cè)待測(cè)物最低水平的能力, 對(duì)疾病早期診斷具有重要的意義, 避免漏診。本評(píng)價(jià)結(jié)果顯示, 亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測(cè)T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的攜帶污染率極低（均＜1.0%）, 符合儀器廠家要求, 這可能與加樣和測(cè)試過程均采用一次性吸頭和反應(yīng)杯有關(guān)。同時(shí)亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測(cè)T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的靈敏度極高, 與廠家提供的基本一致, 表明該分析儀具有很強(qiáng)的檢測(cè)能力。

綜上所述, 亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測(cè)T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的正確度、精密度、攜帶污染、靈敏度及結(jié)果比對(duì)的相關(guān)性等方法學(xué)性能評(píng)價(jià)指標(biāo)符合實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量要求, 能為臨床上甲狀腺功能及相關(guān)疾病的診療工作提供準(zhǔn)確、可靠的檢測(cè)結(jié)果, 滿足臨床要求。