魏 娜

（盤錦市盤山縣疾病預(yù)防控制中心，遼寧 盤錦 124107）

小兒腹瀉是臨床中常見的一種兒科疾病，主要是由于病毒、細(xì)菌等感染所導(dǎo)致，患兒以腹瀉為臨床癥狀表現(xiàn)的一種疾病，其中以細(xì)菌感染較為常見[1]。這是因?yàn)閮和陨須夤芙M織發(fā)育尚未完全，其抵抗力較弱，容易受到病原微生物的感染。臨床中患兒主要表現(xiàn)為大便次數(shù)增多、大便性狀改變等癥狀，同時(shí)還可能伴有發(fā)熱、腹痛及嘔吐等癥狀[2]。通常情況下，患兒起病較急，如未進(jìn)行及時(shí)治療，長(zhǎng)時(shí)間腹瀉可能會(huì)導(dǎo)致患兒的機(jī)體水分大量丟失，引起患兒出現(xiàn)水電解質(zhì)紊亂、脫水等現(xiàn)象，嚴(yán)重時(shí)還可能導(dǎo)致患兒出現(xiàn)休克。這不僅會(huì)損害患兒的身體健康，影響患兒正常的生長(zhǎng)發(fā)育，還可能危及患兒的生命安全[3]。由于不同病因治療方法也各不相同，因此及時(shí)采取針對(duì)性治療對(duì)改善患兒臨床癥狀、促進(jìn)患兒疾病恢復(fù)具有重要意義。近年來，隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，微生物檢驗(yàn)在臨床診斷中的應(yīng)用范圍越來越廣泛，其中就包括腹瀉疾病的診斷[4-5]。為了研究糞便微生物檢驗(yàn)在兒童腹瀉診斷中的應(yīng)用效果，本研究對(duì)抽取的腹瀉兒童樣本均實(shí)施了糞便微生物檢驗(yàn)，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析我疾控中心于2014年5月至2019年5月抽取的80例腹瀉兒童樣本作為本次研究對(duì)象，其中男性患兒49例，女性患兒31例，年齡4個(gè)月～8歲，平均年齡（5.37±1.37）歲，病程2～11 d，平均病程（6.83±1.63）d。所有患兒在入院時(shí)均表現(xiàn)為大便次數(shù)增多及性狀改變，有患兒出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐等癥狀。本次研究中所有患者家屬均同意并且簽署知情同意書，本中心也批準(zhǔn)本次研究。納入標(biāo)準(zhǔn)：家長(zhǎng)同意研究的患兒樣本；診斷為腹瀉疾病的患兒樣本；各項(xiàng)臨床資料齊全的患兒。排除標(biāo)準(zhǔn)：不合格的患兒樣本。

1.2 方法 對(duì)本次研究中所抽取的患兒糞便標(biāo)本均實(shí)施糞便微生物檢驗(yàn)，并按照《全國(guó)檢驗(yàn)操作流程》進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，具體方法為：在確定所有受試兒童后，收集患兒的基本數(shù)據(jù)，包括腹瀉開始時(shí)間、腹瀉頻次、大便特征、用藥情況等，與患兒家屬進(jìn)行溝通，解釋糞便微生物檢測(cè)的原理和操作步驟，使患兒家屬及其患兒盡可能配合研究。具體測(cè)試步驟如下：①樣品采集。為每個(gè)患兒進(jìn)行樣本采集，需要準(zhǔn)備五個(gè)無(wú)菌棉簽。根據(jù)多點(diǎn)采集法，如果患兒標(biāo)本有膿、血或黏液，需要單獨(dú)采集。如果糞便是液體，則盡可能多地選擇絮狀物，并盡可能多地將其包裹在棉簽表面。采集后將樣本放入皮氏培養(yǎng)皿中。然后將其送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢查。收集約5 g糞便，將其置于無(wú)菌糞便取樣杯中。部分兒童需要采集病毒和寄生蟲樣本。②檢測(cè)的具體措施。采集樣品接種在SS板和McConkey板上。需要在35 ℃下保持18～24 h。培養(yǎng)后，根據(jù)結(jié)果對(duì)病原體進(jìn)行分離和鑒定。通過自動(dòng)微生物鑒定和分析進(jìn)行分離，然后采用K-B法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，以確定患者的抗生素應(yīng)用情況。培養(yǎng)條件為35 ℃，培養(yǎng)18～24 h。檢測(cè)后，觀察患者的細(xì)菌抑制情況，并對(duì)藥敏結(jié)果和病原菌類型進(jìn)行分析。藥敏試驗(yàn)后，選擇免疫層析膠體金進(jìn)行輪狀病毒檢測(cè)。糞便樣品需冷凍，稀釋1∶9，靜置15 min后選擇合適的樣品進(jìn)行解釋；用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)小二分法病毒。檢測(cè)結(jié)果采用逆轉(zhuǎn)錄模板法進(jìn)行PCR。對(duì)于寄生蟲檢測(cè)，需要將樣品制成固定膜，并在顯微鏡下觀察。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察本次研究中患兒的糞便微生物檢出情況，并且記錄病原菌的菌群數(shù)量以及占比情況。詳細(xì)分析檢驗(yàn)的具體結(jié)果，記錄具體病原菌的檢出比例情況，觀察不同病原菌對(duì)不同藥物產(chǎn)生耐藥性的情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS20.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，使用χ2和%表示計(jì)數(shù)資料，P＜0.05表示數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 80例兒童腹瀉病原菌的分布情況 本次研究中共有80例患兒，通過對(duì)所有患兒均實(shí)施糞便微生物檢驗(yàn)后，其中共檢測(cè)出63例菌株，檢出率為78.75%；對(duì)檢測(cè)出的菌落群進(jìn)行觀察分析，志賀菌26例，占比41.27%，沙門菌11例，占比17.46%，致病性大腸埃希菌13例，占比20.63%，產(chǎn)毒性大腸桿菌10例，占比15.87%，其他3例，占比4.76%，其中志賀菌占比41.27%分別高于致病性大腸埃希菌的20.63%及沙門菌的17.46%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中志賀菌與致病性大腸埃希菌（χ2=6.276，P=0.012），志賀菌與沙門菌（χ2=8.609，P=0.003）。

2.2 80例兒童腹瀉病原菌耐藥性具體分布情況 志賀菌對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥性共17例，其中對(duì)頭孢帕酮產(chǎn)生耐藥性8例，對(duì)頭孢噻肟產(chǎn)生耐藥性5例，對(duì)頭孢三嗪產(chǎn)生耐藥性4例，對(duì)環(huán)丙沙星產(chǎn)生耐藥性7例，對(duì)阿莫西林產(chǎn)生耐藥性4例；致病性大腸埃希菌對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥性共13例，對(duì)頭孢帕酮產(chǎn)生耐藥性5例，對(duì)頭孢噻肟產(chǎn)生耐藥性3例，對(duì)頭孢三嗪產(chǎn)生耐藥性2例，對(duì)環(huán)丙沙星產(chǎn)生耐藥性6例，對(duì)阿莫西林產(chǎn)生耐藥性5例；沙門菌對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥性共23例，對(duì)頭孢帕酮產(chǎn)生耐藥性8例，對(duì)頭孢噻肟產(chǎn)生耐藥性7例，對(duì)頭孢三嗪產(chǎn)生耐藥性7例，對(duì)環(huán)丙沙星產(chǎn)生耐藥性12例，對(duì)阿莫西林產(chǎn)生耐藥性13例；產(chǎn)毒性大腸肝菌對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥性共10例，對(duì)頭孢帕酮產(chǎn)生耐藥性7例，對(duì)頭孢噻肟產(chǎn)生耐藥性2例，對(duì)頭孢三嗪產(chǎn)生耐藥性2例，對(duì)環(huán)丙沙星產(chǎn)生耐藥性5例，對(duì)阿莫西林產(chǎn)生耐藥性6例，幾類藥物中，病原菌對(duì)頭孢哌酮產(chǎn)生耐藥性概率最高，頭孢噻肟、頭孢三嗪及環(huán)丙沙星和阿莫西林產(chǎn)生耐藥性較低，所有病菌對(duì)藥物耐藥性概率對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 80例腹瀉患兒病原菌季節(jié)分布情況 在80例患兒中出現(xiàn)63例感染病原菌，主要分布在夏季和秋季，夏季出現(xiàn)28例，秋季出現(xiàn)35例，可見患兒在夏秋季易受到病原菌的感染。

3 討論

腹瀉是消化內(nèi)科的一種常見疾病，主要指排便次數(shù)明顯增加同時(shí)大便呈稀薄狀，水分增加，每日排便量超過200 g[6]。其中兒童腹瀉可以分為幾種不同類型，以細(xì)菌性腹瀉最為常見，包括真菌、細(xì)菌、病毒及原蟲等[7]。在患病以后，患兒主要表現(xiàn)為大便次數(shù)多，性狀改變，同時(shí)伴發(fā)熱、嘔吐、腹痛等癥狀，這不僅嚴(yán)重影響了患兒的日常生活，同時(shí)如果腹瀉癥狀未及時(shí)得到控制，患兒還可能會(huì)出現(xiàn)水電解質(zhì)紊亂或脫水現(xiàn)象，嚴(yán)重時(shí)還可能導(dǎo)致其死亡。由于不同病原微生物引起，其治療方法也各不相同。因此及時(shí)了解導(dǎo)致患兒腹瀉的具體病原菌，并且及時(shí)采取相應(yīng)的針對(duì)性治療對(duì)于腹瀉患兒來說具有重要意義[8]。

近年來，隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)也隨之不斷發(fā)展，使得醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的自動(dòng)化水平也在不斷提高，微生物檢驗(yàn)技術(shù)成為了臨床診斷中一項(xiàng)重要的檢查技術(shù)。根據(jù)相關(guān)研究顯示，將糞便微生物檢查技術(shù)運(yùn)用于兒童腹瀉疾病的診斷中，能夠有效提高患兒的檢驗(yàn)準(zhǔn)確率，為患兒的針對(duì)性治療提供有效依據(jù)[9]。在實(shí)際檢驗(yàn)的過程中，通過將采集的糞便標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，可以有效分離出其中的致病菌株，在這個(gè)過程中如果發(fā)現(xiàn)了耐藥菌，則能夠從分子分型中明確患兒感染的具體原因，最終為治療工作的開展提供可靠依據(jù)。本次研究中，通過對(duì)80例腹瀉兒童樣本進(jìn)行糞便微生物檢驗(yàn)，之后再實(shí)施細(xì)菌培養(yǎng)并利用全自動(dòng)微生物鑒定儀進(jìn)行鑒別，以此來分析所有患兒的致病菌株種類及占比。發(fā)現(xiàn)80例患兒樣本中共檢測(cè)出63例致病菌株，檢出率為78.75%。再通過對(duì)致病菌株進(jìn)行分離，發(fā)現(xiàn)志賀菌占比最高，占所有致病菌株的41.27%，其余占比大小依次為致病性大腸埃希菌、沙門菌及產(chǎn)毒性大腸桿菌等。將志賀菌占比與致病性大腸埃希菌占比、沙門菌占比進(jìn)行對(duì)比后，發(fā)現(xiàn)志賀菌占比明顯更高，差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

得到的具體指導(dǎo)依據(jù)，①6個(gè)月以下兒童體內(nèi)IgA含量高，機(jī)體抵抗力強(qiáng)。隨著年齡的增長(zhǎng)，IgA將減少，耐藥性將降低，感染病原微生物的風(fēng)險(xiǎn)將增加。1歲以上兒童的腸道功能會(huì)逐漸改善，對(duì)病原微生物的抵抗力也會(huì)增強(qiáng)。此時(shí)，感染率將下降。②病原微生物分布在80例患兒中，分離出60株病原微生物，其中細(xì)菌主要為大腸桿菌和沙門氏菌。根據(jù)醫(yī)院以往的治療經(jīng)驗(yàn)，在感染的病毒中，輪狀病毒感染最為常見。一旦被感染，將影響患兒身體對(duì)葡萄糖和水的吸收，導(dǎo)致其腹瀉。這提醒我們要重視嬰幼兒腹瀉輪狀病毒感染引起的急性腹瀉的診斷和治療，提高治療的針對(duì)性，改善患兒預(yù)后。③季節(jié)分布流行病學(xué)研究表明，嬰幼兒急性腹瀉的發(fā)病率在夏季和秋季最高。基于此，為進(jìn)一步探討急性腹瀉患兒病原微生物感染的季節(jié)規(guī)律，本研究比較了夏季和秋季急性腹瀉患兒的數(shù)據(jù)。結(jié)果表明，夏季急性腹瀉患兒細(xì)菌感染較常見，秋季病毒感染較常見，提示急性腹瀉患兒夏季應(yīng)重視細(xì)菌感染，秋季應(yīng)重視病毒感染，從而達(dá)到針對(duì)性治療，提高治療效果，改善預(yù)后。④藥敏試驗(yàn)結(jié)果本研究還分析了感染性病原體的耐藥性，以指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用抗生素。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，在這幾類藥物之中，病原菌對(duì)頭孢哌酮產(chǎn)生耐藥性的概率最高，頭孢噻肟、頭孢三嗪及環(huán)丙沙星和阿莫西林產(chǎn)生的耐藥性較低。⑤防治措施根據(jù)以上分析，建議嬰幼兒急性腹瀉的防治可采取以下措施，以提高臨床療效和預(yù)后，主要包括：母乳喂養(yǎng)，提高嬰幼兒抵抗力，發(fā)揮積極的預(yù)防作用；加強(qiáng)對(duì)急性腹瀉患兒的隔離治療，防止交叉感染；重視嬰幼兒飲食健康，并注意飲食和水源的消毒管理；根據(jù)病原微生物檢測(cè)結(jié)果和藥敏試驗(yàn)結(jié)果，制訂治療方案，合理使用抗生素，提高治療效果和預(yù)后。

根據(jù)本次研究的試驗(yàn)結(jié)果可以得知在腹瀉患兒中，志賀菌感染是細(xì)菌性腹瀉疾病中最為常見的菌種，而志賀菌感染引起腹瀉的患兒年齡大多在2周歲以上，這是由于2周歲以下的兒童通過從母體乳汁中可以獲得相應(yīng)特異性抗體，能夠?qū)和纳眢w起到一定保護(hù)作用。然而隨著兒童年齡的增長(zhǎng)，其身體中的特異性抗體數(shù)量在不斷減少，因此兒童身體的抵抗力也在不斷降低，最終很容易發(fā)生細(xì)菌性腹瀉的現(xiàn)象。因此臨床中在為細(xì)菌性腹瀉患兒進(jìn)行治療時(shí)，在為患兒進(jìn)行糞便微生物檢驗(yàn)的過程中，可以將檢驗(yàn)重點(diǎn)放在志賀菌上，這樣不僅能夠有效提高檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)還可以為臨床醫(yī)師的診斷提供有效依據(jù)，可以防止抗生素濫用的現(xiàn)象發(fā)生。除了需要及時(shí)為腹瀉患兒采取有效的治療對(duì)策以外，及時(shí)防止腹瀉疾病的發(fā)生也具有非常重要的意義。因此臨床中可以將志賀菌作為預(yù)防腹瀉疾病的重點(diǎn)內(nèi)容，如需要叮囑兒童在日常生活中多洗手，食用瓜果蔬菜前需要將其徹底洗凈或煮熟，以此減少感染志賀菌的概率，最終能夠有效防止腹瀉疾病的發(fā)生。因糞便微生物檢驗(yàn)在兒童腹瀉中具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值，可以為醫(yī)師的后續(xù)治療提供有效依據(jù)，同時(shí)還可以將菌株占比較高的病原微生物作為腹瀉疾病預(yù)防的重點(diǎn)內(nèi)容，有效減少兒童腹瀉發(fā)生的概率。

綜上所述，多種病原菌感染均可導(dǎo)致兒童患上腹瀉疾病，通過對(duì)患兒進(jìn)行糞便微生物檢驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)在所有致病菌中，以志賀菌感染最為常見，其余則是致病性大腸埃希菌、沙門菌以及產(chǎn)毒性大腸桿菌等，通過根據(jù)檢測(cè)的病原微生物進(jìn)行針對(duì)性治療，能夠有效提高治療效果，從而更快的促進(jìn)患兒疾病康復(fù)，因此糞便微生物檢驗(yàn)值得大力推廣于臨床試驗(yàn)中。同時(shí)對(duì)于患兒細(xì)菌性腹瀉的治療，應(yīng)充分考慮病原微生物檢測(cè)結(jié)果和藥敏試驗(yàn)結(jié)果，掌握病原微生物的分布規(guī)律，使得抗生素合理應(yīng)用，避免濫用。本研究還存在著一些問題，如研究樣本量總量較小、樣本范圍過小、研究?jī)?nèi)容有限等不足，使得研究?jī)r(jià)值有限。在今后的研究中，我們需要進(jìn)一步完善樣本量，增大樣本范圍，適度增加或調(diào)整研究的內(nèi)容，從而能夠更加真實(shí)、科學(xué)地反映臨床研究的實(shí)際情況，為臨床治療患兒的細(xì)菌性腹瀉提供參考。