周紅梅，李興根

（1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬泰州人民醫(yī)院；2.泰州市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院，江蘇 泰州 225300）

工業(yè)化對大氣、水體、土壤的污染，造成中藥材在栽培種植過程中可能受到不同程度重金屬的污染，同時中藥傳統(tǒng)的加工工藝也會帶來一定的污染，從而影響中藥的安全性。其中，砷、汞是中藥材超標(biāo)最嚴(yán)重的兩種重金屬元素，對人體危害極大。2020年版中國藥典對多味中藥材都增加了砷（As）、汞（Hg）檢查的內(nèi)容?？诜簞┦且灾兴帨珓榛A(chǔ)，提取藥物中有效成分，加入矯味劑、抑菌劑等附加劑，并按注射劑安瓿灌封處理工藝，制成的一種無菌或半無菌的口服液體制劑，目前有關(guān)口服液中As、Hg 的檢測多參照的是中藥材和食品的檢測方法[1-3]，如電感耦合等離子體質(zhì)譜法，該方法測定砷和汞元素存在干擾，線性范圍較窄，汞元素測定時溶液濃度必須控制在2μg/L以下，且檢測過程中溶液會殘留于儀器進(jìn)樣系統(tǒng)中即記憶效應(yīng)，試驗結(jié)果不準(zhǔn)確，尚缺乏靈敏度高、專屬性強(qiáng)的檢測手段，因此建立科學(xué)系統(tǒng)的檢測方法進(jìn)行監(jiān)控非常重要。原子熒光光譜技術(shù)在測定中藥材中As、Hg 等重金屬含量方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢[4]，相比電感耦合等離子體質(zhì)譜法，原子熒光光譜分析技術(shù)的校正曲線線性范圍更寬，砷和汞溶液濃度可測定至10μg/L 甚至更高，儀器檢測過程中基本不會有記憶效應(yīng)，檢測結(jié)果重現(xiàn)性好，能同時進(jìn)行砷和汞兩個元素的含量測定。本實驗擬以中藥口服液（蒲地藍(lán)、藍(lán)岑等）為例，采用微波消解法處理樣品，建立原子熒光光譜分析技術(shù)測定其中重金屬As、Hg 含量的方法。

1 實驗部分

1.1 儀器AFS-933 型原子熒光光度計（北京吉天儀器有限公司）；Multiwave PRO 微波反應(yīng)系統(tǒng)（安東帕集團(tuán)）；中央純水系統(tǒng)（法國威立雅公司）。

1.2 試劑As 標(biāo)準(zhǔn)溶液1000g/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；Hg 標(biāo)準(zhǔn)溶液1000g/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；KBH4溶液1.5%：稱取0.5g KOH 溶于100mL 水中，再稱取1.5g KBH4溶于此溶液中，混勻；濃硝酸（65%），優(yōu)級純，德國默克；濃硫酸（98%），優(yōu)級純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；濃鹽酸（37%），優(yōu)級純，德國默克；30%H2O2，優(yōu)級純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；試劑為分析純，水為高純水。

1.3 樣品消解

1.3.1 濕法消解法 稱取3mL 口服液試樣置于250mL 凱氏燒瓶中，加入10mL 硝酸，放置30 分鐘后，緩緩加熱，待作用緩和后，稍冷，沿瓶壁加入5mL 硫酸，再緩緩加熱，至瓶中溶液開始變成棕色，不斷滴加硝酸，至樣品完全分解，繼續(xù)加熱，生成大量的二氧化硫白色煙霧，最后溶液應(yīng)為無色或微帶黃色。冷卻后加入20mL 水煮沸，除去殘余的硝酸至產(chǎn)生白煙為止。如此處理兩次，放冷，將溶液移入25mL容量瓶中，加水定容至刻度，混勻備用。同時作試劑空白。

1.3.2 微波消解法 稱取3mL 試樣于消解罐中，加入10mL HNO3，加蓋密閉，同上述步驟制備樣品空白。將樣品與空白同時置于微波消解儀中，按表1消解程序消解。

表1 微波消解程序

消解程序完成后，冷卻30min，緩慢打開消解罐。注意控制開罐速度，防止消解液噴濺造成損失。將消解罐置于電熱板上加熱趕酸，繼續(xù)加熱濃縮至消解液剩余約2mL，轉(zhuǎn)移至25mL 容量瓶中，用1%硝酸溶液定容至刻度，得到樣品測定溶液。同上述步驟制備樣品空白。

1.4 試樣測定分別吸取消解完全的樣品消解液進(jìn)入各儀器進(jìn)行測定，根據(jù)所測熒光強(qiáng)度利用回歸方程計算樣品中砷和汞的含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 前處理條件的選擇移取相同體積（3mL）的口服液樣品分別采用濕法消解法和微波消解法對其進(jìn)行消解前處理，濕法消解法對樣品進(jìn)行前處理后樣品仍呈現(xiàn)黃色，消解并不徹底，而微波消解法對樣品進(jìn)行前處理后樣品呈現(xiàn)無色透明狀態(tài)，消解非常徹底。同時，濕法消解法為敞口消解，與密閉消解的微波消解法相比，其在前處理過程中易受到污染，且砷、汞元素均為易揮發(fā)元素，采用濕法消解時也極易損失，導(dǎo)致檢測結(jié)果偏低。因此，選擇微波消解法為口服液元素分析的前處理方法。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制使用單標(biāo)移液管準(zhǔn)確吸取一定量的砷和汞標(biāo)準(zhǔn)溶液，用1%HNO3溶液作為稀釋劑，逐級稀釋，分別配制濃度為0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μg/L 的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。分別吸取上面配制的各標(biāo)準(zhǔn)使用液采用原子熒光光度計進(jìn)行測定，測得其吸光度并求得熒光強(qiáng)度與濃度關(guān)系的一元線性回歸方程（見圖1和圖2）。

圖1 As元素標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 Hg元素標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.3 方法檢出限和定量限取試劑空白進(jìn)行11 次平行測定，以其測得的標(biāo)準(zhǔn)偏差3 倍計算，砷的檢出限為0.0099μg/L，汞的檢出限為0.042μg/L；以其測得的標(biāo)準(zhǔn)偏差10 倍計算，砷的檢出限為0.03μg/L，汞的檢出限為0.13μg/L。同時在定量限附近平行測定6個樣本（參照標(biāo)準(zhǔn)溶液配制），砷的標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.52%，汞的標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.22%。

2.4 方法的精密度使用該方法對口服液樣品進(jìn)行6次平行測定（見表2和表3）。

表2 As元素精密度測定

表3 Hg元素精密度測定

2.5 方法回收率試驗本方法采用加標(biāo)回收試驗來驗證方法的準(zhǔn)確性。在口服液樣品中加入三個濃度的重金屬對照，低濃度加入定量限附近的量，中濃度加入量至總量為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的限度附近，高濃度加入量至總量為限度的120%，結(jié)果見表4、表5。

表4 As元素準(zhǔn)確度測定

表5 Hg元素準(zhǔn)確度測定

2.6 溶液穩(wěn)定性最后，對口服液樣品中砷、汞兩種元素消解液的溶液穩(wěn)定性進(jìn)行驗證，即將配置好的同一待測樣品溶液分別室溫下放置若干小時后進(jìn)行測定，具體結(jié)果見表6。結(jié)果顯示，消解液室溫放置下，各重金屬測得值呈下降趨勢，且1小時內(nèi)對測定結(jié)果的影響（下降均不超過0.7%）在可接受范圍之內(nèi)。

表6 砷、汞元素溶液穩(wěn)定性驗證

3 結(jié)論

通過上述的系列試驗和實例檢測結(jié)果可見利用微波消解法測定中藥口服液中的砷、汞具有損失低、污染少、試劑利用率高、快速簡便的優(yōu)點(diǎn)，這對滿足口服液日常監(jiān)管品種雜、批次多、要求檢驗周期短具有重要意義。